HP-20大孔吸附树脂分离纯化儿茶素EGCg的效果

以EGCg(表没食子儿茶素没食子酸酯)含量为31.52%的儿茶素粗提物为原料,比较D202、XDA-1、D201、D900、LSA-7、HP-20等6种大孔吸附树脂对EGCg的静态吸附与解吸的效果,并应用最佳大孔吸附树脂HP-20对EGCg分别进行动态等梯度洗脱和梯度洗脱试验,优化HP-20大孔吸附树脂分离纯化EGCg的技术参数.结果表明,应用体积为125mL的柱进行等梯度洗脱时,1.8g上样量、2BV/h流速、40%乙醇体积分数、2BV洗脱体积,EGCg的纯度和得率分别达55.92%和95.22%;以同样的柱进行梯度洗脱时,1.8g上样量、30%乙醇洗脱、2BV/h流速、2BV洗脱体积、收集1～2BV的体积段,EGCg的纯度和得率分别达68.32%和72.08%.

HP-20型大孔树脂富集纯化桑白皮总黄酮的工艺优选

[目的]优选桑白皮总黄酮的富集工艺条件。[方法]以总黄酮含量和洗脱率为指标,采用单因素试验考察HP-20型大孔树脂的静态饱和吸附量、动态饱和吸附量、乙醇浓度和乙醇用量等工艺条件。[结果]桑白皮经醇提浓缩后,以HP-20型大孔树脂为吸附剂,以3 BV蒸馏水洗脱,浓度15%乙醇3 BV,浓度40%乙醇以2 BV/h流速进行洗脱,收集12 BV洗脱液,总黄酮纯度达到52.95%,总黄酮洗脱率为31.89%。[结论]HP-20型大孔树脂能够有效的富集桑白皮总黄酮,工艺操作简单、效果好。

大孔吸附树脂HP-20分离肉桂原花青素的研究

[目的]研究HP-20大孔吸附树脂分离肉桂原花青素。[方法]采用HP-20大孔吸附树脂分离肉桂原花青素,将1 g原花青素原料溶解在少量60%乙醇中,制得的浓溶液匀速加入吸附柱中,分别用20%、40%、60%、80%、100%的乙醇对吸附在树脂上的肉桂原花青素进行梯度洗脱,并分析各部分质量、纯度以及聚合度。[结果]各部分样品分别标记为F20、F40、F60、F80、F100,五部分的质量分别为0.24、0.19、0.17、0.27、0.02 g;五部分中,纯度最高的为F40部分,纯度为82.65%,纯度最低的为F100部分,纯度为65.11%;洗脱过程中原花青素回收率达89%;分析各浓度的乙醇洗脱液中原花青素平均聚合度发现,10%~40%乙醇洗脱液中主要为低聚体,而40%~100%乙醇洗脱液中主要为高聚体。[结论]该研究为下一步肉桂原花青素高聚体的降解后的分离提供理论依据。

大孔树脂HP-20和HP-SS分离纯化山银花中灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙（英文）

[目的]建立快速从山银花中分离灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的方法。[方法]利用HP-20大孔树脂富集山银花皂苷,HP-SS树脂从总皂苷分离其中主要皂苷成分灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙。[结果]确定了HP-20大孔树脂富集山银花皂苷的工艺,以浓度为4.8 mg/ml的2 BV样品溶液上样,吸附流速1.5 BV/h,解吸的乙醇浓度为60%,解吸体积3BV,解吸流速为1.5 BV/h。HP-SS树脂柱层析中,采用2 BV的水、10%、20%、30%,4 BV的40%、2 BV的50%的乙醇洗脱,控制流速在0.5BV/h。其中40%、50%乙醇洗脱部分分别获得两个单体化合物,通过13C与1H-NMR鉴定确定其分别为灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙单体成分。[结论]大孔树脂HP-20与HP-SS相结合,实现了两步快速从山银花中分离灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的目标。

Diaion HP–20大孔吸附树脂分离纯化含羞草种子中的黄酮类物质

研究Diaion HP–20大孔吸附树脂分离纯化含羞草种子中黄酮类物质的工艺条件。用海南含羞草种子为原料,以含羞草种子中总黄酮吸附量和解吸率为评价指标,考察上样流量、洗脱液种类、柱径比、洗脱液流量等影响因素。Diaion HP–20大孔吸附树脂分离纯化含羞草种子中黄酮类物质的最佳工艺条件:上样流量3 m L/min,洗脱液为40%乙醇溶液,柱径比为1∶10,洗脱液流量为4 m L/min。该方法简单,可行,能够有效分离纯化含羞草种子中黄酮类物质,且大孔吸附树脂可重生,利用率高。

