RP-HPLC荧光检测法同时测定血浆中的盐酸维拉帕米和活性代谢物去甲维拉帕米的浓度

目的 研究建立同时测定盐酸维拉帕米 (Ver)和活性代谢物去甲维拉帕米 (Nor)血药浓度的方法。方法 应用反相高效液相 荧光检测色谱法 ,采用加洛帕米 (Gal)作内标 ,流动相组成为醋酸钠缓冲液 (pH =3.0 ,0 .0 1mol·L-1) 乙腈 三乙胺 (70∶35∶0 .4) ,荧光检测波长λex2 75nm ,λem310nm ,血浆样品提取方法采用碱化后有机相间液 液萃取 ,再酸化后反提。结果 Ver,Nor及Gal的色谱峰分离效果好 ,无内源性杂峰及Ver其它代谢产物干扰。结论 本研究建立了一种快速、准确。

HPLC-荧光检测法测定大鼠脑组织中的单胺类神经递质及相关物质

目的采用HPLC-荧光检测方法测定大鼠脑组织中的单胺类递质及相关物质。方法脑组织匀浆用提取液(含0.1mol.L-1HClO4和0.2 mmol.L-1EDTA)提取后进样。色谱柱用Waters Nova-Pak C18(150 mm×3.9 mm,4μm);流动相为甲醇-缓冲液(14:86);流速1.0 ml.min-1;荧光检测波长λEX=280 nm,λEM=330 nm。结果7种单胺类神经递质及相关物质的标准曲线在一定浓度内线性关系良好,方法的加样回收完全,精密度好。结论所建方法简便、快速、准确,可用于脑组织中单胺类神经递质及相关物质的测定。

Determination of Amantadine Residue in Honey by Solid-phase Extraction and High-performance Liquid Chromatography with Pre-column Derivatization and Fluorometric Detection

Amantadine （AMA） is an anti-viral drug used in apiculture to protect honeybee against the sacbrood virus （Morator aetatulae）. This study described a reliable high-performance liquid chromatographic （HPLC） method for analyzing AMA in honey using a solid-phase extraction （SPE） cartridge （Plexa PCX） for purification, 4-fluoro-7- nitro-2,1,3-benzoxadiazole （NBD-F） as a pre-column derivatization agent, and fluorometric detection （λex =470 nm, λem=530 nm）. The chromatographic separation was performed on an XDB C18 column （150×4.6 mm i.d.） using 0.1% trifluoroacetic acid/acetonitrile （35 ; 65, V/V） as the mobile phase at a flow rate of 1.0 mLomin 1 with a run time of 20 min. Under these optimal conditions, a linear relationship was observed in the range of 0.025--1.0μg·mL-1 with a good correlation coefficient （0.998） and low limit of detection （0.0080 μg·g-1）, the recoveries were all above 90%, and the intra-day and inter-day precision （RSD） ranged from 3.4%--5.1%.

高效液相色谱-荧光检测法同时测定体外循环下狗血浆中的阿曲库铵和劳丹碱

建立了测定体外循环下狗血浆中阿曲库铵及其代谢产物劳丹碱的高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FLD)分析方法。使用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱分离,以0.03 mol/L磷酸氢二钾(pH 5.0)-乙腈(72∶28,v/v)为流动相,流速1.0 mL/min。以维拉帕米为内标,样品经二氯甲烷萃取、浓缩后以流动相溶解进样,荧光检测的激发波长和发射波长分别为240和320 nm。结果表明,阿曲库铵和劳丹碱分别在25～5 000μg/L和25～6 000μg/L范围内线性关系良好(r=0.999 0和r=0.998 4);方法回收率在92.1%～109.5%之间;检出限分别为3μg/L和1μg/L;日内和日间精密度(以RSD计)均小于10%;稳定性试验结果显示样品在不同存储条件下的稳定性良好。该方法选择性好,灵敏度高,结果准确,重现性好,可用于阿曲库铵和劳丹碱的血药浓度测定及其药代动力学研究。

