强直性脊椎炎与HLA-B27等位基因研究

为探索强直性脊椎炎与ＨＬＡ－Ｂ２７关联机理，建立非同位素地高辛标记的ＰＣＲ／ＳＳＯ方法对中国上海地区６８例ＨＬＡ－Ｂ２７阳性的强直性脊椎炎病人和７例ＨＬＡ－Ｂ２７阳性正常对照进行了ＨＬＡ－Ｂ２７等位基因的检测，结果显示在病人和正常对照组中Ｂ＊２７０４都是最常见的等位基因，各占７６．８％和７１．４％，Ｂ＊２７０５亦是常见的等位基因，分别占２０．３％和２８．６％，两组间比较差异无显著性；在病人组还检出Ｂ＊２７０６和Ｂ＊２７０７各１例，提示此两等位基因可能也与ＡＳ关联。此结果为研究强直性脊椎炎与ＨＬＡ－Ｂ２７关联的机制提供了有用的资料。

中国北方汉族人群中HLA-B27基因多态性与强直性脊柱炎的关联研究

目的首次通过大宗病例对照研究来探讨HLA-B27基因多态性在中国北方汉族强直性脊柱炎(AS)患者以及健康对照人群中的分布情况并研究B27多态性与AS的关联性。方法选用602例北方汉族AS病例和694例健康无关对照进行病例对照研究。HLA-B27基因多态性分析采用序列特异引物介导的PCR反应(PCR-SSP)方法。关联性分析采用卡方检验。结果在AS患者及健康对照中分别有82.4%和7.5%的个体为B27阳性。关联分析证实B27与AS之间存在强相关性(OR=58,p=6.5×10-163)。本研究共发现5种B27基因多态性,B*2705、B*2704、B*2702、B*2707和B*2724,其中B*2704、B*2705和B*2702都与AS有强相关性,而B*2704的相关性最强(P=1.4×10-68),但是B*2705诱发AS的危险度却高于B*2704;B*2707和B*2724与AS则没有相关性。另外,北方汉族与上海、广东、台湾地区AS患者中B27基因多态性的分布有较大差异(其中B*2705差异最显著,P=6.28×10-52);而且4个地区人群中不同B27基因多态性诱发AS的风险度也有明显不同。结论本研究证实B27与AS之间存在高度相关性,并首次发现B*2704虽与北方汉族人群AS发病最为相关,但其诱发AS的相对危险度却低于B*2705。B27基因多态性在AS患者中的分布是存在地域差异的,这一现象提示不同地区汉族人群的AS在遗传学发病机制上是有其独特性的。

强直性脊柱炎早发髋关节强直与HLA-B27基因亚型的易感性研究

背景:前期临床研究中发现,人类白细胞抗原B27阳性与强直性脊柱炎早发髋关节强直具有强相关性。目的:分析强直性脊柱炎早发髋关节强直与人类白细胞抗原B27基因亚型的易感性,探讨人类白细胞抗原B27基因亚型在强直性脊柱炎早发髋关节强直发病中的作用。方法:收集具有完整病历资料的强直性脊柱炎早发髋关节强直患者300例,强直性脊柱炎非早发髋关节强直患者300例。研究经过广西壮族自治区人民医院伦理委员会审议通过,所有受试者及监护人均签署知情同意。采用病例-对照研究方案,其中强直性脊柱炎早发髋关节强直组,在其开始发病5年内,均有放射学检查(髋关节MRI、CT,骨盆X射线正侧位片)证实髋关节发生强直。收集2组患者一般情况和临床表现,采集患者2mL静脉血,通过PCR-SSP高分辨技术进行29种人类白细胞抗原B27基因亚型检测,计算人类白细胞抗原B27各基因亚型的构成比,分析相对危险度。结果与结论:①2组患者人类白细胞抗原B27检测的总阳性率为93.67%(562例):强直性脊柱炎早发髋关节强直组99.33%,强直性脊柱炎非早发髋关节强直组88.59%;②共找到29种人类白细胞抗原B27亚型中的6种,分别是B*2702、B*2703、B*2704、B*2705、B*2706及B*2713;2组均以B*2704及B*2705亚型为主,组间比较,B*2704亚型在强直性脊柱炎非早发髋关节强直组所占比例最高(P<0.01),强直性脊柱炎早发髋关节强直组B*2705亚型所占比例最高(P<0.01);③B*2705亚型与强直性脊柱炎早发髋关节强直发病危险度相关(OR=1.896,95%可信区为1.221-3.218);④结果表明,强直性脊柱炎患者以B*2704和B*2705为主要亚型,其中B*2705亚型是导致强直性脊柱炎患者早发髋关节强直的易感基因。B*2705亚型可作为强直性脊柱炎早发髋关节强直早期诊断的重要参考指标。

