HPLC-DAD-ESI/MS^n-DPPH在线筛选与鉴别丹参和康定鼠尾草中抗氧化活性成分

本研究建立了在线高效液相色谱-质谱-二苯基三硝基苯肼(HPLC-DAD-ESI/MSn-DPPH)快速筛选和鉴别丹参和康定鼠尾草中抗氧化活性成分和含量的方法。经液相色谱、质谱和文献报道综合分析鉴定出丹参和康定鼠尾草中的3种抗氧化活性化合物,分别为咖啡酸、异迷迭香酸苷和迷迭香酸。比较了热回流、超声辅助提取和快速溶剂萃取的提取效果,并对色谱条件进行优化。在优化条件下,这3种化合物均可有效分离,并在1.7~35.3μg/m L范围内线性关系良好,相关系数为0.999 5~0.999 8,检出限为0.05~1.85μg/m L,定量下限为0.18~6.16μg/m L,平均回收率为96.6%~97.2%,相对标准偏差为1.1%~1.3%。运用该方法测定丹参和鼠尾草样品中这3个化合物的含量分别为:咖啡酸0.303,0.254 mg/g;异迷迭香酸苷1.019,1.401 mg/g;迷迭香酸17.279,8.104 mg/g。本方法简便、快速、准确、重现性好,适用于从复杂天然产物中快速筛选与鉴别抗氧化活性成分。

HPLC-DAD-ESI-MSn和GC-MS比较陈皮、橘皮和霉变橘皮中的化学成分

橘皮是陈皮的原料,很容易感染指状青霉而发生霉变。文中运用HPLC-DAD-ESI-MSn和GC-MS技术分析了陈皮、橘皮以及霉变橘皮中化学成分,比较了三者的总黄酮和总多酚的含量。结果表明:陈皮、橘皮以及霉变橘皮中的非挥发性成分很相似,但是挥发性成分差别很大,同时它们的总黄酮和总多酚含量也不同。柑橘种植过程中使用的杀虫剂,在霉变橘皮中却没有检出。

玉簪属植物花瓣中类黄酮化合物价值评价

为拓宽玉簪属植物除园林方面的应用,本研究以玉簪属5个野生种和85个栽培品种的花瓣为材料,利用高效液相色谱(HPLC-DAD)技术,建立了定性定量分析玉簪花中类黄酮化合物的HPLC方法,可作为玉簪花药材的质量控制方法。同时结合质谱(MSn)技术,鉴定了玉簪花瓣中17种类黄酮化合物的化学结构,分别为:山奈酚3,7-二葡萄糖苷、山奈酚3-葡萄糖-7-芸香糖苷、异鼠李素3,4-二葡萄糖苷、山奈酚3-奎尼酰葡萄糖苷、山奈酚3-芥子酰葡萄糖苷、山奈酚3-抗坏血酰葡萄糖苷、山奈酚7-新橙皮糖苷、山奈酚3,7-二己糖苷、山奈酚3-葡萄糖-7-鼠李糖苷、木犀草素7-新橙皮糖苷、槲皮素3-葡萄糖苷、槲皮素3-葡糖苷酸、槲皮素3-刺槐二糖苷、山奈酚3-葡萄糖苷、山奈酚3-葡糖苷酸、山奈酚3-戊糖苷和山奈酚7-葡萄糖苷。并比较了90种玉簪花中类黄酮化合物成分与含量的差异性,筛选出类黄酮化合物含量较高的种类。

醋酸氟孕酮原料药相关物质分析

目的:鉴定醋酸氟孕酮原料药中的含量大于0.1%的相关物质。方法:运用液相色谱-光电二极管阵列检测-电喷雾离子阱质谱联用技术对醋酸氟孕酮原料药中的相关物质进行分离检测,然后比较相关物质与醋酸氟孕酮类似物的紫外光谱特征和二级质谱的裂解特征,确定相关物质的结构。结果:在醋酸氟孕酮原料药中检测到5个相关物质,其中17-乙酰氧基-9-氟-11,17-二羟基-孕甾4,6-二烯-3,20-二酮(P5,t_R=13.13 min)的含量大于0.1%,综合使用 LC/MS^n 和 DAD技术确定了其结构。结论:所鉴定的相关物质为醋酸氟孕酮的新副反应产物。

