萹蓄HPLC-ECD指纹图谱建立与抗氧化活性评价

目的建立萹蓄HPLC-电化学检测(ECD)指纹图谱,并评价其抗氧化活性。方法萹蓄80%甲醇提取液的分析采用XBridge BEH shield RP18色谱柱(3.0 mm×150 mm,2.5μm);流动相乙腈-9.6 mg/mL柠檬酸溶液(pH 2.74),梯度洗脱;体积流量0.6 mL/min;柱温45℃;检测电压650 mV。采用铁离子还原能力、DPPH自由基清除能力和ABTS自由基清除能力评价抗氧化活性。再对指纹图谱共有峰与抗氧化活性进行灰色关联分析、偏最小二乘回归分析。结果17批样品指纹图谱中共有26个共有峰,通过与对照品比对指认出18种化学成分,相似度在0.944~0.991之间。表儿茶素、原花青素B2、原儿茶醛、儿茶素、洋蓟素、对香豆酸、异荭草苷、杨梅苷、槲皮苷、萹蓄苷等化学成分对抗氧化活性的贡献较大。结论HPLC-ECD指纹图谱结合谱效关系研究能明确萹蓄中不同化合物对抗氧化活性的贡献程度,可为萹蓄的质量控制提供参考依据。

HPLC-ECD与HPLC-MS联用测定人尿样中的罗红霉素及其代谢物

目的：建立灵敏专一的分析方法，测定人尿样中的罗红霉素（Ｅ－Ｒｏｘ）及其活性代谢产物Ｚ－Ｒｏｘ。方法：采用高效液相色谱－电化学检测法（ＨＰＬＣ－ＥＣＤ）与高效液相色谱－质谱法（ＨＰＬＣ－ＭＳ），样品经液－液萃取后，通过ＨＰＬＣ－ＥＣＤ定量分析Ｅ－Ｒｏｘ浓度；然后，采用ＨＰＬＣ－ＭＳ，通过选择性离子反应监测方式（ＳＲＭ），测定Ｚ－Ｒｏｘ与Ｅ－Ｒｏｘ的尿药浓度比值，ＳＲＭ扫描方式进行定量分析的碎片离子为ｍ／ｚ６７９（母离子ｍ／ｚ８３７）。结果：Ｅ－Ｒｏｘ和Ｚ－Ｒｏｘ的线性范围分别为０．１～１０ｍｇ·Ｌ－１和０．０５～５ｍｇ·Ｌ－１，最低检测限分别为０．１ｍｇ·Ｌ－１和０．０５ｍｇ·Ｌ－１，日内、日间ＲＳＤ均小于１２．５％。两法联用，分析了４名健康受试者单剂量口服１５０ｍｇＥ－Ｒｏｘ后的尿样。结论：为深入研究Ｅ－Ｒｏｘ在人体内的代谢规律提供了可靠的分析方法，首次测定了人尿样中的活性代谢产物Ｚ－Ｒｏｘ。

HPLC-ECD法对精神分裂症患者脑脊液单胺类神经递质的检测

目的 探讨精神分裂症患者脑脊液 (CSF)中多巴胺 (DA)、高香草酸 (HVA)含量的变化及立体定向手术对其的影响。方法 立体定向手术治疗 2 2例精神分裂症患者 ,高效液相色谱 电化学HPLC ECD法检测CSF中的DA及HVA水平。结果 精神分裂症患者手术前CSF中DA[(3.2 3± 0 .36 ) μmol/L]、HVA[(1.99± 0 .4 9)μmol/L]水平显著高于对照组 [(2 .4 4± 0 .32 ) μmol/L、(1.4 1± 0 .37) μmol/L](P <0 .0 1) ;手术后DA[(2 .4 9± 0 .35 ) μmol/L]、HVA[(1.4 2± 0 .2 8) μmol/L]水平明显下降 (P <0 .0 1)。 结论 支持精神分裂症中枢DA亢进假说 ,立体定向手术具有明显的DA传导阻滞作用。

DA、Salsolinol及N-methyl-salsolinol的HPLC-ECD检测方法研究

采用高效液相色谱结合库仑阵列多电极检测器体系(HPLC-ECD)建立了一套操作简便、高效、快速测定多巴胺(DA)、6,7-二羟基-1-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉(Salsolinol)和6,7-二羟基-1,2-二甲基-1,2,3,4 -四氢异喹啉(N-methyl-salsolinol)的方法,并研究该检测方法的灵敏性和稳定性,检测物质浓度和响应因子之间的线性关系。DA、Salsolinol及N-methyl-salsolinol的相关系数分别为1、1和0.9997;DA的检测限低于0.1ng/mL,Sal和NMSal的检测限低于0.5ng/mL,各种物质的方法回收率为98.5%-104.7%。

