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G6PD对大肠癌细胞生长侵袭的影响及其与HK Ⅱ的相关性 被引量:1
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作者 郑可心 张秀梅 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2019年第10期895-900,共6页
目的探讨G6PD对大肠癌HCT116和SW480细胞生长侵袭的影响,以及G6PD与HKⅡ在大肠癌及其癌旁上皮组织中的表达和两者的相关性。方法将体外培养的大肠癌HCT116和SW480细胞进行G6PD过表达和干扰处理。Western blot法检测细胞中G6PD和HKⅡ的... 目的探讨G6PD对大肠癌HCT116和SW480细胞生长侵袭的影响,以及G6PD与HKⅡ在大肠癌及其癌旁上皮组织中的表达和两者的相关性。方法将体外培养的大肠癌HCT116和SW480细胞进行G6PD过表达和干扰处理。Western blot法检测细胞中G6PD和HKⅡ的蛋白表达水平;流式细胞术分析细胞周期进程;葡萄糖氧化酶法检测培养液中葡萄糖的含量;划痕实验检测细胞侵袭能力;免疫组织化学法检测大肠癌及癌旁组织中G6PD与HKⅡ蛋白的表达水平。结果过表达实验中,与Flag转染组相比,Flag-G6PD转染组HCT116和SW480两种细胞培养液中葡萄糖浓度、S期所占比例及侵袭能力均无明显变化;干扰实验中,与阴性对照转染组相比,G6PD-Homo-1504转染组两种细胞的葡萄糖浓度显著升高,S期所占比例和侵袭能力显著降低。G6PD与HKⅡ表达水平呈正相关。结论干扰G6PD减少了大肠癌细胞葡萄糖的消耗,抑制了细胞的增殖和侵袭能力;同时G6PD对HKⅡ可能存在调控作用。 展开更多
关键词 G6PD hk 大肠癌 侵袭 细胞周期 葡萄糖的浓度
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冬凌草甲素下调STAT3-HKⅡ通路诱导HepG2细胞凋亡的研究 被引量:12
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作者 王天晓 刘迎滑 时小燕 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期101-106,共6页
目的研究冬凌草甲素(Oridonin)诱导HepG2细胞凋亡的作用和机制。方法采用MTT法检测HepG2细胞的增殖;Hoechst 33342/PI双染法检测细胞凋亡;RT-PCR检测STAT3和HK-ⅡmRNA水平;Western blot检测STAT3、pSTAT3和HK-Ⅱ蛋白表达。结果冬凌草甲... 目的研究冬凌草甲素(Oridonin)诱导HepG2细胞凋亡的作用和机制。方法采用MTT法检测HepG2细胞的增殖;Hoechst 33342/PI双染法检测细胞凋亡;RT-PCR检测STAT3和HK-ⅡmRNA水平;Western blot检测STAT3、pSTAT3和HK-Ⅱ蛋白表达。结果冬凌草甲素可降低STAT3和HK-Ⅱ的mRNA及蛋白表达水平,剂量依赖性抑制HepG2细胞生长,促进细胞凋亡;STAT3 siRNA可下调HK-Ⅱ水平;冬凌草甲素诱导的细胞增殖抑制及凋亡可被STAT3siRNA和3-BrPA消除。结论冬凌草甲素可能通过抑制STAT3-HK-Ⅱ通路诱导HepG2细胞凋亡。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 STAT3 己糖激酶 HEPG2细胞 增殖 凋亡
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姜黄素亚型B14对HKⅡ细胞损伤的保护作用及机制
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作者 马佳男 刘秋菊 +2 位作者 安伟 程飞 魏巍 《东北师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期129-132,共4页
采用CCK-8比色法检测了姜黄素(Cur)及其亚型对人肾皮质近曲小管上皮细胞(HKⅡ)的损伤作用;采用ELISA法检测了不同浓度和时间条件下血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)对HKⅡ细胞Cleaved caspase-3表达的影响,并建立了糖尿病肾病细胞模型... 采用CCK-8比色法检测了姜黄素(Cur)及其亚型对人肾皮质近曲小管上皮细胞(HKⅡ)的损伤作用;采用ELISA法检测了不同浓度和时间条件下血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)对HKⅡ细胞Cleaved caspase-3表达的影响,并建立了糖尿病肾病细胞模型;利用此模型研究了B14对HKⅡ细胞的保护作用及机制.结果表明:Cur及其亚型B13,B14对HKⅡ细胞均无毒害作用;以AngⅡ250nmol/L培养48h时,可建立最佳糖尿病肾病模型.B14对AngⅡ引起的HKⅡ细胞损伤具有保护作用,且此种保护作用与PI3K信号通路有关. 展开更多
