HPLC及LC-MS测定榛子中氯吡苯脲和多菌灵残留

本文采用高效液相色谱法(HPLC)和液相色谱-质谱法(LC-MS)对干果榛子中氯吡苯脲和多菌灵残留量进行含量测定.HPLC和LC-MS均使用C18色谱柱,含量测定采取等度洗脱,流动相:甲醇-水(55∶45,体积比);体积流量:1.0 mL·min-1;测定波长:260 nm;柱温:30℃.LC-MS采取电喷雾离子源,梯度洗脱,体积流量:0.6 mL·min-1,柱温:30℃.结果表明,榛子中氯吡苯脲与多菌灵存在残留,氯吡苯脲质量浓度在1.00~10.00μg·mL-1范围内线性关系良好,加样回收率在95.58%~100.58%;多菌灵质量浓度在1.005~15.075μg·mL-1范围内具有良好的线性关系,加样回收率在95.61%~104.39%.实验证明,HPLC与LC-MS相结合的方法具有操作简便、灵敏度高、检出限低等优点,能有效地检测到榛子样品中膨大剂氯吡苯脲及杀菌剂多菌灵的残留,并确定其残留量,线性关系和回收率结果均令人满意.根据被检测的8批样品中氯吡苯脲和多菌灵两项农药残留量推断,作为一般干果食用榛子是安全的.

HPLC与紫外-可见分光光度法对翻白草中黄酮类成分含量测定

目的 建立测定翻白草中黄酮类成分含量的最佳方法。方法 先建立高效液相色谱法(HPLC)测定翻白草中的4种黄酮类物质含量的方法,其中流动相为乙腈与0.1%甲酸溶液,并采用梯度洗脱,柱温设为30℃,色谱柱为InertSustain C18(150 mm×4.6 mm, 5μm),检测波长设为360 nm,并对不同批次的翻白草中的4种黄酮类物质含量进行检测;选取芦丁作为对照品,以UV-VIS法测定翻白草中总黄酮含量。结果 不同产地的翻白草含有的黄酮类成分含量差异较大,总黄酮含量的差异也较大,建立的HPLC法与紫外-可见分光光变法(UV-VIS)法具有很好地重复性,样品稳定性好,且仪器精密度高,两种检测方法相结合能很好的把控翻白草品质。结论 以UV-VIS法对翻白草中的总黄酮进行测定,并采用HPLC法测定翻白草中含有的槲皮苷、芦丁、山柰酚和槲皮素,方法较为简便,且有很好的重复性、稳定性,精密度高,能很好地控制翻白草的品质,并为临床研究及其药理活性研究提供依据。

枸杞不同部位UV-Vis和HPLC指纹图谱研究

目的采用多维指纹图谱结合化学计量学方法,比较枸杞果实和根皮中黄酮、香豆素类和苯丙酸类等成分的整体差异,并综合多糖和总黄酮的含量比较,为枸杞不同药用部位的价值评估和质量标准的建立提供理论依据。方法建立HPLC指纹图谱进行相似度评价和共有峰确定。化学计量学方法对药材不同部位进行分类研究,建立分类模型,筛选出重要差异性标志物并进行定量分析;紫外-可见光谱(UV-Vis),反映药材化学组成的整体特征;采用2020年版《中华人民共和国药典》苯酚-硫酸法测定枸杞多糖的含量,亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定总黄酮含量。结果HPLC指纹图谱共标定9个共有峰,指认了绿原酸、东莨菪内酯、槲皮素、芦丁4个色谱峰。相似度评价表明果实和根皮整体组成差异较大,地骨皮不同产地之间质量缺乏一致性;正交偏最小二乘法-判别分析找出芦丁是对整体差异性贡献比较大的化学成分;UV-Vis呈现明显的指纹特性;枸杞子中枸杞多糖和总黄酮的含量分别为2.74%~3.79%和1.52%~2.24%,均高于地骨皮中1.92%~2.67%和0.46%~0.58%,且含量分布具有产地差异性。结论综合多指标揭示枸杞果实和根皮中化学成分差异,为枸杞药材的质量评价和资源价值的充分利用提供重要的数据参考。

