一种唾液快速检测HIV-1/2型抗体试剂的现场评价

目的对一种唾液快速检测艾滋病病毒Ⅰ/Ⅱ型(HIV-1/2)抗体试剂进行现场评价,考核其现场使用的敏感性和特异性,以及与血液HIV-1/2抗体检测试剂的一致性。方法采集247例已知HIV感染者、1 090例正常献血人员、60例患有其它疾病的患者(包括孕妇、肿瘤患者、一般疾病患者),以及109例HCV感染者和119例未知HIV感染状况的吸毒人员的唾液标本,现场使用Vanguard OMTTM唾液HIV-1/2抗体快速检测试剂盒(CalypteBiomedical生产)进行检测,同时平行采集上述人群的血液标本,使用Vironostika HIV Uni-FormⅡplus O(BioMerieux生产)进行对比测试。结果247例已知HIV感染者中,247例唾液标本HIV-1/2型抗体检测均为阳性。1 259例血液酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HIV抗体阴性人群中,1 257例唾液检测为阴性,2例为阳性。119例吸毒人员中,28例血液标本HIV阳性中,唾液标本检出27例。91例HIV阴性中检出阴性90例。该唾液HIV抗体快速检测试剂,敏感性为99.64%,特异性为99.78%。与ELISA检测的一致性为99.75%。结论唾液HIV-1/2型抗体检测试剂与现行的血液ELISA检测结果相近。唾液标本的采集方便而且危险性小,推荐在采血较困难的人群、基层医疗机构、VCT门诊等,可考虑使用唾液HIV-1/2型抗体快速检测试剂进行HIV抗体初筛检测。

福建发现首例HIV-2感染者

目的：我国目前尚未发现ＨＩＶ－２病毒感染者，首例ＨＩＶ－２病毒感染者的检出对于ＨＩＶ－２病原学的研究、血清学确认实践、及艾滋病的预防控制具有重要意义。方法：被检血清标本用ＦＡＧＴ（ＧＢＣ，ＨＩＶ－１＋２）、ＥＩＡ（Ｖｉｒｏｎｏｓｔｉｃａ，ＨＩＶ－１＋２）和ＰＡ（Ｓｅｒｏｄｉａ，ＨＩＶ－１）３种不同原理的检测方法进行ＨＩＶ抗体初筛检测，可疑阳性血清经免疫印迹试验（ＷＢ）确认，通过分析蛋白反应条带确定ＨＩＶ抗体的性质。进行艾滋病流行病学调查，分析被检人员感染ＨＩＶ的地点、途径及可能扩散传播的范围。结果：ＦＡＧＴ和ＥＬＩＳＡＨＩＶ抗体初筛检测试验发现１个回国人员ＨＩＶ抗体阳性，用ＨＩＶ－１＋２和ＨＩＶ－２特异性的抗体ＷＢ试验证实为ＨＩＶ－２病毒感染。这是福建也是我国首例确认报告的ＨＩＶ－２抗体阳性者。

广州市发现首例HIV-1/HIV-2混合感染

目的探讨首例HIV-1/HIV-2混合感染发现的经过以及对本地艾滋病预防控制的意义。方法对广州市某医院一名门诊患者血样2份(包括初筛试验前后各1份)进行HIV抗体检测。初筛试验采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和明胶颗粒凝集试验(PA),确认试验采用蛋白印迹法(WB)。结果患者为男性,非洲马里人,血清经初筛试验为HIV阳性。初筛阳性的血清,以HIV-1/HIV-2 HIVBLOT2.2试剂做蛋白印迹试验(WB),确认为HIV-1阳性,同时HIV-2的特异条带gp36阳性;样本再用HIV-2型的BLOT1.2膜条确认为HIV-2阳性。结论被检者为HIV-1/HIV-2混合感染,这是广州市、广东省首次发现HIV-1/HIV-2混合感染,提示HIV-2可能会以对外交流等方式传入广东。

β2-微球蛋白作为HIV感染者疾病进展及疗效评估的新指标

目的:评价β2-微球蛋白(B2M)作为预测人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者病情进展及抗逆转录病毒治疗(HAART)效果评估标志物的价值。方法:3 145例标本分为4组,分别按试剂盒操作说明检测CD4+、CD8+细胞数、HIV病毒载量及B2M水平。结果:初次诊断HIV感染未接受HAART治疗组(Ⅰ组)与接受规则HAART治疗无症状组(Ⅱ组)B2M水平差异不显著(P>0.05);与对照组及接受不规则HAART治疗组(Ⅲ组)比较,差异显著(P<0.001)。3组间CD4+、CD8+计数、CD4+/CD8+比值、病毒载量差异显著(P<0.001);B2M水平与CD4+、CD8+计数、CD4+/CD8+比值呈负相关,与病毒载量呈正相关。结论:B2M是一个良好的预测HIV感染者病情进展及抗逆转录病毒治疗监测的标志物。

