强直性脊椎炎与HLA-B27等位基因研究

为探索强直性脊椎炎与ＨＬＡ－Ｂ２７关联机理，建立非同位素地高辛标记的ＰＣＲ／ＳＳＯ方法对中国上海地区６８例ＨＬＡ－Ｂ２７阳性的强直性脊椎炎病人和７例ＨＬＡ－Ｂ２７阳性正常对照进行了ＨＬＡ－Ｂ２７等位基因的检测，结果显示在病人和正常对照组中Ｂ＊２７０４都是最常见的等位基因，各占７６．８％和７１．４％，Ｂ＊２７０５亦是常见的等位基因，分别占２０．３％和２８．６％，两组间比较差异无显著性；在病人组还检出Ｂ＊２７０６和Ｂ＊２７０７各１例，提示此两等位基因可能也与ＡＳ关联。此结果为研究强直性脊椎炎与ＨＬＡ－Ｂ２７关联的机制提供了有用的资料。

中国北方汉族人群中HLA-B27基因多态性与强直性脊柱炎的关联研究

目的首次通过大宗病例对照研究来探讨HLA-B27基因多态性在中国北方汉族强直性脊柱炎(AS)患者以及健康对照人群中的分布情况并研究B27多态性与AS的关联性。方法选用602例北方汉族AS病例和694例健康无关对照进行病例对照研究。HLA-B27基因多态性分析采用序列特异引物介导的PCR反应(PCR-SSP)方法。关联性分析采用卡方检验。结果在AS患者及健康对照中分别有82.4%和7.5%的个体为B27阳性。关联分析证实B27与AS之间存在强相关性(OR=58,p=6.5×10-163)。本研究共发现5种B27基因多态性,B*2705、B*2704、B*2702、B*2707和B*2724,其中B*2704、B*2705和B*2702都与AS有强相关性,而B*2704的相关性最强(P=1.4×10-68),但是B*2705诱发AS的危险度却高于B*2704;B*2707和B*2724与AS则没有相关性。另外,北方汉族与上海、广东、台湾地区AS患者中B27基因多态性的分布有较大差异(其中B*2705差异最显著,P=6.28×10-52);而且4个地区人群中不同B27基因多态性诱发AS的风险度也有明显不同。结论本研究证实B27与AS之间存在高度相关性,并首次发现B*2704虽与北方汉族人群AS发病最为相关,但其诱发AS的相对危险度却低于B*2705。B27基因多态性在AS患者中的分布是存在地域差异的,这一现象提示不同地区汉族人群的AS在遗传学发病机制上是有其独特性的。

强直性脊柱炎早发髋关节强直与HLA-B27基因亚型的易感性研究

背景:前期临床研究中发现,人类白细胞抗原B27阳性与强直性脊柱炎早发髋关节强直具有强相关性。目的:分析强直性脊柱炎早发髋关节强直与人类白细胞抗原B27基因亚型的易感性,探讨人类白细胞抗原B27基因亚型在强直性脊柱炎早发髋关节强直发病中的作用。方法:收集具有完整病历资料的强直性脊柱炎早发髋关节强直患者300例,强直性脊柱炎非早发髋关节强直患者300例。研究经过广西壮族自治区人民医院伦理委员会审议通过,所有受试者及监护人均签署知情同意。采用病例-对照研究方案,其中强直性脊柱炎早发髋关节强直组,在其开始发病5年内,均有放射学检查(髋关节MRI、CT,骨盆X射线正侧位片)证实髋关节发生强直。收集2组患者一般情况和临床表现,采集患者2mL静脉血,通过PCR-SSP高分辨技术进行29种人类白细胞抗原B27基因亚型检测,计算人类白细胞抗原B27各基因亚型的构成比,分析相对危险度。结果与结论:①2组患者人类白细胞抗原B27检测的总阳性率为93.67%(562例):强直性脊柱炎早发髋关节强直组99.33%,强直性脊柱炎非早发髋关节强直组88.59%;②共找到29种人类白细胞抗原B27亚型中的6种,分别是B*2702、B*2703、B*2704、B*2705、B*2706及B*2713;2组均以B*2704及B*2705亚型为主,组间比较,B*2704亚型在强直性脊柱炎非早发髋关节强直组所占比例最高(P<0.01),强直性脊柱炎早发髋关节强直组B*2705亚型所占比例最高(P<0.01);③B*2705亚型与强直性脊柱炎早发髋关节强直发病危险度相关(OR=1.896,95%可信区为1.221-3.218);④结果表明,强直性脊柱炎患者以B*2704和B*2705为主要亚型,其中B*2705亚型是导致强直性脊柱炎患者早发髋关节强直的易感基因。B*2705亚型可作为强直性脊柱炎早发髋关节强直早期诊断的重要参考指标。

