HPLC-RF法测定激光针刺治疗帕金森病患者尿液中多巴胺浓度

目的 研究经用氦氖激光针刺治疗帕金森病患者针刺前后尿液中多巴胺 (DA)的含量变化 ,尝试建立评价该种传统医学理论、方法与现代技术相结合的全新疗法的客观量化标准。方法 尿液经有机溶剂提取 ,HPLC 荧光检测法。结果 DA在 2 0～ 40 0ng·mL-1范围内与峰高线性关系良好 ,r=0 .9996。方法回收率为 ( 89.6 9± 3.95 ) %～ ( 92 .99± 6 .5 3) %。患者体内DA含量与帕金森病体征紧密相关。未用多巴类药物的患者针刺前DA含量均低于健康人。结论 HPLC RF测定人尿液DA含量的方法 。

HPLC-RF法快速测定水中苯并(a)芘

利用高效液相色谱仪 (HPLC) ,将样品中苯并 (a)芘与其他有机物分离 ,并同荧光分光光度计 (RF)的微流动池相联 ,作荧光测定 ,组成了HPLC -RF测定体系 ,进行饮用水检测。该方法相对标准差为 4 5%～ 7 2 % ,回收率为 86 5%～ 93 5% ,检测限为 0 0 0 0 9μg/L。

HPLC法同时测定参龙通络丸中三七皂苷R_(1)和人参皂苷Rf的含量

目的建立一种可以同时测定参龙通络丸中两种成分(三七皂苷R1、人参皂苷Rf)含量的HPLC法。方法采用高效液相色谱法(HPLC),Hypersil Hypersil BDS C18色谱柱(5μm,4 mm×250 mm),乙腈-水为流动相梯度洗脱;流速1.0 ml/min;检测波长203 nm;柱温35℃,检测参龙通络丸中两种成分的含量。结果三七皂苷R1样品量在0.198~9.535μg范围(r=0.9993)、人参皂苷Rf的样品量在0.957~38.392μg范围(r=0.9997)线性关系良好,两种成分的平均回收率分别为99.10%(RSD=1.57%,n=6)和98.76%(RSD=2.13%,n=6)。结论本方法具有结果准确、可靠、重复性好的特点,可为参龙通络丸的质量标准制定提供科学依据。

HPLC法同时测定制马钱子中4种生物碱类成分的含量

目的:建立HPLC法制测定马钱子中4种生物碱类成分——马钱子碱、士的宁、马钱子碱氮氧化物、士的宁氮氧化物的含量。方法:采用C18柱,流动相乙腈(A),0.2%乙酸-0.2%三乙胺(B)梯度洗脱;流量:1 mL.min-1;检测波长为254 nm;柱温:30℃;进样体积:10μL。结果:4种生物碱类成分得到良好分离,平均加样回收率:马钱子碱、士的宁、马钱子碱氮氧化物,士的宁氮氧化物分别为:100.1%、100.0%、99.8%、99.8%;RSD分别为1.17%、1.19%、1.21%、1.21%。结论:本方法结果准确,便于操作,为马钱子的质量控制提供参考。

柱前衍生-反相高效液相色谱法测定钢铁及合金中铌

建立了反相液相色谱法测定钢铁及合金中铌的分析方法。采用HNO3 HF H2 SO4 溶解样品 ,用酒石酸络合铌 ,以 2 (5 溴 2 吡啶偶氮 ) 5 二乙基氨基酚为柱前衍生试剂 ,在C18柱上用甲醇 水 (体积比为 5 6∶4 4 )为流动相 ,其中含 0 .0 1mol·L- 1pH为 3.5的HOAc NaOAc缓冲液。在60 0nm处测定了铌的配合物 ,方法检出限为 1.5 μg·g- 1。应用此法直接测定了合金铸铁和中低合金钢样品中铌 ,其加标回收率为 96.8%～ 10 3.2 %

人参皂苷Rf的分离提纯

以人参根须为原料,采用甲醇浸提法提取人参根须中总皂苷,再用硅胶柱层析法对总皂苷进行分离,得到较纯净的人参皂苷单体Rf。结果表明,500 g人参根须中提取得到总皂苷20.5 g,提取率为4.10%。总皂苷中主要含Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd等成分。20.5 g人参根须总皂苷经硅胶柱层析法分离,得到较纯人参皂苷单体Rf 0.410 g,在总皂苷中的得率为2.00%,在人参根须中得率为0.082%。高效液相色谱法检测分离得到的人参皂苷单体Rf的纯度较高,为93.0%。

