HBV相关慢加急性肝衰竭患者血清HMGB1、sCD163、PGE2的表达水平及其对预后的预测价值

目的观察HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、可溶性CD163(sCD163)、前列腺素E2(PGE2)的表达水平,并评估三者单独及联合检测对预后的预测价值。方法收集2022年7月1日—2023年9月30日在新乡医学院第一附属医院感染内科住院的HBV-ACLF患者76例,根据28天预后情况,将其分为生存组(n=48)和死亡组(n=28)。收集患者一般资料,计算MELD评分,并采用ELISA法检测血清HMGB1、sCD163和PGE2水平。正态分布的计量资料两组间比较采用成组t检验,非正态分布的计量资料两组间比较采用Mann-Whitney U检验;计数资料两组间比较采用χ2检验。采用Spearman秩相关性分析HMGB1、sCD163和PGE2与MELD评分的相关性;采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析HMGB1、sCD163和PGE2单独及联合检测对HBV-ACLF患者预后的预测价值。结果生存组和死亡组间TBil、WBC、中性粒细胞百分数、降钙素原、血清淀粉样蛋白A、IL-6、血清钠(Na^(+))、血清肌酐(SCr)差异均有统计学意义(P值均<0.05)。死亡组血清HMGB1(Z=−2.997,P=0.003)、sCD163(Z=−2.972,P=0.003)和MELD评分(t=−6.997,P<0.001)显著高于生存组,差异均有统计学意义;死亡组血清PGE2水平显著低于生存组,差异有统计学意义(Z=−4.909,P<0.001)。Spearman秩相关性分析发现,HMGB1、sCD163与MELD评分呈正相关(r值分别为0.431、0.319,P值均<0.05),PGE2与MELD评分呈负相关(r=−0.412,P<0.001)。ROC曲线分析发现,HMGB1、sCD163和PGE2单独预测的曲线下面积(AUC)分别为0.717、0.716、0.856,三者联合预测价值最高,AUC为0.930,敏感度为0.778,特异度为0.920。结论血清HMGB1、sCD163、PGE2单独及联合检测在预测HBV-ACLF患者预后方面均具有良好参考价值,三者联合预测价值最高,值得进一步观察和研究。

龙血竭总黄酮对大鼠I/R心肌细胞HMGB1/PI3K通路的影响

目的本研究旨在观察龙血竭总黄酮(sanguis draconis flavones,SDF)对大鼠心肌I/R模型的干预效果,并探讨其对HMGB1/PI3K的影响。方法采用随机数字表法将32只雄性健康SD大鼠划分为Control组、Sham组、I/R组和SDF组,每组有8只大鼠;为了建立I/R模型,进行冠状动脉左前降支中上段的结扎手术;通过酶联免疫吸附技术测定大鼠血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,并使用HE染色观察心肌病理学变化;通过采用TTC染色法,进而准确评估心肌梗死面积;利用Western Blot技术检测大鼠心肌中HMGB1和PI3K蛋白表达水平。结果①相较于Control组和Sham组,I/R组及SDF组的CK-MB表达水平提高(P<0.05),HMGB1和PI3K蛋白的表达量增加(P<0.05),I/R组及SDF组的大鼠心肌梗死面积高于Sham组。②HE染色观察到Control组和Sham组大鼠心肌结构完整,心肌纤维有序排列。I/R组大鼠心肌细胞则排列紊乱,细胞间质水肿,部分细胞出现坏死。此外,还可以观察到炎性细胞的浸润。与I/R组相比,SDF组大鼠心肌结构破坏程度明显减轻,细胞仅有轻微死亡,纤维排列较为整齐,且仍可观察到少量中性粒细胞浸润。结论SDF预处理可以干预HMGB1/PI3K信号通路,从而对心肌缺血再灌注损伤起到保护作用。