关键词 姜黄素亚型B14 血管紧张素 糖尿病肾病 人肾皮质近曲小管上皮细胞
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不同级别前列腺癌中HKⅡ和PSA的表达及临床意义 被引量:5
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作者 孙雪骐 黄麒睿 +1 位作者 孙彦珍 王建 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期692-695,701,共5页
目的探讨不同级别前列腺癌中己糖激酶Ⅱ(hexokinaseⅡ,HKⅡ)和前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)的表达。方法收集35例正常前列腺组织及189例前列腺癌手术标本,在HE染色下根据危险程度将前列腺癌分为低级别和高级别组,... 目的探讨不同级别前列腺癌中己糖激酶Ⅱ(hexokinaseⅡ,HKⅡ)和前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)的表达。方法收集35例正常前列腺组织及189例前列腺癌手术标本,在HE染色下根据危险程度将前列腺癌分为低级别和高级别组,应用免疫组化EnVision两步法染色检测HKⅡ和PSA在不同前列腺组织中的表达,并分析HKⅡ和PSA表达与前列腺癌临床病理学特征的关系及两者的相关性。结果HKⅡ在正常前列腺组织(14.3%)、低级别前列腺癌(52.7%)及高级别前列腺癌(74.0%)的高表达率逐渐升高(P<0.05);在189例前列腺癌中,HKⅡ表达与Gleason评分、组织学分级及分期有关(P<0.05)。与正常前列腺组织(37.1%)相比,PSA在前列腺癌中(96.3%)的高表达率明显升高(P<0.05)。前列腺癌中HKⅡ与PSA表达呈正相关(P=0.019)。结论HKⅡ和PSA在前列腺癌中高表达,随着前列腺癌的进展,HKⅡ的高表达率呈逐渐升高的趋势,且HKⅡ和PSA表达呈显著相关性,提示HKⅡ联合PSA检测有望成为前列腺癌预后评估的潜在生物学标志物,为前列腺癌患者的治疗提供新思路。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 Warburg效应 分级分组 hk PSA
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FoxM1和HK—Ⅱ基因蛋白水平与乳腺肿瘤恶性程度相关性研究
5
作者 石教启 黄金文 《现代检验医学杂志》 CAS 2012年第2期34-36,共3页
目的探讨FoxM1(forkhead boxprotein,M1)与HK—Ⅱ(己糖激酶-Ⅱ)鉴别乳腺肿瘤恶性程度的应用价值。方法收集2010年2月~201】年7月在阳新县人民医院肿瘤科就诊的乳腺疾病患者病理组织切片共110例,经病理确诊为乳腺炎44例,乳腺非... 目的探讨FoxM1(forkhead boxprotein,M1)与HK—Ⅱ(己糖激酶-Ⅱ)鉴别乳腺肿瘤恶性程度的应用价值。方法收集2010年2月~201】年7月在阳新县人民医院肿瘤科就诊的乳腺疾病患者病理组织切片共110例,经病理确诊为乳腺炎44例,乳腺非典型增生28例,乳腺瘤20例,乳腺癌18例。均采用世界卫生组织公布的乳腺肿瘤TNM分类标准。RT-PCR联合图像分析软件进行光密度积分值检测各组标本FoxM1 mRNA,HK—IImRNA水平,图像分析软件联合western-blOt检测FoxM1与HK-Ⅱ的蛋白表达水平。结果FoxM1与HK-ⅡmRNA与蛋白质在四种不同来源的乳腺组织中有相关性,在乳腺癌中表达水平最高,与其它组差异具有统计学意义(P〈0.05),不典型增生与良性乳腺瘤差异无统计学意义(p〉0.05),但与正常组差异有统计学显著性意义p〈0.05。结论FoxM1与HK-Ⅱ水平与乳腺组织的异型性有关,可作为鉴别良恶性乳腺瘤的指标。 展开更多
关键词 乳腺瘤 FOXM1 己糖激酶同工酶-(hexokinase-) 异形性
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HKⅡ在大肠癌组织中表达的临床意义
6
作者 王涵可 张小玉 +2 位作者 田苗苗 郑可心 张秀梅 《锦州医科大学学报》 CAS 2019年第6期6-8,I0010,共4页
