QuEChERS/HPLC-MS/MS法测定渔用饲料及饵料中地西泮及其代谢物

研究建立了一种同时测定渔用饲料及饵料中地西泮及其代谢物的分散型固相萃取(QuEChERS)/高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)的方法。样品采用乙酸乙酯提取,提取液经50 mg C18和PSA分散固相萃取净化,40℃下氮吹浓缩近干,加入80%乙腈1.0 mL复溶,过滤后采用HPLC-MS/MS法进行测定。目标物采用飞诺美Kinetex C18系列色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm)分离,以0.1%体积比甲酸水溶液和乙腈为流动相梯度洗脱。电喷雾离子源(ESI+)、选择反应监测(SRM)模式下进行测定,基质匹配内标法定性定量。结果显示,该方法在0.5~50.0μg/kg范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,检出限和定量下限分别为0.5μg/kg和1.0μg/kg。在3个不同的添加水平下,地西泮及其代谢物的平均回收率为82.3%~109.4%,相对标准偏差为3.62%~6.33%。研究表明,该方法具有快速、准确度高与灵敏度高的优点,可满足渔用饲料及饵料中地西泮及其代谢物的残留检测需求。

HPLC-MS/MS法同时测定微量血浆中甲氨蝶呤、左乙拉西坦、拉莫三嗪浓度及其临床应用

目的 建立HPLC-MS/MS法测定微量血浆中甲氨蝶呤、左乙拉西坦和拉莫三嗪的浓度,同时应用于儿童治疗药物监测。方法 取含药血浆10μl,用蛋白沉淀法对样本进行前处理。色谱柱为Agilent C18(50 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为0.1%甲酸水和甲醇,梯度洗脱;流速为0.4 ml/min。采用电喷雾离子源正离子模式,监测甲氨蝶呤m/z 455.1→308.2,甲氨蝶呤-D3 m/z 458.1→311.1(内标);左乙拉西坦m/z 171.1.4→126.2,左乙拉西坦-D6 m/z177.2→132.2(内标);拉莫三嗪m/z 256.1→211,拉莫三嗪-13C3-D3 m/z 262.1→217.1(内标)。结果 甲氨蝶呤在25~1 500 ng/ml线性关系良好,标准曲线方程:Y=0.251 6X+0.003 4(r=0.998 9),定量下限为25 ng/ml;左乙拉西坦在1~50μg/ml线性关系良好,标准曲线方程:Y=16.687 6X+0.000 2(r=0.991 1),定量下限为1μg/ml;拉莫三嗪在0.5~25.0μg/ml线性关系良好,标准曲线方程:Y=46.369 5X-0.059 9(r=0.999 1),定量下限为0.5μg/ml。样本批内、批间准确度和精密度符合要求、基质效应符合规定。本方法验证后成功用于1 348例临床患儿样本的检测。结论 本方法操作简便、专属性强、灵敏度高,可用于人血浆中甲氨蝶呤、左乙拉西坦及拉莫三嗪的分析,适用于儿童治疗药物监测。

HPLC-MS/MS法同时测定患者全血中他克莫司和五酯胶囊4种主要成分的浓度

建立HPLC-MS/MS法同时测定人全血中他克莫司和五酯胶囊4种主要成分五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子酯甲的浓度,并用于免疫抑制剂他克莫司联用保肝中药五酯胶囊临床药物浓度监测的研究中。采用了WatersAcquity UPLC■BEH C18色谱柱(50×2.1mm,1.7μm),以5mmol/L乙酸铵-0.1%甲酸水溶液为水相,乙腈为有机相,流速为0.3mL/min,柱温60℃。各成分均采用他克莫司同位素化合物(13C,2H4)作为内标(IS),全血样本首先经硫酸锌处理,再加入含内标的乙腈沉淀蛋白,最后离心后取上清液进样,质谱采用电喷雾离子源,以多反应离子监测(MRM)、正离子扫描模式检测。建立的HPLC-MS/MS法在1~100ng/m L范围内,他克莫司和五酯胶囊的4种主要成分色谱响应与浓度相关性良好,定量下限均为1ng/m L;他克莫司、五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子酯甲以及内标的保留时间分别为2.54、2.33、2.65、1.14、1.56、2.54min;准确度、回收率和经内标校准后的基质效应及稳定性数据均符合相关要求。方法灵敏、专属性强、准确性好,适用于人全血中他克莫司、五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子酯甲的浓度测定。