DA、5-HT及其代谢产物HPLC-ECD检测方法的研究

采用高效液相色谱结合库仑阵列多电极检测器体系(HPLC-ECD)建立了一套操作简便、高效、快速测定多巴胺(DA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5-羟色胺(5-HT)以及5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的方法,并探究了检测的灵敏性,浓度和响应因子之间的线性关系,系统的稳定性等。DA、DOPAC、HVA、5-HT及5-HIAA的相关系数分别为0.9964、0.9999、1、0.9989、0.9999;HVA和5-HIAA的检测限都低于0.5ng/mL,DA、DOPAC及5-HT的检测限均低于0.1ng/mL,各种物质的方法回收率为85.6%-107.4%。

HPLC-ECD法测定大鼠脑微透析液中的多巴胺及其代谢产物

目的：建立应用常规高效液相-电化学法（HPLC-ECD）测定大鼠脑微透析液中多巴胺（DA）及其代谢产物3，4-二羟基苯乙酸（DOPAC）和高香草酸（HVA）的方法。方法：将探针插入大鼠右侧纹状体，在清醒自由活动状态下，用Ringer氏液以1．5μl·min^-1的速度灌流，每20min收集1管透析液，将其注入HPLC-ECD，考察本方法的专属性、线性范围、精密度和准确度等，并对其中所含的DA、DOPAC、HVA进行测定。结果：3种物质在12．5～250μg·L^-1范围内线性关系良好，高、中、低3种浓度的回收率分别为98．33％、102．67％、92．33％．各物质的日内RSD值分别为3．3％、3．4％、2．5％；日间RsD值为4．2％、2．3％、5．6％。大鼠脑微透析液中的DOPAC及DA、HVA的含量分别为1．79±0．07、0．45±0．02、1．67±0．05μg·ml^-1（n=6）。结论：本方法简便、准确、稳定，可用于应用脑微透析技术进行的DA相关疾病的基础研究。

RP-HPLC-ECD测定通脉颗粒中3种化合物

目的:建立测定通脉颗粒中原儿茶醛、阿魏酸和黄芩苷的 RP-HPLC-ECD 分析方法。方法:采用 RP-HPLC-ECD 检测法,以 Zorbax SB—C_(18)(150 mm×4.6 mm,5.0 μm)为色谱柱,甲醇(A)、2%醋酸(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1);电化学检测器的工作电位为0.9 V;柱温为30℃。结果:原儿茶醛、阿魏酸和黄芩苷的线性范围分别为0.138～12.4μg·mL^(-1)(r=0.9999),0.130～11.7μg·mL^(-1)(r=0.9992)和0.192～240μg·mL^(-1)(r=0.9998);平均加样回收率(n=6)分别为97.4%(RSD=0.8%),98.7%(RSD=2.3%)和97.9%(RSD=2.9%)。结论:该法快速、灵敏、准确,可为通脉颗粒的质量控制提供科学依据。

基于HPLC-ECD法与聚类分析的中国白酒品质鉴别

白酒中的活性物质影响人的味觉,是感官品评的重要指标之一,库仑阵列高效液相色谱法能够检测白酒中电化学活性物质。建立了我国白酒的HPLC-ECD检测方法,在最优色谱条件下,8通道能采集固态法白酒中102个信息峰,各物质得到了很好的分离,精密度、稳定性高;样品无需前处理,检测到的物质无需定性、定量分析,简便快捷、成本低。使用该方法对固态法白酒与酒精勾兑白酒进行分析,发现能够检测到白酒中多种活性物质,指纹图谱信息丰富,两种白酒谱图差异明显。同时,运用聚类分析对检测数据处理,能实现准确区分固态法白酒与酒精勾兑白酒。运用该方法进一步分析不同勾兑比例的固液法白酒,聚类结果与实际相符,白酒样品被准确分为4类:固态法白酒体积分数分别为10%、15%、75%和100%。该方法可以有效应用于白酒分类鉴定。

HPLC-ECD检测羟自由基方法的研究

采用高效液相色谱结合库仑阵列多电极检测器体系（HPLC—ECD）建立了一套操作简便、高效、快速测定羟自由基的方法，并探究了检测的灵敏性，浓度和响应因子之间的线性关系，系统的稳定性等。2，3-二羟基苯甲酸（2，3-DHBA）、2，5-二羟基苯甲酸（2，5-DHBA）以及水杨酸（sA）的相关系数分别为0．9999、0．9996、0．9968。2，3-DHBA和2，5-DHBA的检出限都低于0．1ng／mL，SA的检出限均低于10ng／mL。各种物质的方法回收率为100．5％。102．9％。

