胃癌组织miR-30b和HOXA1的表达及与临床病理特征的关系

目的探讨胃癌组织miR-30b和HOXA1表达及其与临床病理特征的关系。方法选择胃癌患者142例,实时荧光逆转录法及免疫组化法测定miR-30b及HOXA1在胃癌组织(胃癌组)及正常胃组织(癌旁组)中的表达水平,分析其与临床病理参数和预后的关系。结果胃癌组MiR-30bmRNA表达水平低于癌旁组,HOXA1mRNA表达水平高于癌旁组(P<0.01);胃癌组MiR-30b蛋白表达评分低于癌旁组,HOXA1蛋白表达评分高于癌旁组(P<0.01);胃癌组MiR-30b蛋白表达阳性率低于癌旁组、HOXA1蛋白表达阳性率高于癌旁组(P<0.01);MiR-30b、HOXA1蛋白表达与年龄相关性不明显(P>0.05);与TMN分期、病理学分级、复发、浸润深度、淋巴血管间隙浸润、肿瘤最大径、淋巴结转移相关性明显,且TMN分期越高、病理学分期越高、有复发、浸润深度越深、有淋巴血管间隙浸润、肿瘤最大径≥5cm、有淋巴结转移,MiR-30b蛋白阳性表达率越低、HOXA1蛋白阳性表达率越高(P<0.01);MiR-30b阳性组3年生存率及生存期均明显高于MiR-30b阴性组,HOXA1阴性组3年生存率及生存期均明显高于HOXA1阳性组(P<0.01)。结论胃癌组织MiR-30b表达降低,HOXA1表达增加;MiR-30b在胃癌的发生发展过程中起抑制作用,HOXA1起促进作用;MiR-30b高表达、HOXA1低表达的胃癌患者能获得较好的预后。

二羟环氧苯并芘恶性转化细胞miR-10a及其靶基因HOXA1的表达改变

目的检测二羟环氧苯并芘恶性转化细胞miR-10a表达水平,探讨其与靶基因HOXA1癌基因的关系。方法以正常支气管上皮细胞为对照组,二羟环氧苯并芘恶性转化细胞为实验组,用茎环结构逆转录引物逆转录,定量PCR检测两组细胞miR-10a表达水平。运用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、定量PCR和流式细胞术间接法检测2组细胞HOXA1 mRNA和蛋白表达水平。结果二羟环氧苯并芘恶性转化细胞miR-10a表达水平是对照组的0.01倍,RT-PCR HOXA1 mRNA是对照组的(3.12±0.23)倍,定量PCR HOXA1 mRNA是对照组的8.75倍,HOXA1蛋白表达是对照组的3.48倍。结论二羟环氧苯并芘恶性转化细胞miR-10a可能反向调控靶基因HOXA1的表达。

HOXA1基因与先天性小耳畸形相关性研究

目的:研究同源框A1(HOXA1)基因与先天性小耳畸形之间是否存在关联,为小耳畸形的候选基因研究提供线索。方法:在HapMap数据库中选出HOXA1基因的标签SNP rs17449024,利用飞行时间质谱在1152例非综合征型小耳畸形(病例组)及1152例相匹配的健康对照中对该SNP位点进行基因分型,统计检验HOXA1与小耳畸形之间相关性。结果:Rs17449024的等位基因频率及基因型分布在病例组和对照组中不存在统计学差异(P=0.279、0.186)。在显性和隐性模型下也未观察到差异。结论:在本研究人群中,HOXA1基因与非综合征型小耳畸形之间不存在关联。还需利用多种方法探究该基因在小耳畸形发生中的作用。

牦牛HOXA1基因的时空表达及其对机体调控机制的研究

试验旨在获得牦牛HOXA1基因序列并进行生物信息学分析,同时分析其组织表达谱和时序表达谱,为进一步研究多脊椎骨形成的原因及其机制奠定基础。通过RT-PCR技术克隆多脊椎骨牦牛HOXA1基因,利用半定量RT-PCR技术检测该基因在多脊椎骨牦牛组织中的表达情况,利用实时荧光定量PCR技术检测该基因在多脊椎骨牦牛不同发育时期各组织中的表达情况。RT-PCR结果表明,多脊椎骨牦牛HOXA1基因序列全长为885bp,其中开放阅读框（ORF）为870bp,编码290个氨基酸。同源性分析表明,牦牛与普通牛、野牦牛、人、野猪、马、家鼠、黑猩猩、原鸡和野猪的同源性为75.4%~98.1%。组织表达分析表明,HOXA1基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大肠、小肠、肌肉、胃、卵巢、子宫、输卵管、乳腺、睾丸中均有不同程度的表达;时序表达分析表明,随着年龄的增长HOXA1基因在多数组织中的表达量呈逐渐升高趋势。

