桑叶中1-脱氧野尻霉素的提取及含量对比研究

研究了桑叶中1-脱氧野尻霉素(DNJ)的提取条件,并采用高效液相色谱-紫外检测法测定前期研究筛选出的9种运城市优势桑树品种中的1-脱氧野尻霉素(DNJ)含量。以提取温度、提取功率、提取时间为影响因素,采用单因素试验确定各因素最优水平,并在此基础上进行三因素三水平正交试验优化提取条件,得出最佳提取条件为:提取温度70℃,提取功率350 W,提取时间60 min。在此提取条件下峰分离完好,无拖尾、无连续;1-脱氧野尻霉素在0.1~1.5 mg/mL质量浓度范围内,线性关系良好(R^(2)=0.9989);测得不同品种桑叶中1-脱氧野尻霉素含量有差异,赤红大叶(8-12)中1-脱氧野尻霉素含量最高(1.545 6 mg/g),黄格鲁(8-15)中1-脱氧野尻霉素含量最低(0.112 5 mg/g)。此方法操作简单,适用于桑叶中1-脱氧野尻霉素提取及含量测定。

HPLC法测定1-氟萘中工艺杂质和遗传毒性杂质含量

建立了1-氟萘中的2种工艺杂质和1种遗传毒性杂质含量检测的HPLC方法。采用Phenomenex Gemini色谱柱(C18250×4.6mm,5µm);流动相为10mM碳酸氢钠+6mM三乙胺∶乙腈=55∶45,等度洗脱,采集时间为主峰的2倍保留时间;柱温为40℃;检测波长为220nm;流速为1.0mL/min;进样量为20μL。采用加校正因子的主成分自身对照法对各杂质进行计算,各杂质分离度良好,定量限为0.005~0.008μg/ml,线性关系良好,精密度和高中低三浓度准确度符合要求。实验结果表明该方法专属性强、灵敏度高、操作简便、重复性好、结果准确可靠,可用于1-氟萘中杂质控制。

HPLC-DAD法测定草鱼肉质中的维生素B_(1)和维生素B_(12)的含量

本文建立了高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)同时分离检测草鱼肉质中维生素B_(1)和维生素B_(12)的方法。草鱼样品经过酸消化和酶提取后释放出样品中蛋白结合和磷酸化的维生素B_(1)和维生素B_(12),再经固相萃取净化,结合HPLC-DAD对两种目标物进行检测。考察了高效液相色谱条件中流动相组成对分离效果的影响及固相萃取条件中样品溶液pH和洗脱剂对样品回收率的影响。采用HLB固相萃取柱对草鱼样品进行净化,甲醇/水(v/v=1/1)混合液洗脱维生素B_(1)和维生素B_(12)。色谱流动相分别为85%甲醇和50 mmol/L磷酸二氢钠(pH 3.00,含5 mmol/L己烷磺酸),进行梯度洗脱,柱温为40℃,检测波长为255 nm,进样体积为20µL,维生素B_(1)和B_(12)可在15 min内分离。在最佳分离检测条件下,维生素B_(1)和B_(12)的检出限(S/N=3)为0.21~0.36µg/mL,加标回收率为83.9%~95.1%。本文建立的方法可对草鱼肉质中维生素B_(1)和维生素B_(12)含量进行准确定量。

高效液相色谱质谱法测定葵花籽中黄曲霉毒素B_(1)的测量不确定度评定

本试验采用HPLC-MS/MS法检测葵花籽中黄曲霉毒素B 1的不确定度,研究了不确定的主要来源。结果表明:当葵花籽中黄曲霉毒素B_(1)含量为0.097μg/kg时,扩展不确定度为0.016μg/kg(k=2),不确定度的来源主要是移液定容。

不同炮制方法对巴戟天中耐斯糖和甲基异茜草素-1-甲醚含量的影响

目的挖掘古籍中的经典炮制方法,考察不同炮制方法对巴戟天中耐斯糖和甲基异茜草素-1-甲醚的质量分数的影响。方法采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)和高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)分别测定5种炮制方法巴戟天中耐斯糖和甲基异茜草素-1-甲醚的质量分数。结果不同炮制方法巴戟天中耐斯糖、甲基异茜草素-1-甲醚的质量分数明显不同:耐斯糖,米炒巴戟天>蒸制巴戟天>甘草制巴戟天>盐制巴戟天>古法巴戟天;甲基异茜草素-1-甲醚,盐制巴戟天>甘草制巴戟天>蒸制巴戟天>米炒巴戟天>古法巴戟天。结论不同炮制方法对巴戟天中耐斯糖以及甲基异茜草素-1-甲醚的质量分数影响较大,其中米炒巴戟天的耐斯糖质量分数较高,盐制巴戟天的甲基异茜草素-1-甲醚质量分数较高。