姜黄素通过调节HMGB1/NF-κB通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的:探讨姜黄素对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)的保护作用及可能机制。方法:100只健康8周龄Sprague-Dawley大鼠采用随机数字表法分为假手术组、模型组、地尔硫䓬组、姜黄素组,每组25只。H9c2细胞分为对照组、缺氧/复氧组、姜黄素组。采用冠状动脉结扎法构建大鼠MI/RI模型,H9c2心肌细胞缺氧/复氧体外模拟MI/RI。采用BL-420S生物功能实验系统采集心电图(ECG)测量值;四唑盐(MTT)法测定H9c2细胞活性;酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血清和细胞上清液中的炎性细胞因子水平;苏木精-伊红(HE)染色及2,3,5-三苯基氯化四唑(TTC)观察损伤的心肌组织情况。蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/核转录因子-κB(NF-κB)通路相关蛋白水平。结果:TTC染色结果显示,姜黄素组心肌灰色改变较模型组少,地尔硫䓬组与姜黄素组心肌组织病理学无明显差异;苏木精-伊红(HE)染色结果显示,姜黄素组心肌组织纤维排列尚规则,无明显出血、水肿等改变,炎性细胞数量较少,地尔硫䓬组与姜黄素组心肌组织病理学则无明显差异。与假手术组比较,模型组ST段明显抬高(P<0.05);与模型组比较,姜黄素组ST段明显降低(P<0.05)。地尔硫䓬组与姜黄素组ST段比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,缺氧/复氧组、姜黄素组H9c2细胞活力降低(P<0.05);与缺氧/复氧组比较,姜黄素组H9c2细胞活力明显升高(P<0.05)。与假手术组比较,模型组、地尔硫䓬组、姜黄素组大鼠血清白细胞介素(IL-)6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)水平,HMGB1、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,地尔硫䓬组、姜黄素组大鼠血清IL-6、IL-1β、TNF-α、CK、LDH水平,HMGB1、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白水平明显降低(P<0.05)。与对照组比较,缺氧/复氧组、姜黄素组H9c2细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α、CK、LDH水平,HMGB1、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与缺氧/复氧组比较,姜黄素组H9c2细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α、CK、LDH水平,HMGB1、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:姜黄素对大鼠心肌MI/RI损伤有保护作用,其机制可能与其参与HMGB1/NF-κB通路的调控有关。

新型生物标志物MDW HMGB1及OSM在脓毒症中的应用价值

虽然脓毒症在诊断和治疗方面有所改进,但重症监护病房(ICU)住院患者的发病率和病死率仍然很高。临床尚不能完全做到及早发现脓毒症,但对于已确诊的脓毒症患者,就应及早干预脓毒症进展,降低其病死率。因此,目前需要及早识别、较好预测脓毒症结局的生物标志物,以帮助临床医生解决其实际问题。近年来脓毒症相关生物标志物的研究广受外界关注,现重点对脓毒症早期诊断、风险预测相关标志物单核细胞分布宽度(MDW)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及抑癌蛋白M(OSM)的最新研究进展做一综述。

血清Hcy、HMGB1水平与多发性骨髓瘤患者预后的关系

【目的】探讨血清同型半胱氨酸(Hcy)、血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平与多发性骨髓瘤(MM)患者预后的关系。【方法】在本院治疗的72例MM患者,根据随访3年的存活情况分为预后良好组(n=49)和预后不良组(n=23)。比较两组患者入院时年龄、性别、体重指数(BMI)、病程、吸烟史、饮酒史、高血压史、贫血、轻链型、国际分期系统(ISS)分期各项资料及骨髓浆细胞、血红蛋白(Hb)、血钙(Ca)、血肌酐(Scr)、Hcy、HMGB1水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Hcy、HMGB1水平对MM患者预后不良的预测价值,采用Logistic分析MM患者预后不良的危险因素。【结果】预后不良组年龄≥60岁患者占比及血清Hcy、HMGB1水平显著高于预后良好组(P<0.05)。Hcy、HMGB1预测MM患者预后不良的ROC曲线下面积分别为0.815、0.777(均P<0.05)。经多因素Logistic回归分析证实,年龄≥60岁及Hcy≥13.562μmol/L、HMGB1≥216.919 pg/mL是MM患者预后不良的危险因素(均P<0.05)。【结论】MM患者预后不良的发生与年龄及血清Hcy、HMGB1水平密切相关,值得临床关注。

