MicroRNA-129通过靶向调控HMGA2抑制胃癌细胞增殖、侵袭

背景:越来越多的研究表明microRNA在胃癌发生、发展中起重要作用。有研究表明miR-129在胃癌组织中表达异常,但其对胃癌细胞增殖、侵袭的作用仍不明确。目的:探讨miR-129在胃癌组织和胃癌细胞株中的表达及其影响胃癌细胞增殖和侵袭的机制。方法:收集82例胃癌组织及其相应癌旁组织,培养人胃黏膜上皮细胞株和不同的胃癌细胞株,以q PCR法检测miR-129表达。将miR-129 mimic或miR-NC转染胃癌SGC-7901细胞后,转染HMGA2过表达质粒。以克隆形成实验观察细胞增殖情况,Transwell小室法检测细胞侵袭情况,Pearson相关分析评估miR-129表达与HMGA2表达的相关性,荧光素酶实验检测荧光素酶活性,q PCR和蛋白质印迹法分别检测miR-129、HMGA2 mRNA和蛋白表达。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中miR-129表达明显下降(P<0.05);与人胃黏膜上皮细胞株GES-1相比,各胃癌细胞株中miR-129表达明显下降(P<0.05)。与miR-NC组相比,miR-129 mimic组SGC-7901细胞增殖、侵袭能力均明显下降(P<0.05)。胃癌组织中HMGA2 mRNA表达明显增加(P<0.05),并与miR-129表达呈负相关(r=-0.543 9,P<0.01)。野生型miR-129 mimic组荧光素酶活性显著低于miR-NC组(P<0.05);转染miR-129 mimic后HMGA2 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05)。与miR-129+阴性对照组相比,miR-129 mimic+HMGA2组细胞增殖、侵袭能力明显升高(P<0.05)。结论:miR-129在胃癌组织和细胞中低表达,其可通过下调HMGA2抑制SGC-7901细胞的增殖和侵袭。

HMGA2与胃癌上皮细胞间质转化的相关性及临床意义

探讨HMGA2、E-cadherin及N-cadherin在胃癌组织中差异性表达的临床意义及其与上皮细胞间质转化的关系.应用RT-PCR方法检测20例胃癌组织及对应的正常胃粘膜组织HMGA2 mRNA的表达,应用免疫组织化学法检测71例胃癌组织及癌旁组织中HMGA2、E-cadherin及N-cadherin的表达情况,与临床资料做统计学分析.HMGA2 mRNA在胃癌组织和癌旁组织中的表达存在显著性差异(P<0.01),在胃癌组织中HMGA2、E-cadherin及N-cadherin的阳性表达率分别为64.7%、29.6%和43.7%,HMGA2和E-cadherin的表达成负相关(P<0.05),和N-cadherin的表达成正相关(P<0.05),HMGA2表达和胃癌患者淋巴结转移及临床分期有显著相关性(P<0.05).HMGA2高表达的胃癌组织中有明显的上皮细胞间质转化表型,其表达与胃癌侵润转移有一定的相关性.

PARP-1与HMGA2在乳腺癌分子分型中的表达及临床意义

【目的】通过免疫组化法实验观察PARP‐1和 HMGA2在乳腺癌不同分子分型中的表达，探讨其在乳腺癌中表达的意义及其与临床特点的相关性。【方法】采用免疫组化法检测240例乳腺癌术后肿瘤标本和60例乳腺良性肿瘤组织中PARP‐1与 HMGA2蛋白的表达情况。分析 PARP‐1和 HMGA2在不同分子类型乳腺癌组织中的表达差异；分析两者在不同分子类型表达的相关性及其与原发肿瘤直径、腋窝淋巴结转移等病理特征相关性。【结果】在乳腺癌中 PARP‐1阳性表达率为65．4％显著高于癌旁组织中的22．4％；HMGA2阳性表达率为58．8％高于癌旁组织中的36．4％，PARP‐1及 HMGA2在乳腺癌各分子分型中的阳性表达与腋窝淋巴结转移情况具有相关性（ P ＜0．05），HMGA2的阳性表达在luminal A型及luminal B型中与原发肿瘤大小存在相关性（ P ＜0．05），而在 H ER‐2过表达型及三阴性乳腺癌中不存在相关性（ P ＞0．05）。【结论】PARP‐1与HMGA2在乳腺癌的浸润、转移过程中相互作用，是反映乳腺癌进展的生物学指标。PARP‐1与HMGA2高表达的患者易发生淋巴结转移，预后不良。

