应用荧光定量聚合酶链反应检测非典型尖锐湿疣HPV 6/11-DNA

目的探讨用FQ-PCR检测非典型尖锐湿疣HPV 6/11-DNA的可行性。方法采用FQ-PCR检测194例疑诊CA、107例单纯阴道炎、50例健康查体者的HPV6/11-DNA,同时对疑诊CA者进行病理组织学检测。结果194例疑诊CA样本,HPV 6/11-DNA的阳性率为77.83%(151/194),阳性标本DNA定量范围在1.4×10 cop ies/m l^1.78×107cop ies/m l,平均为1.27×106cop ies/m l;炎症组和正常对组均为0 copy/m l。病理组织学检测阳性率为70.10%(136/194),经χ2检验,FQ-PCR与病理组织学检测二者有显著性差异(χ2=4.787,P<0.05)。HPV6/11-DNA定量数值的高低与发病部位的多少有关(χ2=9.87,P<0.01),与CA的形态、大小、数量/部位及具体发病部位无关。结论FQ-PCR检测HPV 6/11-DNA,有助于正确判断尖锐湿疣和假性湿疣,HPV 6/11-DNA数值的高低可反应CA的严重程度。

外阴恶性肿瘤中P21^(WAF1/CIP1) P53及HPV6/11 HPV16/18的检测和意义

目的 探讨P2 1WAF1/CIP1,P5 3及HPV6/11,16/18与外阴恶性肿瘤的关系。方法 P2 1WAF1/CIP1,P5 3用免疫组化SP法检测 ;HPV6/11,16/18用原位杂交法 (ISH)检测。结果 P2 1WAF1/CIP1,P5 3在外阴恶性肿瘤组、外阴上皮内瘤变 (VIN)组、正常对照组中的阳性检测率分别为 40 .0 0 % (12 /3 0 )、63 .3 3 % (19/3 0 ) ,5 2 .3 8% (11/2 1) ,47.62 % (10 /2 1) ,0 (0 /10 )和 0 (0 /10 ) ;外阴病变各组P2 1WAF1/CIP1,P5 3与正常组比较差异均有显著性 (P均 <0 .0 5 ) ;HPV6/11、16/18在外阴恶性肿瘤组、VIN组中的阳性检测率分别为 60 .0 0 % (18/3 0 )和 3 3 .3 3 % (10 /3 0 ) ,42 .86% (9/2 1)和 2 8.5 7% (6/2 1) ,正常对照组没有检测出 ;HPV 6/11阳性率外阴恶性肿瘤组、VIN组与正常组比较差异均有显著性 (P均 <0 .0 5 ) ;外阴恶性肿瘤组HPV16/18阳性率与正常组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 P2 1WAF1/CIP1P5

HPV611相关尖锐湿疣皮损中P53和P21蛋白的表达

目的 : 了解P5 3和P2 1在HPV6 11相关尖锐湿疣 (CA)皮损中的表达和意义。方法 : 用免疫组化SP法检测经PCR法证实HPVDNA6 11阳性的 2 7例CA皮损和 10例正常皮肤。结果 : (1)CA皮损基底细胞和棘细胞表达P5 3较正常皮肤显著增加 ;(2 )CA皮损棘细胞表达P2 1与正常皮肤无显著差异。结论 : (1)P5 3可能刺激和促进HPV6 11相关CA皮损的细胞增殖 ;(2 )P2

HPV6/11、HPV16/18与HPVL1蛋白检测在男性阴茎乳头状增生性病变诊断中的应用

目的调查男性阴茎乳头状增生性病变患者的HPV6/11、HPV16/18和HPVL1蛋白表达情况,确定病理诊断应用依据。方法回顾性调查130例男性阴茎乳头状增生性病变患者,采用常规病理组织学方法、免疫组化和原位杂交技术检测男性阴茎乳头状增生性病变患者手术标本的HPV6/11、HPV16/18和HPVL1蛋白表达情况。结果 130例阴茎上皮乳头状增生性病变病例,尖锐湿疣、低级别上皮内病变、高级别上皮内病变和鳞癌分别占64.6%、16.9%、10.8%、7.7%。尖锐湿疣中HPV6/11、HPVL1蛋白表达阳性率为92.9%和97.6%,高于其他三组病变。低级别上皮内病变HPV16/18表达阳性率为81.8%,高于其他3组病变。结论对于HPVL1表达阴性的男性阴茎上皮乳头状增生性病变患者应该严格随访。