原花青素B_2代谢产物在小鼠体内组织的分布

为了探究原花青素B_2在小鼠体内主要代谢产物形式及其组织分布。采用高效液相色谱-二级阵列-电喷雾-离子阱-飞行时间质谱技术测定分析原花青素B_2灌胃小鼠的血浆、肝、心、脾、肺、肾、脑、小肠样品中代谢产物。结果表明,原花青素B_2在小鼠体内结合代谢产物形式主要包括:甲基化(8种)、磺酸化(7种)、水合(5种)、羟基化(1种)、葡糖苷酸化(1种);在血浆、肝、小肠、肾、肺、心、脑和脾中检出的原花青素B_2代谢产物的种类分别为6、8、8、6、3、6、2、2种,且发现3种单体表儿茶素及其代谢产物。原花青素B_2结合型代谢产物多样,在小鼠体内组织分布范围广,甲基化、磺酸化和水合代谢是主要的结合型产物形式,肝脏是原花青素B_2结合产物(M_r>577.13)形成的主要器官,黄烷键(4β→8)的断裂产物是原花青素B_2重要的吸收形式之一。

Characterization of flavonoids in Millettia nitida var. hirsutissima by HPLC/DAD/ESI-MS^n

Millettia nitida var. hirsutissima is a Chinese herbal medicine used for the treatment of gynecological diseases. An HPLC/DAD/ESI-MSn method was established for the rapid separation and characterization of bioactive flavonoids in M. nitida var. hirsutissima. A total of 32 flavonoids were detected, of which 14 compounds were unambiguously characterized by comparing their retention time, UV, and MS spectra with those of the reference standards, and the others were tentatively identified based on their tandem mass spectrometry fragmentation data obtained in the negative ionization mode on line. Nineteen of these compounds characterized were reported from this plant for the first time.

利用HPLC DAD ESI/IT TOF/MSn分析不同品种蓝莓果实的花青素结构

以6种不同品种的蓝莓果实(埃利奥特、爱国者、北蓝、北陆、杜克、蓝丰)为原料,利用甲醇水溶液提取蓝莓中的花青素。用二极管阵列-高效液相色谱-电喷雾离子阱飞行时间串联多级质谱仪(High performance liquid chromatography-electric spray four pole flight time series multipolar mass spectrometer,HPLC-DAD-ESI/IT-TOF/MSn)及紫外可见光谱及多级质谱数据对得到的6种不同品种的蓝莓花青素结构进行鉴定和对比。结果表明,6种蓝莓果实中共鉴定出13种花青素类化合物,苷元分别为锦葵色素、花翠素、矢车菊素、牵牛花色素、芍药素。其中埃利奥特蓝莓检测到11种花青素,爱国者10种,北蓝7种,北陆12种,杜克9种,蓝丰6种。从花青素结构上分析,6种蓝莓均可检测到带糖配基的锦葵色素-3-O-半乳糖、不连接糖苷的花翠素及矢车菊素;不同的蓝莓品种间所含有的花青素种类、个数、结构等均有明显差异。本研究为快速获取蓝莓中花青素的结构信息提供一定的理论支撑。

基于HPLC-DAD-MS^n的柴胡皂苷A的体外生物转化研究

目的对柴胡皂苷A进行体外生物转化,分析其体外代谢产物。方法用人工胃液模拟胃酸环境,厌氧状态下与大鼠肠内容物共温孵模拟肠道环境,分别进行柴胡皂苷A的体外生物转化,采用HPLC-DAD-MS^n方法,分析鉴定代谢产物。结果在人工胃液中,柴胡皂苷A可转化为柴胡皂苷b1、柴胡皂苷g,在肠道菌群环境下,柴胡皂苷A可先转化为柴胡次皂苷F,进一步转化为柴胡皂苷元F。结论模拟体内环境,柴胡皂苷A可转化成其次生苷和苷元,采用HPLC-DAD-MS^n可以指认并鉴定其产物。柴胡皂苷A的药物分布与浓度不能全面反映其体内过程,应同时考察其次生代谢产物。