重组人HMGB1调控内皮细胞成血管作用的机制初探

目的探讨重组人高迁移率族蛋白1(rhHMGB1)在调控内皮细胞成血管过程中可能涉及的机制。方法将内皮细胞分为对照组、骨髓间充质干细胞(MSC)上清组以及rhHMGB1组。采用细胞计数试剂(CCK)-8法检测内皮细胞的增殖、存活情况;采用蛋白质印迹法检测血管内皮生长因子(VEGF)、Yes相关蛋白(YAP)、CD31、缺氧诱导因子(HIF)-1α的蛋白相对表达量;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测VEGF、YAP、CD31、HIF-1α的信使RNA(mRNA)相对表达量;采用Transwell实验检测内皮细胞迁移水平;免疫荧光实验检测YAP定位情况。结果与对照组比较,rhHMGB1组内皮细胞迁移率增加(P<0.05),且细胞迁移率随着时间的延长而增加。与对照组比较,MSC上清组VEGF蛋白相对表达量增加,p-YAP蛋白表达增多,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与对照组比较,rhHMGB1组的VEGF和HIF-1α蛋白相对表达量以及VEGF和CD31 mRNA相对表达量均增加,YAP和p-YAP蛋白表达均增多,YAP/p-YAP比值增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与MSC上清组比较,rhHMGB1组的CD31 mRNA相对表达量增加,YAP蛋白表达增多,YAP/p-YAP比值增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论外源高浓度rhHMGB1可能通过介导YAP入核促进内皮细胞的迁移能力,并上调血管生成相关蛋白的表达。

miR-101-3p调控HMGB1影响甲状腺乳头状癌的体外转移活性

目的探讨miR-101-3p在甲状腺乳头状癌细胞发展中的作用机制,以期为甲状腺乳头状癌的预防和治疗提供一个新思路。方法采用q-PCR方法检测癌组织和癌旁组织中miR-101-3p和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达水平。用miR-101-3p mimic、miR NC、pcDNA3.1 HMGB1和pcDNA3.1 NC转染KAT-5细胞后,Western blotting检测HMGB1途径蛋白的表达。使用划痕实验检测细胞的迁移情况,Transwell实验检测细胞的侵袭能力,通过集落形成实验分析细胞的生长能力。荧光素酶报告基因实验分析miR-101-3p和HMGB1的相互作用情况。结果miR-101-3p在甲状腺乳头状癌组织中的表达显著低于癌旁组织(分别为1.08±0.02、0.52±0.01,P<0.05);HMGB1在人PTC中表达显著高于癌旁组织(分别为0.88±0.03、1.29±0.02,P<0.05)。荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-101-3p能够靶向抑制HMGB1表达(分别为0.98±0.02、0.03±0.0l,P<0.05)。miR-101-3p过表达能够明显抑制KAT-5细胞的增殖与侵袭和迁移。然而,过表达HMGB1能够逆转miR-101-3p对KAT-5细胞的抑制作用。结论miR-101-3p在甲状腺乳头状癌组织中的表达降低,HMGB1在甲状腺乳头状癌组织中的表达升高。miR-101-3p可靶向调控HMGB1进而抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖、侵袭并诱导细胞凋亡。

HMGB1和RAGE在呼吸机相关性肺炎中作用的研究进展

呼吸机相关性肺炎(VAP)发病机制复杂,炎症反应在VAP的病理进程中具有关键作用。高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和晚期糖基化终末产物受体(RAGE)是促发炎症反应的关键介质,且在脓毒症的进程中发挥着重要的作用;而脓毒症是VAP的主要结局及死因。二者可能作为早期发现VAP进展为脓毒症的标志物及治疗靶点。就HMGB1/RAGE在VAP炎症发展中的作用及相关治疗进展进行综述。