HIV-1 CRF01_AE重组型gp120 V1/V2结构域单克隆抗体的制备与鉴定

目的真核表达人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF01_AE重组型gp120蛋白的V1/V2结构域,制备其单克隆抗体并鉴定其抗原反应性。方法构建pTriEx-3-V1/V2CNE55真核表达载体,在HEK293F细胞中表达V1/V2-His融合蛋白,纯化后作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA筛选分泌抗V1/V2重组蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤,对单克隆抗体的特异性、型别以及效价进行鉴定。结果制备并获得一株稳定分泌抗HIV-1 AE亚型V1/V2结构域单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA测定腹水效价高达1∶81 000,单克隆抗体类型属于IgG1/κ型。Western blot结果表明该单克隆抗体同样能够识别不同亚型的HIV gp120蛋白。结论成功制备出抗HIV-1 AE重组型gp120蛋白V1/V2结构域的单克隆抗体。

我国首例HIV-2感染者的确认

目的 HIV-2抗体的确认。方法 用多种血清学检测方法测定一份可疑HIV-2抗体,并用HIV-2特异性免疫印迹试剂盒确认。结果 从一个科特迪瓦回国人员采集的血液标本经FAGT(GBC,HIV-1+2)和ELISA(Vironostica,HIV-1+2)检测为HIV抗体阳性,使用HIV-1+2免疫印迹试验(WB)证实该血清含有HIV-2特异性抗体,其中LiaTekⅢWB出现HIV-1 p24和HIV-2的gp105、gp35 3条反应条带,HIV Blot 2.2WB出现HIV-1 p24和HIV-2 gp36 2条反应带,继续用HIV-2特异性的HIV-2 Blot 1.2试剂盒检测,出现gp125、gp80、P68、p56、gp36、p26和p16条带,而HIV-1感染者血清仅出现p26反应带,因此,确认检出HIV-2抗体阳性者。结论 发现我国首例HIV-2病毒感染者。

3-(6-溴吡啶-2)-2-(2-氟-6-氯苯)-噻唑酮-4的电子结构与抗HIV活性间关系的量子化学研究

采用AM1方法,对3-(6-溴吡啶-2)-2-(2-氟-6-氯苯)-噻唑酮-4(BPFCTZO)进行了量子化学计算,给出了分子的几何构型、原子的净电荷、键级、前沿分子轨道组成与能级、前沿轨道电子密度等参数.结果表明BPFCTZO分子的稳定构型呈蝴蝶状,噻唑酮环为主活性区,其上的2位C、4位N和6位O等原子很可能是其与RT酶作用的活性位点.

3-(6-溴吡啶-2)-2-(2,6-二氟苯)-噻唑酮-4的电子结构与抗HIV活性

采用AM1方法,对3-(6-溴吡啶-2)-2-(2,6-二氟苯)-噻唑酮-4(BPDFTZO)进行了量子化学计算,给出了分子的几何构型、前沿分子轨道组成与能级、前沿轨道电子密度、原子的净电荷、键级等参数.结果表明:BPDFTZO分子的稳定构型呈蝴蝶状,噻唑酮环上的3位N、5位C和吡啶环的4位C等原子很可能是其与RT酶作用的活性位点.

抗HIV-2 gp36基因工程抗原单克隆抗体的制备和鉴定

目的制备稳定产抗人类免疫缺陷病毒-2gp36基因工程抗原单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb,单抗)的杂交瘤细胞株及相应单抗,鉴定细胞株的生物学特性和单抗的免疫学特性及理化特性;初步探索用所制单抗构建检测gp36酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)的适用性。方法分别用杂交瘤技术和常规免疫制备抗gp36的单抗和多抗(polyclonal antibody,PcAb,多抗)。纯化单抗和多抗,并标记辣根过氧化物酶。分别用纯化的单个单抗-单个单抗或单个单抗-多抗建立夹心ELISA。结果获得9株稳定分泌抗gp36单抗的杂交瘤细胞株。用纯化的8E5单抗和辣根过氧化物酶标记的多抗建立的夹心ELISA可以检测到低至50μg/L的gp36。结论为人类免疫缺陷病毒-2感染的检测和研究初步提供了可资应用的单抗。

