HPLC-MS/MS法同时测定治伤胶囊中9种成分的含量

目的建立HPLC-MS/MS法同时测定治伤胶囊中腺苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、关附甲素、关附壬素、关附辛素、欧前胡素、羌活醇、升麻素苷、异欧前胡素的含量。方法分析采用Agilent Porshell EC-C 18色谱柱(4.6 mm×100 mm,2.7μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;柱温30℃;电喷雾离子源;正离子扫描;分时间段多反应监测模式。结果9种成分在各自范围内线性关系良好(R 2>0.9950),平均加样回收率97.52%~99.87%,RSD1.3%~2.4%。结论该方法简便灵敏,准确可靠,可用于治伤胶囊的质量控制。

HPLC-MS/MS法同时测定微量血浆中甲氨蝶呤、左乙拉西坦、拉莫三嗪浓度及其临床应用

目的 建立HPLC-MS/MS法测定微量血浆中甲氨蝶呤、左乙拉西坦和拉莫三嗪的浓度,同时应用于儿童治疗药物监测。方法 取含药血浆10μl,用蛋白沉淀法对样本进行前处理。色谱柱为Agilent C18(50 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为0.1%甲酸水和甲醇,梯度洗脱;流速为0.4 ml/min。采用电喷雾离子源正离子模式,监测甲氨蝶呤m/z 455.1→308.2,甲氨蝶呤-D3 m/z 458.1→311.1(内标);左乙拉西坦m/z 171.1.4→126.2,左乙拉西坦-D6 m/z177.2→132.2(内标);拉莫三嗪m/z 256.1→211,拉莫三嗪-13C3-D3 m/z 262.1→217.1(内标)。结果 甲氨蝶呤在25~1 500 ng/ml线性关系良好,标准曲线方程:Y=0.251 6X+0.003 4(r=0.998 9),定量下限为25 ng/ml;左乙拉西坦在1~50μg/ml线性关系良好,标准曲线方程:Y=16.687 6X+0.000 2(r=0.991 1),定量下限为1μg/ml;拉莫三嗪在0.5~25.0μg/ml线性关系良好,标准曲线方程:Y=46.369 5X-0.059 9(r=0.999 1),定量下限为0.5μg/ml。样本批内、批间准确度和精密度符合要求、基质效应符合规定。本方法验证后成功用于1 348例临床患儿样本的检测。结论 本方法操作简便、专属性强、灵敏度高,可用于人血浆中甲氨蝶呤、左乙拉西坦及拉莫三嗪的分析,适用于儿童治疗药物监测。

HPLC-MS/MS法同时测定清开灵口服液中7种成分的含量

目的 建立高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)法同时测定清开灵口服液中7种成分含量。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×10 mm,1.7μm);以含10 mmol·L^(-1)乙酸铵和0.1%甲酸的水溶液(A)及甲醇(B)为流动相,梯度洗脱;电喷雾离子源,正、负离子多反应监测(MRM)模式进行定量分析。结果 腺苷、绿原酸、咖啡酸、栀子苷、黄芩苷、猪去氧胆酸和胆酸质量浓度分别在0.100 4~3.213、0.784 5~8.982、0.998~3.194、0.622 5~19.92、25.05~300.6、2.513~30.15和7.775~93.30μg·m L^(-1)范围内与峰面积呈良好线性关系(r≥0.999 0);平均回收率(n=6)分别为100.9%、98.74%、101.2%、100.2%、100.8%、99.97%和98.94%,RSD分别为1.58%、0.59%、1.78%、1.25%、0.65%、1.69%和1.07%。15批样品中腺苷、绿原酸、咖啡酸、栀子苷、黄芩苷、猪去氧胆酸和胆酸的含量范围分别为0.12~0.18、0.19~0.24、0.06~0.09、0.34~0.37、4.54~4.85、0.49~0.67和1.82~2.19 mg·m L^(-1)。15批样品测定结果较为接近。结论 该方法具有良好的灵敏度、准确性和重复性,可为清开灵口服液的质量控制和后续研究提供参考及数据支持。

