HPLC及LC-MS测定榛子中氯吡苯脲和多菌灵残留

本文采用高效液相色谱法(HPLC)和液相色谱-质谱法(LC-MS)对干果榛子中氯吡苯脲和多菌灵残留量进行含量测定.HPLC和LC-MS均使用C18色谱柱,含量测定采取等度洗脱,流动相:甲醇-水(55∶45,体积比);体积流量:1.0 mL·min-1;测定波长:260 nm;柱温:30℃.LC-MS采取电喷雾离子源,梯度洗脱,体积流量:0.6 mL·min-1,柱温:30℃.结果表明,榛子中氯吡苯脲与多菌灵存在残留,氯吡苯脲质量浓度在1.00~10.00μg·mL-1范围内线性关系良好,加样回收率在95.58%~100.58%;多菌灵质量浓度在1.005~15.075μg·mL-1范围内具有良好的线性关系,加样回收率在95.61%~104.39%.实验证明,HPLC与LC-MS相结合的方法具有操作简便、灵敏度高、检出限低等优点,能有效地检测到榛子样品中膨大剂氯吡苯脲及杀菌剂多菌灵的残留,并确定其残留量,线性关系和回收率结果均令人满意.根据被检测的8批样品中氯吡苯脲和多菌灵两项农药残留量推断,作为一般干果食用榛子是安全的.

HPLC与紫外-可见分光光度法对翻白草中黄酮类成分含量测定

目的 建立测定翻白草中黄酮类成分含量的最佳方法。方法 先建立高效液相色谱法(HPLC)测定翻白草中的4种黄酮类物质含量的方法,其中流动相为乙腈与0.1%甲酸溶液,并采用梯度洗脱,柱温设为30℃,色谱柱为InertSustain C18(150 mm×4.6 mm, 5μm),检测波长设为360 nm,并对不同批次的翻白草中的4种黄酮类物质含量进行检测;选取芦丁作为对照品,以UV-VIS法测定翻白草中总黄酮含量。结果 不同产地的翻白草含有的黄酮类成分含量差异较大,总黄酮含量的差异也较大,建立的HPLC法与紫外-可见分光光变法(UV-VIS)法具有很好地重复性,样品稳定性好,且仪器精密度高,两种检测方法相结合能很好的把控翻白草品质。结论 以UV-VIS法对翻白草中的总黄酮进行测定,并采用HPLC法测定翻白草中含有的槲皮苷、芦丁、山柰酚和槲皮素,方法较为简便,且有很好的重复性、稳定性,精密度高,能很好地控制翻白草的品质,并为临床研究及其药理活性研究提供依据。

HPLC-PDA法测定黄芪多糖注射液中非法添加利巴韦林的试验

为了快速检测黄芪多糖注射液中非法添加的化学物质,本试验建立了黄芪多糖注射液中非法添加抗病毒药利巴韦林的高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-PDA)检测方法。色谱条件:氢型阳离子交换树脂,碘化交联的苯乙烯-二乙烯基共聚物为填充剂,以水(用硫酸调节pH值至2.5±0.1)为流动相;流速为0.3mL/min;采用二极管阵列检测器,采集波长范围为200nm～400nm,分辨率为1.2nm,记录207nm波长处的色谱图;进样量20μL。理论板数按利巴韦林峰计算应不低于3 000。结果显示,利巴韦林平均回收率100.3%;线性方程为y=46 083x+106,相关系数R2=0.999 9。本文建立的测定方法简便、灵敏、准确、快速、重现性好,可对黄芪多糖注射液中非法添加的利巴韦林违禁药物进行定性和定量检测。

HPLC-PDA-MS快速测定“染红食品”中苏丹红残留量方法的研究

[目的]建立“染红食品”中苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ残留量的高效液相色谱(HPLC)初筛、质谱确认分析方法。[方法]以Merck RP-18柱为分析柱,流动相:乙腈∶水=90∶10,Waters-2996二极管矩阵检测器(PDA)和FinniganLCQ Deca XP MAX质谱仪为检测器。[结果]回归方程和相关系数为:苏丹红Ⅰ:y=0.163104x+0.019217,r=0.99993;苏丹红Ⅱ:y=0.153674x-0.2212981,r=0.99993;苏丹红Ⅲ:y=0.305919x-5.0810264,r=0.9997;苏丹红Ⅳ:y=0.239273x-5.260669,r=0.9997。平均回收率(%):87.3、83.0、86.7和90.0。[结论]用HPLC-PDA-MS法检测食品中的苏丹红方法简便,重现性好,灵敏度高,定性准确,定量精确。

