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穿膜肽HIV Tat蛋白的研究进展 被引量:6
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作者 尹锐 郝飞 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B06期77-81,共5页
经数十年的研究发现HIV—ITat蛋白的转导域具有穿膜活性,能将外源性的生物学分子如多肽、寡核苷酸、DNA、蛋白、质粒甚至颗粒性物质携带入多种哺乳动物活细胞质膜及核膜,并且对细胞不会产生毒副作用。尽管其穿膜途径的具体机制,目前尚... 经数十年的研究发现HIV—ITat蛋白的转导域具有穿膜活性,能将外源性的生物学分子如多肽、寡核苷酸、DNA、蛋白、质粒甚至颗粒性物质携带入多种哺乳动物活细胞质膜及核膜,并且对细胞不会产生毒副作用。尽管其穿膜途径的具体机制,目前尚不十分清楚,但却不影响其在生命科学研究领域,包括基础研究和临床研究中的应用。HIV-ITat蛋白转导域的发现及应用,为生物学研究领域开辟了一条新的探索途径。 展开更多
关键词 穿膜肽 hiv tat 细胞内在化
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HIV Tat蛋白与单核细胞表达辅助受体CCR5和感染HIV病毒相互关系的研究
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作者 杨益大 郑临 +2 位作者 吕国才 陈亚岗 Maria Salvato 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2004年第6期532-534,545,共4页
目的 :研究 HIV Tat蛋白对单核细胞表达 HIV辅助受体 CCR5的影响 ,并观察 Tat蛋白对单核细胞感染嗜单核细胞 HIVBa-L病毒的影响。方法 :以流式细胞仪方法测定单核细胞表面表达的 CCR5 ,单核细胞表达分泌的HIV gag p2 4蛋白由 ELISA方法... 目的 :研究 HIV Tat蛋白对单核细胞表达 HIV辅助受体 CCR5的影响 ,并观察 Tat蛋白对单核细胞感染嗜单核细胞 HIVBa-L病毒的影响。方法 :以流式细胞仪方法测定单核细胞表面表达的 CCR5 ,单核细胞表达分泌的HIV gag p2 4蛋白由 ELISA方法检测。结果 :HIV Tat蛋白能增加单核细胞表达 CCR5 ,此作用能被多克隆 Tat蛋白抗体所抑制 ;同时 HIV Tat蛋白能明显增加嗜单核细胞 HIV病毒 (HIVBa-L)感染单核细胞 ,表现为 HIV gag p2 4蛋白表达明显增加。结论 :HIV Tat蛋白增加单核细胞表面 CCR5受体的表达 ,并增加 HIVBa-L感染单核细胞 ,表明HIV Tat蛋白在 HIV感染和发病中起着十分重要的作用。 展开更多
关键词 hiv tat蛋白 辅助受体CCR5 单核细胞 感染
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Extracellular HIV Tat and Tat cysteine rich peptide increase CCR5 expression in monocytes
3
作者 郑临 杨益大 +1 位作者 吕国才 SALVATO Maria S. 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE EI CAS CSCD 2005年第7期668-672,共5页
In our previous work we reported that HIV Tat and 6 cysteine rich peptides of Tat induce tumor necrosis factor-related apoptosis-induced ligand (TRAIL) in human monocytes (Yang et al., 2003). Here our results showed t... In our previous work we reported that HIV Tat and 6 cysteine rich peptides of Tat induce tumor necrosis factor-related apoptosis-induced ligand (TRAIL) in human