胃癌中HMGA2与HDAC6表达的临床意义及其相关性

目的检测胃癌中高迁移率族蛋白2(HMGA2)和组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)在胃癌中的表达情况及相关关系,分析其与临床病理特征的关系。方法分别用免疫组织化学法、Western blot和real-time PCR检测82例配对人胃癌、癌旁及正常组织中HMGA2和HDAC6的蛋白及mRNA表达,并分析其与临床病理参数的关系及两者表达的相关性。结果胃癌组织中HMGA2和HDAC6蛋白阳性表达率分别为69.51%(57/82)和65.85%(54/82),明显高于癌旁组织14.63%(12/82)、12.20%(10/82)和正常组织9.76%(8/82)、7.32%(6/82)(P<0.05);胃癌组织HMGA2、HDAC6蛋白和mRNA表达较癌旁组织及正常组织高(P<0.05),且两者表达水平与肿瘤的临床分期和淋巴结转移相关(P<0.05);HMGA2和HDAC6在胃癌组织中的表达呈明显正相关(r=0.56,P<0.05)。结论 HMGA2和HDAC6基因在胃癌组织中存在高表达且共存现象,可能与胃癌恶性程度有关。

HMGA2在胃癌细胞上皮-间充质转化中的作用

目的:探讨HMGA2在胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)中的作用及机制。方法:采用Western blot和RT-qPCR实验检测不同分化程度的人胃癌细胞株MKN45、MKN28和SGC7901以及人永生化胃黏膜上皮细胞株GES-1中HMGA2的表达水平;采用脂质体转染法将pcDNA3.0-HMGA2质粒转染至MKN28细胞中,将si-HMGA2干扰片段转染至MKN45细胞中,并采用Western blot和RT-qPCR实验检测转染效率;CCK-8实验检测HMGA2上调对MKN28细胞活力的影响以及HMGA2下调对MKN45细胞活力的影响;采用细胞迁移和侵袭实验检测HMGA2上调对MKN28细胞迁移和侵袭能力的影响;采用Western blot和RT-qPCR实验检测HMGA2过表达对MKN28细胞EMT相关标志蛋白上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达的影响以及敲减HMGA2表达对MKN45细胞E-cadherin、N-cadherin和vimentin表达的影响;采用RT-qPCR实验检测过表达HMGA2的MKN28细胞Wnt/β-catenin信号通路相关分子表达的变化。结果:HMGA2在不同分化程度的胃癌细胞中的表达水平是不同的(P<0.05)。上调MKN28细胞HMGA2的表达水平能够抑制细胞活力(P<0.05);而在MKN45细胞中下调HMGA2的表达水平能够增强细胞活力(P<0.05)。上调MKN28细胞HMGA2的表达水平能够促进细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05),且E-cadherin表达降低,N-cadherin和vimentin表达升高(P<0.05);敲减HMGA2在MKN45细胞的表达水平使E-cadherin表达升高,而N-cadherin和vimentin表达降低(P<0.05)。上调MKN28细胞中HMGA2的表达水平,细胞内Wnt/β-catenin通路的β-catenin及其下游分子c-Myc和cyclin D1的mRNA表达水平显著增加(P<0.05)。结论:HMGA2与胃癌细胞迁移和侵袭能力密切相关,并且能够通过激活细胞内Wnt/β-catenin通路,促进胃癌细胞EMT。