芹菜提取物中芹菜素的HPLC与HPTLC定量分析研究

通过采用高效液相色谱(HPLC)、紫外光谱和黄酮颜色特征反应对芹菜提取物主要成分芹菜素进行定性鉴定,同时建立定量测量芹菜素的高效薄层色谱(HPTLC)方法。结果表明:芹菜提取物的主要成分是黄酮醇-芹菜素,与芹菜素标准品具有相同的光谱和色谱性质;采用G60高效硅胶板,以氯仿-甲醇-水(18:2.3:0.35)为展开剂,芹菜素标样与试样有相同的Rf值为0.65;用最小二乘法作线性回归,芹菜素含量与斑点峰面积的标准曲线回归方程:y=15138x+7594.8,R2=0.993,线性范围:0.332～0.996μg/斑点。精密度实验RSD(n=5)=1.33%,平均回收率97.82%。

注射用苦碟子HPLC数字化指纹图谱研究

目的:建立注射用苦碟子HPLC数字化指纹图谱,为注射用苦碟子质量控制提供依据。方法:采用反相HPLC法分析注射用苦碟子水溶液,以Century SIL BDS柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为1%醋酸水-1%醋酸乙腈低压梯度洗脱,检测波长265nm,柱温(30±0.15)℃,进样量20μL。用"中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0"软件计算不同批次的注射用苦碟子HPLC指纹图谱的色谱指纹图谱指数F和色谱指纹图分离量指数RF等42个参数进行潜信息特征数字化评价。以双参照物体系结合定量结构-性质相关(QSPR)原理标定指纹峰的表观分子量、峰位、洗脱动量数δ、折合相对积分φ。结果:以咖啡酸峰为参照物峰,确定21个共有峰,建立了注射用苦碟子HPLC数字化指纹图谱,获得了判别注射用苦碟子质量的重要数字化信息。以双定性双定量相似度法评价注射用苦碟子批间质量稳定。结论:所建立HPLC数字化指纹图谱具有较好的精密度和重现性,适用于注射用苦碟子的质量控制。数字化指纹图谱是数字中药的核心技术,双定性双定量相似度法是宏观定性定量评价中药质量的最准确和最佳技术。

奶瓶中双酚A、烷基酚及烷基酚聚氧乙烯醚残留量的高效液相色谱-荧光测定法

建立了奶瓶中双酚A、烷基酚及烷基酚聚氧乙烯醚残留量的高效液相色谱-荧光测定方法。样品用二氯甲烷-甲醇提取后,采用高效液相色谱分离,荧光检测器检测。BPA、OP、NP、OPEO在0.05～1.0μg/mL,NPEO在0.2～1.0μg/mL范围呈线性。对奶瓶样品作添加回收试验,各种成分的平均回收率在81.1%～100.3%之间,相对标准偏差在2.7%～5.5%之间。方法检出限:BPA为1mg/kg;OP、NP、OPEO为2mg/kg;NPEO为5mg/kg。结果表明,该法简便、灵敏、精确度高,适用于奶瓶中双酚A、烷基酚及烷基酚聚氧乙烯醚的残留分析。

HPLC-RF测定小鼠肝微粒体中CYP2A5的酶活性

目的以香豆素为探针底物建立测定小鼠肝微粒体中CYP2A5酶活性的方法。方法用Waters Symmetry C18柱;流动相为0.1%醋酸-乙腈=70∶30;流速为1.0 mL·min-1,柱温30℃,E x=340 nm,E m=458 nm。香豆素与小鼠肝微粒体在37℃孵育20 min,加入含内标的冰乙腈终止,4℃、12000 r·min-1离心15 min,取上清液,用HPLC测定其代谢产物7-羟基香豆素的含量,以GraphPad Prism 5.0作图计算酶动力学参数。结果 7-羟基香豆素与内标两者分离良好。7-羟基香豆素的检测限为2 nmol·L-1(S/N≥3),线性范围为8～800nmol·L-1。日内日间精密度RSD小于5%,回收率为91.3%～101.4%。香豆素羟化反应的K m为2.15μmol·L-1;V max为9.74 pmol·(min·mg protein)-1。结论该方法稳定可靠,灵敏度高,适于体外CYP2A5酶活性的测定。