HLA-B27与强直性脊柱炎的相关性研究

目的探讨应用流式细胞术检测人类白细胞抗原B27（HLA-B27）在临床上对强直性脊柱炎（AS）的诊断价值。方法应用流式细胞术,选择来本院就诊的门诊、住院的AS患者（AS组）561例及健康体检者（健康对照组）1 000例,进行HLA-B27检测。结果两组间HLA-B27阳性率比较：AS组为88.95%,健康对照组为6.90%,两组比较差异有显著性（P〈0.01）。两组不同性别间HLA-B27检测阳性率比较：临床确诊的AS组561名患者中,HLA-B27表达阳性患者499名（88.95%）,其中男性364名（64.88%）,女性135名（24.07%）,AS组男女比例约为2.7∶1,阳性率差异有显著性（P〈0.01）;健康对照组1 000例中HLA-B27表达阳性患者69名（6.9%）,其中男性39名（3.9%）,女性30名（3.0%）,健康对照组男女比例约为1.3∶1,阳性率差异无显著性（P〉0.05）。两组不同年龄段间HLA-B27检测阳性率比较：临床确诊的AS组561名患者,HLA-B27表达阳性患者中21~40年龄段298名（52.46%）,21~40年龄段阳性率差异有显著性（P〈0.01）,其他年龄段的阳性率无显著性差异（P〉0.05）;健康体检组HLA-B27表达阳性患者各年龄段的阳性率无显著性差异（P〉0.05）。结论 HLA-B27与AS具有高度相关性,检测HLA-B27有助于早期发现AS患者,以实现早期诊断,早期治疗。

HLA-B27亚型及其与强直性脊柱炎关系的研究进展

强直性脊柱炎 (AS)是与HLA关联最强的疾病。HLA B2 7由 2 2个以上同种异型基因型 (亚型 :B※2 70 1～B※2 2 )组成 ,不同亚型核苷酸序列之间只存在个别位点的差异 ,其亚型具有分布不同的种族和人种流行情况 ,以B※2 70 5分布最广。近年来建立了大量的AS动物模型 ,人类B2 7转基因鼠实验证实B2 7分子是AS的原发关联成分 ,这种带有B2 7等位基因的实验动物可发生类似人类AS疾病。目前倾向于以关节源性肽假说来解释HLA B2

流式细胞术与PCR-SSP法检测HLA-B27的比对及HLA-B27亚型的研究

目的探讨流式细胞术(FCM)与序列特异性引物聚合酶链式反应(PCR-SSP)在人类白细胞表面抗原-B27(HLA-B27)检测中的应用,并观察HLA-B27亚型在本地区的分布情况。方法采用PCR-SSP和FCM检测88例疑似强直性脊柱炎(AS)患者HLA-B27。结果 88例AS疑似患者中FCM法检测HLA-B27结果阳性82例,阴性6例,阳性率为93.2%;PCR-SSP法检测阳性83例、阴性5例、阳性率为94.3%。分型结果 B*2705型41例占49.4%;B*2704型37例占44.5%;B*2702型1例占1.2%;阳性但未分辨型别4例。结论 Kappa一致性系数K=0.905,PCR-SSP法与FCM检测HLA-B27结果具有较高的一致性。本地区易感HLA-B27等位基因亚型主要以HLA-B*2704和HLA-B*2705为主。

山东地区强直性脊柱炎患者HLA-B27基因高分辨分型结果分析

目的研究山东省强直性脊柱炎(AS)与亚型水平的HLA-B27等位基因的相关性。方法应用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术进行山东省AS患者HLA-B27基因高分辨分型。结果30例AS患者HLA-B27高分辨分型均为B*2704或B*2705,其中B*2704阳性11例,B*2705阳性19例,构成比分别是36.67%、63.33%。结论不同地区、不同人群的AS患者,HLA-B27各亚型分布频率存在差异性;山东地区AS患者HLA-B27等位基因以B*2704和B*2705为主,且B*2705最多见。

HLA-B27与强直性脊柱炎免疫学机制的研究进展

强直性脊柱炎是与HLA-B27有明确相关性的自身免疫性疾病,其发病过程包括了微生物和宿主的相互作用、免疫细胞对MHC-Ⅰ类分子的识别以及细胞因子网络的失平衡等方面。未折叠蛋白应答反应参与了强直性脊柱炎发病过程,并且下游IL-23/IL-17轴的激活可能在发病过程中起重要作用。未折叠蛋白反应和IL-23/IL-17轴是研究强直性脊柱炎发病机制和防治措施的新靶点。