monocytes (Yang et al., 2003). Here our results showed that HIV Tat and Tat cysteine rich peptide increase CCR5 expression in human monocytes, and this activity is inhibited by rabbit anti-Tat. Boiled Tat does not increase CCR5 expression in monocytes. These results provide insight into a new mechanism by which HIV Tat plays a key role in the pathogenesis of HIV-1 infection. 展开更多
关键词 hiv tat tat cysteine rich peptide CCR5 MONOCYTES
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用酵母双杂交筛选与HIV Tat相互作用的宿主因子 被引量:1
4
作者 路艳芳 刘为勇 +3 位作者 乔龙 汪峰 侯红艳 孙自镛 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期398-401,共4页
目的通过酵母双杂交试验筛选与HIV Tat蛋白相互作用的宿主因子。方法对构建的pGBKT7-tat进行自激活和半乳糖苷试验。运用酵母双杂交实验以HIV Tat作为诱饵,与人均一化基因库进行初筛。对筛选出来的阳性克隆进行测序分析。结果构建的pGBK... 目的通过酵母双杂交试验筛选与HIV Tat蛋白相互作用的宿主因子。方法对构建的pGBKT7-tat进行自激活和半乳糖苷试验。运用酵母双杂交实验以HIV Tat作为诱饵,与人均一化基因库进行初筛。对筛选出来的阳性克隆进行测序分析。结果构建的pGBKT7-tat无自激活特性和细胞毒性,然后进行酵母双杂交试验。结果发现在DDO/X/A平板上出现47个阳性的蓝色斑点,在QDO/X/A平板上进行进一步筛选,对再次出现的8个蓝色斑点进行测序。在GenBank中对相互作用的人体基因进行BLAST分析,根据基因注释推测其在病毒与机体相互作用过程中可能发挥的作用。结果测出5个不同的基因,这5个不同的基因分别为羧肽酶N、酪氨酸磷酸酶受体M、ATP1B1、锌指蛋白MYM2和锌指蛋白MYM5。结论本研究新筛选出羧肽酶、酪氨酸磷酸酶受体和ATP1B1病程相关蛋白及两个锌指蛋白等5种功能蛋白与HIV Tat相互作用,为进一步研究HIV Tat蛋白功能提供依据。 展开更多
关键词 酵母双杂交 hiv tat 蛋白质相互作用 天然免疫 病毒复制
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甲基苯丙胺与HIV-1 Tat蛋白单独及协同诱导神经炎症机制的研究进展
5
作者 澹忆 杨根梦 +7 位作者 张树威 张慧洁 王浩伟 苗霖 李怡 李娟 李桢 曾晓锋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1417-1421,共5页
甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)滥用和人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染是当今世界面临的极其严重的公共卫生和社会问题。METH与HIV-1 Tat蛋白可单独及协同诱导神经毒性,而神经炎症是引起神经毒性的重要机制... 甲基苯丙胺(methamphetamine,METH)滥用和人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染是当今世界面临的极其严重的公共卫生和社会问题。METH与HIV-1 Tat蛋白可单独及协同诱导神经毒性,而神经炎症是引起神经毒性的重要机制之一。神经炎症可由神经胶质细胞、细胞因子、NLRP3炎性小体等介导调控。该文综述了近年来METH与HIV-1 Tat蛋白单独及协同诱导神经炎症机制的研究进展,旨在为将来进一步探索两者协同诱导神经炎症的机制以及有效的药物干预靶点提供参考和依据。 展开更多
关键词 甲基苯丙胺 hiv-1 tat蛋白 神经胶质细胞 神经炎症 细胞因子 NLRP3炎性小体 受体 氧化应激 自噬
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HIV-Tat蛋白转导域在医学研究中的应用 被引量:8