Hoxa1通过MEK/ERK信号通路促进低氧下大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖、迁移和表型转换的研究

背景 低氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary arterial hypertension,HPH)是一种以血管阻力持续性升高和血管重塑为特征的进展性疾病。研究表明Hoxa1参与血管生成过程,但Hoxa1在调控肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)中的作用尚不明确。目的 本研究旨在确定Hoxa1对PASMCs增殖、迁移和表型转化的调控作用。方法 使用Ⅱ型胶原酶消化分离培养原代大鼠PASMCs。采用1%低氧处理细胞构建低氧诱导的细胞模型,并检测24 h、48 h、72 h低氧处理的PASMCs中Hoxa1 mRNA和蛋白表达水平。采用干扰或过表达Hoxa1慢病毒下调或上调细胞中Hoxa1表达。慢病毒干扰实验分为常氧组(Normoxia)、低氧组(Hypoxia)、低氧空病毒组(Hypoxia+shRNA-NC)、低氧Hoxa1干扰病毒组(Hypoxia+shRNA-Hoxa1);慢病毒过表达实验分为对照组(Control)、过表达空病毒组(LV-NC)、过表达Hoxa1组(LV-Hoxa1)。采用EdU检测细胞增殖能力;RT-qPCR检测Hoxa1 mRNA表达;Western blot检测Hoxa1、表型转化标志蛋白、MEK/ERK信号通路蛋白表达;免疫荧光检测Hoxa1、α-actin表达;免疫共沉淀实验确定Hoxa1与MEK的相互作用。结果 成功分离培养PASMCs,并鉴定细胞表达α-SMA。低氧诱导下PASMCs中Hoxa1表达上调(P<0.05)。低氧下Hoxa1沉默抑制PASMCs增殖和迁移,而常氧下Hoxa1过表达促进PASMCs增殖和迁移(P均<0.05)。低氧下沉默Hoxa1导致Hypoxia+shRNA-Hoxa1组收缩型标志蛋白表达升高,合成型标蛋白表达降低(P<0.05)。而在常氧下过表达Hoxa1导致LV-Hoxa1组收缩型标志蛋白降低,合成型标志蛋白升高(P均<0.05)。此外,Hoxa1表达增加促进MEK/ERK信号通路激活。免疫共沉淀结果显示,Hoxa1与MEK存在相互作用。结论 Hoxa1可能通过激活MEK/ERK通路促进PASMCs增殖、迁移和表型转化。

HOXA1基因反义寡核苷酸对结直肠癌细胞转移潜能的影响研究

目的探讨HOXA1基因反义寡核苷酸(ASODN)对结直肠癌HCT116细胞侵袭和迁移的影响及机制。方法将HCT116细胞分为:15 μmol/L的 HOXA1 ASODN处理组(ASODN组)、15 μmol/L N-ODN处理的无关对照组(N-ODN组)、15 μmol/L的HOXA1 SODN处理的正义对照组(SODN组)及正常对照组。Western blotting检测HOXA1、上皮型钙黏附素(E-cadherin)、神经型钙黏附素(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和磷酸化丝氨酸苏氨酸激酶(p-AKT)蛋白表达。MTT法检测细胞活力。Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力。对比四组上述各指标。结果与其他三组相比较,HOXA1 ASODN组可明显下调HOXA1、N-cadherin、Vimentin、PI3K和p-AKT蛋白表达,上调E-cadherin蛋白表达,抑制细胞活力、侵袭和迁移能力。结论 HOXA1基因反义寡核苷酸可明显降低结直肠癌细胞转移潜能,机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路,从而逆转上皮间质转化有关。