HPLC-MS/MS指纹图谱模式识别结合化学计量学对文王一支笔特征标志物的差异分析

文王一支笔为蛇菰科植物筒鞘蛇菰(Balanophora involucrate Hook.f.)的干燥全草,是鄂西地区特色民族珍稀药材。本研究首先利用HPLC-MS/MS技术建立了鄂西十堰地区5个产地10个批次文王一支笔的根茎、花茎和花序3个部位的化学指纹图谱,标定了其中29个共有峰,并推断了27个色谱峰的化学结构,包括13个酚酸类和8个黄酮类成分。聚类分析(CA)及主成分分析(PCA)结果显示,文王一支笔地下(根茎)与地上(花茎、花序)部位化学成分差异较大,花茎与花序间化学成分差异较小。正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)中VIP值分析结果表明,峰12、8、2、3、17、21、9和22是引起文王一支笔不同药用部位化学成分差异的潜在标志性成分(Q-marker),可作为其质量控制的依据。

HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和布洛芬

目的建立一种可以同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和布洛芬的液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)。方法选用对乙酰氨基酚-d_(3)和布洛芬-d_(3)为内标,采用甲醇蛋白沉淀法处理血浆样品。色谱柱采用ZORBAX Extend C_(18)(4.6×150 mm,3.5μm),选用梯度洗脱方式,流动相A为5 mM乙酸铵水溶液,流动相B为甲醇;采用电喷雾离子化多反应监测模式:0~3.50 min,以正离子检测对乙酰氨基酚和对乙酰氨基酚-d_(3),3.5~5.5 min,以负离子检测布洛芬和布洛芬-d_(3)。结果对乙酰氨基酚和布洛芬分别在0.0400~10.0μg·mL^(-1)、0.100~25.0μg·mL^(-1)内线性关系良好,且精密度、回收率、稳定性等考察均符合要求。结论该方法快速简便,灵敏、准确且选择性好,适用于对乙酰氨基酚和布洛芬的临床药代动力学研究。

HPLC-MS-MS法测定人血清中氟西汀、文拉法辛及其代谢产物与应用

建立可同时快速测定人血清中氟西汀(Fluoxetine, FXT)、文拉法辛(Venlafaxine, VEN)及其活性代谢产物N-去甲氟西汀(Norfluoxetine,N-FXT)、O-去甲文拉法辛(O-Desmethylvenlafaxine,O-VEN)浓度的方法,并应用于临床,监测相关药物在人体中的代谢情况。临床样本,以甲醇-甲酸混合溶剂作蛋白沉淀剂,处理后,离心后取上清,进样高效液相色谱-串联质谱系统(HPLC-MS/MS),使用Phenomenex Kinetex Biphenyl色谱柱(2.1 mm×50 mm, 2.6μm),流动相为含0.1%甲酸和1 mmol/L甲酸铵的水和甲醇,流速0.4 mL·min^(-1),柱温45℃,进样量5μL,采用电喷雾正离子多反应监测模式检测。检测方法特异性和选择性较好,血药质量浓度分别在10~1 000,32~3 200,18~1 800,18~1 800 ng/mL范围内线性良好,回收率在85%~115%之间,批内批间精密度RSD均小于15%,临床样本在室温放置24 h、反复冻融、长期冻存保存下,检测准确度在85%~115%之间,相对基质效应均在20%以内,临床检测患者血药浓度,VEN加O-VEN,结果平均(263.89±176.67) ng/mL;FXT加N-FXT结果平均(139.12±121.3) ng/mL。方法样品用量少,处理简便,准确度高,特异性强,稳定性好,适用于同时快速测定人血清中FXT、VEN及其活性代谢产物的浓度,为精准个性化用药提供可靠的方法学支持。

HPLC-MS/MS法同时测定月季花配方颗粒中10种成分的含量

目的建立HPLC-MS/MS法同时测定月季花配方颗粒中金丝桃苷、异槲皮苷、没食子酸、鞣花酸、槲皮苷、芦丁、阿福豆苷、萹蓄苷、槲皮素-3-O-6-反式-香豆酰基-β-D-葡萄糖苷、槲皮素3-O-2″-没食子酰基-β-D-葡萄糖苷的含量。方法分析采用Waters Acquity UPLC HSS T3色谱柱(1.8μm,2.1 mm×150 mm);流动相甲醇-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温40℃;电喷雾离子源;负离子扫描;多反应监测模式。结果10种成分在各自范围线性关系良好(r>0.9958),平均加样回收率97.3%~99.6%,RSD 0.8%~2.7%。结论该方法简便快速,灵敏度高,专属性强,可用于月季花配方颗粒的质量控制。