大孔树脂联合Sephadex LH-20葡聚糖凝胶分离纯化芦荟大黄素

目的对芦荟药材中芦荟大黄素进行分离纯化及含量测定。方法以DM301、X5、DM1303种大孔树脂的静态吸附率,动态吸附率为指标,分离芦荟大黄素,用Sephadex LH-20葡聚糖凝胶纯化芦荟大黄素,采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)测定芦荟大黄素的含量。结果芦荟大黄素线性回归方程为Y=41131X-44.34(r^2=0.9993),DM301大孔树脂联合Sephadex LH-20葡聚糖凝胶分离纯化芦荟大黄素效果好。结论该方法快速、简便,为芦荟中有效成分大黄素分离和测定提供了依据,为大黄素的纯化提供了参考。

大孔树脂纯化西番莲果皮花色苷工艺

通过静态吸附-解吸实验筛选适合西番莲果皮花色苷纯化的大孔树脂,并进行静态、动态吸附-解吸工艺条件优化。结果表明:在供试树脂中,HP-20大孔树脂为西番莲果皮花色苷纯化最适用的吸附剂,其静态吸附最优条件为温度40℃、pH4.0、洗脱液为90%酸化乙醇(pH3.5);动态吸附-解吸最适工艺条件为:上样液流速4.5BV/h、上样液质量浓度18.176μg/mL、洗脱剂用量6BV、洗脱流速3BV/h。

沙棘果原花青素的分离纯化研究

用大孔树脂、SephadexLH-20凝胶色谱的方法和反相高效液相色谱分离纯化沙棘果中的原花青素。结果表明:大孔树脂层析法分离纯化沙棘果中的原花青素时使用50%的乙醇水溶液洗脱得到的洗脱液中原花青素的含量较高,达71.9%;将经过大孔树脂层析分离纯化的原花青素粗品经SephadexLH-20柱分离,50%乙醇作为流动相,原花青素粗品可纯化至95%以上。反相高效液相色谱分析发现,从SephadexLH-20洗脱下来的组分中含有原花青素的二聚体。

HP-20型大孔树脂富集纯化南山茶花总黄酮的工艺优选

目的:优选HP-20型大孔树脂富集纯化南山茶花总黄酮的工艺参数。方法:以总黄酮含量和洗脱率为指标,采用单因素试验考察HP-20型大孔吸附树脂的静态饱和吸附量、动态饱和吸附量、乙醇体积分数、乙醇用量等工艺参数。结果:HP-20型大孔树脂对南山茶花总黄酮的静态饱和吸附量50.5 mg.g-1。最佳纯化工艺为上样液体积9 BV,分别用3 BV去离子水及15%乙醇洗除杂质,35%乙醇10.5 BV以2 BV.h-1流速洗脱。总黄酮纯度达54.24%,总黄酮洗脱率29.83%。结论:HP-20型大孔吸附树脂对南山茶花总黄酮具有良好的纯化效果,优选的工艺合理、稳定可行。

制备色谱法在纯化甜茶苷工艺中的应用

研究了从甜茶叶中纯化甜茶苷的制备工艺。首先用沸水从甜茶叶中提取甜茶苷,提取3次,每次1 h。再利用HP-20大孔吸附树脂对甜茶苷粗提物进行预纯化,以90%乙醇为洗脱液,洗脱6倍柱体积;浓缩去除乙醇后,用D-941阴离子交换树脂脱色,水洗并干燥得到甜茶苷粗产品,纯度为68.6%。最后甜茶苷粗产品经制备色谱纯化后,得到纯度为97.9%的甜茶苷,色谱条件为流动相V甲醇∶V水=70∶30,流速10 mL/min,上样量200 mg。

发酵麦麸阿魏酰低聚糖的纯化工艺及其心脏保护作用研究

以发酵麦麸阿魏酰低聚糖(Feruloylated oligosaccharides,FOs)粗提液为原料,研究Amberlite XAD-2大孔吸附树脂结合Sephadex LH-20葡聚糖凝胶对发酵麦麸FOs的纯化工艺和效果,同时考察分离纯化后发酵麦麸FOs对斑马鱼心脏损伤的保护作用。结果表明:Amberlite XAD-2大孔吸附树脂分离发酵麦麸FOs的最佳吸附条件为:上样液质量浓度4.0 mg/mL,上样液pH 4.0,上样体积40 mL,在此条件下吸附率可达83.76%;最佳的解吸条件为:乙醇体积分数50%、洗脱体积15 mL,在此条件下解吸率可达94.80%。Sephadex LH-20葡聚糖凝胶进一步纯化发酵麦麸FOs的最佳条件为:洗脱剂乙醇体积分数25%,上样量1.25 mL,洗脱流速0.3 mL/min,在此条件下,分离出的组分最多;紫外光谱分析表明纯化发酵麦麸FOs中有阿魏酸的存在;纯化后发酵麦麸FOs含量由粗提液的(1107.796±52.18)nmol/g提高到(2217.38±25.36)nmol/g,提高了2倍,纯化效果较佳;此外,经分离纯化后发酵麦麸FOs能有效缓解特非那定诱导的斑马鱼心率和降低斑马鱼心脏SV-BA间距,表明分离纯化后发酵麦麸FOs具有良好的心脏保护作用。