ELISA法和化学发光法对脐血中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体的检测比较

目的:分析和比较临床上采用酶联免疫吸附法(ELISA)以及化学发光法检测脐血中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体以及丙肝抗体的结果。方法:2011年8月-2014年8月收集脐血1 147份,对其临床数据进行回顾性分析,分别采用酶联免疫吸附以及化学发光法对其中的HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体进行检测,并对结果进行分析。结果:1 147份脐血中酶联免疫吸附方法检测HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体阳性率分别为0.61%(7/1 147)、0.87%(10/1 147)、1.13%(13/1 147),而化学发光法检测HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体阳性率分别为0.78%(9/1 147)、0.96%(11/1 147)、1.39%(16/1 147),并且将购买的抗体标准品进行梯度稀释。检测结果表明,3种抗体稀释到10pg/m L,化学发光法检测3组抗体均为阳性,酶联免疫吸附方法仅梅毒抗体为阳性,而HIV-1/HIV-2抗体、丙肝抗体的检测结果均为阴性。结论:本研究结果表明,临床上采用化学发光发对脐血中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体检测的灵敏性高于ELISA方法,因此在临床检测过程中建议采用化学发光发进行检测。

ELISA法和化学发光法对血清中HIV-1HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体的检测意义

目的探讨分析ELLSA法(酶联免疫吸附法)和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙抗体的临床检测意义。方法将382份脐血作为研究分析对象,分别采用酶联免疫吸附和化学发光法对所选标本进行检测,包含丙肝抗体、梅毒抗体、HIV-1/HIV-2抗体检测。结果采用ELLSA检测后HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙肝抗体阳性率分别为0.52%、0.79%、1.05%。采用化学发光法检测HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙肝抗体3种检测的阳性率分别为0.79%、1.05%、1.31%。标准抗体品梯度稀释后再进行检测,将此3种抗体稀释程度为10 pg/m L,三组抗体采用化学发光法进行检测,其结果均为阳性,采用酶联免疫吸附方式进行检测的只有梅毒抗体呈阳性,其余两项均为阴性。结论化学发光法作为临床进行血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙肝抗体检测的首选方案,此检测方式具有更高的灵敏性。

HIV-1/2抗体口腔快速检测仪临床效果观察

目的:评价HIV-1/2抗体口腔快速检测仪检测艾滋病病毒Ⅰ/Ⅱ型(HIV-1/2)抗体的敏感性和特异性,及其与血液HIV-1/2抗体检测试剂的一致性。方法:使用HIV-1/2抗体口腔快速检测仪采集并检测已知HIV感染者37例及我院性病门诊就诊患者391例口腔外牙龈黏膜渗出液(OMT)标本,同时使用ELISA检测上述人群的血清标本HIV-1/2抗体。结果:37例已知感染者口腔外牙龈黏膜渗出液及血液标本检测均为阳性;391例就诊患者中血液样本呈阳性2例,口腔外牙龈黏膜渗出液呈阳性1例。结果不同的病例1例,后经WesternBlot试验确认为阴性。该HIV-1/2抗体口腔快速检测仪的敏感性为100%,特异性为100%,与ELISA检测的一致性为99.77%。结论:HIV-1/2抗体口腔快速检测仪检测HIV-1/2抗体结果与现行的血液ELISA检测相近。其特有的无创安全、简捷易用的特点适用于不愿或不宜采血人群、艾滋病自愿咨询检测(VCT)门诊和自行检测等,也适用于医疗机构,可有效降低艾滋病职业暴露的风险。

湖北省HIV-2抗体确证及HIV-1和HIV-2血清学双重感染状况分析

目的对HIV-2可疑样品进行确证,了解我省HIV/AIDS人群中HIV-1和HIV-2双重感染状况。方法用新加坡Genelabs Diagnostics公司生产的HIV-2抗体确证试剂检测16份HIV-1抗体阳性并且有HIV-2特异性指示带的样品。结果11份样品结果为HIV-2抗体阳性,3份样品为不确定,2份阴性。结论我省可能存在HIV-1和HIV-2型双重感染者,需从分子生物学水平进一步验证。

聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林治疗HIV感染合并慢性丙型肝炎患者

本研究比较了聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林或聚乙二醇干扰素α-2a加安慰剂治疗HIV感染合并慢性丙型肝炎患者的安全性和疗效.868例未用过干扰素或利巴韦林治疗的HIV感染合并慢性丙型肝炎患者,随机分为3组:聚乙二醇干扰素α-2a(180μg/周)加利巴韦林(800mg/d)组;