MWCNTs改进QuEChERS结合HPLC-MS/MS检测柑橘类水果中16种农药残留

建立了多壁碳纳米管(MWCNTs)改进的QuEChERS方法、结合高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(HPLC-MS/MS)技术,建立柑橘类水果中16种农药的多残留分析方法。样品前处理采用QuEChERS(quick,easy,cheap,effective,rugged,safe)方法,用乙腈提取,经混合净化剂(100 mg PSA+10 mg MWCNTs)分散固相净化,过膜后进行HPLC-MS/MS检测,外标法定量。结果显示16种农药在2.5~250μg/L范围内有着良好的线性关系,相关系数0.9962~0.9999,16种农药的回收率为70.00%~111.55%,RSDs为1.26%~14.58%,定量限为0.023~5.365μg/kg。应用该方法对75个样品进行检测,多残留农药的检出率为61.3%,单份样品中最多检出8种农药。苯醚甲环唑的检出率最高(42.7%),丙溴磷的最大残留浓度最高(95.31μg/kg),但75份柑橘全果样品中检出的农药残留量均未超过其最大残留限量。

HPLC-MS/MS法测定盐酸拉贝洛尔中潜在基因毒性杂质

为了更好地控制盐酸拉贝洛尔中潜在的基因毒性杂质,保证用药安全,建立了高效液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)法检测盐酸拉贝洛尔中潜在遗传毒性杂质N-亚硝基拉贝洛尔。液相色谱条件:以Waters ACQUITY UPLC CSH C_(18)(150 mm×3.0 mm,1.7μm)为色谱柱,流动相A为0.01 mol/L甲酸铵-0.1%甲酸水溶液,流动相B为乙腈溶液,梯度洗脱,流速为0.5 mL/min,柱温为50℃,进样体积为10μL。以电喷雾电离源为离子源,负离子模式,采用多反应监测,建立质谱条件,对盐酸拉贝洛尔中N-亚硝基拉贝洛尔进行定量检测。结果表明:N-亚硝基拉贝洛尔质量浓度在1.01~100.60 ng/mL范围内有良好的线性关系;低、中、高3个浓度的加样回收率(n=3)为96.84%~99.53%;检测限和定量限分别为0.01 ng/mL和0.03 ng/mL;6批盐酸拉贝洛尔样品中N-亚硝基拉贝洛尔的含量为0.37~0.79 ng/mL。所提出的方法灵敏度高、专属性强,可用于测定盐酸拉贝洛尔中的N-亚硝基拉贝洛尔,为盐酸拉贝洛尔的质量控制提供参考。

HPLC-MS/MS直接进样法测定环境水体中阿特拉津和甲萘威

采用HPLC-MS/MS直接进样方式,建立了一种适用于生活饮用水及其水源水等环境水体中甲萘威和阿特拉津的快速测定方法。本方法与现行环境保护标准相比,具有灵敏度高、操作简便、出峰时间快等优势。实验结果表明:甲萘威和阿特拉津的检出限分别为0.07μg/L和0.08μg/L,甲萘威相关系数达0.999 7,阿特拉津相关系数达0.999 6,方法精密度在2.72%~10.32%之间,加标回收率结果在87.5%~120.5%之间。该方法线性相关系数高、方法检出限低、精密度和准确度均满足环境水体中特定项目分析要求,方法准确可靠,且只需将样品过滤及稀释后即可上机测定,免去了液液萃取或固相萃取等浓缩步骤,极大地缩短了样品预处理和分析测试时间,快速简便。

HPLC-MS法同时测定大鼠血浆中那格列奈及其主要代谢物M1

目的建立同时测定那格列奈及其主要代谢物M1的HPLC-MS方法。方法血浆样品经过乙酸乙酯萃取,以非那西丁为内标。色谱采用岛津C18柱(5μm,4.6 mm×250 mm)分离,流动相为0.1%甲酸溶液与乙腈,梯度洗脱,流速0.2 mL/min。质谱采用选择性离子监测(SIM)阳离子模式,检测对象[M+H]^(+)为:那格列奈318.2,代谢物M1334.1,非那西丁180.1。结果标准曲线线性范围为0.0625~8μg/mL那格列奈,M1为0.0313~4μg/mL。日内及日间准确度和精密度变异均<10%,血浆样品稳定性良好,提取回收率均>96%,基质效应<5%。结论本方法稳定性好、灵敏度高、重现性好,可应用于各类生物样本中那格列奈及其代谢物M1的生物等效性与药物代谢动力学研究。