HPLC-MS/MS法同时测定儿童血浆中万古霉素和地高辛的浓度

目的建立同时测定血浆中万古霉素和地高辛浓度的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法,并用于儿童患者治疗药物监测。方法血浆样本经甲醇沉淀蛋白前处理,分别以去甲万古霉素和地高辛-d3作为内标,采用EVO-C18色谱柱分离,流动相为水(含0.02%甲酸和2 mmol·L^(-1)乙酸铵)和甲醇,梯度洗脱,流速为0.55 mL·min^(-1)。质谱检测方式为ESI正离子模式,dMRM扫描。结果万古霉素在1~50μg·mL^(-1)与峰面积线性关系良好(R^(2)>0.991),地高辛在0.25~8 ng·mL^(-1)与峰面积线性关系良好(R^(2)>0.993)。方法准确度、精密度、基质效应和稳定性均符合要求,并成功应用于311个样本的测定。结论本方法操作简便、快速、灵敏度高,适用于人血浆中万古霉素和地高辛浓度的同时分析,可用于儿童患者临床治疗药物监测。

HPLC-MS/MS法测定茶叶中儿茶素类、茶黄素类物质

针对同时测定茶叶中儿茶素、茶黄素的方法较少的现状,该研究建立了同时定性和定量测定茶叶中8种儿茶素类和4种茶黄素类物质的高效液相色谱-串联质谱法。研究采用Agilent Eclipse Plus C18(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱,甲酸-乙腈为流动相,流量为0.2 mL/min进行梯度洗脱,采用ESI源正、负离子扫描模式,多反应监测(MRM)。结果表明,儿茶素类和茶黄素类物质分别在10~10000μg/L和25~5000μg/L范围内线性关系良好,相关系数R>0.99,回收率在96.53%~106.08%之间,精密度的相对标准偏差均小于10%。相较于分别检测儿茶素类和茶黄素类物质的国家标准方法,该方法提高了检测效率且具有更低的检出限和定量限,能够提供更加准确、全面的检测结果。

QuEChERS/HPLC-MS/MS法测定渔用饲料及饵料中地西泮及其代谢物

研究建立了一种同时测定渔用饲料及饵料中地西泮及其代谢物的分散型固相萃取(QuEChERS)/高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)的方法。样品采用乙酸乙酯提取,提取液经50 mg C18和PSA分散固相萃取净化,40℃下氮吹浓缩近干,加入80%乙腈1.0 mL复溶,过滤后采用HPLC-MS/MS法进行测定。目标物采用飞诺美Kinetex C18系列色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm)分离,以0.1%体积比甲酸水溶液和乙腈为流动相梯度洗脱。电喷雾离子源(ESI+)、选择反应监测(SRM)模式下进行测定,基质匹配内标法定性定量。结果显示,该方法在0.5~50.0μg/kg范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,检出限和定量下限分别为0.5μg/kg和1.0μg/kg。在3个不同的添加水平下,地西泮及其代谢物的平均回收率为82.3%~109.4%,相对标准偏差为3.62%~6.33%。研究表明,该方法具有快速、准确度高与灵敏度高的优点,可满足渔用饲料及饵料中地西泮及其代谢物的残留检测需求。

HPLC-MS/MS法测定茶叶中花青素类活性物质含量

花青素类物质作为茶叶的主要生物活性成分,其含量和种类代表着茶叶的食用价值。由于茶叶富含蛋白质、糖类、茶多酚、黄酮类、生物碱、矿物质、维生素、色素等多种成分,采用国内现有相关标准测定茶叶基质中花青素类活性物质时,存在难以同时准确定量多种花青素物质含量的实际问题,因此,文章首先对样品前处理条件和色谱、质谱条件进行优化,然后采用高效液相色谱–串联质谱法测定茶叶中6种花青素类物质的含量。其结果表明,该方法在浓度范围为25~2500μg/L内线性关系良好,相关系数R均大于0.99,回收率的范围为91.95%~106.99%,精密度RSD均小于10%,满足同时准确定量分析的要求。该方法操作简便、灵敏度和准确度高,可为茶叶中花青素含量检测标准方法的制定提供参考。