目的探讨己糖激酶Ⅱ(hexokinaseⅡ,HKⅡ)在大肠癌及其癌旁上皮组织中的表达情况,分析其与大肠癌发生、发展和转移间的相互关系。方法采用免疫组化(streptavidian-perosidase SP)法检测89例大肠癌组织芯片及癌旁组织中HKⅡ蛋白的表达情况... 目的探讨己糖激酶Ⅱ(hexokinaseⅡ,HKⅡ)在大肠癌及其癌旁上皮组织中的表达情况,分析其与大肠癌发生、发展和转移间的相互关系。方法采用免疫组化(streptavidian-perosidase SP)法检测89例大肠癌组织芯片及癌旁组织中HKⅡ蛋白的表达情况,采用SPSS17.0统计学软件对实验数据进行处理,进一步分析其与临床病理特征和预后相关性间的关系。结果HKⅡ蛋白在大肠癌组织中高表达,表达水平随浸润深度而升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。HKⅡ蛋白的阳性表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移及病理分析无关(P>0.05)。结论与癌旁组织相比,大肠癌组织中HKⅡ表达明显升高,并与肿瘤浸润深度密切相关,对大肠癌患者预后判断具有重要意义。 展开更多
关键词 hk 大肠癌 免疫组化 浸润深度 肿瘤
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北农化控Ⅱ号对小麦茎秆生长和产量器官发育的调节效应 被引量:6
7
作者 于运华 何钟佩 +2 位作者 杨培珠 李召虎 田晓莉 《西南农业学报》 CSCD 1995年第2期46-52,共7页
对两个冬小麦品种(“京冬6号”和“农大142”)施用北农化控Ⅱ号生长调节剂,初步显示可以有效地降低株高,并使杆壁增厚,增强了小麦的抗倒能力。该调节剂有增强小麦籽粒乳熟中期以后灌浆速度的效应,并调节了麦穗中乙烯、籽粒中... 对两个冬小麦品种(“京冬6号”和“农大142”)施用北农化控Ⅱ号生长调节剂,初步显示可以有效地降低株高,并使杆壁增厚,增强了小麦的抗倒能力。该调节剂有增强小麦籽粒乳熟中期以后灌浆速度的效应,并调节了麦穗中乙烯、籽粒中IAA、Z+ZR等激素水平。同时处理可使亩穗数、结实小穗、穗粒数和穗粒重增加,产量也有不同程度的提高。收获的种子经生物学方法测定,基本无药效残留的反应。北农化控Ⅱ号,每公顷用量225g,使用安全,可以进一步扩大试验示范。 展开更多
关键词 冬小麦 北农化控 茎杆生长 产量器官发育
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天然二萜衍生物JYD01促进己糖激酶Ⅱ与线粒体解离诱导胃癌细胞凋亡
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作者 苏楠 范霞霞 +1 位作者 王爱凤 马永成 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期871-877,共7页
目的研究二萜衍生物JYD01诱导己糖激酶Ⅱ(hexokinaseⅡ,HKⅡ)与线粒体解离作用,并探讨其抗胃癌细胞增殖机制。方法MTT法检测JYD01对胃癌细胞MGC-803、BGC-823的抑制作用;细胞能量代谢分析仪实时检测细胞糖酵解;流式细胞术定量分析细胞... 目的研究二萜衍生物JYD01诱导己糖激酶Ⅱ(hexokinaseⅡ,HKⅡ)与线粒体解离作用,并探讨其抗胃癌细胞增殖机制。方法MTT法检测JYD01对胃癌细胞MGC-803、BGC-823的抑制作用;细胞能量代谢分析仪实时检测细胞糖酵解;流式细胞术定量分析细胞凋亡及线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)、荧光显微镜进行细胞形态学研究及MMP观察;Western blot检测蛋白表达。结果JYD01明显抑制MGC-803、BGC-823细胞增殖,且呈浓度依赖性;JYD01可以促使HKⅡ与线粒体解离,抑制胃癌细胞糖酵解,诱导MMP下降并导致细胞色素C由线粒体释放至细胞质;1、2、4μmol·L-1 JYD01诱导MGC-803总凋亡率分别为(32.2±4.7)%、(46.5±6.3)%和(66.4±7.5)%,与对照组(5.8±2.3)相比,差异均具有显著性(P<0.01)。结论JYD01明显抑制胃癌细胞生长,机制可能与其促进HK2与线粒体解离,从而抑制糖酵解功能,并启动线粒体凋亡途径有关。本研究为天然二萜化合物的抗肿瘤研究提供了新的视角。 展开更多
关键词 天然二萜衍生物 hk 糖酵解 线粒体 抗肿瘤 凋亡
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己糖激酶Ⅱ在乳腺癌中的表达及对细胞增殖能力的影响
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作者 王翠瑶 单良 +2 位作者 岳金金 庞一心 张秀梅 《锦州医科大学学报》 2022年第6期1-6,共6页
