HPLC-UV-ELSD法同时测定青蒿中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量

用HPLC-UV-ELSD法同时测定青蒿药材中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量。采用Nucleodur C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μmID）；以乙腈-0．1％乙酸水（50：50）为流动相；紫外检测波长209nm，蒸发光散射检测器漂移管温度50℃。结果显示，青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸能够达到很好分离。它们的线性范围分别为0．52．2．6μg，r=0.9994（n=5）；0．022～4．4μg，r=0．9999（n=5）；0．203～8．12μg，r=0．9998（n=5）。平均回收率分别为99．45％（RSD=2．3％，n=6）；102．37％（RSD=1．7％，n=6）；101．10％（RSD=0．79％，n=6）。本法简单、准确、快速，可同时测定青蒿药材中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量。

HPLC-UV-ELSD同时测定藏药狭叶红景天中4种成分含量

目的:建立HPLC-UV-ELSD法同时测定13批藏药狭叶红景天中百脉根苷、没食子酸、红景天苷和酪醇的含量。方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.2%冰乙酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速:1 mL/min;检测波长:275 nm;柱温:30℃。蒸发光散射检测器的条件为漂移管温度:50℃,载气体积流量:1.5 L/min。结果:百脉根苷、没食子酸、红景天苷和酪醇分别在0.1044～6.2640μg(R^2=0.9999)、0.0223～1.3380μg(R_1~2=0.9993)、0.1758～10.5480μg(R_2~2=0.9994)、0.0468～2.8080μg(R_3~2=0.9999)的范围内线性关系良好,4种成分的平均加样回收率(RSD)分别为98.5%(1.13%)、100.5%(0.84%)、99.3%(0.96%)、99.8%(0.77%)。结论:该含量测定方法简便、快速、准确、分离度好,可用于狭叶红景天中没食子酸、百脉根苷、红景天苷和酪醇的含量测定,为藏药狭叶红景天的物质基础研究提供依据。

HPLC-UV-ELSD法同时测定黄芪中黄芪皂苷和黄酮类成分

建立HPLC-UV-ELSD法同时测定黄芪中黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、刺芒柄花苷、毛蕊异黄酮的含量,并比较四种不同供试液中7种成分的含量差异,实验采用Agilent 5 TC-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),0.3%甲酸水溶液-乙腈进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长254 nm;柱温30℃,漂移管温度70℃。在该色谱条件下,黄芪中7种成分能得到较好的分离,稳定性,重复性及精密度良好。本方法能简便、快捷、有效的测定黄芪药材中多种成分含量。大孔树脂制备供试品中黄芪皂苷和黄酮类成分更高,说明碱化处理对黄芪中的成分含量产生了一定影响。

不同配比补肾活血方HPLC-UV-ELSD指纹图谱研究

目的:建立不同配比补肾活血方HPLC-UV-ELSD指纹图谱,并对各峰来源进行归属。方法:采用HPLC法,色谱柱为Inertsil OSD-SP C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.05%甲酸水溶液(梯度洗脱),紫外检测器:检测波长为250 nm,蒸发光散射检测器:漂移管温度为105℃,空气体积流量为3.2 L/min;进样量20μL;流速为1 mL/min。运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2008版)》对12批不同配比补肾活血方指纹图谱进行相似度计算,并对各共有峰进行药材来源归属及成分指认。结果:建立了不同配比补肾活血方指纹图谱;在其HPLC-UV指纹图谱中标定了23个共有峰,其中1～15、17、21号峰来源于葛根,18～20、22、23号峰来源于丹参,16号峰为丹参和葛根共有。在其HPLC-ELSD指纹图谱中标定了7个共有峰,其中1’～4’号峰来源于葛根,5’号峰来源于丹参,6’、7’号峰来源于人参。通过与对照品对照指认出复方中4个成分,分别是6/3’号峰为葛根素,22/5’号峰为丹酚酸B,10号峰为大豆苷,6’号峰为人参皂苷Rb1。结论:建立了不同配比补肾活血方HPLC-UV-ELSD指纹图谱,为筛选补肾活血方最佳配比、确定其防治DR药效物质奠定基础。