石墨化碳黑净化柱结合HPLC-PDA和LC-MS/MS快速检测苹果汁中展青霉素

基于石墨化碳黑材料制备了一种固相萃取柱(GCB柱),结合高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-PDA)和液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)评估了GCB柱和4种商业化固相萃取柱(Retain AX PAX、MAX和HLB)的净化效果,并对澄清型苹果汁中影响展青霉素准确定量的杂质进行了分析。结果发现,苹果汁经上述5种净化柱净化后,大大降低了杂质干扰,色谱图、信噪比和基质效应显著改善。其中,GCB净化为HPLC-PDA分析提供了理想的色谱图,为LC-MS/MS分析提供了可接受的基质效应(-14%)、优于HLB净化的色谱图以及与Retain AX净化相当的信噪比。建立的稳定同位素稀释-液相色谱-串联质谱法(SIDA-LC-MS/MS)可以克服基质效应和净化损失对检测结果准确性的影响。采用HPLC-PDA和SIDALC-MS/MS分析时,GCB净化比HLB净化的方法更灵敏;MAX、HLB和GCB净化均能得到较好的回收率(82%~102%)和较小的相对标准偏差(≤9%)。所开发的GCB净化方法仅需上样和洗脱2步,且在重力作用下过柱仅需10 min,比其他固相萃取净化更简单快捷,净化能力良好。实际样品经GCB柱净化和HPLC-PDA、SIDA-LC-MS/MS分别分析,展青霉素的平均含量为34μg·kg-1。GCB柱较好的净化效果和较低的使用成本将有助于其在展青霉素常规检测中的广泛应用。

HPLC-PDA-ESI/MS鉴定芥蓝中脱硫芥子油苷

利用液相色谱-二极管阵列-电喷雾质谱联用(HPLC-PDA-ESI/MS)对芥蓝中脱硫芥子油苷进行鉴定,通过分析各种脱硫芥子油苷在正、负离子两种模式下的质谱特点和PDA图谱特点,由正、离子两种模式下的脱硫芥子油苷离子碎片信息可以推断出芥蓝中含有11种脱硫芥子油苷,其中7种为脂肪族芥子油苷、4种为吲哚族芥子油苷。进一步对PDA图谱分析发现,因结构差异,脂肪族脱硫芥子油苷在220～230nm波长范围内只有一个大的吸收峰,而吲哚族脱硫芥子油苷在220～230nm波长范围内有两个吸收峰。

HPLC-PDA法测定沙棘籽油软胶囊中α-生育酚的含量

目的 建立一种快速简便的沙棘籽油软胶囊中的α-生育酚的HPLC测定方法.方法 样品经回流加热皂化,冰醋酸调PH为6.0～7.0,定容静置后高效液相色谱测定;色谱条件：色谱柱Thermo C18（4.6×250mm,5μm）,流动相：甲醇,流速：1.0mL·min-1.结果 方法线性范围：0.0470～0.2340mg·mL-1,相关系数（r）为0.9990;平均回收率为96.39%,相对标准偏差（RSD）为1.98%.结论 该方法前处理简便、重现性好,适用于保健食品中α-生育酚的含量测定.

枸杞不同部位UV-Vis和HPLC指纹图谱研究

目的采用多维指纹图谱结合化学计量学方法,比较枸杞果实和根皮中黄酮、香豆素类和苯丙酸类等成分的整体差异,并综合多糖和总黄酮的含量比较,为枸杞不同药用部位的价值评估和质量标准的建立提供理论依据。方法建立HPLC指纹图谱进行相似度评价和共有峰确定。化学计量学方法对药材不同部位进行分类研究,建立分类模型,筛选出重要差异性标志物并进行定量分析;紫外-可见光谱(UV-Vis),反映药材化学组成的整体特征;采用2020年版《中华人民共和国药典》苯酚-硫酸法测定枸杞多糖的含量,亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定总黄酮含量。结果HPLC指纹图谱共标定9个共有峰,指认了绿原酸、东莨菪内酯、槲皮素、芦丁4个色谱峰。相似度评价表明果实和根皮整体组成差异较大,地骨皮不同产地之间质量缺乏一致性;正交偏最小二乘法-判别分析找出芦丁是对整体差异性贡献比较大的化学成分;UV-Vis呈现明显的指纹特性;枸杞子中枸杞多糖和总黄酮的含量分别为2.74%~3.79%和1.52%~2.24%,均高于地骨皮中1.92%~2.67%和0.46%~0.58%,且含量分布具有产地差异性。结论综合多指标揭示枸杞果实和根皮中化学成分差异,为枸杞药材的质量评价和资源价值的充分利用提供重要的数据参考。