HPLC法测定1-氟萘中工艺杂质和遗传毒性杂质含量

建立了1-氟萘中的2种工艺杂质和1种遗传毒性杂质含量检测的HPLC方法。采用Phenomenex Gemini色谱柱(C18250×4.6mm,5µm);流动相为10mM碳酸氢钠+6mM三乙胺∶乙腈=55∶45,等度洗脱,采集时间为主峰的2倍保留时间;柱温为40℃;检测波长为220nm;流速为1.0mL/min;进样量为20μL。采用加校正因子的主成分自身对照法对各杂质进行计算,各杂质分离度良好,定量限为0.005~0.008μg/ml,线性关系良好,精密度和高中低三浓度准确度符合要求。实验结果表明该方法专属性强、灵敏度高、操作简便、重复性好、结果准确可靠,可用于1-氟萘中杂质控制。

HPLC测定蜈蚣配方颗粒中3,8-二羟基喹啉的含量

目的建立HPLC法测定蜈蚣配方颗粒中3,8-二羟基喹啉的含量。方法采用Kromasil 100-5 C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以10 mmol/L的磷酸二氢钾溶液-甲醇(68∶32)为流动相,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,检测波长为252 nm。结果HPLC色谱图中阴性对照无干扰;3,8-二羟基喹啉在0.01163~1.395 mg/ml(r=0.9997)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为99.4%(RSD=2.7%)。结论该方法准确、稳定、可行,本文建立的方法经方法学验证可用于评价蜈蚣配方颗粒的质量。

HPLC法测定滇紫草及昆明滇紫草中β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁

(目的)建立滇紫草、昆明滇紫草中β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的测定方法。(方法)采用安捷伦液相色谱仪,色谱柱为ThermoAcclaim 120-C_(18)(250 mm×φ4.6 mm,5μm),乙腈-0.2%甲酸(体积比70∶30)等度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,分析波长275 nm。(结果)β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁在24.151~301.889 ng范围内呈良好线性关系(r=0.9998),平均回收率为93.07%,RSD为2.43%(n=6);18批次样品质量分数在0.0934 mg/g~1.7584 mg/g范围内,各批样品质量分数存在差异。(结论)该方法专属性强、重复性好,符合中国药典相关要求,可用于滇紫草及其昆明滇紫草中β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量测定。

HPLC测定石菖蒲药材中β-细辛醚、α-细辛醚的含量

目的 :测定石菖蒲药材中 β 细辛醚、α 细辛醚的含量。 方法 :色谱条件 :ODSC18分析柱 ( 15 0mm× 4 .6mm ,5 μm) ,流动相为甲醇 水 ( 6∶4 ) ,10 0 0mL中加入磷酸二氢钾 1.4 g ,十二烷基磺酸钠 1.2 g ,检测波长 2 5 7nm :流速 1.0mL·min-1室温操作。结果 :β 细辛醚、α 细辛醚平均回收率分别为 99.0 2 % (RSD =1.0 3% ) ,10 1.2 6 % (RSD =3.5 7% )。 结论 :方法快速准确 ,样品处理简便 。

HPLC法测定β-榄香烯脂质体药物含量及包封率

目的:建立β-榄香烯脂质体药物含量及包封率测定的 HPLC 法。方法:采用 Diamonsil C_(18)(4.6 mm×200 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(80:20),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长210 nm,柱温25℃,进样量20μL。采用葡聚糖凝胶(Sephadex G-50)柱分离脂质体中游离药物。结果:在本色谱条件下β-榄香烯与辅料及溶剂峰分离良好,β-榄香烯浓度在5.0～60.0μg·mL^(-1)范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9994),精密度试验的 RSD 为1.4%～4.2%(n=5),重复性试验的 RSD 为3.1%(n=5),平均回收率为101.8%(n=15)。结论:该方法简便、易行,可用于β-榄香烯脂质体含量及包封率的测定。