HPLC-UV-ELSD联用测定黄花蒿叶片中青蒿素及相关倍半萜的含量

目的HPLC-UV-ELSD联用建立黄花蒿叶片中青蒿素及其生合成相关倍半萜的含量测定方法。方法采用Venusil XBP-C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水梯度洗脱,检测波长:203 nm,流速:1.0 mL.min-1,ELSD载气压力:0.35 MPa,喷嘴温度:35℃,漂移管温度:60℃,检测器:UV-ELSD联用,测定黄花蒿叶片中青蒿素、青蒿素B、3α-羟基-1-去氧青蒿素含量。同一色谱柱条件下流动相改为乙腈-水-甲酸(体积比为60.00∶40.00∶0.08),检测波长:215 nm,流速:1.0 mL.min-1,检测器:UV检测器,测定黄花蒿叶片中青蒿酸含量。结果4种倍半萜在各自的线性范围内线性关系良好(r≥0.9990),RSD<3%,平均加样回收率分别为98.5%(RSD=2.3%)、96.5%(RSD=1.8%)、97.5%(RSD=3.6%)、95.4%(RSD=2.5%)。结论该方法可作为黄花蒿中青蒿素及其生合成相关倍半萜的含量测定方法。

HPLC-UV-ELSD同时检测新型催泪喷射器中的合成辣椒素与吐温20

为检测警用催泪喷射器中合成辣椒素和吐温20的质量浓度,建立了一种紫外与蒸发光散射检测器联用的高效液相色谱方法(HPLC-UV-ELSD).其中紫外检测器检测合成辣椒素(SC)、蒸发光散射检测器检测吐温20.检测条件为:流动相为甲醇:水(80∶20),流速1 mL/min,紫外检测波长280 nm,柱温28℃;蒸发光散射检测器空气载气流量2.5 L/min,漂移管温度为60℃,雾化载气流压力设置为0.5 MPa.在合成辣椒素质量浓度为196~980μg/mL范围内,吐温20在质量浓度为212~1 060μg/mL范围内呈良好的线性关系(R^2>0.999),回收率均在90%~110%范围内.本方法已成功应用于实际警用催泪喷射器填充剂的检测.

HPLC-UV-ELSD联用检测熊香胶囊中牛磺熊去氧胆酸的含量

目的:HPLC-UV-ELSD联用检测熊香胶囊中牛磺熊去氧胆酸的含量;方法:采用Kromasil C18色谱柱(5μm,4.6mm×250mm),以甲醇-水(0.1%甲酸)(60∶40)为流动相;紫外检测波长为210nm;ELSD漂移管温度105℃,雾化气体(空气)流速2.7L·min-1;结果:牛磺熊去氧胆酸在1.44～5.76μg线形关系良好,紫外检测方式回收率为97%(n=5),RSD2.3%,UV检测方式回收率为101%(n=5),RSD1.5%;结论:与HPLC/UV相比,HPLC/ELSD测定熊香胶囊中牛磺熊去氧胆酸成分的含量结果更准确。

基于HPLC-UV-ELSD指纹图谱法同时测定绞股蓝中4种成分及不同产地药材质量评价

目的:建立绞股蓝药材高效液相色谱-紫外-蒸发光散射器(HPLC-UV-ELSD)串联指纹图谱方法,并同时测定槲皮素、芦丁、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷XLIX的含量,对其质量优劣进行全面综合评价。方法:采用HPLC-UV-ELSD串联法和相似度评价软件,对15批不同产地绞股蓝药材进行指纹图谱研究,并对绞股蓝中槲皮素、芦丁、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷XLIX 4种指标性成分中的含量进行测定与分析。结果:建立了绞股蓝药材HPLCUV-ELSD串联指纹图谱法,标定了11个共有峰,指认了其中4个色谱峰;不同产地绞股蓝药材中槲皮素、芦丁、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷XLIX 4种成分的含量高低不一,质量存在差异。结论:建立了绞股蓝药材HPLC-UVELSD指纹图谱法,并结合相似度评价和4种成分的定量分析结果,较全面地反映该药材的质量,该法可用于不同产地绞股蓝药材质量的有效评价。