松果菊苷对脑缺血大鼠纹状体细胞外液中氨基酸水平的影响

目的研究松果菊苷(ECH)对急性脑缺血大鼠纹状体细胞外液中4种氨基酸水平和脑梗死率的影响,以探讨ECH对脑神经保护作用的可能机制。方法 SD大鼠随机分为假手术对照组、模型组、阳性药川芎嗪组(CXQ,40 mg.kg-1)、ECH高剂量(ECH 40 mg.kg-1)组、ECH低剂量(ECH 20mg.kg-1)组和ECH配伍冰片(ECH 40 mg.kg-1,冰片400mg.kg-1)组。各组大鼠给予相应的药物或者生理盐水腹腔注射,每天1次,连续7 d。在给药d 3,脑纹状体埋置探针套管,末次给药1 h后,制作大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),模型成功后立刻进行微透析。将透析液注入高效液相-荧光检测器(HPLC-RF),此方法较氨基酸分析仪相比较,具有最低检测限低等特点,检测各组纹状体细胞外液中天门冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(GABA)的含量。结果与假手术对照组相比,模型组的Asp、Glu、Gly、GABA水平均明显升高;ECH给药组与模型组相比,ECH高剂量组能明显降低Asp、Glu的水平,而ECH低剂量组与ECH配伍冰片组Asp、Glu降低均不明显;ECH高、低组与配伍冰片组对Gly、GABA的影响均不明显;与模型组相比,ECH高、低剂量组能明显地缩小脑梗死面积。结论 ECH对脑神经的保护作用可能与对抗脑缺血后兴奋性氨基酸升高有关。

马钱子炮制前后士的宁及马钱子碱氮氧化物的含量变化研究

目的:用RF-HPLC法测定并考察马钱子炮制前后士的宁及马钱子碱氮氧化物的含量变化。方法:Lichrospher C18柱(4.6mm×150mm,5μm),以乙腈(A):0.2%乙酸-0.2%三乙胺(B)为流动相,采用梯度洗脱的方法(0min:8∶92;10min:91.5∶8.5;30min:79∶21;60min:40∶60),流速为1mL/min,检测波长为254nm。结果:经炮制以后,士的宁氮氧化物由0.0033上升到0.0044,上升率为133%,马钱子碱氮氧化物由0.0025上升到0.0033,上升率为132%。结论:马钱子经砂烫后,士的宁及马钱子碱氮氧化物的含量有所增加,实验结果为制定马钱子饮片的质量标准提供了一定依据。

青霉素G酶促裂解液的高效液相色谱分析

建立了用反相高效液相色谱测定青霉素Ｇ酶促裂解产物的方法。以与分离程度和分析时间有关的ＣＲＦ为目标函数，用改进的单纯形法对流动相进行优化选择。结果表明本法快速、准确、简便。

参麦注射液中有效成分的含量测定

目的：测定参麦注射液中主要有效成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf和人参皂苷Rb1的含量。方法：采用高效液相色谱法进行梯度洗脱,色谱柱为BDS Hypersil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5.0μm）,流动相为乙腈：水=25：75（0~40 min）,35：65（40~70 min）,检测波长为210 nm,进样量为15μL,流速为1.0 m L/min,柱温为35℃。结果：人参皂苷Rg1在0.3985~3.985μg（r=0.9998）、人参皂苷Re在0.4104~4.104μg（r=0.9997）、人参皂苷Rf在0.2998~2.998μg（r=0.9998）、人参皂苷Rb1在0.6042~6.042μg（r=0.9998）范围内具有稳定的线性关系;平均回收率分别为96.97%、98.47%、96.62%、98.55%（n=6）,RSD值分别为1.36%、1.22%、1.54%、1.67%。结论：高效液相色谱法用于参麦注射液有效成分的含量测定中,方法简单可靠,重复性好,含量测定准确,灵敏度高,可以作为参麦注射液含量测定和质量控制的方法之一。

