广州地区汉族人群HNA-1基因频率分布的研究

目的了解广州地区汉族人群HNA-1基因的多态性及频率分布情况。方法采用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)对150名广州地区汉族健康献血者作HNA-1基因分型,计算HNA-1等位基因频率并进行Hardy-Weinberg平衡检验;将结果与国内外部分数据比较。结果广州地区汉族人群HNA-1a、1b等位基因频率分别为0.713、0.287,未发现HNA-1c等位基因;人群基因型以HNA-1aa(50%)纯合子和HNA-1ab(43%)杂合子为主要表达形式;广州地区汉族人群HNA-1基因频率与浙江汉族、西藏藏族、大连汉族、西北回族、日本、韩国、德国、西班牙人群比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论得出了广州地区汉族人群HNA-1的基因频率的分布情况,为临床上相关疾病的诊治和预测提供一定的实验数据基础。

中药复方提取物HNA-1对SIV慢性感染恒河猴胸腺输出及胸腺细胞发育的影响

目的探讨中药复方提取物湘A-1号方（HNA-1,湖南省艾滋病防治小组推荐免费使用的两个中药复方之一的提取物）治疗HIV-1感染及艾滋病（Acquired Immune Deficiency Syndrome,AIDS）的疗效机制。方法用8只已感染猴免疫缺陷病毒SIVmac239 16-21个月的中国恒河猴,治疗组采用2个月的HNA-1治疗;对照组给予等体积生理盐水灌胃。在预设时间点采集外周血提取DNA,采用定量PCR检测T细胞受体重排删除环（T cell receptor excision circles,TRECs）来评价胸腺输出功能;并用酶消化法分离胸腺细胞,利用流式细胞术检测胸腺内CD34＋前体细胞、CD4^＋T细胞发育各阶段的比例改变。结果与模型对照组比较,HNA-1治疗组胸腺细胞输出明显增加（P〈0.05）;且胸腺内CD34^＋Lin-细胞比例明显增加（P〈0.05）,胸腺双阳性T细胞（Double positive,DP）Ⅱ阶段比例减少,而DPⅢ和DPⅣ阶段比例均增加。结论 HNA-1对艾滋病的疗效可能与其能显著增加胸腺输出有关;其作用机制可能涉及增加胸腺内前体细胞数量、以及促进胸腺细胞细胞从DPⅡ阶段发育至DPⅢ等。

中药复方提取物HNA-1治疗猴免疫缺陷病毒感染的实验研究

目的:研究中药复方提取物HNA-1治疗猴免疫缺陷病毒(SIV)感染的作用。方法:采用SIVmac239毒株静脉感染15只中国恒河猴,待感染10周病毒载量进入平台期后,将动物随机分为高剂量组、低剂量组和模型对照组,分别灌胃给予1.8g.kg-1.d-1和0.6g.kg-1.d-1HNA-1药物以及等容量温开水;给药治疗8周,之后停药观察8周。观察、检测动物的一般情况、血浆病毒载量、CD4+和CD+8T细胞、血细胞学和活检淋巴结病理改变等。结果:模型对照组在观察期间有2例动物死亡,而治疗组动物均存活;且治疗组动物在体质量、CD4+T细胞数上均显著优于模型对照组(P<0.05);活检淋巴结病理检查显示,治疗组动物淋巴组织保存较好,部分原本淋巴组织结构已发生退变甚至耗竭的动物,经治疗后出现了恢复。结论:中药复方提取物HNA-1虽然不能直接起到抗SIV的作用,但可以提高动物体质量、减少动物死亡、提高CD4+T细胞数、改善淋巴结组织结构的病理退变,对SIV感染导致的免疫系统破坏具有一定的保护作用。

中药复方提取物HNA-1对SIV慢性感染恒河猴单核细胞各亚群的影响

目的:探讨中药复方提取物湘A-1(HNA-1)对猴免疫缺陷病毒(SIV)慢性感染恒河猴单核细胞亚群的影响,以进一步了解HNA-1促进胸腺输出、提升初始型CD4的机制。方法:采用SIVmac239病毒液对8只中国恒河猴慢性感染16-21个月,随机分为对照组和治疗组,每组4只。治疗组给予HNA-1灌胃治疗,每日1次;对照组给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃。两组给药2个月。在治疗第0、28、56天采集血液检测血常规,并采用流式细胞法检测外周血单核细胞CD14^(++)CD16^-(经典型)、CD14^(++)CD16^+(中间型)和CD14dim CD16^+(非经典型)亚群的比例、各亚群表达HLA-DR、趋化因子CCR5和CCR7的情况,以及外周血单个核细胞(PBMC)表达白细胞介素(IL)-17、IL-10及转化生长因子(TGF-β)的比例。并采用酶消化法从胸腺分离所有细胞,检测胸腺内CD_3^+、CD_(68)^+细胞的比例。结果:治疗组外周血单核细胞比例及数量无明显改变;但CD14^(++)CD16^+亚群的比例明显增高(P<0.05)。该亚群高表达HLA-DR、CCR5和CCR7。同时,治疗组胸腺内巨噬细胞标记CD_(68)^+细胞的比例显著高于对照组(P<0.05)。治疗后PBMC表达IL-10显著降低(P<0.05)。结论:治疗后CD14^(++)CD16^+单核细胞增加、归巢进入胸腺并分化为巨噬细胞,可能是HNA-1提高外周初始型CD4、促进胸腺输出的疗效基础;其临床价值尚有待进一步研究评估。

中药复方HNA-1对地塞米松诱导小鼠胸腺萎缩的保护作用及对胸腺RLR信号通路的影响

目的:探讨中药复方湘艾一号方(HNA-1)对地塞米松诱导的胸腺萎缩、胸腺输出功能的保护作用及胸腺RLR信号通路表达的影响。方法:将C57BL/6小鼠,随机分为正常对照组、模型组、HNA-1低、中、高剂量治疗组,左旋咪唑组。观察各组小鼠胸腺形态改变,检测外周血中T细胞受体重排删除环(TRECs)的含量、CD4+T初始亚群细胞的比例,并检测胸腺组织RLR/MAVS/IFN-α/β通路的表达情况。结果:模型组小鼠胸腺严重萎缩,组织结构破坏明显,外周血TRECs下降;RIG-Ⅰ、MDA5、LGP2和IFN-α/β表达上调明显。与模型组比较,HNA-1治疗组小鼠胸腺指数改变不显著,但胸腺细胞数量增加,以中、低剂量组较为明显;外周血TRECs含量升高,尤以低剂量组差异明显(P<0.05)。且HNA-1可明显抑制胸腺RLR信号通路的表达,以中剂量组最为明显(P<0.05)。结论:HNA-1对地塞米松诱导的胸腺萎缩小鼠具有一定的治疗作用,以中、低剂量较为明显,其机制可能与调控RLR通路的表达情况相关。