HLA-B27与强直性脊柱炎的相关性研究

目的探讨应用流式细胞术检测人类白细胞抗原B27（HLA-B27）在临床上对强直性脊柱炎（AS）的诊断价值。方法应用流式细胞术,选择来本院就诊的门诊、住院的AS患者（AS组）561例及健康体检者（健康对照组）1 000例,进行HLA-B27检测。结果两组间HLA-B27阳性率比较：AS组为88.95%,健康对照组为6.90%,两组比较差异有显著性（P〈0.01）。两组不同性别间HLA-B27检测阳性率比较：临床确诊的AS组561名患者中,HLA-B27表达阳性患者499名（88.95%）,其中男性364名（64.88%）,女性135名（24.07%）,AS组男女比例约为2.7∶1,阳性率差异有显著性（P〈0.01）;健康对照组1 000例中HLA-B27表达阳性患者69名（6.9%）,其中男性39名（3.9%）,女性30名（3.0%）,健康对照组男女比例约为1.3∶1,阳性率差异无显著性（P〉0.05）。两组不同年龄段间HLA-B27检测阳性率比较：临床确诊的AS组561名患者,HLA-B27表达阳性患者中21~40年龄段298名（52.46%）,21~40年龄段阳性率差异有显著性（P〈0.01）,其他年龄段的阳性率无显著性差异（P〉0.05）;健康体检组HLA-B27表达阳性患者各年龄段的阳性率无显著性差异（P〉0.05）。结论 HLA-B27与AS具有高度相关性,检测HLA-B27有助于早期发现AS患者,以实现早期诊断,早期治疗。

HLA-B27亚型及其与强直性脊柱炎关系的研究进展

强直性脊柱炎 (AS)是与HLA关联最强的疾病。HLA B2 7由 2 2个以上同种异型基因型 (亚型 :B※2 70 1～B※2 2 )组成 ,不同亚型核苷酸序列之间只存在个别位点的差异 ,其亚型具有分布不同的种族和人种流行情况 ,以B※2 70 5分布最广。近年来建立了大量的AS动物模型 ,人类B2 7转基因鼠实验证实B2 7分子是AS的原发关联成分 ,这种带有B2 7等位基因的实验动物可发生类似人类AS疾病。目前倾向于以关节源性肽假说来解释HLA B2

流式细胞术与PCR-SSP法检测HLA-B27的比对及HLA-B27亚型的研究

目的探讨流式细胞术(FCM)与序列特异性引物聚合酶链式反应(PCR-SSP)在人类白细胞表面抗原-B27(HLA-B27)检测中的应用,并观察HLA-B27亚型在本地区的分布情况。方法采用PCR-SSP和FCM检测88例疑似强直性脊柱炎(AS)患者HLA-B27。结果 88例AS疑似患者中FCM法检测HLA-B27结果阳性82例,阴性6例,阳性率为93.2%;PCR-SSP法检测阳性83例、阴性5例、阳性率为94.3%。分型结果 B*2705型41例占49.4%;B*2704型37例占44.5%;B*2702型1例占1.2%;阳性但未分辨型别4例。结论 Kappa一致性系数K=0.905,PCR-SSP法与FCM检测HLA-B27结果具有较高的一致性。本地区易感HLA-B27等位基因亚型主要以HLA-B*2704和HLA-B*2705为主。

山东地区强直性脊柱炎患者HLA-B27基因高分辨分型结果分析

目的研究山东省强直性脊柱炎(AS)与亚型水平的HLA-B27等位基因的相关性。方法应用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术进行山东省AS患者HLA-B27基因高分辨分型。结果30例AS患者HLA-B27高分辨分型均为B*2704或B*2705,其中B*2704阳性11例,B*2705阳性19例,构成比分别是36.67%、63.33%。结论不同地区、不同人群的AS患者,HLA-B27各亚型分布频率存在差异性;山东地区AS患者HLA-B27等位基因以B*2704和B*2705为主,且B*2705最多见。