6
作者 丁劲 马斌 +1 位作者 刘军 薛采芳 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2003年第6期6-8,13,共4页
HIV Tat蛋白转导域 (proteintransductiondomain ,PTD)是新近发现的一种在蛋白转导过程中能高效穿过生物膜的结构域 ,它能将与其共价连接的多肽、蛋白质及DNA等分子跨膜导入几乎所有的组织和细胞 ,甚至可以通过血脑屏障 ,转导效率很高... HIV Tat蛋白转导域 (proteintransductiondomain ,PTD)是新近发现的一种在蛋白转导过程中能高效穿过生物膜的结构域 ,它能将与其共价连接的多肽、蛋白质及DNA等分子跨膜导入几乎所有的组织和细胞 ,甚至可以通过血脑屏障 ,转导效率很高而且对细胞没有损伤。TAT融合蛋白系统被认为是一种很有前途的运载工具 。 展开更多
关键词 hiv-tat蛋白转导域 人免疫缺陷病毒反式激活蛋白 生物膜 运载工具 目的蛋白
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HIV-1Tat基因的融合构建及在大肠杆菌中的高效表达 被引量:6
7
作者 林剑萍 王华 +4 位作者 王玲 卫红飞 胡晓平 王丽颖 于永利 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期33-36,共4页
目的: 在E.coliBL21(DE3)中高效表达Tat蛋白。方法: 用PCR方法构建HIV- 1Tat基因全序列, 同时将Tat基因进行定点突变(AAG28替换为CAG, AAG50替换为CAG),以消除天然Tat蛋白的转录活性。将突变的Tat基因与伴侣10(chap10)基因连接后, 共同... 目的: 在E.coliBL21(DE3)中高效表达Tat蛋白。方法: 用PCR方法构建HIV- 1Tat基因全序列, 同时将Tat基因进行定点突变(AAG28替换为CAG, AAG50替换为CAG),以消除天然Tat蛋白的转录活性。将突变的Tat基因与伴侣10(chap10)基因连接后, 共同亚克隆入表达载体pET28a中,并在E.coli中表达, 表达产物用Westernblot进行鉴定。结果: 分别通过 3轮PCR, 成功地构建了Tat基因全序列。构建的重组质粒pET28a- chap10 Tat在E.coliBL21(DE3)中得到高效表达。Westernblot分析表明, 在相对分子质量 (Mr)为24 000处有 1条特异性的带。结论: chap10基因与HIV- 1Tat全基因的融合构建, 使Tat蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,为其在爱滋病发病中作用研究奠定了基础。 展开更多
关键词 hiv-1 tat 伴侣10 表达
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我国HIV-1 B'/C重组流行株Tat蛋白的表达、纯化及功能分析 被引量:14
8
作者 陆彬 邢辉 +2 位作者 赵全壁 耿运琪 邵一鸣 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期297-302,共6页
根据全国HIV分子流行病学研究发现,B'和C亚型HIV-1在我国发生了重组,并以优势株形式在我国广泛流行。为了探讨这种HIV-1B'/C重组毒株tat基因的变异与其表型之间的关系,利用pET表达系统在大肠杆菌中高效表达了三种不同基因变异... 根据全国HIV分子流行病学研究发现,B'和C亚型HIV-1在我国发生了重组,并以优势株形式在我国广泛流行。为了探讨这种HIV-1B'/C重组毒株tat基因的变异与其表型之间的关系,利用pET表达系统在大肠杆菌中高效表达了三种不同基因变异类型的Tat蛋白,重组蛋白占菌体总蛋白的26%,Westernblot显示较好的反应原性,并通过金属鏊合层析纯化了目的蛋白。荧光素酶活性检测表明:体外表达的Tat蛋白具有明显的生物学活性,可以反式激活HIVLTR引导的报告基因的表达;三种Tat蛋白在激活活性上的差异与流行现场检测的病毒载量的高低存在明显的对应关系,说明tat基因的变异可以引起病毒生物学特性的改变,进而影响病毒的流行特征。此结果为进一步研究我国HIV重组毒株的基因变异特征及变异规律奠定了基础。 展开更多
关键词 hiv-1B'/重组流行株 tat蛋白 表达 纯化 功能分析 人免疫缺陷病毒1型 基因变异