毛蕊花糖苷调节HMGB1/RAGE/NF-κB信号通路对动脉粥样硬化大鼠内皮功能障碍的影响

目的 探讨毛蕊花糖苷(VB)调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/晚期糖基化终产物受体(RAGE)/核因子κB(NF-κB)信号通路对动脉粥样硬化(AS)大鼠内皮功能障碍的影响机制。方法 采用高脂饲料喂养联合维生素D3溶液腹腔注射的方法建立AS大鼠模型。将大鼠分为对照组(10只),模型组(12只),毛蕊花糖苷低、中、高剂量组(VB-L、M、H,2、5、10 mg/kg,每组10只)和阳性对照组(辛伐他汀,5 mg/kg,10只)。全自动生化分析仪检测血清中血脂水平;HE染色观察大鼠主动脉组织病理变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中炎性因子及内皮细胞因子水平;微量法试剂盒检测大鼠氧化应激水平;Western blot检测主动脉HMGB1/RAGE信号通路蛋白表达。结果 与对照组相比,模型组大鼠主动脉内膜增厚、血管出现斑块,并伴有脂质沉积和炎性细胞浸润,血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、C反应蛋白(CRP)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、内皮素1(ET-1)、内脂素、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、丙二醛(MDA)及主动脉中HMGB1、RAGE、NF-κB磷酸化水平升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平降低(P<0.05);与模型组相比,VB各组及辛伐他汀组大鼠病理学变化明显改善,血清中TC、TG、LDL-C、TNF-α、IL-1β、CRP、MMP-9、ET-1、内脂素、ICAM-1、MDA及主动脉中HMGB1、RAGE、NF-κB磷酸化水平降低,血清HDL-C、NO、SOD、GSH-Px水平升高(P<0.05)。结论 VB可下调HMGB1/RAGE/NF-κB信号通路蛋白表达,抑制AS大鼠炎症和氧化应激,改善脂质代谢和血管内皮功能。

血清HMGB1、Vaspin水平与急性大面积脑梗死患者恶性脑水肿的关系

目的探讨血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)水平与急性大面积脑梗死(AMCI)患者恶性脑水肿(MBE)的关系。方法选取2019年1月至2022年12月海南医学院第一附属医院神经内科113例AMCI患者,根据是否继发MBE分为MBE组和非MBE组。对比两组患者入院1d、3d、7d时血清HMGB1、Vaspin水平,Logistic回归分析AMCI患者发生MBE的危险因素。分析血清HMGB1、Vaspin对MBE的预测价值。结果133例AMCI患者中37例出现MBE,发病率为27.82%。MBE组患者入院NIHSS评分显著高于非MBE组(P<0.05),MBE组患者入院1d、3d、7d时血清HMGB1水平均高于非MBE组,血清Vaspin水平低于非MBE组(P<0.05);MBE组入院第3天血清HMGB1水平高于第1天、7天,而入院第3天时血清Vaspin水平低于第1天、7天(P<0.05);非MBE组各时间点血清HMGB1、Vaspin水平差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析显示,NIHSS评分、入院1天血清HMGB1、Vaspin水平与AMCI患者发生MBE存在相关性(P<0.05)。入院第1天时血清HMGB1联合Vaspin预测MBE的曲线下面积为0.856。结论血清HMGB1、Vaspin水平与AMCI患者MBE的发生密切相关,检测入院1d时血清HMGB1、Vaspin水平有助于早期预测MBE发生风险。