目的探讨HKⅡ在浸润性乳腺导管癌(invasive ductal carcinomas,IDC)中的表达和临床意义及HKⅡ对乳腺癌细胞增殖能力的影响。方法通过免疫组织化学法研究IDC组织和癌旁正常组织中HKⅡ的表达水平;使用Spearman检验分析HKⅡ的表达与浸润性... 目的探讨HKⅡ在浸润性乳腺导管癌(invasive ductal carcinomas,IDC)中的表达和临床意义及HKⅡ对乳腺癌细胞增殖能力的影响。方法通过免疫组织化学法研究IDC组织和癌旁正常组织中HKⅡ的表达水平;使用Spearman检验分析HKⅡ的表达与浸润性乳腺导管癌患者临床特征之间的相关性;使用Kaplan-Meier方法和Log-rank检验评估浸润性乳腺导管癌中HKⅡ的表达水平与总生存期之间的关系;使用Cox比例风险回归模型进一步评估HKⅡ表达水平对浸润性乳腺导管癌患者总生存期的预测效能。通过瞬时转染法将体外培养的MCF 7和MDA-MB-231细胞进行HKⅡ干扰处理,Western Blot法检测HKⅡ蛋白的表达水平;葡萄糖氧化酶法检测培养液中葡萄糖浓度;MTT法检测细胞增殖情况。结果69例IDC组织中HKⅡ的表达水平显著高于相应正常乳腺组织;138例IDC组织中HKⅡ高表达的IDC患者生存期比HKⅡ低表达患者更短,而且HKⅡ高表达是IDC患者预后不良的独立危险因素;KMPLOT数据库的3951位乳腺癌患者HKⅡ的表达水平与其生存期同样存在负相关。干扰HKⅡ后消耗的葡萄糖减少,细胞增殖速度减慢。结论HKⅡ在IDC患者中的表达明显高于正常乳腺组织,HKⅡ高表达是IDC患者预后不良的独立危险因素;而且HKⅡ促进乳腺癌细胞的葡萄糖的摄取及细胞增殖。 展开更多
关键词 乳腺癌 hk 预后 增殖
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Klotho与自噬在脓毒症急性肾损伤细胞中的表达趋势
10
作者 陈宇 陈若如 黄蔚霞 《中国中西医结合肾病杂志》 2023年第10期862-866,I0002,共6页
目的:研究脂多糖(LPS)诱导的人近曲肾小管上皮细胞(HK-2)中Klotho与自噬的变化及其关系。方法:HK-2细胞分别在浓度为0、1、5、10、50、100μg/ml的LPS干预下孵育3 h,明确最佳的LPS诱导浓度。继而分别在LPS干预下孵育3 h、6 h、12 h、24... 目的:研究脂多糖(LPS)诱导的人近曲肾小管上皮细胞(HK-2)中Klotho与自噬的变化及其关系。方法:HK-2细胞分别在浓度为0、1、5、10、50、100μg/ml的LPS干预下孵育3 h,明确最佳的LPS诱导浓度。继而分别在LPS干预下孵育3 h、6 h、12 h、24 h,明确LPS诱导的最佳时间点。从而建立脓毒症急性肾损伤的细胞模型,Westernblot检测HK-2细胞中Klotho蛋白、LC3蛋白和P62蛋白的表达,电镜观察自噬体的形成,免疫荧光观察细胞自噬激活情况。SPSS 23.0软件采用独立样本资料的t检验进行统计学分析。结果:HK-2细胞在不同浓度梯度LPS诱导3 h后,Klotho蛋白在LPS 10μg/ml浓度时表达最弱。自噬相关蛋白包括LC3和P62,在LPS 10μg/ml浓度时LC3-Ⅱ表达最显著,P62表达最弱。HK-2细胞在不同时间梯度LPS诱导(10μg/ml浓度)下,Klotho蛋白在LPS作用24 h时表达最弱,而LC3-Ⅱ在该时间点表达最显著,P62表达最弱。电镜显示HK-2细胞在LPS 10μg/ml浓度诱导24 h时可发现自噬小体和吞噬泡现象。免疫荧光也同样显示细胞在LPS 10μg/ml浓度诱导24 h时自噬激活。结论:LPS诱导的HK-2细胞中Klotho减少,自噬增强;Klotho和自噬在脓毒症急性肾损伤细胞中的变化具有剂量和时间依赖性,在LPS 10μg/ml的浓度预处理24 h最显著。 展开更多
关键词 LPS hk-2 脓毒症 急性肾损伤 KLOTHO 自噬 LC3- P62
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G肽对血管紧张素Ⅱ诱导人肾小管上皮细胞转化生长因子β1活化的影响
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作者 吴开胤 王伟铭 +1 位作者 黄秋花 陈楠 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期353-359,共7页
目的观察根据血小板反应蛋白1(TSP1)分子WSHW序列人工合成的六肽 (GGWSHW,G肽)对由血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的肾小管上皮细胞TGF-β1过度活化的抑制作用。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞系(HK-2),以未处理HK-2细胞为正常对照,以 AII... 目的观察根据血小板反应蛋白1(TSP1)分子WSHW序列人工合成的六肽 (GGWSHW,G肽)对由血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的肾小管上皮细胞TGF-β1过度活化的抑制作用。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞系(HK-2),以未处理HK-2细胞为正常对照,以 AII刺激HK-2细胞(AngⅡ组),选择合成TSP1和TGF-β1最佳刺激浓度和时间。刺激前加入10 μmol/L G肽进行干预(G肽组),并以AngⅡ受体阻断剂洛沙坦(losartan)为抑制对照(losartan 组)。