高效液相色谱-库伦阵列电化学法测定大鼠血浆中克拉霉素的浓度

目的:建立大鼠血浆中克拉霉素浓度的高效液相色谱-电化学检测(HPLC-ECD)方法。方法:采用 Nova-Pak C_(18)色谱柱(150 mm×3.9 mm,5μm)色谱柱;以0.085 mol·L^(-1)磷酸二氢钾-乙腈(1:1)为流动相,pH 7.1;流速1 mL·min^(-1);柱温为30℃;库伦阵列电化学检测器的工作电位为860 mV。结果:血浆中克拉霉素检测方法的线性范围为0.1～8μg·mL^(-1),检出限可达50 ng·mL^(-1);血浆中克拉霉素的方法回收率(n=5)为90.2%～95.7%,提取回收率(n=5)为88.7%～91.5%;日内 RSD≤3.3%,日间 RSD≤5.2%。结论:本法灵敏、准确,可用于克拉霉素的药代动力学研究。

不同方法检测微囊藻毒素-LR致DNA氧化损伤

目的观察微囊藻毒素-LR(MCLR)对人肝癌细胞HepG2的DNA氧化损伤效应。方法应用高效液相色谱-电化学法(HPLC-ECD)和免疫酶染色法检测8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平。结果用HPLC-ECD法分析,低、中剂量组8-OHdG水平显略有增高趋势,高剂量组(100μmol/L)8-OHdG水平显著高于空白对照组;用免疫酶染色法分析,各剂量组8-OHdG染色强度明显高于空白对照组,处理剂量与8-OHdG水平之间呈现剂量-反应关系。结论MCLR引起人肝癌细胞DNA氧化损伤,HPLC-ECD法与免疫酶染色法所测损伤的趋势一致。免疫酶染色法能够更灵敏地检测DNA氧化损伤,可应用于人类疾病研究与环境监测。

高效液相-电化学法测定大鼠血浆中单胺类神经递质及其代谢产物

目的:建立高效液相色谱-库仑阵列电化学法测定大鼠血浆中的单胺类神经递质及其代谢产物含量的分析方法。方法:采用Agilent公司的1200型高效液相色谱仪和ESA公司库仑2通道电化学检测器,以3,4二羟基苄胺(DHBA)为内标,测定大鼠血浆中的肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、高香草酸(HVA)和5-羟色胺(5-HT)的含量。色谱柱:Zorbax Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm),加EasyGuard预柱;流动相:含一水合柠檬酸80 mmol.L-1,柠檬酸三钠73.4 mmol.L-1,1-辛烷磺酸钠0.12 mmol.L-1,乙二胺四乙酸二钠0.1 mmol.L-1,18%甲醇的混合溶液,pH4.3;流速:1.0mL.min-1;柱温:25℃;进样量:10μL;测定电极电势:-150 mv和400 mv。结果:NE、E、DA、HVA和5-HT的最低检测浓度分别为2.0,3.0,5.4,5.2,11.1 ng.mL-1;平均回收率分别为99.72%、85.33%、83.15%、120.43%、103.56%;日内(n=6)和日间(n=3)精密度RSD小于9.12%。结论:本方法操作简便、准确、快速、灵敏度高。可用于大鼠血浆中相关单胺类神经递质的检测和研究。