尖锐湿疣及湿疣样病变中HPV6／11DNA原位杂交的观察

对４８例生殖道尖锐湿疣（ＣＡ）及湿疣样病变常规石蜡包埋组织切片进行人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）６／１１型ＤＮＡ原位分子杂交及病理组织学观察，在１２例ＣＡ中９例（７５％）和湿疣样病变中１例（２．７％）检出ＨＰＶ６／１１ＤＮＡ，阳性细胞位于鳞状上皮中表层的凹空细胞及其周围细胞核内。在ＣＡ与湿疣样病变的鉴别诊断中，ＨＰＶ６／１１ＤＮＡ原位杂交检测具有重要的价值。

HPV-6/11 L1/E6、HPV-6/11 L1/E7嵌合DNA疫苗质粒的构建

目的 构建HPV 6 / 11L1/E6、HPV 6 / 11L1/E7预防、治疗性DNA疫苗质粒。方法 运用PCR扩增HPV 6 /11L1、E6、E7序列 ,PCR产物连接至pGEMT Easy质粒 ,测序鉴定正确后 ,分别连接至真核表达载体pVAX ,再用酶切、连接而构建成HPV 6 / 11L1 E6 /E7 pVAX质粒。运用电穿孔法将所获得质粒转染COS 7细胞 ,免疫组化检测蛋白表达情况。结果 所构建质粒的插入目的片段测序正确 ;免疫组化检测在胞浆胞核可见棕黄色点状阳性产物沉积。结论 所构建的HPV 6 / 11L1 E6 /E7 pVAX融合蛋白表达质粒可在体外表达L1 E6 /L1 E7蛋白 。

HPV6/11原位杂交方法在尖锐湿疣诊断上应用

尖锐湿疣是由HtW6B／11型感染引起的一种性传播疾病，常规病理及临床诊断有一定困难，易与假性湿疣相混，而二者治疗方法不同。用原位杂交技术检测外阴湿疣组织中有无HPV感染可确诊，为临床诊断和治疗提供重要依据。原位分子杂交是近几年来在病理组织学领域兴起的又一新技术，由于它是在核酸分子水平上分析研究细胞的功能和形态，因而其准确性和特异性较其它手段优越，自1986年首次应用于常规石蜡包埋的组织切片上以来，已显示出巨大的发展潜力．尖锐湿疣近年来显著增多，研究表明它与人乳头瘤病毒（HPV）感染有关，特别是HPV6／11呈现高表达，仅凭HE切片形态难以进行判断．HPV原位分子杂交具有较高的敏感性和特异性。采用HPV6／11探针对尖锐湿疣样病变的石蜡切片进行原位分子杂交，现报道如下：

阴道炎患者HPV6/11-DNA定量分析

目的 了解女性阴道炎患者人乳头瘤病毒 6 / 11型 (HPV6 / 11)的感染情况。方法 荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)技术检测 2 5 8例门诊患者阴道分泌物中HPV6 / 11的病毒拷贝数。结果 共检出HPV6 / 11阳性者 94例 ,阳性率 36 .43 % ,拷贝数在 10 5以上者 78例 ,占阳性者中 82 .98% ,40岁以上年龄组阳性率高且病毒复制量均在10 5以上。结论 ①中老年阴道炎患者就诊晚 ,感染重。②FQ PCR检测HPV敏感、快速、准确 。

HPV6/11、P21^(WAF1)、PCNA蛋白在女性生殖道尖锐湿疣中的表达

目的探讨P21WAF1及PCNA蛋白在尖锐湿疣发病机制中的作用以及两者与尖锐湿疣(CA)中HPV6/11表达之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测60例尖锐湿疣皮损中P21WAF1和PCNA及HPV6/11蛋白的原位表达情况。结果CA组织中HPV6/11、P21WAF1、PCNA阳性表达率分别为80%、30%、88%,PCNA强阳性表达率为57%。CA组织中HPV6/11、P21WAF1阳性表达率及PCNA强阳性表达率与对照组相比有统计学差异;CA组中PCNA与P21WAF1表达负相关,PCNA与HPV6/11表达呈正相关,HPV与P21WAF1表达呈负相关。结论P21WAF1表达下调可能与CA的发病机制有关,并受多因素调控。

外生殖器尖锐湿疣表面脱落细胞及疣组织液HPV6/11检测分析

目的了解PCR检测外生殖器尖锐湿疣 (CA)表面脱落细胞及疣组织液HPV6/11的效果。方法将病理确诊为外生殖器CA的92例患者随机分成两组 ,疣表面脱落细胞组48例和疣组织液组44例 ,样本于 -4℃保存 ,用HPV6/11引物进行PCR检测,并比较不同皮疹形态的HPV6/11检出情况。结果疣表面脱落细胞组与疣组织液组的HPV6/11PCR阳性率分别为87.5 %和86.4 %,两组间无显著性差异(P>0.05)。不同皮疹形态的HPV6/11检出率无显著性差异(P>0.05)。结论CA表面脱落细胞及疣组织液可用于检测外生殖器CAHPVDNA ,扩展了PCR的应用范围。前者无创伤,取材更简便。