HLA-B27与强直性脊柱炎免疫学机制的研究进展

强直性脊柱炎是与HLA-B27有明确相关性的自身免疫性疾病,其发病过程包括了微生物和宿主的相互作用、免疫细胞对MHC-Ⅰ类分子的识别以及细胞因子网络的失平衡等方面。未折叠蛋白应答反应参与了强直性脊柱炎发病过程,并且下游IL-23/IL-17轴的激活可能在发病过程中起重要作用。未折叠蛋白反应和IL-23/IL-17轴是研究强直性脊柱炎发病机制和防治措施的新靶点。

南方汉族强直性脊柱炎患者及健康人群HLA-B27基因的分子多态性及分布

目的研究南方汉族强直性脊柱炎(AS)患者及健康人群HLA-B27亚型等位基因的多态性和分布特点。方法采用HLA测序分型方法,对收集到的46份B*27阳性的南方汉族AS患者血样以及随机选择的80份经rS-SOHLA流式磁珠低分辨检测为B*27阳性的造血干细胞南方汉族捐献者血样,做HLA-B基因的第2—4外显子测序分型,测序反应产物用ABI PrismTM3730测序仪检测,Assign3.5分析软件分析结果。对检出的模棱两可结果及"罕见型"等位基因,辅以PCR-SSP法HLA-B27高分辨基因分型。结果46名南方汉族AS患者中,共检出4个HLA-B*27相关的等位基因:B*2704的检出比例最高,为82.98%(39/47);其次是B*2705,为12.77%(6/47);B*2707和B*2724各为2.13%(1/47)。80名南方汉族造血干细胞捐献者中,共检出7种B*27相关等位基因:以B*2704的检出比例最高,为57.32%(47/82);其次为是B*2705,为26.83%(22/82);B*2706和B*2707各为6.10%(5/82);B*2703、B*2715和B*2724各为1.22%(1/82)。结论南方汉族AS患者HLA-B*27基因中以B*2704最为常见,健康人群以B*2704和B*2705等位基因为主要亚型。

相对定量检测HLA-B27 mRNA表达水平的方法建立

目的建立检测HLA-B27 mRNA表达水平的相对定量的方法。方法筛选未经治疗的AS患者外周静脉血27例,其中HLA-B27阳性患者22例,HLA B27阴性患者5例,对标本进行Total RNA提取,然后用RT-PCR方法进行HLA-B27反转录及相对定量。结果22例HLA-B27阳性AS患者有着相对较高的HLA-B27 mRNA表达水平,最低值为1.16,最高值为37.01,均值为7.77。5例HLA-B27阴性AS患者均值为1.19,接近于HLA-B27阴性健康对照组。结论检测外周静脉血HLA-B27mRNA表达水平对检测AS是一种有效可行的方法。

强直性脊柱炎867例HLA-B27的表达及意义

目的:通过检测临床疑为强直性脊柱炎(AS)患者的HLA-B27表达,探讨HLA-B27抗原的检测在AS早期诊断中的意义。方法:采用流式细胞术对1807例疑为AS患者外周血进行HLA-B27表达的检测。结果:在867例诊断为AS的患者中,HLA-B27阳性758例,HLA-B27检测AS的敏感性为87.4%(758/867),特异性为91.9%(864/940),诊断正确率为89.8%。结论:AS与HLA-B27阳性高度相关,临床疑为AS的患者若加上流式HLA-B27抗原检测结果将对AS的早期诊断起到重要作用。

HLA-B27对强直性脊柱炎的诊断价值

目的 了解人类白细胞抗原-B27（HLAB27）对强直性脊柱炎（AS）的诊断价值和在病情活动中的作用。方法 对2000～2002年病案资料中38例HLA-B27阴性的AS患者与92例HLA—B27阳性患者，进行临床表现和实验室的特殊检查结果分析。结果 B27阴性组的严重的髋关节病变、窦缓和／或传导阻滞、合并类风湿性关节炎及其它合并症（颈椎病、骨关节炎、腰椎间盘突出症等）的比率均明显低于B27阳性组。疾病活动性指标如血沉（ESR）、C-反应蛋白（CRP）在B27阴性组中明显低于B27阳性组。结论 B27检查结果对于AS疑似患者有助于明确诊断；而B27阴性的AS患者病情较轻，预后良好。