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穿膜肽HIV-Tat_(49-57)和CTL表位融合多肽疫苗的初步免疫学效应研究 被引量:3
9
作者 王莉 吴玉章 +3 位作者 石统东 贾正才 周伟 邹丽云 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1159-1161,共3页
目的 探讨穿膜肽HIV Tat4 9- 57将CTL表位带入活细胞胞质并将其投入MHC Ⅰ类抗原提呈途径的可能性。方法 应用多肽固相合成技术 ,分别合成含HIVTat4 9- 57和HLA A2 1限制性CTL优势表位MART 12 7- 35的 18肽和该CTL表位 9肽。采用间... 目的 探讨穿膜肽HIV Tat4 9- 57将CTL表位带入活细胞胞质并将其投入MHC Ⅰ类抗原提呈途径的可能性。方法 应用多肽固相合成技术 ,分别合成含HIVTat4 9- 57和HLA A2 1限制性CTL优势表位MART 12 7- 35的 18肽和该CTL表位 9肽。采用间接免疫荧光与激光共聚焦显微镜技术 ,分别对上述 18肽和 9肽的穿膜能力进行了动态观察。进一步用标准51 Gr释放试验分别检测了上述 18肽和 9肽在HLA A2 1阳性健康者外周血单个核细胞 (PBMC)中诱导的表位MART 12 7- 35特异性CTL活性。结果  18肽能够穿过活哺乳动物细胞质膜进入胞质 ,并呈现出时间、剂量依赖关系 ;而 9肽则无此效应。与 9肽相比 ,18肽在体外诱导出了明显增强的特异性CTL活性 (P <0 0 5 )。结论 穿膜肽HIVTat4 9- 57可有效携带CTL表位穿过细胞膜进入胞质 ,并有效激发出针对该表位的特异性CTL应答 。 展开更多
关键词 免疫学效应 穿膜肽 tat49-57 CTL表位 MHC-I类抗原提呈途径 多肽疫苗 肿瘤免疫治疗
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HIV-1 Tat蛋白对人类疱疹病毒8型复制的影响 被引量:5
10
作者 卢春 黄丽 +1 位作者 贾雪梅 曾怡 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期306-312,共7页
用HindⅢ将HIV-1Tat101蛋白编码基因从pEV质粒中切出,BamHI、NotⅠ将绿色荧光蛋白(GFP)编码基因从表达质粒pcDNA3 1+/GFP中切出,分别插入到质粒LZRSpBMN-Z中,构建成重组反转录病毒表达质粒LZRS-Tat101和LZRS-GFP。采用磷酸钙转染法将两... 用HindⅢ将HIV-1Tat101蛋白编码基因从pEV质粒中切出,BamHI、NotⅠ将绿色荧光蛋白(GFP)编码基因从表达质粒pcDNA3 1+/GFP中切出,分别插入到质粒LZRSpBMN-Z中,构建成重组反转录病毒表达质粒LZRS-Tat101和LZRS-GFP。采用磷酸钙转染法将两重组质粒转染到含反转录病毒env、gal和pol编码基因的包装细胞Phoenix(ΦNX)中,嘌呤霉素筛选获得稳定细胞系。分别收集稳定细胞系分泌的病毒上清,并感染体外培养的原发性渗出性淋巴瘤(PEL)BCBL-1细胞。收集LZRS-GFP重组病毒感染的BCBL-1细胞进行流式细胞计数,检测GFP表达水平。收集LZRS-Tat101重组病毒感染的BCBL-1细胞,提取蛋白作Westernblot,检测Tat蛋白表达状况;取细胞总RNA作Northernblot和定量PCR,检查HHV-8次要衣壳蛋白ORF26mRNA转录水平。重组LZRS-Tat101病毒进一步感染HL3T1细胞(HeLa细胞包含HIV-1-LTR/CAT报告基因),收集感染细胞提取蛋白,检测CAT活性,评价Tat生物学功能。PCR扩增HHV-8复制和转录激活蛋白Rta启动子区上游序列,并克隆至pGL-3载体中,构建Rta启动子+虫荧光素酶(Luciferase)报告基因重组质粒。此重组质粒进一步电转染预先感染了LZRS-Tat101病毒的BC-3细胞,TPA刺激后收集细胞,检测Luciferase活性。结果显示:①重组反转录病毒感染BCBL-1细胞,一次感染? 展开更多
关键词 人类疱疹病毒8型 复制 可溶性周期复制 hiv-1tat蛋白
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HIV-1 tat基因改造及其蛋白表达、纯化与抗体制备 被引量:5
11
