HIV抗原抗体化学发光免疫检测方法的建立及优化

目的:建立并优化HIV抗原抗体化学发光免疫检测方法(CLIA)。方法:采用化学发光免疫的方法,通过对包被条件、HIV酶用量、反应加入量、反应时间和温度等反应参数进行优化,建立HIV抗原抗体联合检测方法,使用HIV国家参考品评价所建立方法的准确性。结果:包被比例取HIV-1抗原1∶5 000、HIV-2抗原1∶1 0000、HIV P24单抗1∶2 000;检测酶比例取Biotin-P24多抗1∶2 000;HRP-HIV-1抗原1∶5 000、HRP-HIV-2抗原1∶20 000、SA-HRP 1∶4 000;待测样本75μL/孔;第一步反应温度和时间分别为37℃和60 min,第二步反应温度和时间分别为37℃和30 min,为检测方法的较佳反应条件。检测国家参考品结果表明,阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、灵敏度和精密性均符合国家参考品标准要求。结论:成功建立了特异、灵敏的HIV抗原抗体化学发光免疫检测方法,为在临床上推广应用提供了科学依据。

使用四代HIV抗原抗体试剂筛查联合蛋白印迹或核酸补充实验的检测策略临床评价

目的对使用四代艾滋病病毒（HIV）抗原抗体试剂筛查,联合蛋白印迹试验（WB）或核酸补充实验的检测策略进行临床效果评价。方法第四代HIV抗原抗体检测试剂筛查阳性样本282例,采用第三代HIV抗体检测试剂复检,复检阳性样本进行WB确证,复检阴性样本同时进行WB检测及HIV核酸检测。结果 282例样本,经WB检测HIV抗体阳性195例,占69.1%,阴性71例,占25.2%,抗体不确定16例,占5.7%。71例WB阴性样本,HIV核酸检测阳性5例。16例WB不确定样本,经核酸检测阳性11例。四代阳性＋三代阳性样本206例中,WB确认为HIV抗体阳性195例,占94.7%;9例不确定样本的WB带型主要为p24gp160。四代阳性＋三代阴性样本76例,WB检测HIV抗体阴性69例,其中5例经核酸检测为阳性,核酸值均〉1×10^6拷贝/mL。结论四代阳性＋三代阳性样本,WB确证阳性符合率高;四代阳性＋三代阴性样本,WB检测存在漏检的问题,需要补充核酸试验确证。WB不确定样本,核酸检测可以实现早期诊断的目的。

HIV实验室检测策略

目前,临床诊断和疫情监测对于艾滋病(AIDS)预防控制工作十分重要。但临床诊断及疫情监测则是基于实验室检测。随着艾滋病防治工作的不断深入,针对艾滋病病毒(HIV)的实验室检测策略也在不断完善和发展。因此建立一种敏感性高、特异性强的检测策略,对于控制艾滋病的流行尤为重要。该文从HIV检测策略的提出、评价和应用进行了阐述。通过对各种检测策略的综合分析,应用第四代抗原抗体联合检测试剂的检测策略可进一步缩短窗口期,发现急性期感染者,从而对中国现行的检测策略提出了新的选择。