HPLC法测定1-氟萘中工艺杂质和遗传毒性杂质含量

建立了1-氟萘中的2种工艺杂质和1种遗传毒性杂质含量检测的HPLC方法。采用Phenomenex Gemini色谱柱(C18250×4.6mm,5µm);流动相为10mM碳酸氢钠+6mM三乙胺∶乙腈=55∶45,等度洗脱,采集时间为主峰的2倍保留时间;柱温为40℃;检测波长为220nm;流速为1.0mL/min;进样量为20μL。采用加校正因子的主成分自身对照法对各杂质进行计算,各杂质分离度良好,定量限为0.005~0.008μg/ml,线性关系良好,精密度和高中低三浓度准确度符合要求。实验结果表明该方法专属性强、灵敏度高、操作简便、重复性好、结果准确可靠,可用于1-氟萘中杂质控制。

HPLC测定蜈蚣配方颗粒中3,8-二羟基喹啉的含量

目的建立HPLC法测定蜈蚣配方颗粒中3,8-二羟基喹啉的含量。方法采用Kromasil 100-5 C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以10 mmol/L的磷酸二氢钾溶液-甲醇(68∶32)为流动相,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,检测波长为252 nm。结果HPLC色谱图中阴性对照无干扰;3,8-二羟基喹啉在0.01163~1.395 mg/ml(r=0.9997)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为99.4%(RSD=2.7%)。结论该方法准确、稳定、可行,本文建立的方法经方法学验证可用于评价蜈蚣配方颗粒的质量。

Study on degradation kinetics of epalrestat in aqueous solutions and characterization of its major degradation products under stress degradation conditions by UHPLC-PDA-MS/MS

Drug stability is closely related to drug safety and needs to be considered in the process of drug production,package and storage.To investigate the stability of epalrestat,a carboxylic acid derivative,a reversed-phase high-performance liquid chromatography(RP-HPLC)method was developed in this study and applied to analyzing the degradation kinetics of epalrestat in aqueous solutions in various conditions,such as different pH,temperatures,ionic strengths,oxidation and irradiation.The calibration curve was A=1.6×10^5C–1.3×10^3(r=0.999)with the liner range of 0.5–24μg/mL,the intra-day and inter-day precision was less than 2.0%,as was the repeatibility.The average accuracy for different concentrations was more than 98.5%,indicating that perfect recoveries were achieved.Degradation kinetic parameters such as degradation rate constants(k),activation energy(Ea)and shelf life(t0.9)under different conditions were calculated and discussed.The results indicated that the degradation behavior of epalrestat was pH-dependent and the stability of epalrestat decreased with the rised irradiation and ionic strength;however,it was more stable in neutral and alkaline conditions as well as lower temperatures.The results showed that the degradation kinetics of epalrestat followed first-order reaction kinetics.Furthermore,the degradation products of epalrestat under stress conditions were identified by UHPLC-PDA-MS/MS,with seven degradation products being detected and four of them being tentatively identified.