HPLC法检测人外周血5-~mC含量及其与年龄相关性研究

目的探讨人外周血中5-^mC含量随年龄变化的规律。方法94例健康个体（4～87岁，男性50例，女性44例）按年龄分为6组：〈20岁、20～30岁、30～40岁、40～50岁、50～60岁及〉60岁组，用HPLC法对外周血中5种脱氧核苷进行定量分析。结果50～60岁组（平均年龄54．7岁）和〉60岁组（平均年龄71．7岁）间的5-^mC含量差异无显著性，但与其它4组有明显差异（P〈0．0001）；〈20岁、20～30岁、30～40岁和40～50岁4组间无显著性差异。男性5-^mC含量的均值（3.5％±0．005％）稍低于女性（3．32％±0．006％），但差异无统计学意义。结论5-^mC的含量随着年龄的增长呈下降趋势，但其下降程度很小。

HPLC及LC-MS法测定全血中青霉素

青霉素(penicilin G)属于青霉素类杀菌剂药物,极易溶于水,在甲醇、乙醇中溶解,在脂溶性溶剂中不溶解.易吸潮,遇酸、碱或氧化剂等迅速失效,水溶液也易分解.人体肌注后15～30 min血浓度达到高峰值,有60%～90%原形物从肾脏中排出.青霉素毒性很小,人类即使使用大剂量也难以中毒,但是青霉素肌内注射、输液常引起过敏,并导致死亡.……

茶叶中γ-氨基丁酸与L-谷氨酸的HPLC分析方法

以2、4-二硝基氟苯为衍生试剂,以0.05mol/L乙酸钠缓冲液(pH=6.5,含10mL/LN,N-二甲基甲酰胺)和体积分数50%乙腈为流动相,建立了茶叶中γ-氨基丁酸与L-谷氨酸的HPLC分析方法。结果表明:γ-氨基丁酸与L-谷氨酸浓度在0.03～2.0mmol/L内,峰面积与浓度之间有良好的线性关系,相关系数R2均为1。各样品γ-氨基丁酸、L-谷氨酸含量RSD(%)分别为0.91%～2.01%和0.94%～1.91%,加标回收率分别为95.82%～99.33%和95.83%～99.88%。

HPLC—ELSD法同时测定马铃薯中α-茄碱和α-卡茄碱含量

建立高效液相色谱—蒸发光散射检测（HPLC—ELSD）同时测定马铃薯中α-茄碱和α-卡茄碱的方法,并对不同样品含量进行测定。结果表明：当ELSD漂移管温度98℃,雾化管温度30℃,载气压力6.90kPa时,以0.1%三氟乙酸水—乙腈为流动相,经梯度洗脱程度,α-茄碱和α-卡茄碱可获得良好分离,色谱峰柱效高。样品用质量100倍的1%甲酸甲醇为提取溶剂在70℃下提取90min,提取液直接注入色谱仪进行检测。α-茄碱标准品在0.196-9.800μg线性关系良好（R2=0.999 5）,平均回收率为99.4%,并以该标准曲线同时计算样品中的α-茄碱和α-卡茄碱的含量。马铃薯植物的不同部位均含有生物碱,α-茄碱的含量为0.13-1.59mg/g,α-卡茄碱的含量为0.39-8.28 mg/g;两种生物碱总量为0.52-9.37mg/g,同一部位中α-卡茄碱的含量为α-茄碱的1.2-7.6倍。