血清PGRN、SIRT3、HMGB1水平与新生儿重症肺炎病情相关性及对预后的影响

目的探讨血清颗粒蛋白前体(PGRN)、沉默信息调节因子相关酶3(SIRT3)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平与新生儿重症肺炎病情相关性及对预后的影响。方法选取2019年7月至2021年7月保定市儿童医院新生儿重症肺炎患儿108例为研究对象,根据随访30d后预后情况分为预后良好组(80例)与预后不良组(28例),比较两组入院当天(D0)、入院1d(D1)、入院3d(D3)、入院5d(D5)、入院7d(D7)血清PGRN、SIRT3、HMGB1水平、小儿危重病例评分(PCIS)、急性生理慢性健康(APACHEⅡ)评分,并计算D7/D1的比率,以ratio值表示,分析各血清指标水平变化与病情变化的相关性及对预后的影响。结果预后不良组D0~D7血清PGRN、HMGB1水平及APACHEⅡ评分高于预后良好组,血清SIRT3水平及PCIS评分低于预后良好组(t值介于3.726~18.683之间,P<0.05);血清PGRN-ratio值、HMGB1-ratio值与PCIS-ratio值呈负相关(r值分别为-0.850、-0.785,P<0.05),与APACHEⅡ-ratio值呈正相关(r值分别为0.840、0.815,P<0.05);SIRT3-ratio值与PCIS-ratio值呈正相关(r=0.689,P<0.05),与APACHEⅡ-ratio值呈负相关(r=-0.815,P<0.05);血清PGRN、HMGB1-ratio高值患儿预后不良风险是低值患儿的4.253倍、3.370倍,SIRT3-ratio低值患儿预后不良风险是高值患儿的8.030倍;血清PGRN、SIRT3、HMGB1的ratio值预测预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.771、0.783、0.751,三者联合预测的AUC为0.916。结论血清PGRN、SIRT3、HMGB1水平变化与新生儿重症肺炎病情显著相关,对预后有明显影响,联合检测可作为预测预后不良的重要辅助途径。

miR-186-5p通过抑制HMGB1信号通路改善脊髓损伤后神经修复

目的探究miR-186-5p在脊髓损伤(SCI)中的变化及对神经修复的影响。方法①将小胶质细胞分为对照组(正常培养)、脂多糖(LPS)组(1μg/ml LPS刺激24 h)、LPS+miR-186-5p-mimic组(转染miR-186-5p-mimic后1μg/ml LPS刺激24 h)和LPS+miR-186-5p-inhibitor组(转染miR-186-5p-inhibitor后1μg/ml LPS刺激24 h)。通过RT-PCR检测细胞中miR-186-5p水平,通过RT-PCR和Western blot检测细胞中高迁移率族蛋白1(HMGB1)mRNA和蛋白表达水平,通过ELISA检测细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的水平。②将大鼠分为假手术组、SCI+LV-NC组和SCI+LV-miR-186-5p组,每组10只大鼠,假手术组大鼠仅行椎板切除术,其余组采用脊髓打击器建立SCI模型。建模后,假手术组大鼠正常饲养,SCI+LV-NC组和SCI+LV-miR-186-5组大鼠分别脊髓注射空载体慢病毒和过表达miR-186-5p的重组慢病毒。通过RT-PCR检测脊髓组织中miR-186-5p水平。通过Western blot检测脊髓组织中HMGB1、Toll样受体4(TLR4)、p-p65、total p65、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、血红素加氧酶-1(HO-1)、超氧化物歧化酶1(SOD-1)、Bax和Bcl-2的蛋白水平。ELISA检测脊髓组织中的TNF-α和IL-6的水平;免疫荧光检测脊髓组织中的离子钙结合接头蛋白分子1(IBA-1)、iNOS、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经丝蛋白-200(NF-200)的表达;通过BBB评分评价大鼠的运动功能;通过尼氏染色测定脊髓前角运动神经元数量。结果①与对照组相比,LPS组miR-186-5p表达降低(P<0.05),而HMGB1、iNOS、TNF-α和IL-6水平升高(P<0.05)。与LPS组相比,LPS+miR-186-5p-mimic组miR-186-5p表达升高(P<0.05),而HMGB1、iNOS、TNF-α和IL-6水平降低(P<0.05)。与LPS组相比,LPS+miR-186-5p-inhibitor组miR-186-5p水平降低(P<0.05),而HMGB1、iNOS、TNF-α和IL-6水平升高(P<0.05)。②与假手术组相比,SCI+LV-NC组大鼠脊髓出现明显损伤,iNOS/IBA-1比例升高(P<0.05),TNF-α和IL-6水平升高(P<0.05),Bax蛋白表达上调(P<0.05),Bcl-2、HO-1和SOD-1蛋白表达下调(P<0.05),GFAP和IBA-1的阳性染色比例增加(P<0.05),HMGB1和TLR4的蛋白水平及NF-κB p65的磷酸化水平增加(P<0.05),BBB评分降低(P<0.05),脊髓前角运动神经元数量减少(P<0.05)。与SCI+LV-NC组相比,SCI+LV-miR-186-5p组脊髓损伤区域减少,iNOS/IBA-1比例降低(P<0.05),TNF-α和IL-6水平降低(P<0.05),Bax蛋白表达下调(P<0.05),Bcl-2、HO-1和SOD-1蛋白表达上调(P<0.05),GFAP和IBA-1的阳性染色比例降低(P<0.05),HMGB1和TLR4的蛋白水平及NF-κB p65的磷酸化水平降低(P<0.05),BBB评分升高(P<0.05),脊髓前角运动神经元数量增多(P<0.05)。结论上调miR-186-5p通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路提高了脊髓损伤大鼠的运动功能和神经修复。