作者 齐香荣 张相民 +4 位作者 高瑛瑛 邓瑶 闫克夏 李仁清 阮力 《生物技术通讯》 CAS 2006年第2期142-145,共4页
目的:为了方便实验室工作中HIV-1B'/C亚型及C亚型Tat蛋白的检测,制备了相应的Tat蛋白及其抗体。方法:将我国HIV-1B'/C亚型流行株tat基因的第1个外显子和HIV-1C亚型tat基因的第2个外显子融合在一起,将密码子替换为大肠杆菌的优... 目的:为了方便实验室工作中HIV-1B'/C亚型及C亚型Tat蛋白的检测,制备了相应的Tat蛋白及其抗体。方法:将我国HIV-1B'/C亚型流行株tat基因的第1个外显子和HIV-1C亚型tat基因的第2个外显子融合在一起,将密码子替换为大肠杆菌的优势密码子,通过合成引物、PCR拼接的方法,获得目的基因序列;在原核系统中与pET32a+载体中的His·Tag、Trx·Tag及S·Tag进行融合表达;目的蛋白经Ni+金属螯合层析柱纯化后,用于免疫家兔,制备多克隆抗体。结果:PCR拼接获得306bp的目的基因序列;在原核系统中融合表达得到相对分子质量约31000的融合蛋白,占菌体总蛋白的21%。纯化后的融合蛋白免疫家兔,制备了多克隆抗体,Western印迹结果显示,获得的多克隆抗体与HIV-1B'/C亚型的Tat蛋白反应良好;间接免疫荧光结果表明,获得的多克隆抗体与HIV-1B'/C亚型和C亚型的Tat蛋白都能产生特异性反应。结论:制备的多克隆抗体能够使用间接免疫荧光方法检测HIV-1C亚型的Tat蛋白,使用Western印迹方法和间接免疫荧光方法都能检测HIV-1B'/C亚型的Tat蛋白。 展开更多
关键词 hiv-1 tat基因 tat蛋白 原核表达 多克隆抗体
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HIV-1 Tat蛋白结合Tar的抗艾滋病药物筛选模型的建立研究 被引量:2
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作者 李在留 刘朝奇 +4 位作者 邹坤 李凤兰 韩钰 杨凡 王磊黎 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期352-355,共4页
目的建立H IV-1 Tat蛋白结合Tar的抗H IV-1药物筛选模型用于抗H IV药物筛选。方法构建表达H IV-1Tat蛋白的真核表达质粒(pCDNA3.1(+)-Tat)和H IV-1 LTR-luc荧光素酶报告基因,采用脂质体转染法共转染HeLa细胞,荧光仪检测Tat蛋白促进荧光... 目的建立H IV-1 Tat蛋白结合Tar的抗H IV-1药物筛选模型用于抗H IV药物筛选。方法构建表达H IV-1Tat蛋白的真核表达质粒(pCDNA3.1(+)-Tat)和H IV-1 LTR-luc荧光素酶报告基因,采用脂质体转染法共转染HeLa细胞,荧光仪检测Tat蛋白促进荧光素酶在HeLa细胞内的表达情况,建立H IV-1Tat蛋白结合Tar的细胞模型,用于抗H IV-1的药物筛选。以DRB(5,6-二氯-1-β-呋核亚硝脲-苯并咪唑)为阳性对照,进行模型的建立及条件的优化。结果通过反复试验表明,目的基因和报告基因的配比、转染时培养液中小牛血清的含量、细胞浓度、转染前细胞状态以及药物作用时间的长短等对模型的稳定性和敏感性有影响。结论应用优化的细胞模型对文冠果、紫苏等浸提物进行筛选及结果的分析。 展开更多
关键词 hiv-1 tat LTR-Luc荧光素酶基因 艾滋药物筛选模型
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HIV-1 Tat蛋白促血管生成作用研究进展 被引量:2
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作者 陆丛笑 李静 耿美玉 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2007年第4期239-241,254,共4页
Tat蛋白是HIV-1基因组编码的6个调控蛋白中一个重要的调控蛋白,在艾滋病相关卡波西肉瘤的发生发展中起一定作用。本文综述了细胞外HIV-1 Tat蛋白促血管生成作用的最新研究进展,包括Tat不同结构区域在促血管生成中所起的作用,以及与各种... Tat蛋白是HIV-1基因组编码的6个调控蛋白中一个重要的调控蛋白,在艾滋病相关卡波西肉瘤的发生发展中起一定作用。本文综述了细胞外HIV-1 Tat蛋白促血管生成作用的最新研究进展,包括Tat不同结构区域在促血管生成中所起的作用,以及与各种生长因子及化学因子之间的相互作用,阐述了Tat促内皮细胞及卡波西肉瘤细胞血管生成的主要机制,为临床开发拮抗Tat的促血管生成作用药物,抑制AIDS相关卡波西肉瘤的发生及发展提供理论依据。 展开更多