分别用RT-PCR和Western印迹检测TSP1和TGF-β1以及细胞外基质纤连蛋白(FN)和纤溶酶原活化物抑制剂-1(PAI-1)mRNA转录和蛋白表达。共聚焦显微镜和流式细胞仪观察TSP1 和TGF-β1的表达以及两者共表达。ELISA法检测培养细胞上清液中活性TGF-β1、总TGF-β1、 FN和PA1-1的分泌含量。Western印迹检测TGF-β1信号转导蛋白Smad2及磷酸化Smad2(p- Smad2)表达水平。结果 AngⅡ以时间和剂量依赖方式促进HK-2细胞合成TSP1和TGF-β1 (优化后分别为6 h的1μmol/L,12 h的0.1μmol/L)。与正常对照组比较,AngⅡ组TSP1与 TGF-β1阳性共表达的细胞数上调5.4倍;总TGF-β1和活性TGF-β1水平分别增加1.8和2.0 倍;p-Smad2蛋白水平明显上调;FN和PAI-1 mRNA转录水平分别上调3和1.5倍,且细胞上清液中两者含量分别增加2和1.9倍。G肽对TSP1和TGF-β1 mRNA转录和蛋白表达水平均无显著性影响,且对总TGF-β1分泌无明显抑制作用,但可显著抑制活性TGF-β1的水平。此外与 losartan组比较,G肽组p-Smad2蛋白表达减少28.9%,FN和PAl-1mRNA转录水平分别下调34. 5%和26%,且细胞上清液中两者含量分别减少11%和8.9%。结论TSP1肽抑制物体外能通过有效竞争抑制TSP1致HK-2细胞的TGF-B1活化作用,并可相应下调FN和PAI-1的合成分泌。 展开更多
关键词 转化生长因子Β 血管紧张素 凝血酶敏感蛋白1 hk-2细胞
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高糖对肾小管上皮细胞ACE/ACE2表达的影响 被引量:3
12
作者 郭汉城 孟雪 +1 位作者 关天俊 高清 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期680-682,共3页
体外培养的HK-2细胞分为正常对照组(NG组)、高糖组(HG组)、渗透压对照组(MG组),检测细胞ACE、ACE2 mRNA和蛋白表达及细胞上清液血管紧张素Ⅱ的浓度。结果在NG组,正常培养的HK-2细胞即存在ACE、ACE2 mRNA及蛋白表达。在HG组HK-2... 体外培养的HK-2细胞分为正常对照组(NG组)、高糖组(HG组)、渗透压对照组(MG组),检测细胞ACE、ACE2 mRNA和蛋白表达及细胞上清液血管紧张素Ⅱ的浓度。结果在NG组,正常培养的HK-2细胞即存在ACE、ACE2 mRNA及蛋白表达。在HG组HK-2细胞,ACE mRNA及蛋白表达较NG组升高,而ACE2 mRNA及蛋白表达降低。在HG组血管紧张素Ⅱ水平较NG组显著升高。结果表明高糖可促进体外培养的HK-2细胞ACE表达、抑制ACE2表达,进而促进血管紧张素Ⅱ合成。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 hk-2细胞 血管紧张素转换酶 血管紧张素
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茶多酚对裸鼠喉鳞癌的抑制作用及机制研究
13
作者 刘阳 赵莉琳 骆文龙 《世界科技研究与发展》 CSCD 2011年第5期901-903,共3页
目的观察茶多酚对裸鼠喉鳞癌的抑制作用,并初步探讨其机制。方法将接种Hep22细胞后的裸鼠随机分为4组,其中对照组8只,每天给予生理盐水1ml灌胃;茶多酚高、中、低剂量组各8只,每天分别给予茶多酚80、160、320mg/kg。20 d后处死。分离肿... 目的观察茶多酚对裸鼠喉鳞癌的抑制作用,并初步探讨其机制。方法将接种Hep22细胞后的裸鼠随机分为4组,其中对照组8只,每天给予生理盐水1ml灌胃;茶多酚高、中、低剂量组各8只,每天分别给予茶多酚80、160、320mg/kg。20 d后处死。分离肿瘤测量其体积,real-time RT-PCR法检测肿瘤组织中Src、HK Ⅱ mRNA的表达。己糖激酶活性测定试剂盒测定肿瘤组织中己糖激酶活性。结果茶多酚能明显降低肿瘤体积,降低肿瘤组织中Src、HK Ⅱ mRNA的表达和己糖激酶活性。结论茶多酚能抑制裸鼠喉鳞癌的生长,其机制可能与抑制肿瘤糖酵解有关。 展开更多
关键词 茶多酚 SRC hk 糖酵解
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白蛋白对肾小管上皮细胞血管紧张素转换酶表达的影响
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作者 高珺 刘必成 +2 位作者 张晓良 宫壮 弓玉祥 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期838-841,共4页