RP-HPLC-ECD检测血浆尿液中儿茶酚胺及其临床应用

目的 建立一种简便、准确、灵敏、易于临床推广的测定血尿中儿茶酚胺 (CAs ,包括NE、E、DA)的检测方法 ,并进行了临床血浆及 2 4小时尿液标本中CAs测定。方法 采用活性氧化铝吸附标本中CAs,酸解吸附后 ,以 3,4-二羟基苄胺 (DHBA)为内标 ,利用离子对反相高效液相色谱及电化学检测器进行测定。结果 显示NE、E、DA在 0 .15 6 - 10 0ng/ml浓度范围内与响应值 (色谱峰面积对内标峰面积之比 )线性关系良好 (r分别为0 .9998、0 .9999、0 .9998) ,其方法回收率分别为 6 3.2 %- 93.4%、6 5 .6 %- 10 3.7%、70 .4%- 111.3%,CV值为1.2 3%- 19.5 2 %,在嗜铬细胞瘤患者中CAs有显著升高。结论 该实验方法简单、准确、灵敏、特异性高 ,不失为一种敏感、可靠的诊断嗜铬细胞瘤的方法。

HPLC-ECD法测定川芎中药配方颗粒中原儿茶酸的含量

建立测定川芎中药配方颗粒中原儿茶酸的高效液相色谱电化学分析法,并用该方法测定2种不同批号的川芎中药配方颗粒.采用反相高效液相色谱电化学检测法,以Zorbax SB-C18(150 mm×4.6 mm,5.0μm)为色谱柱;甲醇-4%醋酸为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min;检测电压为0.7V,柱温为30℃.结果显示原儿茶酸浓度在0.8-3.6μg/mL(r=0.9994)范围内线性关系良好,平均加样回收率(n=6)为97.9%(RSD=1.7%).表明该法是一种快速、灵敏、准确的分析方法,可以为川芎中药配方颗粒的质量控制提供科学依据.

HPLC-ECD法测定小鼠脑组织内去甲肾上腺素的含量

目的:建立小鼠脑内去甲肾上腺素含量的高效液相色谱-电化学(HPLC-ECD)测定方法。方法:小鼠脑组织采用70%高氯酸沉淀蛋白后,以HPLC-ECD法进行分析。使用汉邦lichrospher C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为醋酸钾缓冲液-甲醇(95:5,pH 4.5),流速为1.0 ml·min^(-1),温度为25℃;电化学检测器电压为0.6 V,电流为100 nA,频率为0.05 Hz。结果:去甲肾上腺素在0.1～25μmol·L^(-1)范围内线性关系良好,日内、日间RSD分别小于7.81%和3.61%,回收率为75.05%,测得小鼠脑内去甲肾上腺素含量为(8.94±0.71)μg·g^(-1)。结论:该方法快速、准确。

HPLC-ECD法测定盐酸多巴胺预灌装注射液的含量

目的建立测定盐酸多巴胺预灌装注射液含量的HPLC-ECD方法。方法采用Diamonsil-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.11%庚烷磺酸钠溶液(含0.1 mmol/L EDTA-2Na及5%冰醋酸,用1 mol/L NaOH溶液调节pH值至3.4)-甲醇(70∶30,v/v)为流动相,玻碳电极为工作电极,银/氯化银电极为参比电极,工作电位为+0.65 V,流速1.0 ml/min,柱温20℃。结果盐酸多巴胺在0.05～5μg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9,n=5),平均加样回收率为(99.19±4.03)%(n=3),日内及日间RSD均小于4%(n=3);3批样品中盐酸多巴胺的平均含量相当于标示量的(102.97±1.11)%。结论该方法准确、快速、灵敏度高,能够用于盐酸多巴胺预灌装注射液的含量测定。

HPLC-ECD检测尿液中儿茶酚胺含量

目的建立一种准确可靠、易于临床推广的测定尿液中儿茶酚胺(CAs,包括NE、E、DA)的检测方法。方法采用活性氧化铝吸附标本中CAs,酸解吸附后,以3,4-二羟基苄胺(DHBA)为内标,利用离子对高相液相色谱及电化学检测器进行测定。结果显示NE、E、DA在0.135～100ng/ml浓度范围内与响应值(色谱峰高对内标峰高之比)线性关系良好(r值分别为0.9999、0.9998、0.9998),其方法回收率分别为63.2%～93.4%、65.6%～103.7%7、0.4%～111.3%,CV值为1.23%～19.52%。结论此法简单、准确、灵敏、特异性高,便于临床和实验室推广应用。