HMGA2、Smad4在胃腺癌组织中的表达及其与上皮间质转化的相关性

目的探讨高迁移率蛋白A2（HMGA2）和Smad4在胃腺癌组织中差异性表达的临床意义及其与上皮间质转化的关系。方法通过免疫组织化学方法分别检测80例胃腺癌癌组织和20例胃阴性切端中HMGA2、Smad4、E—cadherin和vimentin的蛋白表达水平，并对其与病理分级和临床分期之间的相关性作统计学分析。结果HMGA2和vimentin在胃腺癌中的蛋白阳性表达率分别为41．25％（55／80）和67．5％（54／80），表达水平分别高于胃阴性切端组织（P〈0．05）。Smad4和E—cad在胃腺癌中的阳性表达率分别为17．5％（14／80）和26．25％（21／80），表达水平分别低于胃阴性切端组织（P〈0．05）；HM—GA2与vimentin呈正相关（P〈0．05），与Smad4、E—cadherin呈负相关（P〈0．05）。HMGA2与胃腺癌患者的分化程度、TNM分期和淋巴结转移有显著的相关性，Smad4与胃腺癌患者的浸润深度、TNM分期和淋巴结转移有显著的相关性。结论HMGA2、vimentin的表达上调和E—cadherin、Smad4的表达下调可以促进上皮间质转化（EMT），与胃腺癌的发生、发展和转移密切相关，HMGA2和Smad4可能作为胃癌诊断和预后的生物学标记。

糖尿病肾病患者血清HMGA2蛋白表达及其与肾功能下降迅速的关系

目的探讨糖尿病肾病(DN)患者血清高迁移率族蛋白A2(HMGA2)的表达及其与肾功能下降的关系。方法选取经肾脏穿刺活检确诊的DN患者159例,根据肾功能下降的情况将患者分为肾功能下降迅速组(61例)和非肾功能下降迅速组(98例)。比较2组实验室检查结果及血清HMGA2蛋白的表达水平,分析其与临床病理资料的相关性,Logistic回归分析探讨DN患者肾功能下降迅速的危险因素。受试者工作特征(ROC)曲线评价血清HMGA2水平对DN患者肾功能下降迅速的评估价值。结果肾功能下降迅速组收缩压、血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量、血尿酸、HMGA2水平、肾间质小管及血管评分高于非肾功能下降迅速组,估算肾小球滤过率(eGFR)、血清白蛋白水平低于非肾功能下降迅速组(均P<0.05)。DN患者的血清HMGA2水平与血肌酐(r=0.464)、尿素氮(r=0.323)、24 h尿蛋白(r=0.261)、肾间质小管及血管评分(r=0.497)呈正相关(P<0.05),与eGFR(r=-0.344)、血红蛋白(r=-0.199)呈负相关(P<0.05)。高龄、高水平的基线血肌酐、24 h尿蛋白定量、HMGA2以及低水平的基线eGFR和血清白蛋白是DN患者肾功能下降的独立危险因素。HMGA2对DN患者肾功能下降有一定评估价值,ROC曲线下面积为0.760(95%CI:0.663~0.872),最佳临界值为1.5μg/L,敏感度为0.772,特异度为0.745。结论DN肾功能下降迅速的患者血清HMGA2表达水平升高,且与患者基线肾功能以及肾小管间质和血管病变程度密切相关。

HMGA2、Twist在胃腺癌中的表达及其与EMT的关系

目的探讨胃腺癌中HMGA2、Twist的表达及其与上皮间质转化相关因子E—cadherin和Vimentin的关系。方法应用免疫组织化学方法检测80例胃腺癌标本以及20例正常胃组织中HMGA2、Twist、E—cadherin和Vimentin的表达，分析其与临床病理资料之间的关系。结果80例胃腺癌组织中，HMGA2、Twist、E—cadherin和Vimentin表达的阳性率分别为65％、68．75％、26．25％和67．5％，HMGA2和Twist的表达呈正相关（P〈0．05），HMGA2与Twist的表达均与淋巴结转移及肿瘤临床分期有统计学意义（P〈0．05），而且HMGA2和Twist的表达均与E—cadherin低表达（P〈0．05）和Vimentin高表达（P〈0．05）存在相关性。结论HMGA2与Twist在胃腺癌组织中的高表达与EMT的发生密切相关，通过促进胃腺癌组织上皮表型向间质表型转化进而促进侵袭转移。

lncRNA ZFAS1通过miR-588/HMGA2轴促进肝癌HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移