HPLC-PDA测定不同产地、不同部位明日叶中4-羟基德里辛和黄当归醇的含量

目的建立一种明日叶中4-羟基德里辛和黄当归醇的快速检测方法,测定不同产地、不同部位明日叶中4-羟基德里辛和黄当归醇的含量。方法采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-PDA),硅胶色谱柱Thermo NO.30005-254630(4.6 mm×250 mm,5μm),0.1%甲酸溶液(A)-甲醇(B),梯度洗脱;流速1.0 ml/min,柱温40℃,检测波长370 nm,进样量5μl。结果4-羟基德里辛在4.95~495μg/ml范围内线性关系良好,r^(2)=0.9993;平均回收率为98.4%;最低检出限为2μg/g。黄当归醇在5.65~565μg/ml范围内线性关系良好,r^(2)=0.99988;平均回收率为102.3%,最低检出限为2μg/g。对6个地区18份明日叶样品中功效成分4-羟基德里辛和黄当归醇进行检测。结论此法样品前处理简单,适于明日叶功效组分快速检测。从不同地域看,南方地区明日叶中4-羟基德里辛含量和黄当归醇含量明显较高,但江苏的样品含量明显低。4-羟基德里辛、黄色当归醇主要分布在茎部和根部,以根部含量最高,叶部最低。该研究对明日叶中功效成分提取产业化发展提供了参考依据。

Quantitative estimation of (-)-hinokinin, a trypanosomicidal marker in Piper cubeba, and some of its commercial formulations using HPLC-PDA

The fruits of Piper cubeba have been used in Ayurvedic system of medicine for pain,tastelessness, painful urination and mouth diseases. Among its various chemical constituents,（-）-hinokinin, a trypanosomicidal dibenzylbutyrolactone lignan, is found in significant quantities.For quality evaluation of P. cubeba fruit and its commercial formulations, there is an urgent need to develop an analytical method based on（-）-hinokinin. For this purpose, an HPLC method was developed using photo diode array detector and Waters HR C18 column with gradient elution consisting of water and acetonitrile. The developed method was validated as per ICH-Q2 B guidelines and found to be accurate, precise and linear over a wide range of concentrations（5–300 mg/m L）.（-）-Hinokinin contents were found to be in the range of 0.005–0.109%（m/m） in various P. cubeba samples. The developed method was extended to LC–MS for further identification and characterization of（-）-hinokinin in samples. The developed method is simple,rapid and specific, and can be used as a tool for quality control of P. cubeba fruits and its commercial formulations.

HPLC法测定冠脉宁片(胶囊)中11-羰基-β-乙酰乳香酸及松香酸检查

目的 建立HPLC法测定冠脉宁片（胶囊）（乳香、没药、血竭等）中11-羰基-β-乙酰乳香酸和掺伪物松香中松香酸的含有量.方法 冠脉宁片（胶囊）和松香的乙醇提取物的分析采用Agilent TC-C18 （4.6 mm×150 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈-0.1％甲酸（75∶25）为流动相;检测波长为251 nm（11-羰基-β-乙酰乳香酸）,241 nm（松香酸）.同时采用液-质联用方法对松香酸进一步确证.结果 松香酸的检出限为0.3 μg/mL;松香酸和11-羰基-β-乙酰乳香酸线性范围分别为3.036 ～ 303.6 μg/mL和3.068～306.8 μg,/mL; 11-羰基-β-乙酰乳香酸和松香酸回收率分别为98.16％和104.22％.结论 本研究建立的HPLC方法可用于冠脉宁片（胶囊）中11-羰基-β-乙酰乳香酸的测定及掺伪松香中松香酸的检查.

HPLC测定石菖蒲药材中β-细辛醚、α-细辛醚的含量

目的 :测定石菖蒲药材中 β 细辛醚、α 细辛醚的含量。 方法 :色谱条件 :ODSC18分析柱 ( 15 0mm× 4 .6mm ,5 μm) ,流动相为甲醇 水 ( 6∶4 ) ,10 0 0mL中加入磷酸二氢钾 1.4 g ,十二烷基磺酸钠 1.2 g ,检测波长 2 5 7nm :流速 1.0mL·min-1室温操作。结果 :β 细辛醚、α 细辛醚平均回收率分别为 99.0 2 % (RSD =1.0 3% ) ,10 1.2 6 % (RSD =3.5 7% )。 结论 :方法快速准确 ,样品处理简便 。

茶叶中γ-氨基丁酸与L-谷氨酸的HPLC分析方法

以2、4-二硝基氟苯为衍生试剂,以0.05mol/L乙酸钠缓冲液(pH=6.5,含10mL/LN,N-二甲基甲酰胺)和体积分数50%乙腈为流动相,建立了茶叶中γ-氨基丁酸与L-谷氨酸的HPLC分析方法。结果表明:γ-氨基丁酸与L-谷氨酸浓度在0.03～2.0mmol/L内,峰面积与浓度之间有良好的线性关系,相关系数R2均为1。各样品γ-氨基丁酸、L-谷氨酸含量RSD(%)分别为0.91%～2.01%和0.94%～1.91%,加标回收率分别为95.82%～99.33%和95.83%～99.88%。