相对定量检测HLA-B27 mRNA表达水平的方法建立

目的建立检测HLA-B27 mRNA表达水平的相对定量的方法。方法筛选未经治疗的AS患者外周静脉血27例,其中HLA-B27阳性患者22例,HLA B27阴性患者5例,对标本进行Total RNA提取,然后用RT-PCR方法进行HLA-B27反转录及相对定量。结果22例HLA-B27阳性AS患者有着相对较高的HLA-B27 mRNA表达水平,最低值为1.16,最高值为37.01,均值为7.77。5例HLA-B27阴性AS患者均值为1.19,接近于HLA-B27阴性健康对照组。结论检测外周静脉血HLA-B27mRNA表达水平对检测AS是一种有效可行的方法。

强直性脊柱炎867例HLA-B27的表达及意义

目的:通过检测临床疑为强直性脊柱炎(AS)患者的HLA-B27表达,探讨HLA-B27抗原的检测在AS早期诊断中的意义。方法:采用流式细胞术对1807例疑为AS患者外周血进行HLA-B27表达的检测。结果:在867例诊断为AS的患者中,HLA-B27阳性758例,HLA-B27检测AS的敏感性为87.4%(758/867),特异性为91.9%(864/940),诊断正确率为89.8%。结论:AS与HLA-B27阳性高度相关,临床疑为AS的患者若加上流式HLA-B27抗原检测结果将对AS的早期诊断起到重要作用。

强直性脊柱炎与HLA-B27的表达及T淋巴细胞亚群和细胞因子相关性分析

目的探讨强直性脊柱炎(AS)与HLA-B27、T淋巴细胞亚群及部分细胞因子之间的相关性,为AS的诊断、治疗及预后提供帮助。方法收集131例AS患者及50例健康人(健康对照组)外周血标本,采用流式细胞术检测外周血中T淋巴细胞亚群及HLA-B27的表达情况,固相夹心法化学发光免疫量度法对血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等细胞因子进行定量检测。结果 AS患者与健康对照组比较,CD3+CD4-CD8+T(T8细胞)、IL-8、TNF-α升高,差异有统计学意义(P<0.05),CD3+T(总T细胞)、CD3+CD4+CD8-T(T4细胞)、T4/T8、IL-1β、IL-6差异无统计学意义(P>0.05)。HLA-B27阳性AS患者和HLA-B27阴性AS患者比较,T淋巴细胞亚群和上述细胞因子间均无显著差异(P>0.05)。AS患者HLA-B27不同荧光强度组别间上述各指标均无显著差异(P>0.05)。结论 HLA-B27、T淋巴细胞亚群和细胞因子IL-8、TNF-α的检测有助于提高AS诊断敏感性,对判断AS病情的发展转归有一定价值,HLA-B27的荧光表达强弱可能不反映AS病情进展情况。

龙胆泻肝胶囊对HLA-B_(27)相关性急性前葡萄膜炎患者血清相关细胞因子水平的影响

目的观察龙胆泻肝胶囊对HLA-B27相关性急性前葡萄膜炎(AAU)患者治疗前后外周血中IL-10、IL-23、TNF-α、INF-γ等细胞因子水平的变化,探讨其可能的作用机制。方法 68例AAU患者随机分为龙胆泻肝胶囊加激素治疗组(治疗组)36例42眼及单纯激素治疗组(对照组)32例37眼,并与19例健康人群对比。对患者进行HLA-B27及外周血血浆上述4种因子水平检测。结果治疗组及对照组IFN-γ、TNF-α、IL-23在AAU发作期显著高于健康人群(P<0.01),且治疗后均显著降低(P<0.01);其中TNF-α、IL-23治疗后治疗组水平下调接近健康人群(P>0.05),但对照组仍高于健康人群(P1<0.05,P2<0.01);IFN-γ在治疗后两组均高于健康人群(P<0.05)。IL-10在治疗前均显著高于健康人群(P<0.01),治疗后对照组较治疗前升高(P<0.05),而治疗组呈一定程度下降(P<0.05),基本接近健康人群(P=0.10)。IL-10测定结果与其他3者基本一致,相关系数均达0.8以上。结论糖皮质激素结合龙胆泻肝胶囊能显著调节HLA-B27相关性急性前葡萄膜炎患者的相关血清细胞因子水平,改善患者体内的免疫失衡状态,是其可能的作用机制之一。