成都市58650名妇女宫颈人乳头状瘤病毒HPV6/11,HPV16/18感染状况研究

人类乳头状瘤病毒（HPV）是一种小分子双链DNA病毒,对人皮肤、黏膜有高度亲嗜性。目前,已经鉴定出的HPV约有150种亚型,根据其致病性大小分为低危型和高危型。低危型HPV6和HPV11致尖锐湿疣最主要的基因型,尖锐湿疣治愈后容易复发,随着病程迁延,复发次数增多,尖锐湿疣患者也可能导致癌变;高危型中的HPV16、18在世界范围内始终是引起宫颈癌变的最重要的亚型。

电灼联合斑蝥素治疗对尖锐湿疣患者疗效分析及皮损HPV6/11型DNA载量的影响

目的观察电灼联合斑蝥素疗法对尖锐湿疣(CA)患者疗效及分析皮损HPV6/11 DNA载量的变化。方法纳入广州医科大学附属第四医院皮肤科门诊60例CA患者,随机分为对照组和观察组,各30例。对照组电灼治疗,观察组电灼祛除疣体后,联合斑蝥素乳膏治疗。检测治疗前及治疗后第2、8周的HPV6/11型DNA载量并比较两组的临床治疗效果。结果治疗后第8周的观察组的HPV6/11型DNA载量较对照组的低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗总有效率上,观察组显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组的复发率低于照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论电灼联合斑蝥素可有效降低CA患者HPV6/11 DNA载量,治疗效果优于单独电灼疗法,复发更少。

尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒6、11型的检测及L1基因的序列分析

目的 检测尖锐湿疣患者组织中人乳头瘤病毒 (HPV)6型和 11型的感染率，分析 L1晚期基因序列及其蛋白质的氨基酸序列，为基因工程疫苗的研究提供依据。方法 采用 PCR方法测定北京和锦州两地区 34例尖锐湿疣患者病损组织中 HPV6型及 11型的感染率 ,并扩增 L1晚期基因，构建重组测序质粒，双脱氧法测序观察其变异状况。结果 HPV11型感染率为 73.5％ (25/34)， 6型感染率为 44.1％ (15/34),其中两型混合感染率为 17.6％ (6/34)。 11型 L1基因 7～ 8个碱基变异，推导的蛋白质一级结构中可能有 1～ 3个氨基酸变异， 6型 L1基因仅有 3个碱基发生同义突变。结论 检测的 34例患者中以 HPV11型感染为主，兼有 6型和两型的混合感染。 11型 L1基因及蛋白有一定变异， 6型 L1基因仅发生少数碱基同义突变。

核因子-κBp50和P16^(INK4A)在尖锐湿疣皮损组织中的表达及意义

[目的]探讨核因子-κBp50(NF-κBp50)和P16INK4A在感染HPV6/11、HPV16/18型尖锐湿疣(condylo-mata acuminate CA)组织中的表达及其意义。[方法]采用荧光定量PCR法检测确定CA组织HPV6/11阳性同时HPV16/18阴性26例;HPV16/18阳性同时HPV6/11阴性21例;免疫组织化学Envision二步法检测26例低危型CA、21例高危型CA和18例正常包皮组织中NF-κBp50和P16INK4A的表达。[结果]NF-κBp50阳性表达主要定位于细胞浆,部分细胞核也表达,NF-κBp50在正常包皮、低危型、高危型.CA三组间阳性表达强度比较有统计学意义(χ2=26.739,P﹤0.05),P16INK4A阳性表达主要定位于细胞浆,P16INK4A在正常包皮、低危型、高危型CA三组间比较表达程度无差异(χ2=5.860,P﹥0.05)。[结论]NF-κBp50的表达增高可能在CA细胞增殖中起一定作用。

3013例门诊疑似性传播疾病病原体感染者感染特点分析

目的了解某医院门诊患者淋球菌（NGH）、沙眼衣原体（CT）、解脲脲原体（uu）、单纯疱疹病毒（HSV-II）、人乳头瘤病毒（HPV-6／11）5种性传播疾病（STD）病原体的检出情况、分布情况和流行特征，为临床预防提供依据。方法采用实时荧光定量PCR法对3013例患者进行NGH、CT、UU、HSV-II、HPV-6／11病原体DNA定量检测。结果STD病原体总阳性率为23．13％（697／3013），NGH、CT、UU、HSV-II和HPV-6／11F日陆溯U为8．32％（60／721）、15．99％（137／857）、34．80％（371／1066）、34．41％（85／247）和36．07％（44／122），男性和女性阳性率分别为20．09％和32．46％，21,--40岁年龄段患者占84．66％。结论加强泌尿生殖道炎症患者STD病原体的检测，对STD的防治有重要意义，应引起社会关注。