目的:探讨长链非编码RNA锌指结构反义转录本1(lncRNA ZFAS1)调控miR-588/高迁移率蛋白A2(HMGA2)轴对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法:qPCR、WB法检测80例肝癌组织及对应癌旁组织(2018年1月至2019年12月在武汉第三医院首义院区手术切除标本)及人正常肝LO2细胞和肝癌HepG2、Huh7、HCCLM3细胞中ZFAS1、miR-588及HMGA2表达水平;采用Kaplan-Meier进行患者生存曲线分析。将HepG2细胞分为空白组、si-NC组、si-ZFAS1组、si-ZFAS1+inhibitor NC组、si-ZFAS1+miR-588 inhibitor组;qPCR检测各组HepG2细胞中ZFAS1、miR-588表达水平,WB法检测各组HepG2细胞中HMGA2蛋白表达;CCK-8法、Transwell和划痕实验分别检测各组HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移能力;双荧光素酶报告基因实验分别验证ZFAS1和miR-588、miR-588和HMGA2的靶向关系。用HepG2细胞移植瘤裸鼠模型检测敲减ZFAS1或/和miR-588对移植瘤生长的影响。结果:在肝癌组织和肝癌细胞中,ZFAS1、HMGA2呈高表达,miR-588呈低表达(均P<0.05);ZFAS1低表达患者2年生存率高于高表达组(P<0.05);与空白组比较,si-ZFAS1组ZFAS1、HMGA2表达水平显著降低,miR-588表达水平显著升高(均P<0.05)。与si-ZFAS1组比较,si-ZFAS1+miR-588 inhibitor组中ZFAS1表达水平无显著变化(P>0.05),HMGA2表达水平显著升高、miR-588表达水平显著降低(P<0.05);敲减ZFAS1可抑制HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并抑制裸鼠体内移植瘤的生长(均P<0.05);ZFAS1靶向miR-588并抑制后者的表达,miR-588靶向HMGA2并抑制后者的表达;同时抑制ZFAS1和miR-588表达可逆转敲减ZFAS1对HepG2细胞增殖、侵袭与迁移能力及体内移植瘤生长的抑制作用(均P<0.05)。结论:敲减ZFAS1可通过促进miR-588表达来下调HMGA2表达,进而抑制肝癌HepG2细胞的增殖、侵袭与迁移能力。

阿帕替尼通过抑制HMGA2增强顺铂对胃癌的抗瘤作用

目的:探讨阿帕替尼(apatinib,APA)联合顺铂(cisplatin,DDP)对胃癌(gastric carcinoma,GC)细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响及其分子机制。方法:收集2016年1月到2019年6月武威市人民医院手术切除的50例GC患者的癌及癌旁组织标本,以及GC细胞系MGC803和SGC7901,用qPCR检测组织中HMGA2和细胞中增殖、迁移及侵袭相关mRNA的表达水平。采用脂质体转染技术,将pcHMGA2转染MGC803和SGC7901细胞,经分别用不同浓度的DDP和APA处理,分为NC、pcHMGA2、pcHMGA2+DDP及pcHMGA2+DDP+APA组,用Western blotting检测GC细胞中HMGA2蛋白的表达水平,MTT、Transwell小室法分别检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果:HMGA2 mRNA在GC组织中表达水平高于癌旁组织(P<0.05),且高表达组GC患者的生存率显著降低(P<0.01)。DDP显著抑制MGC803和SGC7901细胞的增殖、侵袭和迁移能力(均P<0.01);DDP+APA组MGC803和SGC7901细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著低于DDP组(均P<0.01);APA显著增强DDP对GC细胞HMGA2表达的抑制作用(均P<0.01);APA通过下调HMGA2表达增强DDP对GC的抗肿瘤性。结论:APA能促进DDP对GC的抗瘤作用,其分子机制可能是增强DDP对HMGA2表达的抑制作用有关。