关键词 hiv-1 tat 获得性免疫缺陷综合征(艾滋病) 血管生成 卡波西肉瘤(KS)
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HIV-1 Tat蛋白抑制DNA修复和增强细胞辐射敏感性 被引量:1
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作者 孙薏 黄越承 +3 位作者 徐勤枝 王会平 隋建丽 周平坤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期666-671,共6页
近年来临床研究发现,艾滋病合并肿瘤患者放疗后产生的正常组织和皮肤毒性反应明显高于普通肿瘤患者.本研究将探讨HIV-1Tat蛋白是否影响细胞对电离辐射敏感性及机理.两个表达Tat蛋白的细胞系TT2和TE671-Tat均来源于人的横纹肌肉瘤细胞(TE... 近年来临床研究发现,艾滋病合并肿瘤患者放疗后产生的正常组织和皮肤毒性反应明显高于普通肿瘤患者.本研究将探讨HIV-1Tat蛋白是否影响细胞对电离辐射敏感性及机理.两个表达Tat蛋白的细胞系TT2和TE671-Tat均来源于人的横纹肌肉瘤细胞(TE671)并已转染了不同来源的tat基因.使用细胞辐射后克隆形成率检测辐射敏感性,RT-PCR和Western印迹检测基因表达,彗星电泳和γ-H2AX位点检测DNA双链断裂和修复.TT2和TE671-Tat细胞的辐射敏感性与转染空载体及对照细胞相比明显增加.彗星电泳和γ-H2AX位点检测表明,在表达Tat蛋白的细胞中,辐射诱导DNA双链断裂的修复水平明显降低.通过RT-PCR和Western印迹检测进一步证实,表达Tat蛋白的细胞中DNA修复蛋白DNA-PKcs的表达被抑制.HIV-1Tat蛋白抑制DNA-PKcs的表达,降低DNA双链断裂的修复,使细胞的电离辐射敏感性增高.本研究为了解AIDS合并肿瘤患者对放射治疗敏感性变化提供了重要信息. 展开更多
关键词 hiv-1 tat DNA-PKCS DNA修复 辐射敏感性
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Rho/ROCK信号通路在HIV-1 Tat诱导血脑屏障破坏及β淀粉样蛋白沉积中的作用 被引量:2
15
作者 陈艳兰 黄文 +4 位作者 巫相宏 叶飚 周小亭 蒋文琳 莫雪安 《中风与神经疾病杂志》 CAS 北大核心 2015年第12期1060-1063,共4页
目的探讨Rho/ROCK信号传导通路在人类免疫缺陷病毒-1型反式转录激活因子(HIV-1 transactivator of transcription,HIV-1 Tat)诱导血脑屏障破坏及对β淀粉样蛋白(Amyloid-beta,Aβ)沉积中的作用。方法将培养的人脑微血管内皮细胞(human c... 目的探讨Rho/ROCK信号传导通路在人类免疫缺陷病毒-1型反式转录激活因子(HIV-1 transactivator of transcription,HIV-1 Tat)诱导血脑屏障破坏及对β淀粉样蛋白(Amyloid-beta,Aβ)沉积中的作用。方法将培养的人脑微血管内皮细胞(human cerebral microvascular endothelial cells,h CMEC/D3)予以不同浓度的Rho/ROCK信号传导通路抑制剂盐酸法舒地尔(Hydroxyfasudil,HF)刺激细胞,并设立对照组,观察其对细胞活力的影响,分别予以HIV-1 Tat、HF刺激细胞,以蛋白免疫印迹法和实时反转录聚合酶链式反应(real-time reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测h CMEC/D3中紧密连接蛋白Occludin、晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE,转移血液Aβ到脑组织)的蛋白和mRNA表达的变化。结果 HF在30μmol/L(0.17±0.02)以下时对h CMEC/D3活力无明显影响(P>0.05)。HIV-1 Tat能抑制h CMEC/D3的Occludin蛋白(0.71±0.03、P<0.001)与mRNA(0.41±0.05、P<0.05)表达,同时上调RAGE蛋白(0.83±0.01、P<0.001)和mRNA(1.93±0.66、P<0.05)表达。