目的观察白蛋白对肾小管上皮细胞血管紧张素转换酶(ACE)mRNA和蛋白水平表达的影响,并探讨尿蛋白激活肾脏局部肾素.血管紧张素系统(RAS)的机制。方法分别采用2.5、5、10g/L的牛血清白蛋白(BSA)刺激人近端肾小管上皮细胞株(HK-... 目的观察白蛋白对肾小管上皮细胞血管紧张素转换酶(ACE)mRNA和蛋白水平表达的影响,并探讨尿蛋白激活肾脏局部肾素.血管紧张素系统(RAS)的机制。方法分别采用2.5、5、10g/L的牛血清白蛋白(BSA)刺激人近端肾小管上皮细胞株(HK-2)6h和12h。并分别采用实时定量PCR和Western印迹检测ACEmRNA和蛋白水平的表达。结果与对照组相比,随着BSA刺激浓度的增加,HK-2细胞ACEmRNA表达均显著增加(均P〈0.05)。同时,Western印迹显示ACE蛋白表达也均显著增加(均P〈0.05)。另外,BSA10g/L作用于HK-2细胞6h和12h后,ACEmRNA表达显著增加(均P〈0.05);Western印迹显示ACE蛋白也显著增加(均P〈0.05)。结论BSA可显著增加HK-2细胞ACE表达,此作用可能是导致肾间质局部AngⅡ蓄积从而启动肾小管间质纤维化的重要机制之一。 展开更多
关键词 血管紧张素转换酶 白蛋白 血管紧张素 肾小管上皮细胞
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白蛋白对肾小管上皮细胞血管紧张素转换酶2表达的抑制作用
15
作者 高珺 宫状 +2 位作者 李青 张晓良 刘必成 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期449-451,共3页
目的观察白蛋白对人近端肾小管上皮细胞株(HK-2)血管紧张素转换酶2(ACE2)mRNA和蛋白表达的影响,探讨蛋白尿激活肾脏局部RAS的机制。方法采用不同浓度的牛血清白蛋白(BSA)作用HK-2细胞不同时间。以实时RT-PCR和Western印迹检测ACE2 mRNA... 目的观察白蛋白对人近端肾小管上皮细胞株(HK-2)血管紧张素转换酶2(ACE2)mRNA和蛋白表达的影响,探讨蛋白尿激活肾脏局部RAS的机制。方法采用不同浓度的牛血清白蛋白(BSA)作用HK-2细胞不同时间。以实时RT-PCR和Western印迹检测ACE2 mRNA和蛋白的表达。采用放射免疫法检测细胞上清液中血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)含量。采用激光共聚焦显微镜观察ACE2蛋白的表达。结果与对照组(相对表达量为0)相比,BSA使ACE2 mRNA表达显著减少(2.5mg/ml:—1.05±0.12;5mg/ml:—1.30±0.11;10mg/ml:—2.54±0.44;P均<0.05)。同时,BSA使ACE2蛋白表达显著降低(对照组:0.90±0.10;2.5mg/ml:0.66±0.09;5mg/ml:0.50±0.07;10mg/ml:0.35±0.05;P均<0.05)。其中BSA(10mg/m1)使ACE2 mRNA及蛋白表达减少呈时间依赖性(P均<0.05)。与对照组相比,不同浓度BSA组的细胞上清液中的ATⅡ均显著升高(P均<0.05)。激光共聚焦显微镜可见ACE2主要分布于细胞膜。结论BSA可显著抑制HK-2细胞ACE2 mRNA和蛋白的表达,此作用所导致的近曲小管间质液ATⅡ浓度升高可能与间质纤维化相关。 展开更多
关键词 血管紧张素转换酶 白蛋白 血管紧张素 肾小管上皮细胞株
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贵州省神经管畸形与基因多态性及环境因素关系 被引量:1
16
作者 周林 何俊峰 +4 位作者 王伟人 邓朝霞 杨琼芬 李光友 李佩珍 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1139-1142,共4页
目的探讨贵州省神经管畸形(NTDs)高发的可疑危险因素,揭示多因素在NTDs发生中的作用。方法采用1:1匹配的病例对照研究,选取9个地区(州、市)63所医院NTDs患儿的母亲110例和正常儿母亲110人进行问卷调查和血样采集,采用PCR—RFLP... 目的探讨贵州省神经管畸形(NTDs)高发的可疑危险因素,揭示多因素在NTDs发生中的作用。方法采用1:1匹配的病例对照研究,选取9个地区(州、市)63所医院NTDs患儿的母亲110例和正常儿母亲110人进行问卷调查和血样采集,采用PCR—RFLP和PCR产物测序验证HKII基因第15外显子C736G、INSRG6244A基因多态性、PC-1K121Q基因多态性;运用SPSS16.0软件进行单因素及多因素logistic回归分析。结果,检验分析发现,INSRG6244A在病例组和对照组中的基因型频率分布有统计学差异(P〈0.05),HKⅡ基因第15外显子和PC一1K121Q基因多态性在两组间的基因频率分布无统计学差异(P〉0.05);多因素条件logistic回归分析显示,妊娠剧吐、食用发芽土豆、妊娠期糖尿病和INSRG6244A基因多态性与NTDs的发生相关,OR及其95%C1分别为3.62(1.46—8.95)、4.01(1.65—9.72)、3.65(1.41—9.48)、3.10(1.52~6.33);母亲高文化程度是NTDs的保护因素,OR及其95%CI为0.45(0.28~0.73)。结论贵州省NTDs发生的主要危险因素为母亲妊娠剧吐史、食用发芽土豆、妊娠期糖尿病和INSRG6244A基因多态性,而母亲高文化程度是其独立保护因素。 展开更多
