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HP0318基因在幽门螺杆菌适应性定植中的作用研究
被引量:
5
1
作者
郭刚
童文德
+2 位作者
邹全明
吴超
刘开云
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第11期1006-1009,共4页
目的通过构建幽门螺杆菌(Hp)HP0318缺失突变株,初步探明该基因在Hp适应性定植中的作用。方法通过基因克隆和重组技术在HP0318基因上下游片段之间连入氯霉素抗性基因(catGC)作为筛选标记,并克隆到质粒pBluescript SK中构建成缺失突变的...
目的通过构建幽门螺杆菌(Hp)HP0318缺失突变株,初步探明该基因在Hp适应性定植中的作用。方法通过基因克隆和重组技术在HP0318基因上下游片段之间连入氯霉素抗性基因(catGC)作为筛选标记,并克隆到质粒pBluescript SK中构建成缺失突变的打靶载体,将其转化沙鼠适应株M13,经过同源重组,对出发菌的HP0318基因进行置换突变,然后用经氯霉素抗性筛选的突变菌株感染蒙古沙鼠,观察其与未突变的M13出发菌在定植能力和致病性上的差异。结果经PCR鉴定成功构建1株缺失HP0318基因的Hp菌株。突变株与非突变株对蒙古沙鼠的感染率相差显著(P<0.05),2个菌株在胃内的定植密度有显著性差异(P<0.05),突变株定植密度有约5倍的减少。结论HP0318基因在Hp的沙鼠适应性定植过程中发挥了重要的作用。
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关键词
幽门螺杆菌
hp0318
同源重组
突变体
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职称材料
幽门螺杆菌适应性定植相关基因HP0318的克隆及序列分析
2
作者
郭刚
肖洁
+2 位作者
邹全明
童文德
张卫军
《重庆医学》
CAS
CSCD
2007年第8期724-725,728,共3页
目的测定幽门螺杆菌(HP)适应性定植蒙古沙鼠前后HP0318基因序列并分析其序列差异,以了解该基因在HP适应性定植过程中在基因水平是否发生了改变,为进一步研究HP的适应性变异机制提供实验依据。方法对幽门螺杆菌临床分离株M0、沙鼠适应株...
目的测定幽门螺杆菌(HP)适应性定植蒙古沙鼠前后HP0318基因序列并分析其序列差异,以了解该基因在HP适应性定植过程中在基因水平是否发生了改变,为进一步研究HP的适应性变异机制提供实验依据。方法对幽门螺杆菌临床分离株M0、沙鼠适应株M13及标准株NCTC11637基因组中的HP0318全长基因进行扩增,然后连接到PMD18-T载体进行测序,最后通过DNAsis软件对不同菌株来源的HP0318基因进行多重序列比对,并与Genbank公布的2个标准株(HP26695株和J99株)的HP0318序列进行对比分析。结果PCR法成功扩增出了3个菌株的HP0318基因片段,克隆到PMD18-T载体上酶切鉴定正确。测序结果表明3株幽门螺杆菌(M0、M13、11637)的HP0318序列大小均为756bp。序列分析显示在不同来源的HP菌株中表现出较高的保守性,最低相似性达到94%。结论HP0318基因属于HP特异性基因,HP在沙鼠中适应性定植可能并不是由HP0318基因水平的变异引起,有必要进一步实验验证其功能和阐明其所具有的调控机制。
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关键词
幽门螺杆菌
hp0318
克隆
序列分析
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职称材料
题名
HP0318基因在幽门螺杆菌适应性定植中的作用研究
被引量:
5
1
作者
郭刚
童文德
邹全明
吴超
刘开云
机构
第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第11期1006-1009,共4页
基金
国家自然科学基金(30400019)~~
文摘
目的通过构建幽门螺杆菌(Hp)HP0318缺失突变株,初步探明该基因在Hp适应性定植中的作用。方法通过基因克隆和重组技术在HP0318基因上下游片段之间连入氯霉素抗性基因(catGC)作为筛选标记,并克隆到质粒pBluescript SK中构建成缺失突变的打靶载体,将其转化沙鼠适应株M13,经过同源重组,对出发菌的HP0318基因进行置换突变,然后用经氯霉素抗性筛选的突变菌株感染蒙古沙鼠,观察其与未突变的M13出发菌在定植能力和致病性上的差异。结果经PCR鉴定成功构建1株缺失HP0318基因的Hp菌株。突变株与非突变株对蒙古沙鼠的感染率相差显著(P<0.05),2个菌株在胃内的定植密度有显著性差异(P<0.05),突变株定植密度有约5倍的减少。结论HP0318基因在Hp的沙鼠适应性定植过程中发挥了重要的作用。
关键词
幽门螺杆菌
hp0318
同源重组
突变体
Keywords
Helicobacter pylori
hp0318
homologous recombination
mutant
分类号
R378.99 [医药卫生—病原生物学]
R394.32 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
幽门螺杆菌适应性定植相关基因HP0318的克隆及序列分析
2
作者
郭刚
肖洁
邹全明
童文德
张卫军
机构
第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室及重庆市生物制药工程技术研究中心
出处
《重庆医学》
CAS
CSCD
2007年第8期724-725,728,共3页
基金
国家"十五"863重点资助项目(2003AA215060)
国家自然科学基金资助项目(30400019)
文摘
目的测定幽门螺杆菌(HP)适应性定植蒙古沙鼠前后HP0318基因序列并分析其序列差异,以了解该基因在HP适应性定植过程中在基因水平是否发生了改变,为进一步研究HP的适应性变异机制提供实验依据。方法对幽门螺杆菌临床分离株M0、沙鼠适应株M13及标准株NCTC11637基因组中的HP0318全长基因进行扩增,然后连接到PMD18-T载体进行测序,最后通过DNAsis软件对不同菌株来源的HP0318基因进行多重序列比对,并与Genbank公布的2个标准株(HP26695株和J99株)的HP0318序列进行对比分析。结果PCR法成功扩增出了3个菌株的HP0318基因片段,克隆到PMD18-T载体上酶切鉴定正确。测序结果表明3株幽门螺杆菌(M0、M13、11637)的HP0318序列大小均为756bp。序列分析显示在不同来源的HP菌株中表现出较高的保守性,最低相似性达到94%。结论HP0318基因属于HP特异性基因,HP在沙鼠中适应性定植可能并不是由HP0318基因水平的变异引起,有必要进一步实验验证其功能和阐明其所具有的调控机制。
关键词
幽门螺杆菌
hp0318
克隆
序列分析
Keywords
Helicobacter pylori
hp0318
gene cloning
sequence analysis
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HP0318基因在幽门螺杆菌适应性定植中的作用研究
郭刚
童文德
邹全明
吴超
刘开云
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
5
下载PDF
职称材料
2
幽门螺杆菌适应性定植相关基因HP0318的克隆及序列分析
郭刚
肖洁
邹全明
童文德
张卫军
《重庆医学》
CAS
CSCD
2007
0
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职称材料
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