牛肉、肝和肾中9种抗菌药物残留的HPLC-MS/MS检测方法研究

为有效监测牛肉、肝和肾中抗菌药物多残留水平,提升风险隐患的排查能力,建立一种快速测定牛肉、肝和肾中9种药物残留的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS),药物涉及大环内酯类、磺胺类、喹诺酮类、四环素类、氨基糖苷类共5大类。通过比较提取溶剂、提取次数、称取重量和净化柱选择对9种抗菌药提取效果的影响,考察牛肉组织的基质效应,确定最优的检测条件为:称取2.5 g,采用Mcllvaine-Na 2 EDTA-甲酸-乙腈溶液提取2次,提取液经HLB柱净化,使用C18柱(50 mm×2.1 mm,1.8μL)色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾电离(ESI)和多反应监测(MRM)模式检测,基质外标法定量。结果显示,9种抗菌药物在相应线性范围内R^(2)均大于0.99,检出限为0.1~0.5μg/kg,定量限为0.5~2μg/kg;在0.5~200μg/kg添加浓度范围内,平均回收率为71.65%~118.59%,相对标准偏差(RSD)为0.14%~9.57%。建立了牛肉、肝和肾中9种药物残留检测的高效液相色谱串联质谱法,该方法灵敏准确,适用于牛肉、肝和肾3种产品中9种抗菌药物的残留检测。

HPLC-MS/MS指纹图谱模式识别结合化学计量学对文王一支笔特征标志物的差异分析

文王一支笔为蛇菰科植物筒鞘蛇菰(Balanophora involucrate Hook.f.)的干燥全草,是鄂西地区特色民族珍稀药材。本研究首先利用HPLC-MS/MS技术建立了鄂西十堰地区5个产地10个批次文王一支笔的根茎、花茎和花序3个部位的化学指纹图谱,标定了其中29个共有峰,并推断了27个色谱峰的化学结构,包括13个酚酸类和8个黄酮类成分。聚类分析(CA)及主成分分析(PCA)结果显示,文王一支笔地下(根茎)与地上(花茎、花序)部位化学成分差异较大,花茎与花序间化学成分差异较小。正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)中VIP值分析结果表明,峰12、8、2、3、17、21、9和22是引起文王一支笔不同药用部位化学成分差异的潜在标志性成分(Q-marker),可作为其质量控制的依据。

HPLC-MS/MS法同时测定月季花配方颗粒中10种成分的含量

目的建立HPLC-MS/MS法同时测定月季花配方颗粒中金丝桃苷、异槲皮苷、没食子酸、鞣花酸、槲皮苷、芦丁、阿福豆苷、萹蓄苷、槲皮素-3-O-6-反式-香豆酰基-β-D-葡萄糖苷、槲皮素3-O-2″-没食子酰基-β-D-葡萄糖苷的含量。方法分析采用Waters Acquity UPLC HSS T3色谱柱(1.8μm,2.1 mm×150 mm);流动相甲醇-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温40℃;电喷雾离子源;负离子扫描;多反应监测模式。结果10种成分在各自范围线性关系良好(r>0.9958),平均加样回收率97.3%~99.6%,RSD 0.8%~2.7%。结论该方法简便快速,灵敏度高,专属性强,可用于月季花配方颗粒的质量控制。