关键词 神经管畸形(NTDs) hk基因 INSR基因 PC-1基因 基因多态性
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马蔺子素放射增敏作用对MDA-MB231细胞Warburg效应的影响 被引量:2
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作者 苏晓雨 徐慧琴 +3 位作者 汪会 张丹 谯凤 余文静 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-5,共5页
目的 研究马蔺子素放射增敏作用在人乳腺癌MDA-MB231细胞照射过程中对Warburg效应的影响。方法 取指数生长期的人乳腺癌MDA-MB231细胞,分为空白对照组、马蔺子素组、单纯照射组、马蔺子素+照射组、阴性对照组及转染己糖激酶-Ⅱ(HKⅡ... 目的 研究马蔺子素放射增敏作用在人乳腺癌MDA-MB231细胞照射过程中对Warburg效应的影响。方法 取指数生长期的人乳腺癌MDA-MB231细胞,分为空白对照组、马蔺子素组、单纯照射组、马蔺子素+照射组、阴性对照组及转染己糖激酶-Ⅱ(HKⅡ) siRNA的实验组。克隆形成实验检测MDA-MB231细胞的存活分数;单击多靶模型拟合细胞存活曲线并计算放射增敏比(SER);用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;通过qRT-PCR和Western blot分别检测各组细胞HKⅡmRNA和蛋白相对表达水平。结果 马蔺子素+照射组的D0、Dq及SF2较单纯照射组均有所下降,放射增敏比(SER)为1.52。马蔺子素+照射组凋亡率高于空白对照组、马蔺子素组、单纯照射组、转染HKⅡsiRNA组,差异有统计学意义(t=13.29、12.09、5.90、3.83,P 〈 0.05)。马蔺子素+照射组与空白对照组、马蔺子素组、单纯照射组相比,HKⅡmRNA的相对表达水平明显降低,差异有统计学意义(t=9.14、10.48、3.40,P 〈 0.05),HKⅡ蛋白的相对表达水平也明显降低,差异有统计学意义(t=13.39、16.08、5.81,P 〈 0.05)。结论 马蔺子素放射增敏作用能通过下调HKⅡ基因的表达,从而抑制MDA-MB231细胞的Warburg效应。 展开更多
关键词 马蔺子素 放射增敏 Warburg效应 己糖激酶-
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Protective Effects of Combination of Radix Astragali and Radix Salviae Miltiorrhizae on Kidney of Spontaneously Hypertensive Rats and Renal Intrinsic Cells 被引量:6
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作者 LI Wei JIANG Yue-hua +4 位作者 WANG Yan ZHAO Meng HOU Guang-jian HU Hong-zhen ZHOU Le 《Chinese Journal of Integrative Medicine》 SCIE CAS CSCD 2020年第1期46-53,共8页
Objective: To evaluate the effects of combination of Radix Astragali(RA) and Radix Salviae Miltiorrhizae(RS) on kidney of spontaneously hypertensive rats(SHRs) and renal intrinsic cells. Methods: SHRs were intragastri... Objective: To evaluate the effects of combination of Radix Astragali(RA) and Radix Salviae Miltiorrhizae(RS) on kidney of spontaneously hypertensive rats(SHRs) and renal intrinsic cells. Methods: SHRs were intragastrically administrated with RA(5.09 g/kg) and RS(2.55 g/kg) either alone or with combination for 4 weeks;valsartan(13.35 mg/kg) was used as a positive control. Blood pressure and renal ultrasonography were monitored periodically. The