高迁移率蛋白A2在浆液性卵巢癌中高表达及其与let-7家族microRNA的关系

目的:检测高迁移率蛋白A2(high mobility group A2,HMGA2)、let-7家族microRNA和P53在浆液性卵巢癌中的表达,分析HMGA2和let-7家族microRNA的关系,比较HMGA2与P53在浆液性卵巢癌中的表达情况。方法:用免疫组织化学方法检测50例卵巢癌和4例正常输卵管石蜡包埋标本中HMGA2和P53蛋白的表达,采用实时荧光定量逆转录-PCR方法检测对应标本以及卵巢癌细胞系中HMGA2 mRNA和let-7家族microRNA的表达。结果:HMGA2和P53在浆液性卵巢癌中免疫组织化学染色阳性率分别为70%(35/50)和78%(39/50)。HMGA2在输卵管纤毛上皮中有微弱表达,在分泌型上皮细胞中不表达;HMGA2的表达存在随着肿瘤病理分级的增高而增高的趋势,但与肿瘤临床分期没有关系。HMGA2 mRNA在所有卵巢癌标本中均能检测到,但在72%(36/50)的标本中表达量高于正常输卵管组;恶性程度高的细胞系(SKOV3.ipl)比恶性程度低(SKOV3)的细胞系HMGA2 mRNA表达更高。let-7家族各成员在所有浆液性卵巢癌标本中均表达,其表达量与HMGA2 mRNA呈低度负相关(r=-0.305,P<0.05)。结论:HMGA2可能与P53一样,可以作为浆液性卵巢癌的生物标志物,其表达与浆液性卵巢癌恶性程度有关。let-7表达降低是HMGA2在浆液性卵巢癌中高表达的一种、但非唯一机制。

高迁移率蛋白A2基因真核表达载体构建与表达鉴定

目的:构建高迁移率蛋白A2(HMGA2)基因的真核表达载体,观察其在真核细胞中的表达,为进一步研究HMGA2基因功能奠定理论基础。方法:采用RT-PCR方法从人乳腺上皮HBL-100细胞中扩增HMGA2基因全长cDNA,扩增产物经双酶切及凝胶回收后,直接克隆至黄绿色荧光真核表达载体YFP-C1中,构建YFP-C1-HMGA2重组质粒。将YFP-C1-HMGA2真核表达载体转染到人前列腺癌PC3细胞中,通过RT-PCR方法验证所构建的真核表达质粒YFP-C1-HMGA2的正确性。结果:RT-PCR获得长度为351bp的HMGA2全长cDNA,经YFP-C1真核表达载体克隆、酶切鉴定及测序分析,测序结果示基因序列与GenBank序列一致,证实真核表达质粒YFP-C1-HMGA2构建成功,并且能够在真核细胞中表达。结论:成功克隆了HMGA2基因,构建了YFP-C1-HMGA2重组质粒。

高迁移率族蛋白A2与肿瘤

高迁移率族蛋白A2是一种非组蛋白的染色质相关蛋白,通过与染色质结合后改变其构象,从而激活或抑制转录因子的活性来调节某些基因的转录,进而通过不同的机制导致肿瘤的形成。本文对高迁移率蛋白A2在肿瘤中的作用、导致肿瘤形成的机制及其在肿瘤诊断及预后中的作用作一综述。

恶性肿瘤中高迁移率族蛋白A2的功能研究进展

高迁移率族蛋白A2(high mobility group A2,HMGA2)是一种非组蛋白染色体蛋白,本身无转录活性,但是可以通过改变染色质结构来调节其他基因的转录。HMGA2在正常组织中低表达或不表达,而在胚胎期以及恶性肿瘤组织中的表达明显上调。在一些恶性肿瘤中,HMGA2可以作为诊断分子标志物或判断预后的独立因子。此外,HMGA2能够促进上皮-间质转化以及维持干细胞的分化潜能和自我更新能力,在肿瘤的发生、生长和转移等方面可能发挥着重要作用。