HPLC法测定冠脉宁片(胶囊)中11-羰基-β-乙酰乳香酸及松香酸检查

目的 建立HPLC法测定冠脉宁片（胶囊）（乳香、没药、血竭等）中11-羰基-β-乙酰乳香酸和掺伪物松香中松香酸的含有量.方法 冠脉宁片（胶囊）和松香的乙醇提取物的分析采用Agilent TC-C18 （4.6 mm×150 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈-0.1％甲酸（75∶25）为流动相;检测波长为251 nm（11-羰基-β-乙酰乳香酸）,241 nm（松香酸）.同时采用液-质联用方法对松香酸进一步确证.结果 松香酸的检出限为0.3 μg/mL;松香酸和11-羰基-β-乙酰乳香酸线性范围分别为3.036 ～ 303.6 μg/mL和3.068～306.8 μg,/mL; 11-羰基-β-乙酰乳香酸和松香酸回收率分别为98.16％和104.22％.结论 本研究建立的HPLC方法可用于冠脉宁片（胶囊）中11-羰基-β-乙酰乳香酸的测定及掺伪松香中松香酸的检查.

喜树果中喜树碱和10-羟基喜树碱的HPLC分析

目的:建立测定喜树果中喜树碱和10-羟基喜树碱的反相高效液相色谱法,并用该方法测定9个产地喜树果中喜树碱和10-羟基喜树碱的含量。方法:以Hypersil ODS(250 mm×4.0 mm,5.0 μm)为色谱柱;流动相A为水,B为甲醇;梯度洗脱:在0 min到40 min内流动相由A—B(60:40)到A—B(30:70);流速为1.0 mL·min^(-1);检测波长为254 nm;柱温为25℃。结果:喜树碱在0.10—1.00μg范围内线性关系良好,其低、中、高3个量的平均加样回收率分别为99.66%,100.3%,99.97%;RSD分别为0.57%,0.25%,0.43%。10-羟基喜树碱在0.30-4.00μg范围内线性关系良好,其低、中、高3个量的平均加样回收率分别为99.87%,99.98%,100.4%;RSD分别为0.32%,0.19%,0.34%。结论:该方法是一种灵敏、准确的分析法。

HPLC测定静脉给药后大鼠血清中5-氟尿嘧啶的含量

目的 建立HPLC用于测定微量 (5 0 μL)血清样品中 5 氟尿嘧啶 (5 Fu)的含量。方法 采用 2 5 0mm× 4.6mm (5 μm)C18色谱柱 ,流动相 5 %甲醇 ,流速 0 .7mL·min-1,紫外检测波长 2 70nm ,内标为对氨基苯甲酸。结果 本方法最低检测浓度为 2 0ng·mL-1,线性范围是 0 .1～ 5 0 μg·mL-1,日内和日间RSD分别是 2 .2 2 %～ 3.81% (n =4)和 2 .42 %～ 3.19% (n =4) ,萃取率为 90 .2 1%～ 95 .6 9%。用本方法成功地测定了大鼠在静脉给药后 5 Fu的时量曲线 ,并计算了药动学参数。结论 本方法简便、快速、灵敏度高、重现性好 ,可适用于 5 氟尿嘧啶的血药浓度测定和药动学的研究。

HPLC法同时测定香加皮中杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛

[目的]同时测定香加皮中杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛的含量。[方法]采用HPLC法,ODS色谱柱,流动相为乙腈∶水=27∶73,检测波长220nm。[结果]杠柳毒苷线性范围0.05～1.6μg,r=0.9994;4-甲氧基水杨醛线性范围0.23～7.4μg,r=0.9993;杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛的精密度分别为1.2%、3.0%,重现性分别为1.4%、2.8%,加样回收率分别为100.2%、99.8%。[结论]本法简便、准确,可同时测定香加皮中的杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛。

HPLC法测定牛乳中5-羟甲基糠醛的含量

采用HPLC法测定牛乳中5-HMF含量,5-HMF的回收率可达到91.7%。在不同加工工艺乳制品中,UHT低乳糖奶中5-HMF含量为4.733μg/mL,分别是巴氏杀菌奶和UHT保鲜奶的19倍和10倍。

