HL60/ADM的耐药性及逆转研究

目的 :研究人类白血病多药耐药细胞株HL6 0 /ADM对 8种常用化疗药的耐药性及环孢菌素A(CsA)对其耐药的逆转作用。方法 :MTT比色法检测细胞耐药性及CsA对细胞耐药性的影响 ,流式细胞仪检测细胞内柔红霉素 (DNR)的浓度。结果 :HL6 0 /ADM对DNR、ADM、VCR、Har、VP16、MIT交叉耐药 ,对DNR耐药性最强 ,对Acla和Ara c基本不耐药。CsA使HL6 0 /ADM细胞内药物浓度增加 ,而对HL6 0的胞内药物浓度基本无影响。结论 :HL6 0 /ADM对Acla基本不产生耐药性 ,阿克拉霉素可能成为治疗白血病和克服白血病多药耐药性的重要药物。CsA对HL6 0

蟾酥注射液对HL60/ADM细胞多药耐药的逆转作用研究

目的:研究蟾酥注射液对人耐阿霉素(ADM)的急性髓性白血病细胞HL60/ADM多药耐药(MDR)的逆转作用。方法:采用MTT法分别考察蟾酥注射液对HL60/ADM细胞增殖能力和对ADM敏感性的变化,并采用高效液相色谱法考察HL60/ADM细胞对ADM的摄取能力。结果:蟾酥注射液能抑制细胞增殖;非细胞毒剂量蟾酥注射液预作用后,ADM对HL60/ADM细胞的半数抑制浓度(IC50)显著降低(P<0.01),HL60/ADM细胞对ADM摄取能力显著增加(P<0.01)。结论:蟾酥注射液可部分逆转HL60/ADM细胞对ADM的耐药性。

人类白血病多药耐药细胞株K562/ADM、HL60/ADM的耐药性及耐药逆转的研究

目的 :研究 K5 6 2 / ADM、HL6 0 / ADM的耐药性及 Cs A对其耐药的逆转作用。方法 :MTT比色法检测细胞耐药性及 Cs A对细胞耐药性的影响 ,流式细胞仪检测 Pgp、MRP的表达及细胞内柔红霉素 (DNR)的浓度。结果 :K5 6 2 / ADM、HL6 0 / ADM对 DNR、ADM、VCR、Har、VP1 6 、MIT交叉耐药 ,对 Acla和 Ara- C基本不耐药。 K5 6 2 / ADM细胞 Pgp过度表达 ,HL6 0 / ADM细胞的 MRP过度表达。 Cs A使 K5 6 2 / ADM、HL6 0 / ADM细胞内药物浓度增加 ,逆转了 K5 6 2 / ADM、HL6 0 / ADM的耐药性 ,而对 K5 6 2、HL6 0的耐药性基本无影响。结论 :两种不同耐药机制的细胞株对 8种常用化疗药物的耐药谱相似 ,对 Acla基本不产生耐药性 ,故在防止和克服多药耐药的基础上 ,Acla可能取代DNR、ADM。环孢菌素 A(Cs A)对两种不同耐药机制的细胞株的耐药性均有逆转作用 。

GM-CSF耦联米托蒽醌脂质体的制备及体外抑瘤作用的实验研究

目的制备粒-巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF）耦联米托蒽醌脂质体（liposome-entrapped mitoxantrone,LEM）,比较其与LEM和米托蒽醌（dihydroxyanthraquinone,DHAQ）对HL60/ADM细胞的体外杀伤作用。方法用逆向蒸发法制备LEM,高速离心法纯化LEM,比色法测定包封率,透射电镜下观察LEM的结构和粒径,以戊二醛交联法制备出LEM-GM-CSF,紫外分光光度法测定耦联率,流式细胞术测定LEM-GM-CSF中GM-CSF的活性保留率。通过MTT法检测所制备LEM-GM-CSF、LEM及DHAQ对HL60/ADM细胞的杀伤作用。结果LEM粒径分布均匀,为170-220nm,包封率为80%,GM-CSF与LEM有较高的耦联率及活性保留率,分别为42.3%及74.6%;LEM-GM-CSF、LEM及DHAQ对HL60/ADM细胞具有杀伤作用,且LEM-GM-CSF的杀伤作用显著强于LEM和DHAQ。LEM-GM-CSF、LEM及DHAQ对HL60/ADM细胞作用24h的IC50分别是8.73、12.42、27.31μg/ml;作用48h的IC50分别是：0.62、8.25、12.44μg/ml。结论本研究制备的LEM-GM-CSF对HL60/ADM细胞具有明显的杀伤作用,有望成为良好的抗白血病药物新剂型。

雷公腾内酯与多柔比星诱导耐药白血病细胞凋亡协同作用及其机制的探讨

目的:以耐多柔比星(adriamycin,ADM)的人急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)耐药细胞株HL60/ADM为研究对象,探讨IC20浓度雷公腾内酯(triptolide,TPL)能否提高ADM诱导耐药白血病细胞凋亡及其与Nrf2通路的关系。方法:流式细胞仪检测空白对照组、IC20浓度TPL单药组、ADM单药组和TPL联合ADM组处理HL-60/ADM后细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测各个处理组作用后,Nrf2及其下游基因醌氧化还原酶(quinone oxidoreductase,NQO1)、谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GSR)及血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)的表达水平变化;蛋白质印迹法检测各处理组作用后Nrf2蛋白表达变化。结果:TPL单药组细胞凋亡率为(5.28±0.80)%,与空白对照组的(7.09±0.46)%比较差异无统计学意义,P=0.226;但该浓度TPL可使ADM组细胞凋亡率由(19.55±1.70)%提高到(72.62±4.83)%,是ADM单药组的3.71倍,P<0.001。空白对照组、TPL单药组、ADM单药组及双药联合组Nrf2mRNA表达水平分别为1、0.742±0.052、0.619±0.042和0.241±0.010,NQO1分别为1、0.363±0.075、0.228±0.053和0.050±0.034;GSR分别为1、0.268±0.042、0.231±0.106和0.038±0.017;HO-1分别为1、0.495±0.023、0.282±0.099和0.048±0.036;各用药组Nrf2及其下游基因NQO1、GSR及HO-1的mRNA表达水平较对照组均出现显著下调,P<0.001;其中双药联合组下调程度最大。蛋白质印迹法结果显示,用药组及联合组Nrf2表达水平较对照组均有不同程度下调,其中联合组下调最为明显。结论:IC20浓度雷公腾内酯可显著提高ADM诱导耐药白血病细胞凋亡,其分子机制与下调Nrf2通路有关。