HPLC法测定远志中黄曲霉毒素B1含量的不确定度评定

为评定高效液相色谱法测定远志中黄曲霉毒素B1含量的不确定度,依据国家计量技术规范JJF 1059.1—2012《测量不确定度评定与表示》,对随机选取的6个远志样品,建立数学模型,从标准溶液稀释、样品称量、样品最终定容体积和仪器测定重复性等方面分析不确定度来源,量化不确定度分量,计算合成不确定度和扩展不确定度.实验结果表明远志中黄曲霉毒素B1测定结果合成标准不确定度为0.01639μg/kg,扩展不确定度0.03278μg/kg.不确定度评定结果表明:HPLC法对远志中黄曲霉毒素B1含量的测定数据可靠,远志中黄曲霉毒素B1含量的测量不确定度主要来源于重复性实验、标准曲线的拟合、液相色谱仪的使用.

粮食中维生素B_(1)含量测定的方法学验证

粮食中含有丰富的维生素,本实验对粮食中的维生素B_(1)进行高效液相色谱法测定,并验证了该检测方法的应用效果。结果表明,该方法检出限仪器响应良好,准确度和精密度均符合要求,可以用于粮食中的维生素B_(1)检测。

RP-HPLC测定哈蟆油中1-甲基海因的含量

目的建立哈蟆油中1-甲基海因反相高效液相色谱（RP—HPLC）含量测定方法。方法采用ZORBAX Eclipse XDB—C18柱（4．6mm×150mm，5μm）色谱柱，检测波长为235nm，乙腈-水（10：90）为流动相，流速为0．3mL·min^-1。结果在0．32—1．58μg内峰面积与其浓度呈良好的线性关系（r=0．9999），方法的精密度RSD为0．8％。平均回收率为99.5％，RSD为1．3％。结论测定方法简便快捷、精密度高、准确性好，可以作为哈蟆油中1-甲基海因的测定方法，以控制其原料的质量。

头孢哌酮/舒巴坦(1∶1)在健康成年与老年人的药代动力学

目的研究(1∶1)头孢哌酮(第3代头孢类抗生素)/舒巴坦(β内酰胺酶抑制剂)在成年与老年的药代动力学。方法44名健康受试者(成年:男12人,女12人;老年:男20人)每次静脉给予头孢哌酮和舒巴坦各1g,每日2次,连续给药3天,第4天首次给药后,采集不同时间的血样,分离血清,用HPLC方法分别测定头孢哌酮和舒巴坦的血药浓度。结果舒巴坦:稳态时,成年男性、女性和老年人的CL分别为(30.6±5.2),(29.3±4.3),(13.7±4.9)L·h-1;Vd分别为(49.7±21.2),(58.8±23.1),(28.7±15.7)L;t1/2分别(1.2±0.5),(1.4±0.4),(1.4±0.4)h;Cmax分别(27.9±4.8),(26.5±4.3),(54.7±19.9)mg·L-1;AUC分别(33.7±6.74),(34.7±4.64),(81.8±28.4)mg·h·L-1。头孢哌酮:稳态时,成年男性、女性和老年人的CL分别为(5.7±1.2),(4.8±1.3),(4.2±1.2)L·h-1;Vd分别为(11.7±2.7),(11.7±4.6),(12.8±3.8);t1/2分别为(1.5±0.5),(1.7±0.4),(2.2±0.6)h;Cmax分别为(89.4±10.7),(110.8±24.7),(102.0±15.3)mg·L-1;AUC分别(182.3±49.6),(224.7±60.7),(256.3±72.0)mg·h·L-1。结论成年人和老年人的药代动力学中,舒巴坦存在明显差异;而头孢哌酮的差异不明显;两性间的药代动力学差异不明显。

以分子印迹聚合物为固定相手性拆分1,1′-联-2-萘酚及其衍生物

以(R)-(+)-1,1′-联-2-萘酚为模板分子,4-乙烯基吡啶为功能单体合成了分子印迹聚合物,将其作为高效液相色谱的固定相,研究其手性识别特性。对该固定相的手性拆分的色谱条件进行了优化。实验结果表明,合成的印迹聚合物对(R)-(+)-1,1′-联-2-萘酚具有较强的亲和力和特定的选择性,能有效拆分1,1′-联-2-萘酚对映体,分离因子最高达到12.25。通过优化色谱条件,该分子印迹聚合物还能对与1,1′-联-2-萘酚结构相似的衍生物5,6,7,8,5′,6′,7′,8′-八氢-1,1′-联-2-萘酚和1,1′-联萘-2-氨基-2′-酚进行手性拆分,分离因子分别达到1.51和2.40。