HF预处理细胞2 h后与HIV-1 Tat共培养可以显著增加Occludin蛋白与mRNA的表达(0.93±0.03、P<0.001;1.04±0.45、P<0.05),同时可以明显减少RAGE蛋白与mRNA的表达(0.54±0.01、P<0.001,1.08±0.43、P<0.05)。结论 HIV-1 Tat可使紧密连接蛋白Occludin蛋白和mRNA表达下调导致血脑屏障破坏,诱导Aβ转运受体RAGE的蛋白和mRNA过度表达,从而可能导致Aβ在脑内沉积增加;阻断Rho/ROCK信号传导通路可抑制HIV-1 Tat诱导血脑屏障破坏作用,阻止RAGE蛋白和mRNA的过度表达。 展开更多
关键词 hiv-1 tat 血脑屏障 RHO/ROCK信号通路 OCCLUDIN RAGE
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JDVTat反式激活LTR与HIV-1Tat采用类似的细胞因子 被引量:1
16
作者 邓刚 莎日娜 +3 位作者 母俊杰 乔文涛 耿运琪 陈启民 《中国病毒学》 CAS CSCD 2004年第6期576-581,共6页
为分析 JDV Tat 在反式激活 JDV 及 HIV-1 LTR 过程中是否采用与 HIV-1 Tat 类似的细胞因子,本文构建了包含完整激活域的 jTat70 和 hTat47,同时构建了 cyclin T1 和 CDK9 真核表达及反义转译质粒。过量表达 hTat47和 jTat70 对 hTat ... 为分析 JDV Tat 在反式激活 JDV 及 HIV-1 LTR 过程中是否采用与 HIV-1 Tat 类似的细胞因子,本文构建了包含完整激活域的 jTat70 和 hTat47,同时构建了 cyclin T1 和 CDK9 真核表达及反义转译质粒。过量表达 hTat47和 jTat70 对 hTat 反式激活 HIV-1 LTR,jTat 反式激活 JDV 和 HIV-1 LTR 均有明显的抑制作用推测 jTat 和 hTat 的反式激活作用可能涉及类似的细胞因子。通过 cyclin T1 和 CDK9 的反义转译质粒对 jTat 反式激活的抑制作用证实这两种细胞因子参与了 jTat 对 JDV 和 HIV-1 LTR 的反式激活。 展开更多
关键词 Jembrana病毒 人免疫缺陷病毒 反式激活因子 细胞周期蛋白T1 细胞周期蛋白依赖性的激酶9
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HIV-1 Tat基因在pEGx-KG中的融合构建及原核表达 被引量:1
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作者 陈凡 周菁 +2 位作者 章晓联 谭光宏 林映莹 《海南医学院学报》 CAS 2008年第2期116-118,121,共4页
目的:在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达融合的Tat蛋白。方法:用PCR方法从HIV cDNA文库中扩增出Tat基因,并将其插入到表达载体pEGx-KG中,转化到E.coli中进行融合表达,表达产物用蛋白电泳和Western-blot进行鉴定。结果:成功地构建了重组质粒... 目的:在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达融合的Tat蛋白。方法:用PCR方法从HIV cDNA文库中扩增出Tat基因,并将其插入到表达载体pEGx-KG中,转化到E.coli中进行融合表达,表达产物用蛋白电泳和Western-blot进行鉴定。结果:成功地构建了重组质粒pEGx-KG-Tat,重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中得到高效表达。蛋白电泳和Western-blot分析表明,在相对分子质量(Mr)为38.9kDa处有1条特异性的带。结论:GST基因与HIV-1 Tat基因的融合构建,使Tat蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,为艾滋病的防治研究奠定了基础。 展开更多
关键词 大肠杆菌 hiv-1 tat pEGx—KG载体 基因表达
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HIV-1 Tat蛋白对DNA修复基因及细胞周期相关基因表达的影响 被引量:1