biomarkers [microalbumin(m ALB), cystatin C, angiotensin Ⅱ(Ang Ⅱ), interleukin-1 beta(IL-1β), and β2-microglobulin(β2-Mg), etc.] in serum and urine were measured by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA). The protein expressions [phosphorylated adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase-α1(p-AMPKα1), sestrin-β, calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase-β(Ca MKK-β), phosphoinositide 3-kinases(PI3 K), serine-threonine protein kinase 1(AKT1), and vascular endothelial growth factor receptor 2(VEGFR2)] in renal cortex were determined by Western blot. In vitro, the hypertensive cellular model was established by applying 2×10^-6 mol/L Ang Ⅱ. The primary human podocytes, human glomerular endothelial cells(HRGECs), and human proximal tubular epithelial cells(HK-2 s) were pre-incubated with sulfotanshinone sodium(Tan, 10 μg/m L) and/or calycosin-7-O-β-D-glucoside(Cal, 5 μg/m L). The cellular viability and apoptosis were assayed by 3-(4, 5-Dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide(MTT) and Annexin V/PI staining, respectively. The level of endothelial nitric oxide synthase(eNOS) in culture supernatant was determined by ELISA. Results: RA+RS significantly decreased the diastolic blood pressure, renal vascular resistance index, and parenchymal thickness, increased 24 h urinary volume as well as lowered the levels of urine m ALB and serum cystatin C, IL-1β and β2-Mg of SHRs(P<0.05 vs. SHRs). The decreased protein levels of p-AMPKα1, sestrinβ and Ca MKK-β and the increased protein levels of PI3 K, AKT1 and VEGFR2 in renal cortex of SHRs were normalized after RA+RS treatment(P<0.05). In vitro, Tan and Cal attenuated the Ang Ⅱ-induced abnormal proliferation and increased the apoptosis of HRGECs and HK-2 s and improved the level of e NOS in culture supernatant. Whereas, neither of them showed powerful effect on podocyte. Conclusion: The combination of RA and RS had potential effects on alleviating the renal damages of SHRs and the renoprotection was independent of blood pressure level. 展开更多
关键词 hypertensive renal damage angiotensin human glomerular endothelial cells hk-2 Chinese medicine
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