HLA-B27基因亚型与汉族人群强直性脊柱炎遗传易感性的研究

目的探讨汉族人群人类白细胞抗原B27(HLA‐B27)基因亚型在强直性脊柱炎(AS)的表达及亚型分析,评价其检测在临床上的应用价值。方法选取2016年1~12月南昌大学第二附属医院门诊及住院AS患者74例,其中,类风湿关节炎(RA)65例,腰椎盘间盘突出(LIDH)51例,脊柱结核(ST)50例,骨关节炎(OA)53例。选取40例作为健康对照,应用BDFACSCalibur流式细胞仪检测细胞HLA-B27抗原;聚合酶链反应-直接测序分型(PCR-SBT)技术对HLA-B27基因亚型进行分型。结果AS患者HLA-B27阳性率高于RA、LIDH和ST疾病及健康对照组(P<0.007);30~<40岁年龄组男性人群HLA-B27阳性率高于女性人群(P<0.05);AS患者HLA-B27基因亚型以B2704为主。结论南昌汉族人群中AS患者HLA-B27基因亚型以B2704、B2705为主,且B2704是AS的发病易感基因亚型。

外周血淋巴细胞HLA-B27表达强度与强直性脊柱炎临床分期的关系

目的了解强直性脊柱炎(AS)不同临床分期患者外周血淋巴细胞人类白细胞抗原B27(HLA-B27)表达量与疾病临床分期之间的关系。方法采用三色流式细胞学检测技术分析88例不同阶段AS患者及132例健康人的外周血淋巴细胞HLA-B27表达率及表达强度(MNX)。结果 AS进展期患者外周血淋巴细胞HLA-B27表达率的中位数、P25、P75分别是95.34%、86.60%、97.39%,MNX的中位数、P25、P75分别为8.70、5.20、10.80;强直期患者外周血淋巴细胞HLA-B27表达率的中位数、P25、P75分别是94.51%、90.40%、97.83%,MNX的中位数、P25、P75分别为8.40、6.05、15.95。健康对照组的外周血淋巴细胞HLA-B27表达率的中位数、P25、P75分别是3.69%、1.03%、11.13%,MNX的中位数、P25、P75分别为1.50、1.30、1.90。Mann-Whitney U检验显示,AS患者进展期与强直期的外周血淋巴细胞HLA-B27表达率及MNX均差异无统计学意义(P>0.05);进展期、强直期与健康对照组的外周血淋巴细胞HLA-B27表达率及MNX均差异有统计学意义(P<0.05)。结论外周血淋巴细胞HLA-B27的表达率及MNX适合于AS诊断,对AS病情判断无辅助意义。

MRI与HLA-B_(27)诊断强直性脊柱炎骶髂关节病变的联合应用

目的探讨MRI与HLA-B27联合对诊断强直性脊柱炎(AS)骶髂关节(SIJ)病变的临床应用价值。方法回顾性分析48例经临床确诊的AS的MRI和HLA-B27检测资料,并比较MRI与MRI联合HLA-B27对ASSIJ病变诊断的阳性率。结果 48例AS病例中,MRI检查诊断AS的阳性率为79.2%;HLA-B27检测阳性率为89.6%;MRI联合HLA-B27检测阳性为91.7%;MRI联合HLA-B27诊断AS的阳性率高于单纯MRI检查组,其差异有统计学意义(X2=11.759,P<0.01)。结论 MRI与HLA-B27联合可提高AS诊断的阳性率,有利于AS的早期发现、及时治疗。

四川地区汉族强直性脊柱炎患者HLA-B27抗原阳性频率和表达强度的联合观察

目的 通过检测674例强直性脊柱炎（AS）患者HLA-B27抗原阳性频率和表达强度，了解四川地区AS与HLA-B27抗原的相关性，并初步探讨其临床意义。方法 采用流式细胞术检测AS患者T淋巴细胞膜上的HLA-B27抗原和其平均荧光强度（mean fluorescence intensity，MH）。研究样本来源于两家医院临床诊断为AS的患者。结果 ①674例AS患者以16～50岁青壮年为主，占91．1％；男女比例为3．0：1；男女患者就诊年龄分别为（30．4±10．7）岁和（35．4±12．1）岁（P〈0．01）；②674例AS患者的HLA-B27抗原阳性率97．9％；男女患者HLA．B27抗原阳性率分别为98．4％和96．5％（P〉0．05）；男女阳性患者的MFI有明显差异（P〈0．01）；③骶髂关节炎在I级和Ⅱ级以上的患者HLA-B27抗原阳性率和荧光强度明显高于O级者（P〈0．01）；④幼年AS患者男女比例为6．7：1（20：3）；HLA-B27抗原阳性率100％；其HLA-B27抗原MFI明显低于成年AS患者（P〈0．01）。结论 四川地区AS患者与HLA．B27抗原有着很强的相关性。采用流式细胞技术检测临床疑似AS患者T淋巴细胞HLA-B27表达强度有助于诊断和鉴别诊断AS，也有利于临床对病情严重程度和进展的判断。