QuEChERS-HPLC-MS/MS法测定中药中4种交链孢霉毒素

样品用1%甲酸-乙腈溶液提取,经N-丙基乙二胺(PSA)净化,采用BEH-C_(18)色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,采用电喷雾离子源负离子模式扫描,多反应模式(MRM)监测目标物,内标法定量。4种交链孢霉毒素在0.200~200 ng/mL的范围内呈现良好的线性关系(R^(2)≥0.999),并以西洋参为例做方法学验证。该方法还可应用在铁皮石斛、薏仁、陈皮、莲子和橄榄这五种基质中。该方法操作简单快捷,可用于中药中4种交链孢霉毒素的检测。

HPLC-MS/MS测定果蔬中生长调节剂

目的:建立一种高效液相色谱-串联质谱的检测方法,用于同时测定果蔬中的多种生长调节剂。方法:通过优化样品提取和净化条件,提高目标化合物的检测灵敏度和准确性,采用乙腈联合QuEChERS提取法进行样品前处理,并通过C18固相萃取柱进行净化。质谱仪采用电喷雾离子源,优化母离子和子离子的扫描范围和碰撞能量。结果:优化后的提取和净化条件能够提高生长剂的提取率,校准曲线R^(2)≥0.996。结论:该方法能有效提高检测灵敏度,操作简单,适用于果蔬中生长调节剂的残留分析。

HPLC-MS/MS快速测定蜂蜜中五氯酚残留

文章建立了应用HPLC-MS/MS快速测定蜂蜜中五氯酚残留的分析方法。样品经氨化乙酸乙酯(9∶1,V∶V)涡旋超声提取,提取液经氮气吹干,液相色谱串联质谱测定,内标法定量。在五氯酚添加浓度为0.5、2.0、10.0μg·kg^(-1)时,回收率为93.5%~101.3%,相对标准偏差(RSD)为4.30%~6.82%,其检出限和定量限分别为0.2μg·kg^(-1)和0.5μg·kg^(-1)。结果表明,此方法操作简单快捷、灵敏度高、重复性好、环保可靠,完全适用于蜂蜜中五氯酚残留量的测定。

QuEChERS-HPLC-MS/MS快速测定花生中4种黄曲霉素含量的研究

建立QuEChERS-高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)快速测定花生中4种黄曲霉毒素的含量。方法样品用乙腈提取之后,使用分散固相萃取纯化管(CNW dSPE)净化,选择ACQUITYBEN C18色谱柱(1.7μM,2.1MM×100MM)分离,采集模式为多反应监测(MRM),外标法定量。结果 4种待测物在范围内线性关系良好,相关系数(R)在0.995~0.999,检出限(LOD)为0.01~0.05mg/kg定量限(LOQ)为0.02~0.5mg/kg,低、中、高3个添加水平的回收率为74.50%~109.00%,相对标准偏差(RSD)为0.25%~3.55%。结论该方法净化效果良好,具有前处理操作简便、快速、高效、准确等优点,可适用于花生中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的检测。

HPLC-MS/ESI法同时检测血浆中4种非典型抗精神病药物

目的 建立同时测定血浆中的非典型抗精神病药利培酮、氯氮平、奥氮平和奎硫平HPLC-MS/ESI法。方法样品经碱化后用乙醚2次提取,采用NUCLEODUR C18(2.0 mm×125 mm,3μm)柱,水(甲酸:2.7 mmol·L-1,醋酸铵:10 mmol·L-1)-乙腈(53:47,v/v)为流动相,以地西泮为内标,电喷雾电离源正源(ESI+)选择离子峰检测。结果 氯氮平和奎硫平在20～1000μg·L-1内,利培酮和奥氮平在1～50μg·L-1内线性关系良好,4种药物的萃取回收率均>90％,方法回收率均>95％,日间差和日内差均<15％。结论 此方法准确、灵敏、简单,适用于这4种药物的常规治疗药物浓度监测(TDM)、药物动力学及代谢机制的研究。