HPLC测定金森脑泰粉针剂中三七皂苷R_1含量

目的 运用 HPL C建立金森脑泰粉针剂中三七皂苷 R1 的含量测定方法。方法 采用 ODS色谱柱 (5 μm,2 5 0 mm× 4.6 m m) ,流动相为甲醇 -水 (5 5∶ 45 ) ,流速 1m L /min,检测波长 :2 0 3 nm。结果 该法回收率 97.0 0 % ,RSD=1.6 0 % (n=5 )。结论 本法操作简便、准确 ,为测定金森脑泰粉针剂中三七皂苷 R1

反相高效液相色谱法测定食品中的苏丹红1号

目的:建立反相高效液相色谱法测定食品中的苏丹红1号的方法.方法:食品中的苏丹红1号经乙醇提取后用反相高效液相色谱一二极管阵列检测器(DAD)测定.结果:该方法线性范围从0.5～1000μg/ml,标准差为0.18,相对标准偏差为0.73%,平均回收率为95.43%,最低检出限为0.2ng,最低检出浓度为0.02 mg/kg.人工合成色素(柠檬黄、日落黄、胭脂红、苋菜红、亮蓝、靛蓝、靛蓝)不干扰其测定.结论:该方法线性范围广、精密度高、准确度好、选择性强,完全能满足食品中苏丹红1号的定性定量分析.

西洋参冠瘿组织培养及其人参皂苷Re和人参皂苷Rg_1的产生

考察了培养基组成、培养时间、接种量、pH值、肌醇浓度等对冠瘿组织生长及其人参皂苷含量的影响 ;用HPLC检测了冠瘿组织中人参皂苷Re和人参皂苷Rg1 的含量。高压纸层析电泳证实 ,根癌农杆菌Ti质粒上的T DNA片段已整合进入植物细胞核基因组中。在考察的 6种培养基中 ,White培养基最适合人参皂苷Rg1 的累积(0 0 95 % ) ,MS培养基最适合人参皂苷Re的累积 (0 194 % )。以MS为基本培养基培养 36d、32d时人参皂苷Re和人参皂苷Rg1 累积含量最高 (分别为 0 14 7%和 0 0 6 1% ) ;接种量为 4g、2g (FW flask) ,有利于人参皂苷Re和人参皂苷Rg1的累积 ;培养基pH 5 8时人参皂苷Re含量最高 (0 184 % ) ,培养基pH 5 6时人参皂苷Rg1 累积量最高 (0 0 5 4 % ) ;肌醇浓度为 0 0 5g L时 ,能促进人参皂苷Re合成 (0 182 % ) ,浓度为 0 30g L时 ,有利于人参皂苷Rg1 累积 (0 0 5 5 % )。

复方益血胶囊中人参皂苷Rg_1定量分析方法研究

目的 :建立复方益血胶囊中人参皂苷Rg1的定量分析方法。方法 :高效液相色谱法 ,采用μBondpackC18柱 ,以乙腈 /水 (2 3 / 77)为流动相 ,流速 1.0ml/min ,检测波长为 2 0 3nm ,柱温 3 0 .0℃ ,灵敏度 :0 .0 2AUFS。结果 :人参皂苷Rg1含量在 0 .3 85～ 4.62 0 μg/ml呈良好的线性关系 ,平均回收率 98.14% ,RSD 1.62 %。 结论 :本法简便、分离及重复性好 ,可作为该产品的质量控制方法。

桑叶中总生物碱和1-脱氧野尻霉素的含量考察

目的建立桑叶中总生物碱和1-脱氧野尻霉素(DNJ)含量的测定方法,并考察不同采摘时间、不同种植基地及药用部位的桑叶药材中总生物碱和DNJ含量。方法采用雷氏盐比色法测定总生物碱含量;应用HPLC-ELSD测定DNJ含量。流动相为乙腈-水(80:20);流速:1.0mL.min-1;柱温30℃;进样量:20μL。漂移管温度55℃;载气(N2)压力:0.15MPa。结果本实验所建立的方法准确、重复性好。不同采摘时间、采摘部位的桑叶中二者含量差异较大,不同种植基地的桑叶中二者含量变化相对较小。结论测定结果表明,桑叶中DNJ和总生物碱的含量与采摘时间、种植基地及药用部位等密切相关,其中采摘季节、部位影响较大。