HPLC-MS/MS法同时测定患者全血中他克莫司和五酯胶囊4种主要成分的浓度

建立HPLC-MS/MS法同时测定人全血中他克莫司和五酯胶囊4种主要成分五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子酯甲的浓度,并用于免疫抑制剂他克莫司联用保肝中药五酯胶囊临床药物浓度监测的研究中。采用了WatersAcquity UPLC■BEH C18色谱柱(50×2.1mm,1.7μm),以5mmol/L乙酸铵-0.1%甲酸水溶液为水相,乙腈为有机相,流速为0.3mL/min,柱温60℃。各成分均采用他克莫司同位素化合物(13C,2H4)作为内标(IS),全血样本首先经硫酸锌处理,再加入含内标的乙腈沉淀蛋白,最后离心后取上清液进样,质谱采用电喷雾离子源,以多反应离子监测(MRM)、正离子扫描模式检测。建立的HPLC-MS/MS法在1~100ng/m L范围内,他克莫司和五酯胶囊的4种主要成分色谱响应与浓度相关性良好,定量下限均为1ng/m L;他克莫司、五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子酯甲以及内标的保留时间分别为2.54、2.33、2.65、1.14、1.56、2.54min;准确度、回收率和经内标校准后的基质效应及稳定性数据均符合相关要求。方法灵敏、专属性强、准确性好,适用于人全血中他克莫司、五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子酯甲的浓度测定。

HPLC-MS/MS法测定儿童微量血浆中白消安和甲氨蝶呤的浓度

目的建立高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定血浆中白消安和甲氨蝶呤的浓度,并用于儿童血液病患者的治疗药物监测。方法血浆样本经甲醇沉淀蛋白前处理,采用Phenomenex Kinetex EVO C18色谱柱分离,流动相为水(含2 mmol·L^(-1)乙酸铵+0.07%甲酸)和甲醇,梯度洗脱;流速为0.5 mL·min^(-1)。质谱检测方式为电喷雾离子源正离子模式,多反应监测(MRM)扫描,监测离子对:白消安m/z 264.1→151.0、内标白消安-D8 m/z 272.0→159.0;甲氨蝶呤m/z 455.1→m/z 308.2、甲氨蝶呤-D3(内标)m/z 458.1→m/z 311.1。结果白消安在62.50~4000 ng·mL^(-1)内与峰面积线性关系良好(r=0.9984),甲氨蝶呤在15.63~1000 ng·mL^(-1)与峰面积线性关系良好(r=0.9990)。准确度、精密度、基质效应和稳定性均符合要求。结论本方法操作简便、快速准确、专属性强且稳定性好,适用于血浆中白消安和甲氨蝶呤的快速分析,可用于儿童血液肿瘤患者的临床治疗药物监测。

HPLC-MS-MS法测定人血清中氟西汀、文拉法辛及其代谢产物与应用

建立可同时快速测定人血清中氟西汀(Fluoxetine, FXT)、文拉法辛(Venlafaxine, VEN)及其活性代谢产物N-去甲氟西汀(Norfluoxetine,N-FXT)、O-去甲文拉法辛(O-Desmethylvenlafaxine,O-VEN)浓度的方法,并应用于临床,监测相关药物在人体中的代谢情况。临床样本,以甲醇-甲酸混合溶剂作蛋白沉淀剂,处理后,离心后取上清,进样高效液相色谱-串联质谱系统(HPLC-MS/MS),使用Phenomenex Kinetex Biphenyl色谱柱(2.1 mm×50 mm, 2.6μm),流动相为含0.1%甲酸和1 mmol/L甲酸铵的水和甲醇,流速0.4 mL·min^(-1),柱温45℃,进样量5μL,采用电喷雾正离子多反应监测模式检测。检测方法特异性和选择性较好,血药质量浓度分别在10~1 000,32~3 200,18~1 800,18~1 800 ng/mL范围内线性良好,回收率在85%~115%之间,批内批间精密度RSD均小于15%,临床样本在室温放置24 h、反复冻融、长期冻存保存下,检测准确度在85%~115%之间,相对基质效应均在20%以内,临床检测患者血药浓度,VEN加O-VEN,结果平均(263.89±176.67) ng/mL;FXT加N-FXT结果平均(139.12±121.3) ng/mL。方法样品用量少,处理简便,准确度高,特异性强,稳定性好,适用于同时快速测定人血清中FXT、VEN及其活性代谢产物的浓度,为精准个性化用药提供可靠的方法学支持。

HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和布洛芬

目的建立一种可以同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和布洛芬的液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)。方法选用对乙酰氨基酚-d_(3)和布洛芬-d_(3)为内标,采用甲醇蛋白沉淀法处理血浆样品。色谱柱采用ZORBAX Extend C_(18)(4.6×150 mm,3.5μm),选用梯度洗脱方式,流动相A为5 mM乙酸铵水溶液,流动相B为甲醇;采用电喷雾离子化多反应监测模式:0~3.50 min,以正离子检测对乙酰氨基酚和对乙酰氨基酚-d_(3),3.5~5.5 min,以负离子检测布洛芬和布洛芬-d_(3)。结果对乙酰氨基酚和布洛芬分别在0.0400~10.0μg·mL^(-1)、0.100~25.0μg·mL^(-1)内线性关系良好,且精密度、回收率、稳定性等考察均符合要求。结论该方法快速简便,灵敏、准确且选择性好,适用于对乙酰氨基酚和布洛芬的临床药代动力学研究。

不同牛血清替代人血清作为空白基质在HPLC-MS/MS法测定他克莫司药物浓度中的可行性分析

目的以他克莫司为模型药,考察不同牛血清替代人血清作为空白基质在HPLC-MS/MS药物浓度测定中的可行性研究。方法在相同的处理方法下,以人血清和不同牛血清作为空白基质制备标准曲线,对比101份他克莫司血清样品在不同标准曲线下的浓度是否存在差异。结果三种牛血清(小牛血清、新生牛血清、胎牛血清)与人血清的相对偏差均大于TEa(12.5%),均不能替代人血清作为空白基质。结论以他克莫司为模型药时,在HPLC-MS/MS法测定药物浓度中,三种牛血清均不能替代人血清作为空白基质。

HPLC-MS/MS测定化妆品中羟丙基四氢吡喃三醇的含量及构型比例

建立了一种高效液相色谱-串联质谱法,能够同时测定化妆品中羟丙基四氢吡喃三醇(玻色因)含量及其不同构型的比例。试样经四氢呋喃溶解混匀后,超声提取,使用氨基柱洗脱分离,选择电喷雾离子源,以MRM模式采集进行分析,外标法定量,利用峰面积计算(β, S)构型玻色因与(β, R)构型玻色因的比例。结果表明,羟丙基四氢吡喃三醇,在10~200 mg/L范围内,浓度与响应值呈显著线性关系,相关系数(r)≥0.999,回收率范围均在86.6%~93.1%之间,相对标准偏差(n=6)小于2.6%,方法定量限为1 000 mg/kg。该方法操作简便,针对高极性、结构差异微小的化合物具有较好的保留和分离效果,且灵敏度高、专属性强、准确性好,前处理操作简易,能够进行化妆品中羟丙基四氢吡喃三醇含量及其不同构型比例的大批量测定。

HPLC-MS/MS法测定盐酸拉贝洛尔中潜在基因毒性杂质

为了更好地控制盐酸拉贝洛尔中潜在的基因毒性杂质,保证用药安全,建立了高效液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)法检测盐酸拉贝洛尔中潜在遗传毒性杂质N-亚硝基拉贝洛尔。液相色谱条件:以Waters ACQUITY UPLC CSH C_(18)(150 mm×3.0 mm,1.7μm)为色谱柱,流动相A为0.01 mol/L甲酸铵-0.1%甲酸水溶液,流动相B为乙腈溶液,梯度洗脱,流速为0.5 mL/min,柱温为50℃,进样体积为10μL。以电喷雾电离源为离子源,负离子模式,采用多反应监测,建立质谱条件,对盐酸拉贝洛尔中N-亚硝基拉贝洛尔进行定量检测。结果表明:N-亚硝基拉贝洛尔质量浓度在1.01~100.60 ng/mL范围内有良好的线性关系;低、中、高3个浓度的加样回收率(n=3)为96.84%~99.53%;检测限和定量限分别为0.01 ng/mL和0.03 ng/mL;6批盐酸拉贝洛尔样品中N-亚硝基拉贝洛尔的含量为0.37~0.79 ng/mL。所提出的方法灵敏度高、专属性强,可用于测定盐酸拉贝洛尔中的N-亚硝基拉贝洛尔,为盐酸拉贝洛尔的质量控制提供参考。