BHLHE40靶向HMGA2激活氧化磷酸化通路降低甲状腺癌细胞对顺铂敏感性的研究

目的探究BHLHE40能否通过靶向高迁移率族蛋白A2(HMGA2)激活氧化磷酸化(OXPHOS)通路进而影响甲状腺癌细胞对顺铂的敏感性。方法通过在线数据库TCGA-甲状腺癌和hTFtarget分析HMGA2及上游转录因子BHLHE40在甲状腺癌组织中的mRNA表达情况。采用脂质体转染法将si-HMGA2、oe-HMGA2、oe-BHLHE40以及阴性对照si-NC、oe-NC转染至甲状腺癌细胞K1和SW579中,通过实时荧光定量PCR检测BHLHE40和HMGA2在甲状腺癌细胞SW579、FTC-133、K1和正常甲状腺细胞Nthy ori3-1中的mRNA表达水平,采用MTT法检测细胞活力,CCK-8法计算顺铂半抑制浓度(IC50)值,流式细胞术检测细胞凋亡水平,蛋白质印迹法检测OXPHOS复合体的表达,Seahorse XFe 96分析细胞的耗氧率。双荧光素酶报告实验和染色质免疫沉淀实验分析BHLHE40与HMGA2的结合关系。结果TCGA数据库结果表明,HMGA2和BHLHE40 mRNA在甲状腺癌组织中的表达(10.57±2.58、13.89±1.13)均较甲状腺正常组织高(4.82±1.69、12.28±1.01),差异均具有统计学意义(t=16.69,P<0.001;t=10.43,P<0.001)。实时荧光定量PCR结果发现,正常甲状腺细胞Nthy ori3-1、甲状腺癌细胞SW579、FTC-133和K1中HMGA2 mRNA相对表达量分别为1.00±0.13、2.94±0.23、4.71±0.41和6.29±0.49,BHLHE40 mRNA相对表达量分别为1.00±0.12、2.60±0.23、3.39±0.35和6.18±0.51,差异均具有统计学意义(F=130.50,P<0.001;F=125.20,P<0.001)。进一步两两比较发现,与正常甲状腺细胞相比,甲状腺癌细胞中HMGA2和BHLHE40 mRNA的表达水平均显著升高(均P<0.001)。MTT法检测显示,与si-NC组相比,si-HMGA2处理显著降低了K1细胞的细胞活力(均P<0.05),oe-HMGA2处理相对于oe-NC组显著增加了SW579细胞的细胞活力(均P<0.05);与oe-NC+DMSO组相比,oe-HMGA2+DMSO组SW579细胞的细胞活力增强,而OXPHOS通路抑制剂Gboxin能够逆转过表达HMGA2对细胞活力的影响(均P<0.05)。流式细胞术和CCK-8实验结果显示,与si-NC组(凋亡水平:6.19%±0.28%;顺铂IC50值:17.47μmol/L)相比,敲低HMGA2能增加K1细胞的凋亡水平(11.96%±0.32%;t=19.17,P<0.001)和顺铂敏感性(IC50值:1.49μmol/L);与oe-NC组(凋亡水平:9.98%±0.32%;顺铂IC50值:8.17μmol/L)相比,过表达HMGA2显著降低了SW579细胞凋亡水平(4.32%±0.25%;t=19.65,P<0.001)和顺铂敏感性(IC50值:34.95μmol/L)。双荧光素酶报告实验结果发现,与si-NC组相比,在人肾上皮细胞293T细胞中敲低BHLHE40的表达显著降低野生型HMGA2的荧光素酶活性(0.31±0.02比1.00±0.11;t=10.69,P=0.004),但对于突变型HMGA2的荧光素酶活性没有显著性影响(1.06±0.11比1.00±0.07;t=0.80,P=0.470)。染色质免疫沉淀实验结果显示,与IgG组(1.00±0.10)相比,anti-BHLHE40组K1细胞的HMGA2 mRNA表达水平显著增加(6.57±0.62;t=15.36,P<0.001)。与oe-NC+DMSO组相比,oe-HMGA2+DMSO组SW579细胞凋亡水平(P<0.05)和顺铂敏感性均降低,OXPHOS复合体Ⅰ~Ⅴ表达显著增强,细胞耗氧率升高(均P<0.05),oe-HMGA2+Gboxin处理可逆转过表达HMGA2的影响(均P<0.05)。回复实验表明,与oe-NC+si-NC组相比,过表达BHLHE40后SW579细胞的细胞活力和OXPHOS复合体Ⅰ~Ⅴ的表达增强,细胞耗氧率和顺铂IC50值显著增加,细胞凋亡水平下降(均P<0.05);而同时敲低HMGA2可逆转过表达BHLHE40的影响(均P<0.05)。结论BHLHE40可通过靶向调控HMGA2的表达激活氧化磷酸化通路,进而影响甲状腺癌细胞对顺铂的敏感性。

miR-219a-5p通过负调控HMGA2抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖、侵袭和迁移