强直性脊柱炎与HLA-B27的表达及T淋巴细胞亚群和细胞因子相关性分析

目的探讨强直性脊柱炎(AS)与HLA-B27、T淋巴细胞亚群及部分细胞因子之间的相关性,为AS的诊断、治疗及预后提供帮助。方法收集131例AS患者及50例健康人(健康对照组)外周血标本,采用流式细胞术检测外周血中T淋巴细胞亚群及HLA-B27的表达情况,固相夹心法化学发光免疫量度法对血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等细胞因子进行定量检测。结果 AS患者与健康对照组比较,CD3+CD4-CD8+T(T8细胞)、IL-8、TNF-α升高,差异有统计学意义(P<0.05),CD3+T(总T细胞)、CD3+CD4+CD8-T(T4细胞)、T4/T8、IL-1β、IL-6差异无统计学意义(P>0.05)。HLA-B27阳性AS患者和HLA-B27阴性AS患者比较,T淋巴细胞亚群和上述细胞因子间均无显著差异(P>0.05)。AS患者HLA-B27不同荧光强度组别间上述各指标均无显著差异(P>0.05)。结论 HLA-B27、T淋巴细胞亚群和细胞因子IL-8、TNF-α的检测有助于提高AS诊断敏感性,对判断AS病情的发展转归有一定价值,HLA-B27的荧光表达强弱可能不反映AS病情进展情况。

淋巴细胞HLA-B27抗原的表达及意义

目的:评价检测淋巴细胞检测淋巴细胞HLA-B27抗原在强直性脊柱炎(ankylosingspondylitis,AS)患者、腰痛患者及健康人中的表达及临床意义。方珐:取肘静脉血Iml(EDTANa2抗凝),采用荧光抗体HLA-B27-FITC/HLAB7-PE直接标记法,流式细胞仪检测淋巴细胞中HLA-B27的比例。结果:24例AS患者、35例腰痛患者和55例健康者中HLA-B27阳性率分别为91.67%、5.71%、5.45%。结论:HLA-B27与强直性脊柱炎高度相关,其检测是AS诊断与鉴别诊断的重要标志。但检测阳性并不能作为AS的确诊和筛选指标;流式细胞仪检测HLA-B27简便省时,稳定性和重复性好,适用于临床检验。

HLA-B27基因亚型与汉族人群强直性脊柱炎遗传易感性的研究

目的探讨汉族人群人类白细胞抗原B27(HLA‐B27)基因亚型在强直性脊柱炎(AS)的表达及亚型分析,评价其检测在临床上的应用价值。方法选取2016年1~12月南昌大学第二附属医院门诊及住院AS患者74例,其中,类风湿关节炎(RA)65例,腰椎盘间盘突出(LIDH)51例,脊柱结核(ST)50例,骨关节炎(OA)53例。选取40例作为健康对照,应用BDFACSCalibur流式细胞仪检测细胞HLA-B27抗原;聚合酶链反应-直接测序分型(PCR-SBT)技术对HLA-B27基因亚型进行分型。结果AS患者HLA-B27阳性率高于RA、LIDH和ST疾病及健康对照组(P<0.007);30~<40岁年龄组男性人群HLA-B27阳性率高于女性人群(P<0.05);AS患者HLA-B27基因亚型以B2704为主。结论南昌汉族人群中AS患者HLA-B27基因亚型以B2704、B2705为主,且B2704是AS的发病易感基因亚型。

HLA-B27阳性与阴性未分化脊柱关节病的临床比较

目的:探讨血清人类白细胞抗原-B27(HLA-B27)阳性与阴性未分化脊柱关节病(undifferentiated spondyloarthropathy,uSpA)患者临床表现及预后的差异,为临床诊疗提供借鉴。方法:根据血清HLA-B27是否阳性将120例uSpA患者分为两组,阳性组78例,阴性组42例。分析HLA-B27阳性组与阴性组的临床表现及相关实验室检查结果,比较两组间的差异;并对部分患者进行3年以上随访观察,了解其病情变化。结果:HLA-B27阳性组患者发病年龄显著早于HLA-B27阴性组(P<0.05);发热、消瘦、疲倦等全身症状表现HLA-B27阳性组显著多于HLA-B27阴性组,且较严重(P<0.05);实验室检查中血沉以HLA-B27阳性组显著为高(P<0.05);骶髂关节X线表现亦以HLA-B27阳性组显著为高(P<0.05)。而两组性别及外周关节炎等表现差异无统计学意义(P>0.05)。随访发现HLA-B27阳性组3年后发展为强直性脊柱炎者显著多于HLA-B27阴性组(P<0.05)。结论:HLA-B27阳性组uSpA患者发病年龄较早,临床症状较重,更有可能发展为强直性脊柱炎。