不同生长年限的人参中8种主要皂苷成分的分析研究

目的:应用反相高效液相色谱法比较不同生长年限的人参中主要皂苷类成分的差异,探讨评价园参、移山参和山参药用质量的理化指标。方法:收集并鉴定了不同生长年限(2-25年)和不同药用部位(主根、须根和芦头)的园参、移山参和山参样品共42份,应用等度和梯度淋洗2种RP-HPLC法对所有样品中的人参皂苷Rg1,Re,Rb1,Rf,Rc,Rh1,Rd2,Rd 8种成分进行鉴别或含量测定。色谱条件1:Supelco ODS-C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.05%磷酸溶液(99:400,pH 2.6);流速1.0 mL·min-1;柱温:35℃;检测波长:203nm。色谱条件2:HIQ Sil-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:A为乙腈,B为0.2%磷酸溶液(pH 1.9):梯度淋洗程序:,115-120 min A-B保持不变;流速1.0 mL·min-1;柱温:35℃;检测波长:203。结果:得到人参不同生长年限或不同药用部位的样品中主要皂苷(包括Rg。,Re,Rb。,Rf,Rh1,Rc,:Rb2,Rd)的液相色谱图,同时测定了Rg1,Re,Rb1,Rf,Rc,Rh1的含量。结论:园参、移山参和山参主根中均含有8种皂苷类成分。随生长年限增长,园参主根中Rg1,Re,Rb1,Rf,Rc,Rh1含量变化不甚明显;移山参和山参主根中Rg1,Re,Rb1,Rf,Rc,Rh1含量变动较为明显。人参不同药用部位8种人参皂苷的含量有差别,尤其是Re、Rb1的含量在须根和芦头中较高。单支人参中,8种皂苷类成分的含量高低及比例关系与其参须、芦头和主根在整支参中所占比例有关。

高效液相色谱法测定蜂王浆中链霉素残留

本文对蜂王浆中链霉素残留的HPLC-RF检测方法进行了研究,结果发现,所采用的预处理方法能有效排除蜂王浆中的杂质干扰,回收率在74.7%～95.3%之间,方法灵敏度达到了5μg/kg,远低于残留限量。该方法稳定性、准确性好,成本低廉,有望成为蜂王浆质量控制的理想检测方法。

高速电力线载波和微功率无线双模 通信在配电台区的应用

配电物联网的快速发展对配电领域的通信技术提出了更高的要求,文章通过分析配电台区中不同层级设备的通信现状和通信需求,基于“台区智能终端+物联网通信单元”技术架构提出了高速电力线载波和微功率无线双模通信在配电台区的应用方案,实现了为提高通信质量所采用的双模组网、IP化和中继等关键技术,并通过试点台区实际应用验证了双模通信技术方案的可靠性和优越性。

高效液相色谱法研究透析法制备的胸腺多肽组分

反相高效液相色谱法按选定的色谱条件，对透析法制备的胸腺多肽与市售胸腺肽（素）等９个样品进行了色谱分离，并测定了各组分的峰归一面积，采用两个流动相体系与美国的ＴｈｙｍｕｓＦａｃｔｏｒ（ＴＦ）进行了组分分离比较。结果表明，胸腺多肽的组成组分及各组分的相对百分含量均不同于国产胸腺肽（素）等９个制品，也不同于美国的ＴＦ制品，它是另一种胸腺激素制剂。

康艾注射液色谱指纹图谱的建立及对照图谱的制定

目的应用高效液相色谱法(HPLC)建立康艾注射液指纹图谱。方法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Agilent XBD,柱长为150 mm,柱内径为4.6 mm,粒径5μm),以乙腈为流动相A,以水为流动相B,梯度洗脱,柱温为30℃,流速为0.8 mL/min,检测波长为205 nm。理论板数按人参皂苷Rf峰计算,应不低于200 000。结果建立了康艾注射液的HPLC指纹图谱,并确定了16个共有峰,共有峰的参数符合中药注射剂指纹图谱技术要求的有关规定。结论该方法准确可靠,为康艾注射液的质量控制提供了依据。

丹桃合剂中芍药苷的鉴别和含量测定方法学研究

目的：研究丹桃合剂中芍药苷的鉴别和含量测定方法。方法采用薄层色谱法鉴定芍药苷比较水饱和正丁醇提取和过DA201型大孔树脂柱提取的提取纯化效果；采用RP－HPLC法以乙腈－0．05％磷酸溶液（11∶89）为流动相，230nm为检测波长测芍药苷含量比较水饱和正丁醇提取和甲醇提取的提取效果。结果不管是TLC法，还是RP－HPLC法，水饱和正丁醇提取法的效果更好。 TLC法主斑点清晰、比移值好、杂质干扰少；RP－HPLC法芍药苷对照品进样量在0．0587～1．1731ug范围内线性关系良好（r＝0．9996），平均加样回收率为93．63％，RSD 为2．09％（n ＝9），阴性无干扰。结论水饱和正丁醇提取法方法简便、准确、可靠，能够有效的控制丹桃合剂中芍药苷的含量。