HPLC-TQ-MS/MS测定加味败藤浸膏中6种有效成分的血药浓度及其药动学研究

目的建立HPLC-TQ-MS/MS分析方法同时测定大鼠血浆中的小檗碱、大车前苷、柴胡皂苷a、延胡索乙素、芍药苷和苦杏仁苷,并用于研究大鼠口服加味败藤浸膏后的药动学。方法色谱柱为Agilent Poroshell 120EC-C18柱(3.0 mm×100 mm,2.7μm),流动相为0.05%甲酸-乙腈(含0.05%甲酸),按程序梯度洗脱。质谱检测方式为多反应离子监测(MRM),采用正、负离子模式切换及时间分段扫描方法。用于定量分析的离子反应分别为m/z 335.9→m/z 319.9(小檗碱,ESI+),m/z 639.1→m/z 160.9(大车前苷,ESI-),m/z 779.3→m/z 617.4(柴胡皂苷a,ESI-),m/z 356.0→m/z 192.0(延胡索乙素,ESI+),m/z 449.1→m/z 121.1(芍药苷,ESI-),m/z 456.1→m/z 323.1(苦杏仁苷,ESI-),m/z 323.9→m/z 126.9(格列齐特,内标,ESI+)和m/z 321.9→m/z 170.1(格列齐特,内标,ESI-)。大鼠单剂量口服加味败藤浸膏(3.1 g·kg-1)后眼底静脉丛取血,血浆经甲醇预处理后进入HPLC-TQ-MS/MS分析。用DAS统计软件计算加味败藤浸膏中活性成分的药动学参数。结果经方法学考证,血浆中小檗碱、大车前苷、柴胡皂苷a、延胡索乙素、芍药苷和苦杏仁苷的线性范围分别为0.59~292.50,0.68~168.75,6.05~1 512.50,0.68~337.50,6.70~1 675.00和5.60~1 400.00 ng·mL^(-1),定量限分别为0.59,0.68,6.05,0.68,6.70和5.60 ng·mL^(-1),精密度、回收率及稳定性均良好,符合生物样本的分析要求。结论本实验所建HPLC-TQ-MS/MS分析方法灵敏、简便、可靠,适用于加味败藤浸膏的药动学研究。

清清颗粒HPLC-DAD指纹图谱

目的建立清清颗粒HPLC-DAD指纹图谱。方法该药物70%甲醇提取液的分析采用Promosil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;柱温30℃;体积流量1.0 m L/min;检测波长237 nm。再通过HPLC-TQ-MS鉴定所含成分。结果 10批样品标识出32个共有峰,相似度均大于0.95,并鉴定出其中31个,包括黄酮、皂苷、生物碱、糖苷等。结论该方法准确可靠,重复性好,可用于清清颗粒的质量控制。

蜂蜜炼制前后黄酮类成分种类和含量变化分析

目的研究中药辅料蜂蜜炼制前后黄酮类成分变化。方法参考《中药药剂学》,对不同来源的6种蜂蜜进行炼制。供试品经固相萃取法富集黄酮类成分。采用高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(HPLC-TQ-MS)法测定,Thermo Accucore RP-MS色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm),以0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.3 m L/min,柱温30℃。质谱条件:采用电喷雾离子源(ESI),正离子检测模式,多反应监测模式(MRM)扫描分析。结果蜂蜜中共检测到12种黄酮类成分,包括黄酮苷元、二氢黄酮苷元和异黄酮苷元。黄酮苷元有8种:槲皮素、桑黄素、木犀草素、山柰酚、芹菜素、汉黄芩素、高良姜素和白杨素;二氢黄酮苷元有3种:短叶松素、柚皮素和乔松素;异黄酮苷元染料木素。不同蜜源蜂蜜所含黄酮类成分种类和含量存在明显差异。6个蜂蜜样品炼制后,都发现了蜂蜜中没有报道过的芦丁和芸香柚皮苷,12种检测到的蜂蜜黄酮类成分在炼制后其量都有不同程度的变化,椴树蜜的槲皮素、桑黄素、木犀草素、山柰酚、芹菜素、汉黄芩素、乔松素和白杨素量均有增加,短叶松素、柚皮素和高良姜素量没增加反而还有下降的;洋槐蜜中除芹菜素量增加不明显外,其余均有所增加,尤其是槲皮素和桑黄素增加的较为明显;百花蜜和枣花蜜12种黄酮类成分量均显著增加。结论炼制可造成蜂蜜中黄酮类成分的种类和含量发生改变。

凌霄花HPLC-ELSD指纹图谱的研究

目的:采用HPLC-ELSD法构建凌霄花药材的指纹图谱,并对其主要成分进行鉴定。方法:采用Thermo C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.8 m L·min-1,柱温30℃,ELSD漂移管温度105℃,氮气流速3.5 L·min-1。结果:对不同产地的10批凌霄花药材进行分析,建立了凌霄花药材HPLC-ELSD指纹图谱,标定共有峰12个。通过对照品指认及HPLC-TQ-MS进一步分析,鉴定出了其中6个色谱峰,分别为麦角甾苷、顺式麦角甾苷或异麦角甾苷、芹菜素、科罗索酸、齐墩果酸和熊果酸。结论:该方法准确可靠、重复性好,可用于凌霄花药材的整体质量评价。