目的研究miR-219a-5p通过调控高迁移率蛋白A2(HMGA2)对骨肉瘤U2OS细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法采用实时定量PCR检测骨肉瘤U2OS细胞和正常成骨细胞hFOB1.19的miR-219a-5p mRNA表达水平。采用脂质体转染法将miR-219a-5p模拟物miR-219a-5p mimic(miR-219a-5p mimic组)以及阴性对照mimic NC(mimic NC组)转染U2OS细胞,通过实时定量PCR检测转染后细胞miR-219a-5p和HMGA2 mRNA的表达水平,蛋白质印迹法检测HMGA2蛋白水平,采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力、划痕实验检测细胞迁移能力、Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力,利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-219a-5p与HMGA2间的作用关系。结果实时定量PCR结果显示,骨肉瘤U2OS细胞中的miR-219a-5p表达水平(0.11±0.01)显著低于正常成骨细胞(1.00±0.06),差异具有统计学意义(t=26.83,P<0.001)。CCK-8法结果显示,mimic NC组和miR-219a-5p mimic组培养24 h后细胞吸光度值分别为0.52±0.02、0.42±0.02,48 h后分别为0.85±0.03、0.60±0.03,72 h后分别为1.12±0.02、0.72±0.02,miR-219a-5p mimic组细胞增殖活性显著低于mimic NC组,差异均具有统计学意义(t=6.97,P<0.001;t=16.65,P<0.001;t=26.78,P<0.001)。克隆形成实验结果显示,miR-219a-5p mimic组细胞克隆数为(157.00±15.39)个,明显低于mimic NC组的(294.00±15.51)个,差异具有统计学意义(t=9.70,P<0.001)。划痕实验结果显示,培养24 h后,miR-219a-5p mimic组细胞划痕面积百分比为(40.53±2.92)%,显著高于mimic NC组的(21.71±3.11)%,差异具有统计学意义(t=7.26,P=0.002)。Transwell小室侵袭实验结果显示,miR-219a-5p mimic组细胞的穿膜数量为(128.67±18.67)个,显著少于mimic NC组的(317.67±14.33)个,差异具有统计学意义(t=15.65,P<0.001)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,在含有MUT-HMGA2细胞中,与mimic NC组(4.40±0.28)相比,转染miR-219a-5p mimic(4.30±0.26)对荧光素酶活性无明显影响,差异无统计学意义(t=0.85,P=0.690)。在含有WT-HMGA2细胞中,相比于NC mimic组(4.50±0.25),miR-219a-5p mimic组(2.88±0.16)荧光素酶活性显著降低,差异具有统计学意义(t=19.15,P<0.001)。且过表达miR-219a-5p后,骨肉瘤U2OS细胞中的HMGA2 mRNA和蛋白表达(0.77±0.01;0.37±0.01)相比于mimic NC组(1.00±0.02;1.00±0.01)均下调,差异均具有统计学意义(t=16.38,P<0.001;t=42.02,P<0.001)。结论在骨肉瘤细胞中,miR-219a-5p可通过下调HMGA2的表达抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。

同型半胱氨酸与心脑血管疾病相关性研究进展

心脑血管疾病在世界范围内都是威胁人类健康的主要疾病之一。而动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）是此类疾病重要的病理基础。能导致AS的除了传统危险因素如吸烟、高血压、高脂血症等之外。

哈萨克族食管癌中高迁移率蛋白A2的表达及其与上皮间质转化的相关性．

目的探讨高迁移率蛋白A2（HMGA2）在哈萨克族食管癌中的表达并分析其对上皮间质转化（EMT）的调控作用。方法免疫组织化学SP法检测72例新疆地区哈萨克族食管癌患者癌组织及癌旁组织中HMGA2及EMT相关蛋白Snail、上皮钙黏素的表达，并分析三者与食管癌浸润、转移等临床病理参数的相关性。采用McNemar检验和卡方检验进行率的比较，Spearman法进行相关性分析。结果HMGA2及Snail在72例食管癌患者癌组织中的表达阳性率分别为83．3oA（60／72）、45．8％（33／72），明显高于二者在癌旁组织中的表达（52．8％，38／72，McNemar检验，P〈0．01；29．2％，21／72，McNemar检验，P〈O．05），同时HMGA2与Snail在癌组织中的表达呈正相关（r=0．262，P〈0．05）。上皮钙黏素在癌组织中的表达阳性率为40．3％（29／72），明显低于其在癌旁组织中的表达（72．2％，52／72，McNemar检验，P〈0．01）。Snail的表达与肿瘤浸润深度相关，肿瘤侵犯至食管外膜及周围组织的患者Snail表达率显著高于仅侵犯至黏膜层及肌层的患者（X2=5．308，P〈0．05），上皮钙黏素的表达与患者的年龄及肿瘤分化程度相关，年龄〈58岁（X2=3．952，P〈0．05）、分化程度较高（X2=8．080，P〈0．05）者上皮钙黏素的表达率较高。结论HMGA2、Snail在哈萨克族食管癌患者癌组织中显著高表达，上皮钙黏素呈低表达，提示EMT可能参与了哈萨克族患者食管癌的发生、发展。