MWCNTs改进QuEChERS结合HPLC-MS/MS检测柑橘类水果中16种农药残留

建立了多壁碳纳米管(MWCNTs)改进的QuEChERS方法、结合高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(HPLC-MS/MS)技术,建立柑橘类水果中16种农药的多残留分析方法。样品前处理采用QuEChERS(quick,easy,cheap,effective,rugged,safe)方法,用乙腈提取,经混合净化剂(100 mg PSA+10 mg MWCNTs)分散固相净化,过膜后进行HPLC-MS/MS检测,外标法定量。结果显示16种农药在2.5~250μg/L范围内有着良好的线性关系,相关系数0.9962~0.9999,16种农药的回收率为70.00%~111.55%,RSDs为1.26%~14.58%,定量限为0.023~5.365μg/kg。应用该方法对75个样品进行检测,多残留农药的检出率为61.3%,单份样品中最多检出8种农药。苯醚甲环唑的检出率最高(42.7%),丙溴磷的最大残留浓度最高(95.31μg/kg),但75份柑橘全果样品中检出的农药残留量均未超过其最大残留限量。

HPLC-MS/MS法同时测定功能性饮料中香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素的含量

目的建立HPLC-MS/MS同时测定功能性饮料中香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素含量的方法。方法^(®)采用WatersCORTECS T3色谱柱(2.1mm×100mm,2.7μm),以0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相,梯度洗脱,柱温30℃;流速0.3 ml/min,进样量为2μl。采用质谱检测器,电喷雾正离子模式(ESI^(+)),进行多反应监测(MRM)。按外标法定量。结果香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素分别在5.493~175.787,5.131~164.179,5.019~160.619ng/ml浓度范围内线性良好,相关系数(r)分别为0.9997,0.9999和0.9999;方法检出限分别为8,7,7μg/kg;定量限分别为15,14,14μg/kg;平均回收率分别为96.8%,86.7%,88.9%,RSD值分别为4.0%,2.0%,5.2%(n=6)。仪器的精密度和方法的重复性RSD均小于10%。结论该方法简单高效、重复性好,可用于检测功能性饮料中香兰素、甲基香兰素和乙基香兰素的含量。

HPLC-MS/MS同时测定感冒安颗粒中5种黄酮成分的含量

目的建立HPLC-MS/MS方法测定感冒安颗粒中5种黄酮成分含量。方法色谱条件:色谱柱为Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×150 mm×4.6 mm,5μm,100Å),流动相为甲醇(A)-0.1%甲酸(B),梯度洗脱(0~20 min,35%A;20~40 min,45%A),流速为1.0 ml/min,柱温为25℃;质谱条件:电喷雾电离源(ESI源)负离子扫描,多反应监测(MRM)模式检测。5种黄酮检测的离子对:芦丁m/z 609.1→300.1、金丝桃苷和异槲皮苷m/z 463.0→300.1、槲皮素m/z 301.0→151.0、木犀草素m/z 285.0→132.9。结果5个成分在一定浓度范围内与峰面积具有良好的线性关系,相关系数r均>0.9991;平均加样回收率在100.63%~102.81%之间,RSD范围在0.67%~2.07%。10批感冒安颗粒中芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素和木犀草素的含量测定结果分别为32.23~479.83、0.291~1.825、11.44~20.54、6.32~18.41、3.46~6.51μg/g。结论建立的HPLCMS/MS法灵敏度高、专属性强,适合同时测定感冒安颗粒中5种黄酮类成分的含量。