HP-20大孔吸附树脂纯化白薇粗多糖

研究大孔吸附树脂对白薇粗多糖同时脱色素和脱蛋白质的最佳条件及其对多糖结构特征的影响。以色素清除率、蛋白质清除率和多糖保留率为基本指标,从7种树脂中筛选到最佳树脂类型,为HP-20。对吸附条件进行优化,结果表明多糖初始浓度5 mg/mL、初始pH 5、温度35℃、流速2.5 BV/h时,具有较好的脱色(清除率约67%)和脱蛋白质(清除率约73%)效果,且多糖损失较少(约27%)。UV、HPLC-ELSD、PMP-HPLC-DAD、1H NMR分析结果显示,吸附前后,多糖在分子量分布、单糖组成、1H NMR特征等都未发生明显改变,表明HP-20的吸附作用不会引起白薇多糖链的降解和结构改变。所获得的方法可用于白薇根粗多糖的精制和工业化生产,且为白薇根粗多糖后续分离纯化和药理活性研究奠定良好基础。

凌霄花中洋丁香苷的制备

目的从凌霄花中制备洋丁香苷。方法凌霄花70%乙醇提取液经D-101型大孔吸附树脂纯化、凝胶Sephadex LH-20柱精制制备洋丁香苷。结果产品经HPLC、ESI-MS分析确定为洋丁香苷,质量分数>95%。结论该方法操作简便,克服耗费大量有机溶剂、收率低等弊端,适合洋丁香苷制备。

大孔吸附树脂富集沙枣花中总黄酮的工艺研究

目的筛选适合分离和纯化沙枣花总黄酮的大孔吸附树脂并确立纯化工艺参数。方法以大孔吸附树脂吸附率及解吸率为指标,筛选出富集沙枣花总黄酮的最佳树脂,并通过单因素考察该树脂分离、纯化沙枣花总黄酮的最佳工艺条件。结果 DA201树脂对沙枣花总黄酮有良好的吸附分离性能。其具体工艺条件为:树脂柱径高比为1∶8、控制上样流速为0.5mL.min-1、上样液浓度20 mg.mL-1、调pH为4、洗脱流速为0.5 mL.min-1、最大上样为4.5 BV、洗脱剂浓度80%、洗脱剂用量12 BV。结论 DA201型树脂在所确定的工艺条件下,纯化沙枣花总黄酮效果良好,总黄酮得率达到85.23%,总黄酮纯度达到了14.95%,比粗提样品纯度(4.901%)提高了3倍。

红豆越橘总三萜的纯化及体外抗炎活性

【目的】为了综合开发利用红豆越橘果实,通过大孔吸附树脂-Sephadex LH-20纯化工艺获得纯度较高的红豆越橘总三萜化合物,并分析此三萜化合物的体外抗炎活性。【方法】以野生矮丛红豆越橘为原料,首先采用静态吸附-解析实验和动态吸附-解析实验筛选大孔吸附树脂,优化最佳工艺,确定最佳上样质量浓度、pH、上样体积、上样流速以及洗脱液浓度;然后采用Sephadex LH-20羟丙基葡聚糖凝胶二次纯化,获得高纯度的红豆越橘总三萜;采用对透明质酸酶和牛血清白蛋白的变性抑制率为抗炎评价指标,分析红豆越橘总三萜的抗炎活性。【结果】比较7种大孔树脂对红豆越橘总三萜的纯化效果,结果显示,X-5树脂最适合初级纯化,最佳纯化工艺优化结果为上样质量浓度1.5 mg/mL、样液pH 6、上样量为4/3 BV、上样流速1 BV/h、80%(体积分数)的乙醇进行洗脱,红豆越橘总三萜的纯度由原来的5.13%提高到29.46%。进一步采用Sephadex LH-20二次纯化获得纯度为(43.25±0.31)%的红豆越橘总三萜,抗炎活性结果显示,对透明质酸酶和牛血清白蛋白变性抑制率分别可达(81.5±1.37)%、(72.59±1.84)%。【结论】红豆越橘是一种营养丰富的浆果,通过二次纯化技术获得纯度较高的三萜类化合物,并初步证实红豆越橘总三萜具有一定的抗炎活性。