α-倒捻子素通过HMGB1促炎通路诱导人黑色素瘤A375细胞的凋亡

目的研究α-倒捻子素对人黑色素瘤A375细胞增殖、迁移和凋亡的影响及HMGB1介导的炎症反应在给药过程中的作用。方法利用含有不同药物浓度(0、10、15、20μM)的DMEM培养基培养人黑色素瘤A375细胞,CCK-8试剂盒检测每组细胞活力及药物毒性,并使用光学显微镜观察用药后细胞形态变化;划痕实验检测每组用药后人黑色素瘤A375细胞的迁移能力;使用TUNEL染色检测用药后人黑色素瘤A375细胞的凋亡情况;细胞免疫荧光实验用来观察HMGB1蛋白用药前后的表达变化;免疫印迹实验检测药物处理后人黑色素瘤A375细胞内HMGB1及其相关炎症通路蛋白的表达情况。结果α-倒捻子素对A375细胞存在明显毒性,且显著抑制A375细胞的增殖及迁移,并呈现剂量依赖的效果;TUNEL染色证明,α-倒捻子素显著诱导A375细胞凋亡;细胞免疫荧光和免疫印迹实验表明,α-MG组HMGB1及炎症相关蛋白表达明显减少(P<0.01)。结论α-倒捻子素可显著抑制人黑色素瘤A375细胞的生长,激活HMGB1相关炎症通路,诱导人黑色素瘤A375细胞发生凋亡。

脂多糖诱导肥大细胞释放HMGB1研究

目的:研究脂多糖(LPS)对肥大细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放的诱导作用及其胞内信号通路。方法:采用小鼠肥大细胞株P815,观察不同剂量LPS诱导后细胞培养上清液中HMGB1含量和细胞HMGB1mRNA表达水平的变化,及不同剂量丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路抑制剂(SB203580、SB202190、U0126和PD98059)对LPS诱导后HMGB1胞外释放的影响。HMGB1含量采用酶联免疫吸附试验检测。结果:LPS诱导后细胞培养上清液中HMGB1含量明显升高,并与LPS剂量、诱导时间有关;100μg/LLPS分别诱导8、24、48h后,HMGB1mRNA表达水平明显增强(P<0.01);SB203580和SB202190对LPS诱导HMGB1释放有明显的抑制作用(P<0.05),但U0126和PD98059不显示抑制作用。结论:LPS诱导肥大细胞释放HMGB1,其释放机制与胞内p38MAPK信号通路有关。