HPLC-MS/ESI 法同时测定人血浆中盐酸特拉唑嗪盐酸哌唑嗪和甲磺酸多沙唑嗪

目的:建立同时测定血浆中盐酸特拉唑嗪、盐酸哌唑嗪和甲磺酸多沙唑嗪的 HPLC-MS/ESI 方法。方法:血浆样品0.5mL,加入10 ng·mL^(-1)二盐酸氟哌噻吨内标液50 μL,经饱和碳酸钠200 μL碱化和1.25 mL 正已烷-叔丁基甲醚(1:1)萃取;以Hypersil GOLD C_(18)柱(100 mm×2.1 mm,5 μm)为固定相,20 mmol·L^(-1)醋酸铵(0.05%甲酸,pH 4.2)-乙腈-甲醇为流动相,梯度洗脱分离,流速为0.2 mL·min^(-1);采用 HPLC-MS,选择离子检测(SIM)法测定盐酸特拉唑嗪([M+H]^+,m/z 388)、盐酸哌唑嗪([M+H]^+,m/z 384)、盐酸多沙唑嗪([M+H]^+,m/z 452和内标氟哌噻吨([M+H]^+,m/z 435)的血药浓度。结果:线性范围为1～100 ng·mL^(-1),r>0.9930(n=7);萃取回收率大于83.0%;方法回收率大于97.0%;日内、日间精密度 RSD 均小于10.0%。结论:该方法灵敏、专属、快速,适用于3种药物的血药浓度监测,以及药代动力学和生物等效性的研究。

高粱原花青素的ESI-MS分析及其低聚体的RP-HPLC-MS/MS法分离鉴定

以高粱加工后的副产物——高粱外种皮为原料,采用电子喷雾离子化质谱(electrospray ionization-massspectroscopy,ESI-MS)对ADS-17大孔树脂纯化的高纯度高粱原花青素(sorghum procyanidins,SPC)的组成进行分析,并通过反相高效液相色谱(reverse phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC)-质谱(RP-HPLC-MS/MS)联用对Toyopearl HW-40凝胶色谱分离的SPC-5级分进行分离鉴定。结果显示:SPC为低聚体原花青素,包含有儿茶素/表儿茶素单体、原花青素二～六聚体;SPC-5由8种三聚体和1种二聚体组成。

HPLC-MS／ESI测定人血清中丙戊酸浓度

目的:建立HPLC-MS/ESI测定人血清中丙戊酸浓度的方法,并用于临床血药浓度监测。方法:采用Waters XTerraTM MS C18色谱柱(150 mm×3.9 mm,5μm),以10 mmol·L-1醋酸铵水溶液-乙腈(60:40)为流动相,流速0.80 mL·min-1,柱温45℃,以双氯芬酸为内标。采用电喷雾电离源(ESI)负源,用各物质准分子离子峰的选择离子监测(SIR)进行定量分析,血清样品用乙腈直接沉淀后进样。结果:丙戊酸在7.25-188.10μg·mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9997),最低检测浓度为0.50μg·mL-1(S/N≥3)。日内与日间RSD均小于10%(n=5),方法回收率在98.7%-105.1%之间。结论:该方法操作简单,结果准确,血药浓度监测时间很短,灵敏度高;适用于丙戊酸血药浓度监测及药代动力学研究。

HPLC-MS/ESI^+测定人血浆中喹硫平及其代谢产物

目的建立同时测定人血浆中喹硫平及其磺氧化-、7-羟基-和7-羟基-氮-去烷基-代谢产物浓度的高效液相色谱-电喷雾电离质谱联用法。方法采用Kromasil C18反相柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以水(含甲酸1.70mmol.L-1,醋酸铵5.8 mmol.L-1)-乙腈(65∶35)为流动相,流速0.95 mL.min-1。质谱采用电喷雾电离源正离子模式(ESI+),选择离子监测(SIR)各物质准分子离子峰,样品用固相萃取法处理。结果喹硫平和磺氧化喹硫平在10~2 000μg.L-1,7-羟基-喹硫平和7-羟基-氮-去烷基喹硫平在1~200μg.L-1线性关系良好,萃取回收率均>85%,方法回收率均>95%,日内、日间RSD均<15%。结论该方法专一性强、灵敏度高、简单,可用于研究喹硫平的代谢机制以及药物动力学。