油菜蜜中5种酚类化合物的HPLC-ECD法测定

以油菜蜜为研究对象,建立了一种同时测定油菜蜜中5种酚类化合物的HPLC-ECD分析方法。采用高效液相色谱电化学检测法,以甲醇(A)和2%醋酸(B))水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0mL/min;电化学检测器的工作电位为0.8V;柱温为30℃。5种酚类化合物的浓度分别在6.83×10-2-5.46,9.6×10-2-8.67,1.05×10-1-12,9.1×10-2-7.3,1.63×10-1-13μg/mL内与各自的峰面积呈良好的线性关系(r>0.9997)。样品的加样回收率分别为97.4%,98.6%,99.1%,101.6%,99.3%。

复方注射液中肾上腺素及其代谢产物的HPLC-ECD检测方法研究

建立了系统测定利多卡因肾上腺素注射液中肾上腺素、去甲肾上腺素、亚硫酸肾上腺素及肾上腺素红含量的高效液相色谱-电化学(HPLC-ECD)方法.其中前3种物质用氧化模式分析,肾上腺素红用还原模式分析.优化了电位、流动相pH及离子对试剂含量、灵敏度参数等色谱条件,并对该方法进行了论证:在各物质的线性浓度范围内,该方法显示出良好的线性关系,R2均为0.999 9,肾上腺素、去甲肾上腺素、亚硫酸肾上腺素和肾上腺素红的检出限依次为0.27,0.50,0.20,50μg.L-1,回收率依次为(100.34±0.62)%,(100.16±1.07)%,(100.26±1.21)%,(97.97±0.72)%(n=9).该方法快速简单、选择性好、灵敏度及准确度高,可用于肾上腺素及其相关物质的分析测定.

模拟兔血浆中富马酸福莫特罗的HPLC-ECD测定

采用液液萃取方法,建立了模拟兔血浆中富马酸富莫特罗的高效液相色谱-电化学检测（HPLC-ECD）测定新方法.实验结果表明,富马酸富莫特罗质量分数的线性范围为47～2500 μg/mL（r=0.999 9）,提取回收率为77.8％～80.1％,方法回收率为96.2％～106.0％ （RSD≤1.9％）.该法有望用于动物体内药物代谢分析.

HPLC-ECD法测大鼠尿液中丹参素的测定方法

建立高液相色谱-电化学测定大鼠尿液中丹参素的方法。方法:多巴灌胃,采用HPLC-ECD方法,测定SD大鼠尿中相关代谢产物。流动相1‰甲酸水(pH3.9)-甲醇(v:v)97:3,柱温30℃,检测器电压900mV。结果:健康大鼠的尿样中存在丹参素,灌服多巴后SD大鼠尿样中有丹参素含量增加。结论:多巴可以在体内促进DSS的形成。

HPLC-ECD法检测血浆中儿茶酚胺含量

目的:建立一种准确可靠、易于临床推广的血液中去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)和多巴胺(DA)的检测方法。方法:采用活性溶剂萃取标本中儿茶酚胺,以3,4-二羟基苄胺(DHBA)为内标,利用离子对高相液相色谱及电化学检测器进行测定。结果:NE、E、DA的加样回收率分别为(95.3±6.7)%、(101.8±5.4)%和(100.3±5.7)%。批内和批间精密度分别小于11.23%和17.66%。该方法测定NE和E在0.5~16×10^(-9)g范围内,DA在1~16×10^(-9)g范围内含量与峰面积比呈良好的线性关系,相关系数为0.998 5~0.999 8,最低检测限分别为:NE 0.3×10^(-9)g,E 0.35×10^(-9)g,DA 0.7×10^(-9)g。结论:此法简单、准确、灵敏、特异性高,便于临床和实验室推广应用。

HPLC-ECD法测定大观霉素的含量

建立了HPLC-ECD法测定大观霉素含量的分析方法。采用高效液相色谱-电化学检测器,Waters XBridge C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以pH 3.2的草酸盐缓冲溶液-乙腈(1000∶105,V∶V)为流动相,流速1.0 mL/min;柱后衍生溶液为21 g/L的NaOH溶液,流速0.5mL/min;ECD系统参数:极性为阳性,检波+0.12 V,氧化电位+0.70 V,还原电位-0.60 V,范围5μA。结果表明,大观霉素及4R-二氢大观霉素在40～320μg/mL范围内呈良好的线性关系(大观霉素r=0.9999,4R-二氢大观霉素r=0.9992),平均回收率为100.0%(n=9),RSD为0.2%。该方法解决了微生物效价测定大观霉素含量偏高的难题,且操作简便、结果准确,可用于大观霉素及相关制剂产品的质量控制。