HMGB1对子宫内膜异位症新生血管生成的潜在作用

新生血管生成是子宫内膜异位症(EMs)的重要发病机制之一。异常的血管增生为异位内膜组织的生长、浸润和转移提供有利的条件。高迁移率族蛋白B1(HMGB1)除了介导炎症反应外,近年研究发现其也可促进多种肿瘤的新生血管生成。研究发现,EMs患者体内HMGB1的表达明显升高,提示HMGB1可能参与EMs的发病机制。HMGB1可直接作用于血管内皮细胞,或激活巨噬细胞上调核因子κB(NF-κB),促进血管内皮生长因子(VEGF)的合成和分泌,间接作用于内皮细胞,促进新生血管网的形成。此外,HMGB1还可通过上调成纤维细胞生长因子(FGF)的表达及提高整合素的活性和亲和力,促进内皮细胞的增殖和迁移;刺激血小板衍生生长因子(PDGF)的分泌,募集周细胞和平滑肌细胞,促进血管管状结构的形成;促进内皮细胞释放转录生长因子β(TGF-β),推动血管管状结构的成熟。综述HMGB1参与调节EMs中新生血管生成的潜在作用机制,可为EMs的治疗提供新的靶点。

高表达HMGB1肺癌细胞系的筛选及意义

背景与目的在人肺鳞癌细胞株YTMLC-9、人肺腺癌细胞株A549、人大细胞肺癌细胞株L9981及人小细胞癌细胞株NCI-H446中筛选高表达HMGB1的细胞株,作为人肺癌细胞HMGB1基因研究的理想材料。方法采用实时荧光定量PCR和Western blot方法对人肺癌细胞HMGB1基因在4株细胞中的mRNA和蛋白水平的表达进行检测,筛选出高表达HMGB1基因的人肺癌细胞株。结果人肺鳞癌细胞株YTMLC-9、人肺腺癌细胞株A549、人大细胞肺癌细胞株L9981及人小细胞癌细胞株NCI-H446中均有HMGB1基因表达,其中人大细胞肺癌细胞株L9981表达水平最高,mRNA是表达量最低的人肺腺癌细胞株A549mRNA表达量的10.3倍;人大细胞肺癌细胞株L9981HMGB1蛋白表达水平最高,与其它3种人肺癌细胞株相比有统计学差异(P<0.001)。结论人大细胞肺癌L9981细胞株为HMGB1高表达细胞株,可作为进行肺癌细胞中研究HMGB1的实验材料。

TNF参与内毒素诱导肥大细胞HMGB1释放

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在内毒素诱导肥大细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放中的作用。方法采用小鼠肥大细胞株P815培养物,观察100μg/L脂多糖(LPS)诱导后培养上清液中HMGB1、TNF-α含量的变化,不同剂量抗TNF-α中和抗体IgG对LPS诱导HMGB1释放的影响,及TNF-α对HMGB1释放的诱导作用。HMGB1含量采用酶联免疫吸附试验检测。结果培养上清液中HMGB1含量随LPS诱导时间而升高,而TNF-α含量于诱导6 h时达到峰值;5、25 mg/L抗TNF-α抗体对LPS诱导HMGB1释放有明显的抑制作用(P<0.05);TNF-α显示具有诱导肥大细胞释放HMGB1的作用,并呈时间、剂量相关性。结论 TNF-α参与内毒素诱导肥大细胞释放HMGB1的过程。