外周血淋巴细胞HLA-B27表达强度与强直性脊柱炎临床分期的关系

目的了解强直性脊柱炎(AS)不同临床分期患者外周血淋巴细胞人类白细胞抗原B27(HLA-B27)表达量与疾病临床分期之间的关系。方法采用三色流式细胞学检测技术分析88例不同阶段AS患者及132例健康人的外周血淋巴细胞HLA-B27表达率及表达强度(MNX)。结果 AS进展期患者外周血淋巴细胞HLA-B27表达率的中位数、P25、P75分别是95.34%、86.60%、97.39%,MNX的中位数、P25、P75分别为8.70、5.20、10.80;强直期患者外周血淋巴细胞HLA-B27表达率的中位数、P25、P75分别是94.51%、90.40%、97.83%,MNX的中位数、P25、P75分别为8.40、6.05、15.95。健康对照组的外周血淋巴细胞HLA-B27表达率的中位数、P25、P75分别是3.69%、1.03%、11.13%,MNX的中位数、P25、P75分别为1.50、1.30、1.90。Mann-Whitney U检验显示,AS患者进展期与强直期的外周血淋巴细胞HLA-B27表达率及MNX均差异无统计学意义(P>0.05);进展期、强直期与健康对照组的外周血淋巴细胞HLA-B27表达率及MNX均差异有统计学意义(P<0.05)。结论外周血淋巴细胞HLA-B27的表达率及MNX适合于AS诊断,对AS病情判断无辅助意义。

四川地区汉族强直性脊柱炎患者HLA-B27抗原阳性频率和表达强度的联合观察

目的 通过检测674例强直性脊柱炎（AS）患者HLA-B27抗原阳性频率和表达强度，了解四川地区AS与HLA-B27抗原的相关性，并初步探讨其临床意义。方法 采用流式细胞术检测AS患者T淋巴细胞膜上的HLA-B27抗原和其平均荧光强度（mean fluorescence intensity，MH）。研究样本来源于两家医院临床诊断为AS的患者。结果 ①674例AS患者以16～50岁青壮年为主，占91．1％；男女比例为3．0：1；男女患者就诊年龄分别为（30．4±10．7）岁和（35．4±12．1）岁（P〈0．01）；②674例AS患者的HLA-B27抗原阳性率97．9％；男女患者HLA．B27抗原阳性率分别为98．4％和96．5％（P〉0．05）；男女阳性患者的MFI有明显差异（P〈0．01）；③骶髂关节炎在I级和Ⅱ级以上的患者HLA-B27抗原阳性率和荧光强度明显高于O级者（P〈0．01）；④幼年AS患者男女比例为6．7：1（20：3）；HLA-B27抗原阳性率100％；其HLA-B27抗原MFI明显低于成年AS患者（P〈0．01）。结论 四川地区AS患者与HLA．B27抗原有着很强的相关性。采用流式细胞技术检测临床疑似AS患者T淋巴细胞HLA-B27表达强度有助于诊断和鉴别诊断AS，也有利于临床对病情严重程度和进展的判断。

HLA-B27抗原与前葡萄膜炎的相关性及其临床意义

目的 探讨HLA B2 7抗原与前葡萄膜炎的相关性及可能的意义。方法 用多聚酶链反应 (PCR)和微量淋巴细胞毒试验对 2 0例伴有关节强直性脊椎炎 (AS)的急性前葡萄膜炎 (AAU)、67例AAU、70例慢性前葡萄膜炎和 70 8个健康人进行HLA B2 7分型。结果 AS伴有AAU和单纯的AAU患者中HLA B2 7阳性率分别为 70 %和 49 2 5 % ,显著高于对照组 ( 2 97% ,P <0 0 0 1) ,慢性前葡萄膜炎患者中HLA B2 7的阳性率 ( 4 2 8% )与对照组无显著差别。结论 AAU与HLA B2 7有密切的相关性 ,在这些患者中进行HLA B2 7分型对评价葡萄膜炎的病因和预后有一定的价值。