HPLC法测定β-榄香烯脂质体药物含量及包封率

目的:建立β-榄香烯脂质体药物含量及包封率测定的 HPLC 法。方法:采用 Diamonsil C_(18)(4.6 mm×200 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(80:20),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长210 nm,柱温25℃,进样量20μL。采用葡聚糖凝胶(Sephadex G-50)柱分离脂质体中游离药物。结果:在本色谱条件下β-榄香烯与辅料及溶剂峰分离良好,β-榄香烯浓度在5.0～60.0μg·mL^(-1)范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9994),精密度试验的 RSD 为1.4%～4.2%(n=5),重复性试验的 RSD 为3.1%(n=5),平均回收率为101.8%(n=15)。结论:该方法简便、易行,可用于β-榄香烯脂质体含量及包封率的测定。

HPLC法检测人外周血5-~mC含量及其与年龄相关性研究

目的探讨人外周血中5-^mC含量随年龄变化的规律。方法94例健康个体（4～87岁，男性50例，女性44例）按年龄分为6组：〈20岁、20～30岁、30～40岁、40～50岁、50～60岁及〉60岁组，用HPLC法对外周血中5种脱氧核苷进行定量分析。结果50～60岁组（平均年龄54．7岁）和〉60岁组（平均年龄71．7岁）间的5-^mC含量差异无显著性，但与其它4组有明显差异（P〈0．0001）；〈20岁、20～30岁、30～40岁和40～50岁4组间无显著性差异。男性5-^mC含量的均值（3.5％±0．005％）稍低于女性（3．32％±0．006％），但差异无统计学意义。结论5-^mC的含量随着年龄的增长呈下降趋势，但其下降程度很小。

HPLC—ELSD法同时测定马铃薯中α-茄碱和α-卡茄碱含量

建立高效液相色谱—蒸发光散射检测（HPLC—ELSD）同时测定马铃薯中α-茄碱和α-卡茄碱的方法,并对不同样品含量进行测定。结果表明：当ELSD漂移管温度98℃,雾化管温度30℃,载气压力6.90kPa时,以0.1%三氟乙酸水—乙腈为流动相,经梯度洗脱程度,α-茄碱和α-卡茄碱可获得良好分离,色谱峰柱效高。样品用质量100倍的1%甲酸甲醇为提取溶剂在70℃下提取90min,提取液直接注入色谱仪进行检测。α-茄碱标准品在0.196-9.800μg线性关系良好（R2=0.999 5）,平均回收率为99.4%,并以该标准曲线同时计算样品中的α-茄碱和α-卡茄碱的含量。马铃薯植物的不同部位均含有生物碱,α-茄碱的含量为0.13-1.59mg/g,α-卡茄碱的含量为0.39-8.28 mg/g;两种生物碱总量为0.52-9.37mg/g,同一部位中α-卡茄碱的含量为α-茄碱的1.2-7.6倍。

喜树果中喜树碱和10-羟基喜树碱的HPLC分析

目的:建立测定喜树果中喜树碱和10-羟基喜树碱的反相高效液相色谱法,并用该方法测定9个产地喜树果中喜树碱和10-羟基喜树碱的含量。方法:以Hypersil ODS(250 mm×4.0 mm,5.0 μm)为色谱柱;流动相A为水,B为甲醇;梯度洗脱:在0 min到40 min内流动相由A—B(60:40)到A—B(30:70);流速为1.0 mL·min^(-1);检测波长为254 nm;柱温为25℃。结果:喜树碱在0.10—1.00μg范围内线性关系良好,其低、中、高3个量的平均加样回收率分别为99.66%,100.3%,99.97%;RSD分别为0.57%,0.25%,0.43%。10-羟基喜树碱在0.30-4.00μg范围内线性关系良好,其低、中、高3个量的平均加样回收率分别为99.87%,99.98%,100.4%;RSD分别为0.32%,0.19%,0.34%。结论:该方法是一种灵敏、准确的分析法。