高容量血液滤过防治猪多脏器功能障碍综合征过程中TNF-α和HMGB1的变化

目的:观察高容量血液滤过(HVHF)防治多脏器功能障碍综合征(MODS)过程中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和高迁移率族蛋白1(HMGB1)的变化。方法:19只健康雄性家猪随机分成MODS组(n=9)和HVHF组(n=10),均采用失血性休克复苏+内毒素血症复合因素建立猪MODS模型,HVHF组动物注射内毒素后采用F50聚砜膜滤器予血液滤过,超滤量3 L/h。观察2组动物处死前主要器官功能指标,记录MODS的发生率与病死率。2组均于放血前、内毒素注射前、内毒素注射后1h、24h、48h及96h留取血标本,采用ELISA法测定血浆TNF-α含量,Western blotting法检测血浆HMGB1蛋白含量。结果:2组动物处死前主要器官功能明显改善。HVHF组MODS发生率与病死率均低于MODS组(P<0.05)。MODS组TNF-α和HMGB1均明显升高,HMGB1较TNF-α分泌高峰延迟,持续时间较长;与MODS组相比,HVHF组HMGB1蛋白相对于基础值水平升高幅度明显降低,TNF-α各时间点均有不同程度下降。结论:过度的炎症反应是MODS发生的本质原因之一,HVHF能够削弱血循环中TNF-α和HMGB1等炎症介质的峰值浓度,有效遏制过度的炎症反应,从而起到防治MODS的作用。

HMGB1对U937细胞VEGF-C／D表达影响的研究

目的:探讨HMGB1对单核巨噬细胞U937VEGF-C/D表达的影响及其在淋巴管生成中的作用。方法:以HMGB1作为干预因素,剂量效应组分别用含0、0.1、1、10、20、50和100mg/L HMGB1的培养液与单核巨噬细胞U937共培养8h,以RT-PCR检测U937中VEGF-C mRNA表达的变化。时间效应组以含HMGB1的培养液分别培养U937细胞0、2、4、8、12和24h,以RT-PCR和Western blot检测细胞中VEGF-C/D mRNA和蛋白的变化。结果:HMGB1可有效诱导U937细胞中VEGF-C/D的表达。U937中VEGF-C mRNA的表达与HMGB1剂量成量效关系。对VEGF-C/D的诱导作用分别在12和4h时达到峰值。结论:HMGB1可诱导单核巨噬细胞U937中淋巴管生成因子VEGF-C/D的表达。

HMGB1、维生素D3水平与多发性骨髓瘤的相关性

目的检测多发性骨髓瘤(MM)患者血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、维生素D3水平变化,分析其与病情进展的关系。方法选取2012年1月-2013年12月在邯郸市中心医院治疗的MM患者145例作为研究组,以及150例健康体检者作为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测血清HMGB1、维生素D3、β2微球蛋白(β2-M)及乳酸脱氢酶(LDH)水平;比较MM不同分期及随访后不同预后[完全缓解(CR)及部分缓解后复发]患者血清HMGB1、维生素D3、β2-M及LDH水平。分析血清HMGB1、维生素D3水平与β2-M、LDH的相关性,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清HMGB1、维生素D3对MM患者预后的预测价值。结果与对照组比较,研究组血清HMGB1、β2-M及LDH升高,而维生素D3降低(P<0.05);研究组I期、Ⅱ期、Ⅲ期组MM血清HMGB1、β2-M及LDH逐渐升高,而维生素D3逐渐降低(P<0.05)。CR患者血清HMGB1、β2-M及LDH低于部分缓解后复发患者,而维生素D3高于部分缓解后复发患者(P<0.05)。MM患者血清HMGB1水平与β2-M、LDH呈正相关(r=0.524和0.412,P<0.05),而维生素D3水平与β2-M、LDH呈负相关(r=-0.401和-0.382,P<0.05)。ROC曲线分析显示,联合检测血清HMGB1、VD3对MM患者预后预测的敏感性、特异性分别为77.6%和74.5%,高于2指标单独检测。结论MM患者血清HMGB1水平升高,维生素D3水平降低,HMGB1、维生素D3可能影响疾病的发生、发展,可作为MM病情评估和预后预测的辅助指标。