miR-577通过靶向调控HOXA1对乳腺癌MDB-MA-231细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的:探讨miR-577靶向调控HOXA1对乳腺癌MDB-MA-231细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:将体外培养的MDB-MA-231细胞分为对照组(未处理)、miR-NC组(转染miR-577模拟物阴性对照)、miR-577组(转染miR-577模拟物)、miR-577+pcDNA组(转染miR-577模拟物和pcDNA3.1质粒)和miR-577+HOXA1组(转染miR-577模拟物和pcDNA3.1-HOXA1质粒),采用实时荧光定量PCR测定MDB-MA-231细胞中miR-577和HOXA1 mRNA的表达,Western blot测定HOXA1蛋白表达,荧光素酶报告基因实验测定miR-577和HOXA1的靶向关系,CCK-8法测定MDB-MA-231细胞增殖,流式细胞仪测定细胞周期分布,Transwell小室测定MDB-MA-231细胞侵袭和迁移。结果:与对照组、miR-NC组相比,miR-577组细胞中miR-577表达水平、G0/G1期细胞百分比升高,HOXA1 mRNA和蛋白表达水平、48与72 h细胞增殖活力、S期细胞百分比、侵袭细胞数和迁移细胞数均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与miR-577组、miR-577+pcDNA组相比,miR-577+HOXA1组中HOXA1 mRNA和蛋白表达水平、48与72 h细胞增殖活力、S期细胞百分比、侵袭细胞数和迁移细胞数均升高,G0/G1期百分比降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-577可通过靶向HOXA1抑制MDB-MA-231细胞增殖、侵袭和迁移。

LncRNAHOTAIRM1/HOXA1促进胶质瘤增殖迁移和侵袭

目的探究长链非编码RNA HOTAIRM1(LncRNA HOTAIRM1)靶向调控HOXA1对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法收集2020年10月至2021年12月于温州市中心医院接受手术治疗的60例胶质瘤患者的肿瘤组织及癌旁正常脑组织标本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定并比较正常脑组织和胶质瘤组织中HOTAIRM1 mRNA和HOXA1 mRNA表达;构建干扰LncRNA HOTAIRM1的慢病毒载体(sh-HOTAIRM1)及其阴性对照载体(sh-NC)、HOXA1过表达载体(pcDNA3.1-HOXA1)及其阴性对照载体(pcDNA3.1-NC)。培养人胶质瘤细胞LN229并进行转染干预,分为对照组(无转染)、sh-HOTAIRM1组(转染sh-HOTAIRM1)、sh-NC组(转染sh-NC)、sh-HOTAIRM1+HOXA1组(转染sh-HOTAIRM1和pcDNA3.1-HOXA1)、sh-HOTAIRM1+NC组(转染sh-HOTAIRM1和pcDNA3.1-NC)。采用MTT法检测转染后各组细胞增殖能力,采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡水平,采用Transwell实验测定各组细胞侵袭和迁移能力。结果胶质瘤组织中HOTAIRM1 mRNA和HOXA1 mRNA的表达水平高于正常脑组织(均P<0.05);LN229细胞转染48h后,sh-HOTAIRM1组和sh-HOTAIRM1+NC组细胞中HOTAIRM1 mRNA和HOXA1 mRNA表达水平均低于对照组和sh-NC组(均P<0.05),细胞凋亡率高于对照组和sh-NC组(均P<0.05),迁移细胞数与侵袭细胞数均少于对照组和sh-NC组(均P<0.05);sh-HOTAIRM1+HOXA1组细胞中HOXA1 mRNA表达水平高于sh-HOTAIRM1组和sh-HOTAIRM1+NC(均P<0.05),凋亡率低于sh-HOTAIRM1组和sh-HOTAIRM1+NC组(均P<0.05),细胞迁移细胞数与侵袭细胞数均多于sh-HOTAIRM1组和sh-HOTAIRM1+NC组(均P<0.05)。转染后24~72h,各组细胞增殖活性均逐渐升高(均P<0.05);在不同时间点,sh-HOTAIRM1组和sh-HOTAIRM1+NC组细胞增殖活性均弱于对照组和sh-NC组(均P<0.05),sh-HOTAIRM1+HOXA1组细胞增殖活性强于sh-HOTAIRM1组和sh-HOTAIRM1+NC组(均P<0.05)。结论LncRNAHOTAIRM1和HOXA1在胶质瘤组织中呈高表达状态,HOTAIRM1或可通过靶向调控HOXA1促进胶质瘤细胞增殖,抑制其凋亡,并增强胶质瘤细胞迁移和侵袭能力。