梯度洗脱HPLC法测定人血浆中阿昔洛韦的浓度

目的:建立一种快速、灵敏、准确的高效液相色谱测定人血浆中阿昔洛韦浓度的方法。方法:以硫酸沙丁胺醇为内标,采用Shimadzu LC-10AD液相色谱仪,以Shimadzu C_(18)为分析柱(100mm×3mm,3μm),柱温35℃;流动相采用梯度洗脱法,A泵为乙腈,B泵为0.1mol·L^(-1)磷酸溶液,流速为A泵:0.005mL·min^(-1),B泵0.600mL·min^(-1);进样量20μL;荧光检测器:Ex=285nm,Em=370nm。结果:色谱峰分离良好,无干扰。测定数据进行回归,线性方程为:Y=0.001604X+0.02230,r=0.9997。检测范围:20～1500ng·mL^(-1)。结论:本法是一种可靠的、快速灵敏的检测方法,适用于包含阿昔洛韦前体药物的药动学的研究。

反相高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中阿呋唑嗪浓度

目的:建立血浆中阿呋唑嗪的反相高效液相荧光检测方法。方法:采用Shimadzu LC-6高效液相色谱仪,ShimadzuC_(18)柱(150mm×4.6 mm),0.02 mol·L^(-1)磷酸盐缓冲液(pH2.5)-乙腈(40:60)为流动相,激发波长374nm,发射波长378nm,流速:1mL·min^(-1)。结果:血浆中阿呋唑嗪能得到较好的分离,无明显的干扰峰。本方法专属性好,可信度高。最低检测浓度为0.78ng·mL^(-1),最低检测限是39pg,线性范围0.78～50 ng·mL^(-1),标准曲线:Y=8648.7X+767.8(r=0.999,P<0.05),回收率高于70%,日间、日内RSD均在10％以下。结论:符合生物样品的分析要求。

反相高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中坎地沙坦浓度

目的:建立血浆中坎地沙坦的反相高效液相荧光检测方法。方法:采用 Agilent 1100高效液相色谱仪,色谱柱为 AgilentZorbax SB-C_(18)(4.6mm×150mm,5μm);以磷酸缓冲液(含0.1%磷酸,0.15%三乙胺)-乙腈(69:31)为流动相,流速1.0mL·min^(-1);柱温40℃;激发波长254nm,发射波长380nm。以厄贝沙坦作为内标。结果:血浆中坎地沙坦能得到较好的分离,血浆中杂质不干扰测定。坎地沙坦血浆线性范围为2.04～510ng·mL^(-1),标准曲线:Y=0.0048C+0.0006(r=0.9999),检测限为2.04ng·mL^(-1),方法回收率均接近100%。结论:本方法专属性强,灵敏度高,符合生物样品的分析要求。

反相高效液相色谱法测定人卵泡液中异丙酚的药物浓度

目的建立人卵泡液中异丙酚的反相高效液相荧光检测方法。方法采用Agilent1100高效液相色谱仪,色谱柱为Agilent Extend-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇-水(77∶23)为流动相,流速1.0 mL·min-1;荧光检测,激发波长为276nm,发射波长为310 nm,以百里酚作为内标。结果卵泡液中异丙酚与内标百里酚得到较好的分离,卵泡液中内源性杂质不干扰测定。卵泡液中异丙酚的线性范围为0.108～5.4 mg·L-1,标准曲线为A=0.207 4ρ-0.001 2(r=0.999 3),检测限为54μg·L-1,定量限为108μg·L-1。低、中、高3个质量浓度的方法回收率分别为117.9%、101.7%、99.4%;日内RSD分别为4.10%、1.28%、0.20%(n=5);日间RSD分别为4.34%、2.33%、0.61%(n=5)。结论本方法简单、准确;专属性强,灵敏度高,可用于临床药动学研究。