山西产酸枣仁HPLC-UV-ELSD特征图谱及7个化学成分的含量测定

目的采用高效液相色谱法建立酸枣仁的特征图谱,并同时测定酸枣仁7个化学成分的含量。方法收集山西临汾大宁、运城闻喜和晋中榆次3个产地的酸枣仁样品,以乌药碱、木兰花碱、维采宁Ⅱ、斯皮诺素、6-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B为指标成分,采用Apollo C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈和0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,柱温为30℃,流速为1.0 ml/min,紫外检测波长分别为227 nm和335 nm,蒸发光散射检测器(ELSD)漂移管温度105℃。空气体积流量为2.5 L/min。结果建立了酸枣仁的特征图谱,标定了7个共有峰,不同检测波长下特征图谱的相似度为0.979-1,相对保留时间和相对峰面积RSD均小于0.3%。在227 nm波长,以木兰花碱为参照峰,乌药碱的相对保留时间为0.84;在335 nm,以斯皮诺素为参照峰,维采宁Ⅱ,6-阿魏酰斯皮诺素的相对保留时间为0.63和1.35;在蒸发光散射检测器(ELSD)检测条件下,以酸枣仁皂苷A为参照峰,酸枣仁皂苷B的相对保留时间为1.1。不同产地酸枣仁中7个成分含量有明显差异,其中乌药碱、木兰花碱、斯皮诺素、酸枣仁皂苷A 4个成分在榆次产地显著高于大宁和闻喜产地。结论本研究所建立的酸枣仁特征图谱方法操作简单,重复性好,并能同时测定酸枣仁中7个成分含量,可为酸枣仁的质量标准研究提供更加全面的依据。

HPLC-UV-ELSD同时测定玄参中5种成分的含量

目的:采用HPLC-UV-ELSD同时测定玄参药材中桃叶珊瑚苷、哈帕苷、哈帕俄苷、安哥拉苷C、肉桂酸的含量。方法:应用SHIMADZU C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);以乙腈-0.4%醋酸溶液为流动相,进行二元梯度洗脱;紫外检测波长为280nm,蒸发光散射检测器漂移管温度105℃。结果:桃叶珊瑚苷、哈巴苷、哈巴俄苷、安哥拉苷C和肉桂酸5种成分能够达到很好的分离。其线性范围分别是0.7520～13.54μg,r=0.9993(n=6);0.8280～14.90μg,r=0.9994(n=6);0.6360～11.45μg,r=0.9997(n=6);0.5440～9.792μg,r=0.9997(n=6);0.0108～0.1939μg,r=0.9999(n=6)。平均回收率分别为98.12%,RSD2.3%(n=6);99.14%,RSD1.5%(n=6);100.2%,RSD1.9%(n=6);98.17%,RSD1.7%(n=6);100.4%,RSD0.50%(n=6)。结论:该方法可同时测定玄参药材中上述5种成分的含量。

HPLC-UV-ELSD测定山银花中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量

目的：建立同时测定传统中药山银花中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙含量的HPLC分析方法。方法：采用Phenomenex Luna C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相0.4%醋酸（A）-乙腈（B）,梯度洗脱（0-12 min,80%A;12-13min,80%A→67%A;13-30 min,67%A→65%A;30-35 min,65%A→80%A）,流速0.5 mL.min-1;UV检测：检测绿原酸,λ=326nm;ELSD检测：检测灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙,雾化室温度88℃,漂移管温度108℃,N2气流量1.0 L·min^-1。结果：线性范围内3个化合物呈良好的线性关系（R^2〉0.9959）,加样回收率在99%-101%之间（n=6）,该方法精密度、稳定性和重复性良好,RSD〈2%。结论：该方法能够方便、准确地测定山银花中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量。

西洋参药材皂苷类成分HPLC-UV-ELSD特征图谱及模式识别研究

采用HPLC-UV-ELSD串联技术,建立西洋参药材皂苷类成分HPLC-UV-ELSD特征图谱的质量控制方法。色谱柱为Agilent Extend-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-水二元梯度洗脱模式,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为203 nm,漂移管温度为106.5℃,空气流速为2.9 L·min-1,对20批西洋参药材进行HPLC-UV-ELSD测定,采用聚类分析和主成分分析对特征图谱数据进行了模式识别研究,并指认了人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rd及拟人参皂苷F11等8个色谱峰。所建立的西洋参皂苷类成分特征图谱特征性和专属性强,方法快速、简便、可靠,可用于西洋参质量控制及综合评价。