CircOGDH通过miR-24-3p介导的HOXA1上调对缺氧复氧诱导的神经元损伤的影响

该文探讨了CircOGDH通过mi R-24-3p靶向调控HOXA1对缺氧复氧(H/R)诱导的神经元损伤的作用机制。以Ht22细胞为研究对象,利用缺氧复氧诱导神经元细胞损伤,将细胞分为阴性对照组(si-NC组)、CircOGDH沉默组(si-CircOGDH组)、过表达阴性对照组(miR-NC组)、miR-24-3p过表达组(miR-24-3p minic组)、CircOGDH沉默+抑制剂阴性对照组(si-CircOGDH+anti-miRNC组)、CircOGDH沉默+miR-24-3p抑制剂组(si-CircOGDH+anti-miR-24-3p组),另设置未转染的对照组(control组)、H/R组。qRT-PCR法检测CircOGDH、miR-24-3p、HOXA1 mRNA表达水平;CCK-8法检测细胞活性;氧化应激水平检测采用微量法;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测HOXA1、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果显示,H/R组Ht22细胞CircOGDH、HOXA1表达上调,miR-24-3p表达下调,细胞凋亡率以及Bax、LDH、MDA含量升高,细胞存活率以及Bcl-2水平、SOD活性、GSH-Px活性下降(P<0.05);沉默CircOGDH可以上调H/R诱导的Ht22细胞中miR-24-3p表达,下调HOXA1表达,提高细胞存活率和Bcl-2蛋白、SOD、GSH-Px水平,降低细胞凋亡率以及Bax、LDH、MDA含量(P<0.05);过表达miR-24-3p能够下调HOXA1表达,提高细胞存活率及以Bcl-2、SOD、GSH-Px水平,降低细胞凋亡率及以Bax、LDH、MDA含量(P<0.05);抑制miR-24-3p表达能够一定程度上逆转沉默CircOGDH对HT22细胞损伤的保护作用。由此提示,沉默CircOGDH可能通过上调miR-24-3p表达,下调HOXA1表达,改善H/R诱导的神经元氧化损伤,抑制其凋亡。

HOXA1基因反义寡核苷酸对食管癌细胞生长的影响

目的探讨同源异形盒A1(HOXA1)基因反义寡核苷酸(ASODN)对食管癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及机制。方法采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测正常食管上皮细胞Het-1A和人食管鳞癌TE-1、EC9706和Eca109细胞HOXA1蛋白的表达,筛选高表达的食管鳞癌细胞进行后续实验;设计合成HOXA1 ASODN链、正义寡核苷酸(SODN)链及无义寡核苷酸(N-ODN)链;将筛选出的高表达的食管鳞癌细胞分为HOXA1 ASODN组(5、10、15μmol/L的HOXA1 ASODN转染Eca109细胞)、对照组(细胞常规培养,不进行细胞转染)、SODN组(细胞转染15μmol/L的SODN)和N-ODN组(细胞转染15μmol/L的N-ODN)。采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术、Transwell小室分别检测细胞活力、凋亡率及侵袭迁移能力;Western blot检测HOXA1、磷酸化的丝氨酸苏氨酸激酶(p-AKT)、细胞增殖核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、B细胞淋巴瘤-2蛋白(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果与正常食管上皮细胞Het-1A比较,人食管鳞癌TE-1、EC9706和Eca109细胞HOXA1蛋白表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。HOXA1蛋白在Eca109细胞表达最高,因此选用Eca109细胞进行后续实验。转染HOXA1 ASODN的Eca109细胞HOXA1蛋白表达降低(P<0.05)。随着Eca109细胞转染HOXA1 ASODN浓度及时间增加,Eca109细胞活力降低,与对照、SODN、NODN组比较差异有统计学意义(P<0.05)。15μmol/L的HOXA1 ASODN转染Eca109细胞后,与对照组比较,细胞侵袭和迁移能力降低,凋亡率升高,p-AKT、PCNA和MMP-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高(P<0.05)。结论 HOXA1基因反义寡核苷酸可抑制食管癌细胞增殖、侵袭和迁移能力,并诱导凋亡,机制与抑制磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/AKT信号通路可能有关。