HPLC荧光检测法同时测定盐酸曲马多及其代谢物M_1血药浓度

目的： 建立一种用高效液相色谱法同时测定盐酸曲马多（ＴＭＤ） 及其主要代谢物Ｍ１ 血药浓度的方法。方法： 以０－０３ ｍｏｌ·Ｌ－ １ 四硼酸钠缓冲液（ 含三乙胺０－５ ％ ， 磷酸调ｐＨ４－０） － 甲醇（６８∶３２） 为流动相， 用ＯＤＳ 柱分析盐酸曲马多及其代谢物Ｍ１ 的血药浓度， 柱温５０ ℃， 阿替洛尔作内标， 荧光检测： 激发波长为２７５ ｎｍ ， 发射波长为３０４ ｎｍ ， 血样处理采用冷冻的二次液－ 液反萃法。结果： 本法中ＴＭＤ 与代谢物Ｍ１ 的线性范围分别为４－５ ～４４６ 和３－１ ～３１２ ｎｇ·ｍ Ｌ－ １ ， 最低检测限分别为２ 和１－５ ｎｇ·ｍ Ｌ－ １ 。回收率均在９５ ％ ～１００－３ ％ 内。结论： 本法同时测定ＴＭＤ 及其代谢物Ｍ１的血药浓度简便易行， 灵敏度高，

反相高效液相色谱法测定骨科洗剂1号方中羟基红花黄色素A的含量

目的:建立以反相高效液相色谱法测定骨科洗剂1号方中羟基红花黄色素A含量的方法。方法:色谱柱为Phenomenex Luna C18,流动相为甲醇-乙腈-0.7%磷酸水溶液(26∶2∶72),流速为1.0ml/min,检测波长为403nm,柱温为30℃。结果:羟基红花黄色素A进样量在0.1044μg～1.2528μg范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为99.08%(RSD=0.52%)。结论:本方法操作简单、准确、专属性强、灵敏度高、重现性好,可用于本品的质量控制。

一个新的MAGE-1表位为肝癌细胞表面HLA-B7分子递呈

目的 :肿瘤抗原的存在是机体识别肿瘤并激活免疫系统的物质基础 ,机体抗肿瘤免疫以细胞免疫为主 ,故寻找被T细胞识别的肝癌细胞抗原肽 ,为肝癌免疫治疗奠定基础。方法 :对于肝癌细胞系HHCC(HLA A2 ,A2 9,B7,B5 1) ,应用细胞膜酸洗技术使抗原肽从细胞膜表面脱落 ,经过凝胶层析 ,反相高效液相色谱层析得到不同组份多肽 ,高效液相色谱 质谱仪联用技术获得抗原肽的一级结构 ,通过氨基酸锚定位点分析 ,预测其HLA配体类型 ;互联网上氨基酸同源性分析确定其同源性序列 ;人工合成抗原肽 ,HLA同型树突状细胞递呈合成抗原肽刺激特异性CTL反应 ,51Cr杀伤实验检测CTL对肿瘤细胞系的杀伤作用。结果 :经过反相高效液相色谱层析后可以获得 10多个组份 ,其中一个组份经过液质联用鉴定和氨基酸同源性分析确定其序列为EPVTKAEML ,是黑色素瘤抗原 1,MAGE 1(12 1 12 9)表位 ,由HLA B7分子递呈 ,体外诱导实验表明其可以诱导出较强的CTL反应。结论 :液质联用技术是寻找抗原肽的有效方法 ,MAGE 1抗原肽EPVTKAEML对于HLA B7阳性及MAGE

FL-1多功能吸附树脂对沙棘叶总黄酮的分离纯化

目的 考察 FL- 1多功能吸附树脂对沙棘叶中总黄酮的分离纯化方法。方法 根据沙棘叶黄酮的结构特征 ,考察了 FL - 1树脂的吸附性能 ,并采用高效液相色谱法对沙棘叶总黄酮进行了定量分析。结果 FL - 1树脂对沙棘叶总黄酮具有较高的吸附选择性 ,70 %乙醇作为脱附剂 ,产品中总黄酮含量为 4 0 .2 %。结论 FL- 1树脂用于沙棘叶总黄酮的分离纯化简便有效。

反相高效液相色谱法测定升麻药材中升麻苷H-1的含量

建立升麻药材中升麻苷H-1含量测定的反相高效液相色谱分析方法。使用H&E XP ODS-A色谱柱(4.6 mm×250 mm5,μm),流动相为乙腈-水-磷酸(35∶65∶0.4),流速为1 mL/min,柱温为26℃,检测波长203nm。测得升麻苷H-1线性范围为0.95～28.5μg/mL(r=0.9999),平均回收率(n=6)为99.35%(RSD=2.79%),不同来源批次升麻药材含量测定结果表明,升麻药材中升麻苷H-1含量为0.53%～1.09%,综合分析批样品含量测定结果,建议升麻药材中含升麻苷H-1应不低于0.4%。本方法简便、准确、重复性好、专属性强,可作为升麻药材质量控制方法。