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作者 孙薏 周平坤 +6 位作者 匡红 张聪 呼永河 冯怀志 李硕 徐勤枝 陈健 《西南国防医药》 CAS 2009年第12期1161-1164,F0004,共5页
目的:探讨HIV-1 Tat蛋白对DNA修复基因及细胞周期相关基因表达影响。方法:使用包含102个与DNA损伤修复和细胞周期相关的基因微阵列检测人横纹肌肉瘤细胞(TE671)及已转染tat基因的TE671细胞(TT2)基因表达谱的改变;使用半定量RT-PCR分析DN... 目的:探讨HIV-1 Tat蛋白对DNA修复基因及细胞周期相关基因表达影响。方法:使用包含102个与DNA损伤修复和细胞周期相关的基因微阵列检测人横纹肌肉瘤细胞(TE671)及已转染tat基因的TE671细胞(TT2)基因表达谱的改变;使用半定量RT-PCR分析DNA-PKcs在mRNA水平表达;Western印迹法检测DNA-PKcs表达变化;荧光染色法检测电离辐射后细胞凋亡。结果:在基因芯片的检测中,发现与DNA损伤修复及细胞周期调控相关的6个基因CdC25C、KIF2C、CdC20、DNA-PKcs、CTS1、WEE1在转染tat基因的细胞中表达下调;DNA-PKcs的表达在表达Tat蛋白细胞中不论是在mRNA和蛋白水平均被抑制;接受电离辐射后,表达Tat蛋白的细胞凋亡增加。结论:HIV-1 Tat蛋白使细胞对电离辐射敏感,部分通过抑制DNA-PKcs表达来降低DNA双链断裂的修复能力,本研究为了解AIDS合并肿瘤患者对放射治疗敏感性提供了重要实验数据。 展开更多
关键词 hiv-1 tat 寡居核苷酸芯片 电离辐射 基因表达 细胞周期
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HIV-1反式激活因子(Tat)作用机理的研究进展 被引量:1
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作者 梁臣 耿运琪 《生命的化学》 CAS CSCD 1994年第5期34-36,共3页
HIV-1反式激活因子(Tat)作用机理的研究进展梁臣,耿运琪(南开大学生命科学学院,天津300071)关键词HIV-1,Tat,TAR人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)属反转录病毒科,慢病毒亚科,为艾滋病的重要病原体... HIV-1反式激活因子(Tat)作用机理的研究进展梁臣,耿运琪(南开大学生命科学学院,天津300071)关键词HIV-1,Tat,TAR人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)属反转录病毒科,慢病毒亚科,为艾滋病的重要病原体。该病毒可长期潜伏于人体内,但在某... 展开更多
关键词 TAR 艾滋病毒 反式激活因子 艾滋病
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HIV-1Tat蛋白改变血脑屏障结构和功能的研究进展 被引量:1
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作者 胡霄 王震 +2 位作者 李桢 曾柏瑞 曾晓锋 《昆明医科大学学报》 CAS 2013年第2期162-166,共5页
HIV-Tat蛋白是人类免疫缺陷病毒-1型(HIV-1)基因编码的一种被称为反式转录激活因子,是HIV转录和复制所必须的一个很重要的调控蛋白.艾滋病痴呆以及艾滋病相关性脑炎的患者其血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)都受到不同程度的损伤,其中... HIV-Tat蛋白是人类免疫缺陷病毒-1型(HIV-1)基因编码的一种被称为反式转录激活因子,是HIV转录和复制所必须的一个很重要的调控蛋白.艾滋病痴呆以及艾滋病相关性脑炎的患者其血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)都受到不同程度的损伤,其中HIV-1 Tat蛋白起到了非常重要的作用.然而HIV-Tat蛋白改变血脑屏障结构和功能并不清楚,本综述主要讨论HIV-1 Tat蛋白对血脑屏障结构和功能的影响. 展开更多
关键词 hiv-1tat蛋白 血脑屏障 紧密连接
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