斑马鱼hoxa1a基因调控颅面骨骼发育的功能研究

hox基因编码一类高度保守的转录因子家族,人类HOXA1的突变会导致阿萨巴斯卡发育不良综合征(Athabascan brainstem dysgenesis syndrome,ABDS),使人出现因颅骨异常导致的面部畸形和面部麻痹等症状。利用模式生物斑马鱼研究其同源基因hoxa1a的功能机制。首先利用CRISPR/Cas9技术对斑马鱼hoxa1a进行基因编辑,获得了hoxa1a基因突变,T7E1酶切结果显示F0酶切效率平均为70%。F1进一步筛选到两种突变类型,分别是插入了8 bp和删除了7 bp的杂合突变体。杂合子自交得到hoxa1a F2纯合突变体,并且测序验证hoxa1a基因突变成功。5 dpf时,hoxa1a纯合突变体出现颅面发育异常。阿尔新蓝软骨染色和茜素红硬骨染色结果表明,hoxa1a突变体中颅骨发育异常、筛骨板断裂,鳃弓发育出现缺损。成功在斑马鱼中构建ABDS疾病模型,表明hoxa1a突变会造成斑马鱼颅面骨骼发育异常,为其功能机制研究奠定了基础,为人类ABDS疾病的致病机制研究提供了新的思路。

HOXA1基因在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨同源异形盒基因A1(HOXA1)基因在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)患者组织中的表达情况与临床特征及预后相关性。方法:从NCBI(美国国立生物技术信息中心)的GEO数据库下载OSCC相关芯片数据(GSE42743),包含74例OSCC样本及29例正常口腔黏膜样本,分析HOXA1基因在二者之间的表达情况;收集73例OSCC组织的基因表达谱及相关临床数据,对样本中的HOXA1基因表达数据及其对应的临床信息进行相关性分析,生存分析HOXA1基因与OSCC总生存期及特异性生存期的相关性;采用基因集富集分析方法探讨HOXA1基因在OSCC中可能的作用机制。结果:OSCC组织中HOXA1基因表达水平明显高于正常黏膜组织(P<0.05);73例OSCC样本中,HOXA1基因表达水平与T分期、CN分期、AJCC分期显著相关(P<0.05);生存分析示HOXA1高表达患者预后明显差于HOXA1低表达组(P<0.05);基因富集分析提示,HOXA1基因高表达样本主要富集了E2F、MYC、m TORC1信号通路及G2M检查点、有丝分裂、蛋白分泌功能基因集,影响OSCC的生物学过程。结论:HOXA1基因高表达与OSCC患者的进展相关,可作为其独立预后危险因素。

同源盒HOXA_1基因在髓系白血病细胞内的表达

目的研究HOXA1基因在髓系白血病细胞内的表达及药物对其表达的影响。方法采用半定量逆转录—聚合酶链反应(RTPCR)技术,研究全反式维甲酸(ATRA)对HL60细胞内同源盒HOXA1基因表达的影响。同时对9例髓系白血病患者的HOXA1基因表达进行了检测。结果①ATRA可上调HL60细胞内HOXA1基因的表达。②所有受检白血病患者的HOXA1基因表达水平均比正常对照组高(P<0.01)。

胶质瘤组织lncRNA HOTAIRM1、miR-129-5p表达变化及其临床意义

目的探讨胶质瘤组织长链非编码RNA(lncRNA)HOXA反义转录物髓系异构体1(HOTAIRM1)、微小RNA-129-5p(miR-129-5p)表达变化及其临床意义。方法选择胶质瘤患者83例(观察组)、因颅脑损伤接受手术治疗者55例(对照组),分别取手术切除的胶质瘤组织和正常脑组织,采用RT-qPCR法检测lncRNA HOTAIRM1、miR-129-5p表达,分析胶质瘤组织lncRNA HOTAIRM1表达与miR-129-5p表达的关系,以及二者表达与患者临床病理特征和预后的关系。结果观察组lncRNA HOTAIRM1相对表达量高于对照组,miR-129-5p相对表达量低于对照组(P均<0.05)。Pearson积矩相关分析显示,胶质瘤组织lncRNA HOTAIRM1相对表达量与miR-129-5p相对表达量呈负相关关系(r=-0.726,P<0.05)。分别以胶质瘤组织lncRNA HOTAIRM1、miR-129-5p相对表达量的中位数为临界值,将患者分为lncRNA HOTAIRM1低表达者40例与lncRNA HOTAIRM1高表达者43例、miR-129-5p低表达者46例与miR-129-5p高表达者37例。lncRNA HOTAIRM1、miR-129-5p表达与肿瘤直径和WHO分级有关(P均<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤位置、病理类型无关(P均>0.05)。lncRNA HOTAIRM1高表达者累积生存时间低于lncRNA HOTAIRM1低表达者,而miR-129-5p高表达者累积生存时间高于miR-129-5p低表达者(P均<0.05)。结论胶质瘤组织lncRNA HOTAIRM1表达上调、miR-129-5p表达下调,二者表达变化与肿瘤直径、WHO分级和患者预后密切相关。