HPLC-UV-ELSD同时测定黄芪水提液与含醇提取物中6种成分

建立参芪扶正注射液2种中间品中6种药效成分的HPLC-UV-ELSD分析法,并探讨在不同检测器上建立一测多评分析法的可行性。选取毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芪甲苷分别作为黄酮类成分和皂苷类成分的内标,计算芒柄花苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、2＇-羟基-3＇,4＇-二甲氧基异黄烷-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、黄芪皂苷Ⅱ相对于各自内标的相对校正因子,最后将样品一测多评法测定结果与外标法相比较。在黄酮类成分的UV检测中,14份样品一测多评方法的测定结果与外标法近似,相对偏差绝对值总体在5%以内。对于皂苷类成分的ELSD检测,2种方法测定结果相对偏差绝对值为0.48%~23.17%。在UV检测器上所建的一测多评方法较稳定,能够作为替代法起到节省对照品的作用,而在ELSD上所建一测多评方法准确度不如外标法,其原理与适用范围需要更进一步的探究。

HPLC-UV-ELSD法同时测定痰热清注射液中主成分含量

目的:建立同时测定痰热清注射液中绿原酸、黄芩苷、熊去氧胆酸含量和鹅去氧胆酸限量的高效液相色谱法。方法:色谱条件:Agilent Zorbax SB-C18柱;流动相为0.15%醋酸溶液-0.15%醋酸乙腈,线性梯度洗脱,流速为0.8 mL.min-1;柱温为30℃;紫外检测波长:绿原酸326 nm,黄芩苷276 nm;蒸发光散射检测器漂移管温度为100℃,雾化气流速为1.5 L.min-1。结果:绿原酸、黄芩苷、熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸分别在0.221～4.42,20.3～406,19.8～396,17.9～179 mg.L-1质量浓度范围内呈良好的线性关系,r均大于0.9995;平均加样回收率分别为101%,98.4%,99.4%,102%;4种化合物含量重复性试验RSD小于1.8%。结论:该方法简便、准确,重复性好,在对痰热清注射液中主要有效成分绿原酸、黄芩苷、熊去氧胆酸进行定量的同时,实现对鹅去氧胆酸限量的测定。

HPLC-UV-ELSD同时测定大鼠尿样中人参皂苷和淫羊藿黄酮苷类成分

目的:建立HPLC紫外检测器串联蒸发光散射检测器的方法同时测定大鼠尾静脉注射肌萎灵冻干粉后尿样中人参皂苷和淫羊藿黄酮苷类成分。方法:采用C18色谱柱,流动相乙腈-水,梯度洗脱,紫外检测器:检测波长220nm;蒸发光散射检测器:漂移管温度80℃,气体压力172.4kPa。结果:所检测的12种成分在检测的范围内线性关系良好,R2均大于0.998,提取回收率在88.67%～101.2%,日内和日间精密度的RSD小于9.1%,RE在-11.58%～10.89%。结论:该方法专属性好,精密度好,可用于大鼠尾静脉注射肌萎灵冻干粉后尿样中皂苷和黄酮苷类成分的测定,该结果可为肌萎灵冻干粉的体内药物代谢和临床用药提供参考。

HPLC-UV-ELSD同时测定复方红景天胶囊中8种成分

目的采用HPLC-UV-ELSD同时测定复方红景天胶囊中大花红天素、没食子酸、红景天苷、酪醇、哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C、肉桂酸8种成分。方法应用Kromasi L色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.3%冰醋酸水溶液,梯度洗脱,体积流量1.0 m L/min,紫外检测波长275 nm,柱温30℃,蒸发光散射检测器漂移管温度40℃,载气N2,压力150 k Pa。结果大花红天素、没食子酸、红景天苷、酪醇、哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C、肉桂酸8种成分能够达到很好分离;其线性范围分别为67.084~670.84(R^2=0.999 2)、11.410~114.100(R^2=0.999 4)、78.995~789.95(R^2=0.999 6)、19.625~196.25(R^2=0.999 7)、59.368~593.68(R^2=0.999 8)、62.585~625.85(R^2=0.999 5)、55.045~550.45(R^2=0.999 6)、6.895~68.95μg/m L(R^2=0.999 8);平均回收率分别为100.8%、98.9%、100.1%、100.8%、98.9%、99.6%、100.7%、99.2%,RSD分别为0.64%、0.56%、0.35%、0.65%、0.26%、0.58%、1.00%、0.64%(n=6)。结论该方法分析简便、准确,可作为该制剂的定量分析方法。