子宫内膜浆液性癌患者输卵管伞端组织的病理特征研究

目的 通过研究子宫内膜浆液性癌（ESC）患者输卵管伞端组织的病理特征,初步探讨ESC的发生与输卵管伞端组织病变的关系.方法 收集北京大学人民医院1999年至2013年间收治的所有典型ESC患者共30例（包括Ⅰ期13例,Ⅱ期2例,Ⅲ期15例）,取其石蜡包埋的典型ESC组织、双侧输卵管伞端组织.（1）通过HE染色切片观察ESC患者的输卵管伞端组织的病理特征,分析输卵管伞端上皮内病变特点、程度及其与ESC期别的关系.（2）利用免疫组化法检测ESC患者的内膜癌组织与其输卵管伞端组织中p53、人类表皮生长因子2（HER2/neu）、高迁移率族蛋白A2（HMGA2）、膜联蛋白Ⅳ（ANX-Ⅳ）蛋白的表达,并分析其相关性.结果 （1）30例ESC患者中,15例（50%）合并输卵管伞端上皮的病变,包括输卵管浆液性癌9例（Ⅲa期5例,Ⅲc期4例）,输卵管上皮内癌（STIC）2例（Ⅰa期、Ⅰb期各1例）,输卵管上皮增生2例（Ⅰa期）,输卵管浆液性癌合并STIC 1例（Ⅲa期）,输卵管浆液性癌合并输卵管上皮增生1例（Ⅲc期）.（2）ESC患者的内膜癌组织中p53蛋白的阳性表达率为87%（26/30）,其输卵管伞端组织中为30%（9/30）,两者比较,差异有统计学意义（P=0.001）.ESC患者的内膜癌组织与其输卵管伞端组织中p53蛋白的表达呈中度正相关（r=0.506,P=0.022）.（3）ESC患者的内膜癌组织中ANX-Ⅳ蛋白的阳性表达率为83%（25/30）,其输卵管伞端组织中为20%（6/30）;内膜癌组织中HER2/neu蛋白的阳性表达率为70%（21/30）,其输卵管伞端组织中为23%（7/30）;内膜癌组织中HMGA2蛋白的阳性表达率为83%（25/30）,其输卵管伞端组织中为20%（6/30）.上述3个蛋白在内膜癌组织与其输卵管组织中分别比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;但上述3个蛋白在ESC患者的内膜癌组织与其输卵管伞端组织中的表达均无相关性（P〉0.05）.结论 Ⅰ期ESC患者的输卵管伞端合并STIC,提示STIC与ESC的发生可能存在一定的关系;在内膜癌与其输卵管组织中,p53蛋白的表达存在相关性,而HER2/neu、ANX-Ⅳ、HMGA2的表达无相关性.

高迁移率蛋白A2在肿瘤中的表达及作用机制

高迁移率蛋白A2（HMGA2）是一种非组蛋白染色质相关蛋白,其AT-钩结构能够特异性结合特定的DNA序列,主要功能是作为致癌基因和结构转录因子.HMGA2几乎在所有类型的恶性肿瘤中表达,与肿瘤的形成、发展以及不良预后密切相关.HMGA2在各个生物过程,包括细胞增殖、细胞周期、干细胞自我更新、上皮间质转化及DNA损伤修复中都起到了重要作用.深入研究高迁移率蛋白A2对肿瘤的影响及其作用机制具有重大意义.