HOXA转录本反义RNA1在胶质母细胞瘤发生发展中的作用研究进展

长链非编码RNAs(LncRNAs)已经成为研究肿瘤机制的热门分子,在许多的肿瘤中起着关键作用。而HOXA转录本反义RNA 1(LncRNA HOTAIRM1)作为LncRNAs的一种,在多种肿瘤发生发展中都发挥一定的作用。本文通过查阅文献以及对比其他肿瘤,介绍LncRNA HOTAIRM1在胶质母细胞瘤(GBM)增殖和侵袭中所发挥的促进作用,并概述了LncRNA HOTAIRM1调节同源框A1(HOXA1)的转录及表达、组蛋白修饰和DNA甲基化,对其发挥作用的可能机制,为临床的更深一步研究提供佐证。

miR-99a对宫颈癌Hela细胞增殖影响机制研究

目的 miR-99a在宫颈癌等多种肿瘤组织中异常表达,且与肿瘤细胞的多种生物学行为密切相关。本研究旨在探讨miR-99a沉默HOXA1表达抑制宫颈癌Hela细胞增殖的影响及相关机制。方法通过瞬时转染将miR-99a mimics导入宫颈癌Hela细胞,采用MTT法和平皿克隆形成实验观察miR-99a增加对Hela细胞增殖的影响;应用Targetscan 6.2软件预测miR-99a与HOXA1基因3’UTR的靶向性作用,荧光素酶报告基因分析miR-99a对HOXA1基因表达的影响,采用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测miR-99a对HOXA1表达的作用;构建HOXA1干扰载体,转染Hela细胞,筛选后利用MTT法和平皿克隆实验观察HOXA1表达降低后对Hela细胞增殖的影响。结果 miR-99a被导入宫颈癌Hela细胞后,细胞的生长速度减慢,miR-99amimics组Hela细胞克隆数为156±30,与miR-ctr组(386±49)比较,克隆数减少,F=26.093,P=0.001。采用Targetscan6.2(http://www.targetscan.org/)软件分析miR-99a与HOXA1基因的作用位点发现,miR-99a与HOXA1基因3’UTR的1 485~1 497位核苷酸位点存在结合,miR-99a表达后,抑制Hela细胞中HOXA1的表达。干扰HOXA1表达后,Hela细胞生长速度减慢,平皿克隆形成能力降低,siHOXA1克隆数为165±35,si-control克隆数为390±46,P<0.05。结论miR-99a与HOXA1基因3’UTR 1 485~1 497位核苷酸位点结合沉默其表达,抑制宫颈癌Hela细胞的增殖。

双侧外耳缺失伴发外耳道闭锁猪动物模型的鉴定及其应用

目的对双侧外耳缺失伴发外耳道闭锁的猪进行鉴定，探讨其作为动物模型在整形外科的应用。方法以1头二花脸公猪和1头沙子岭母猪为祖代个体，构建F2近交群体。对患病和表型正常个体的外耳形态进行检查。选取1头正常个体和1头它的全同胞双侧外耳缺失的患病个体，行颞部CT扫描，并对HOXAl基因突变进行检测。结果二花脸×沙子岭F2近交群体中，75头F2个体中有57头表型正常个体和18头患病个体。患病个体为双侧外耳缺失伴发外耳道闭锁，颞部CT显示为双侧外耳道闭锁、中耳结构发育不良；基因检测结果为HOXAl纯合突变。结论HOXAl基因纯合突变的猪动物模型，符合人类双侧小耳畸形特征，为其进一步在小耳畸形病理机制中的应用提供了理论基础。