不同干燥方法对川麦冬甾体皂苷和高异黄酮的影响

该研究以川麦冬为研究对象,考察不同干燥方法对麦冬药材中化学成分的影响。取新鲜川麦冬块根粗粉,分别采用50℃烘干干燥、80℃烘干干燥、-70℃冷冻干燥3种方法进行干燥处理,应用HPLC-DAD-ELSD-MSn多检测器串联技术,筛选鉴定干燥过程中变化显著的高异黄酮类和甾体皂苷类化学成分。结果显示:与新鲜麦冬药材的HPLC图相比,50℃烘干干燥最能保持药材固有化学成分;80℃烘干干燥、-70℃冷冻干燥方法则对化学成分影响较大;结合HPLC-HRMSn数据,最终筛选了36个差异性成分,并鉴定了其中24个差异性成分(11个甾体皂苷和13个高异黄酮)的结构。结果表明,不同干燥方法对川麦冬中甾体皂苷和高异黄酮有明显影响;从成本、成分含量和实用性综合分析,50℃烘干干燥更有利于川麦冬药材中固有成分的保留,可以为川麦冬药材的产地干燥加工提供借鉴。

HPLC-DAD-MS^n联用技术表征大川芎方效应组分中主要化学成分

目的:采用HPLC-DAD-MSn联用技术研究大川芎方效应组分的主要化学成分,为其体内物质基础研究及质量标准的完善奠定基础。方法:通过建立大川芎方效应组分指纹图谱,将其复杂的化学成分表征出来,并采用HPLC-DAD-MSn联用技术对各化学成分进行结构鉴定和推测。结果:推断出川芎效应组分中的3个化学成分和天麻效应组分中的8个化学成分。结论:大川芎方效应组分的化学成分研究有助于阐明其效应物质基础并完善其质量标准。

高效液相色谱-电喷雾多级质谱法分析鸢尾中黄酮和酚酸类成分(英文)

目的:建立高效液相色谱-电喷雾多级质谱法(HPLC-DAD-ESI-MSn),鉴定鸢尾根茎中的黄酮和酚酸类成分。方法:利用样品的色谱的保留时间以及多级质谱分析,对其中的黄酮和酚酸类成分的结构进行了鉴定。结果:十个黄酮分别鉴定为鸢尾苷元7-O-β-葡萄糖-4'-O-β-葡萄糖双糖苷(3),鸢尾苷(5),鸢尾新苷B(6),鸢尾新苷A(7),野鸢尾苷(8),染料木素(11),鸢尾苷元(12),鸢尾甲黄素A(14),鸢尾甲黄素B(16)和野鸢尾苷元(17)。两个二氢黄酮,一个黄酮醇和一个二氢黄酮醇暂时分别鉴定为橙皮素(9),5,7,3'-三羟基-6,4'-二甲氧基二氢黄酮(10),鼠李柠檬素(13)和二氢山奈酚(15)。此外三个酚酸类成分为草夹竹桃双糖苷(1),草夹竹桃苷(2)和夹竹桃麻素(4)。结论:所建立的高效液相色谱-电喷雾多级质谱法可以用于快速鉴定鸢尾根茎中的活性成分。并首次在该植物中鉴定出橙皮素(9)、5,7,3'-三羟基-6,4'-二甲氧基二氢黄酮(10)。

大鼠口服棉花皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷后尿液中代谢产物研究

目的:研究大鼠口服棉花皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷后尿液中的代谢产物。方法:健康大鼠口服250mg·kg-1棉花皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷后,收集0～48h的尿样,经HPD-600大孔吸附树脂分离纯化后采用HPLC-DAD-MSn方法对尿样中的原形药物及其代谢产物进行分析及结构推测。结果:在大鼠尿液中检测到棉花皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的6个主要代谢产物,根据负离子模式下电喷雾质谱的裂解规律、紫外光谱特征以及与标准品对照的方法,鉴定了其中1个代谢产物的结构,推测了其他5个代谢产物的结构,其代谢过程主要是葡萄糖醛酸化、脱葡萄糖醛酸以及甲基化等。结论:本文建立的方法快速、灵敏,可用于棉花皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷及其体内外代谢产物的研究。