菠萝叶中1,3-二氧咖啡酰甘油酯HPLC测定方法的建立

目的:建立新化合物1,3-二氧咖啡酰甘油酯HPLC测定方法,测定菠萝叶中1,3-二氧咖啡酰甘油酯的含量。方法:采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)进行分离,流动相磷酸溶液(0.1%)-乙腈(75∶25),流速1.0 mL.min-1,柱温30℃。结果:1,3-二氧咖啡酰甘油酯与其他组分分离效果较好,在0.051 6μg^0.516μg具有良好的线性(r=0.999 9),平均回收率为97.1%(RSD 1.3%)。经测定3批菠萝叶中1,3-二氧咖啡酰甘油酯的平均质量分数分别为0.033%,0.034%,0.031%。结论:该分析方法具有较好的分离效果以及很高的回收率和重复性,可以用于菠萝叶中1,3-二氧咖啡酰甘油酯的含量分析及质量控制。

HPLC-MS法检测利培酮与9-羟利培酮的血浆浓度及在临床药动学的应用

目的:建立 HPLC-MS 法测定利培酮及其代谢物9-羟利培酮的血浆浓度,以研究其在华人女性精神病人体内的药动学。方法:24名华人女性精神分裂症患者,口服多剂量的利培酮片,在设计的时间点取静脉血;分取血浆0.5mL,经0.1mol·L^(-1)氢氧化钠溶液0.1mL 碱化和5.0mL 乙醚萃取处理;采用 MACHEREY-NAGEL C_(18)反相色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-30mmol·L^(-1)醋酸铵和1.7mmol·L^(-1)甲酸(85:15)流动相,HPLC-MS 内标(喹硫平,[MH]^+,m/z=384)选择性正离子检测法测定利培酮([MH]^+,m/z=411)和9-羟利培酮([MH]^+,m/z=427)的血浆浓度。结果:利培酮在0.5～200μg·L^(-1),9-羟利培酮在5～250μg·L^(-1)浓度范围内线性关系良好(r=0.9905及 r=0.9926),最低检测浓度为0.5μg·L^(-1)。萃取回收率均大于78.4%,方法回收率均大于90%,日内与日间的相对标准偏差均小于14.2%。24例精神分裂症患者多剂量服用4mg 利培酮片后利培酮及其代谢物9-羟利培酮的主要药动学参数如下:达峰时间 t_(max)分别为(1.7±0.99),(2.3±0.74)h;半衰期 t_(1/2)分别为(3.1±1.4),(25.3±8.1)h;稳态最高血药浓度 C_(max)^(SS)分别为(84.8±54.5),(145.7±41.1)μg·L^(-1);稳态最低血药浓度 C_(mm)^(SS)分别为(13.6±17.5),(79.5±23.7)μg·L^(-1);平均稳态血药浓度 C_(av)^(SS)分别为(30.5±26.5),(136.8±37.2)μg·L^(-1)。利培酬的 C_(0→12)^(SS)为(451.8±404.3)μg·h·L^(-1);9-羟利培酮的 C_(0→48)^(SS)为(3986.2±1175.8)μg·h·L^(-1);C_(0→∞)^(SS)分别为(482.1±418.8),(5511.6±1975.5)μg·h·L^(-1);消除速率常数 K_e 分别为(1.6±0.9),(2.6±0.8)h^(-1);利培酮的表观清除率 CL/F 和表观分布容积 V/F 分别为(88.9±62.1)L·h^(-1)和(361.4±282.3)L。结论:该方法简便快速和可靠,适用于利培酮和9-羟利培酮的临床药动学研究。

OPA柱前自动衍生-紫外检测米胚芽中的γ-氨基丁酸的HPLC法研究

研究了OPA柱前自动衍生 紫外检测米胚芽中的γ 氨基丁酸的HPLC法 ,在最适的条件下 ,γ 氨基丁酸的线性范围为 10～ 2 5 0mg/L ,r =0 9999,RSD小于 1 2 % ,回收率为98 7%～ 10 1 2 %。通过富集 ,米胚芽中的GABA含量由 0 3 0 1mg/g提高到 4 3 9mg/g。