强直性脊柱炎患者HLA-B27、CRP和ESR的水平及相关性分析

目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者HLA-B27、CRP和ESR的水平及相关性。方法检测对54例AS患者和48例健康对照者人类白细胞抗原B27(Human leucocyte antigen B27,HLA-B27)血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)的水平,比较HLA-B27、CRP和ESR在AS的阳性率,探讨三者对AS诊断的相关性。结果 HLA-B27、CRP和ESR在AS患者阳性率分别为90.7%、85.1%、72.2%;AS患者和健康对照组HLA-B27、CRP和ESR的水平存在显著性差异,AS患者HLA-B27与CRP和ESR以及CRP和ESR水平呈正相关(r=0.666;r=0.628;r=0.528,P均<0.05)。结论 HLA-B27是对AS诊断有较高灵敏度实验室诊断指标;CRP和ESR尽管不是AS的特异性诊断指标,但对AS的辅助诊断也具有重要价值,三者同时检测提高AS阳性率,有利于AS辅助诊断。

HLA-B27抗原与前葡萄膜炎的相关性及其临床意义

目的 探讨HLA B2 7抗原与前葡萄膜炎的相关性及可能的意义。方法 用多聚酶链反应 (PCR)和微量淋巴细胞毒试验对 2 0例伴有关节强直性脊椎炎 (AS)的急性前葡萄膜炎 (AAU)、67例AAU、70例慢性前葡萄膜炎和 70 8个健康人进行HLA B2 7分型。结果 AS伴有AAU和单纯的AAU患者中HLA B2 7阳性率分别为 70 %和 49 2 5 % ,显著高于对照组 ( 2 97% ,P <0 0 0 1) ,慢性前葡萄膜炎患者中HLA B2 7的阳性率 ( 4 2 8% )与对照组无显著差别。结论 AAU与HLA B2 7有密切的相关性 ,在这些患者中进行HLA B2 7分型对评价葡萄膜炎的病因和预后有一定的价值。

流式细胞术检测98例献血者外周血HLA-B27的临床意义

目的 通过对 98例献血者外周血HLA B2 7的检测 ,建立并优化测定HLA B2 7的流式细胞术 ,并评价B2 7在早期辅助临床诊断以强直性脊柱炎为代表的脊柱关节病中的应用价值。方法 分别采用EDTA和肝素钠两种不同的抗凝剂 ,以及加单抗不同的量 ( 7～ 3 0 μl)检测 2个B2 7阳性和 9个B2 7阴性个体的全血 ,采用EDTA抗凝和 15 μl的单抗剂量检测献血者外周血 ,探寻流式细胞术检测HLA B2 7的最佳实验条件 ;另以微量淋巴细胞毒实验分别对 2例阳性标本和 9例阴性标本进行验证。结果 通过微量淋巴细胞毒和流式细胞术两种方法检测 98例献血者外周血HLA B2 7中 2例为阳性 ,96例为阴性 ,且EDTA和肝素钠两种不同的抗凝剂 ,以及加单抗不同的量 ( 7～ 3 0 μl)对流式细胞术检测HLA B2 7无任何影响。结论 优化并建立了一种简便省时、稳定性和重复性皆好的流式细胞仪用于检测HLA B2 7的方法 ;HLA B2 7与强直性脊柱炎高度相关 ,HLA B2 7检测已成为临床支持以强直性脊柱炎为首的脊柱关节病的诊断与鉴别诊断的重要依据 ,具有重要的临床意义。

湖南地区强直性脊柱炎与HLA-B27关联性的观察

目的 探讨湖南地区 HL A- B2 7对强直性脊柱炎的诊断意义。 方法 对临床疑为强直性脊柱炎的患者静脉血采用玻璃珠抗凝分离淋巴细胞并用标准的 Terasaki软滴法作微量淋巴细胞毒试验。结果疑为强直性脊柱炎患者 6 47例 ,其中男性 481例 ,女性 16 6例 ,男女比例为 3:1。 B2 7阳性率为 5 6 .5 7% ,其中男性占 6 7.15 % ,女性占 2 5 .90 %。发病年龄主要集中在青少年时期。 结论 HL A- B2 7血清学检测对强直性脊柱炎的诊断和鉴别诊断具有重要意义。