Fingerprint analysis of Ophiopogonis Radix by HPLC-UV-ELSD coupled with chemometrics methods

A new, simple and reliable method using HPLC-UV-ELSD was developed to generate the fingerprint of Ophiopogonis Radix. Homoisoflavonoids and steroidal saponins were determined simultaneously in a single run. A total of 27 Ophiopogonis Radix samples were analyzed, and 18 reference substances were used for the identification of the common peaks. The fingerprint was further analyzed by chemometrics methods including similarity analysis （SA）, hierarchical clustering analysis （HCA） and principal component analysis （PCA）. The results indicated that the combination of chromatographic fingerprint and chemometrics analysis could be used for the geographical differentiation and quality evaluation of Ophiopognnis Radix.

HPLC-UV-ELSD同时测定知母黄柏药对提取物中盐酸小檗碱、黄柏碱、知母皂苷BⅡ

目的:建立知母黄柏药对提取物中盐酸小檗碱、黄柏碱、知母皂苷BⅡ的HPLC-UV-ELSD含量测定方法。方法:采用HPLC-UV-ELSD方法,色谱柱:Dikma C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.2%冰醋酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,柱温30℃,UV检测波长280 nm,蒸发光散射检测器检测,漂移管温度46℃,氮气压力1.5 Bar。结果:盐酸小檗碱、黄柏碱及知母皂苷BⅡ的线性范围分别是1.008～3.528μg(r=0.999 5),0.322～1.127μg(r=0.999 6),0.702～2.457μg(r=0.999 8),平均加样回收率分别为100.11%,98.97%,99.56%;其RSD分别为1.08%,0.90%,1.37%。结论:该法简便快速,重复性良好,结果准确可靠,可用于知母黄柏药对提取物中主要有效成分的含量测定。

HPLC-UV-ELSD同时测定散结镇痛胶囊中5个指标成分含量

目的：建立HPLC-UV-ELSD同时测定散结镇痛胶囊中皂苷类和黄酮类成分的方法,比较15批散结镇痛胶囊中各成分含量。方法：采用HPLC-UV-ELSD联用法,Waters Symmetry@C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,乙腈（A）-水（B）梯度洗脱（1-13 min,19%-37%A;13-50 min,37%-36%A）,流速1 m L·min^-1,检测波长278 nm;蒸发光散射检测器（ELSD）漂移管温度45℃,载气流速3.7 L·min^-1,同时测定散结镇痛胶囊中三七皂苷R1,人参皂苷Rg1,人参皂苷Rb1,龙血素A和龙血素B的含量。结果：建立了同时测定散结镇痛胶囊中3个皂苷类和2个黄酮类成分含量的方法,线性关系良好（0.999 5-0.999 7）,平均回收率为99.1%-104.2%。结论：该方法简便,重复性好,适用于散结镇痛胶囊皂苷类和黄酮类成分的同时测定,亦适用于散结镇痛胶囊的的质量控制。

HPLC-UV-ELSD法同时测定复方妥布霉素滴眼液中妥布霉素和地塞米松的含量

目的：建立高效液相色谱-紫外检测器-蒸发光散射检测器联用法（HPLC-UV-ELSD）同时测定复方妥布霉素滴眼液中妥布霉素和地塞米松的含量。方法：采用Capcell pak MG C18（4.6 mm×150 mm，5 μm）色谱柱，流动相为0.2 mol·L^-1三氟乙酸水溶液-乙腈（90：10），流速1.0 mL·min^-1；检测波长240 nm；进样量：20 μL；ELSD检测器：漂移管温度为90 ℃，载气1.8 Bar。结果：妥布霉素、地塞米松分别在27.65-276.54 mg·L^-1、10.01-100.06 mg·L^-1范围内呈良好的线性关系，r分别为0.9993、0.9997；平均回收率（n=6）分别为99.2%（RSD=0.65%）、99.6%（RSD=0.58%）。结论：该方法简便，重复性好，可用于同时测定复方妥布霉素滴眼液中妥布霉素和地塞米松的含量。