HPVE6/E7mRNA检测对宫颈锥切术后病灶残留和复发的诊断价值

目的：探讨HPV E6/E7 mRNA检测对宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）患者宫颈锥切术后病灶残留和复发的诊断价值。方法：对已行宫颈锥切术并经组织病理学确诊为高级别宫颈上皮内瘤变（CIN II,III）、有完整随访资料的154例患者,在术后第3~6个月、第12个月行薄层液基细胞学检查（thin-prep cytology test,TCT）、HPV-DNA检测、HPV E6/E7 mRNA检测,对细胞学异常[≥未明确意义的非典型鳞状上皮细胞（atypical squamous cell of undetermined significance,ASC-US）]或高危型HPV-DNA（＋）或HPV E6/E7 mRNA（＋）者均再次行阴道镜检查及宫颈活检病理诊断。结果：病灶残留9例,复发22例。术后HPV-DNA（＋）的57例中,残留/复发30例;HPV E6/E7 mRNA（＋）的26例中,残留/复发24例。HPV-DNA检测敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及诊断正确率分别为96.8%,78.0%,52.6%,99.0%及81.8%;HPV E6/E7 mRNA检测敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及诊断正确率分别为77.4%,98.4%,92.3%,94.5%及94.2%。HPV E6/E7 mRNA检测的特异性和阳性预测值均高于HPV-DNA检测（P〈0.05）。结论：将HPV E6/E7 mRNA检测纳入随访检查内容可以及时有效预测宫颈锥切术后CIN残留/复发的风险,并能减少过度检查及治疗。

HPV E6/E7 mRNA和HPV DNA检测技术在宫颈上皮内瘤变中的诊断价值分析

目的比较人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA和HPV DNA检测技术对宫颈上皮内瘤变(CIN)2级及以上(CIN2+)患者的诊断价值,并评价HPV E6/E7 mRNA检测结果在不同实验室间的一致性。方法采用HPV E6/E7 mRNA和HPV DNA检测技术对212例门诊体检的健康者和住院的宫颈病变患者的宫颈脱落细胞学标本进行检测。以病理诊断结果为金标准,评价两种检测技术诊断CIN2+的灵敏度和特异度。北京市迪安中心实验室和北京市怀柔妇幼保健院实验室均采用HPV E6/E7 m RNA检测技术检测同一批标本,评价实验室间检测的一致性。结果HPV E6/E7 m RNA检测的阳性率为38.7%,与HPV DNA的阳性率43.9%比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。HPV E6/E7 mRNA和HPV DNA的检测阳性率均随着病理分级的升高而增加(P<0.01)。HPV E6/E7mRNA检测CIN2+的灵敏度为92.96%,与HPV DNA的90.14%相比,差异无统计学意义(P﹥0.05),而HPV E6/E7mRNA检测CIN2+的特异度为88.65%,高于HPV DNA的79.43%,差异有统计学意义(P<0.05)。两个实验室采用HPV E6/E7 m RNA检测阳性一致的标本例数为78,阴性一致的标本例数为121,总一致率为93.87%,Kappa=0.872,一致性较好。结论与HPV DNA检测技术相比,HPV E6/E7 mRNA检测宫颈病变的特异度更具优势,实验室间重复性检测的一致率较高,有望成为中国宫颈癌HPV筛查的首选方法。

HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈病变诊治中应用价值的比较

目的:比较人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)E6/E7 mRNA检测和HPV DNA检测在宫颈病变诊治中的应用价值。方法:选取2018年1月—2019年9月在石家庄市妇幼保健院行宫颈液基薄层细胞学检查(thinprep cytology test,TCT)的患者共33496例,其中符合纳入标准的诊断意义不明的非典型鳞状上皮细胞(atypical squamous cells of undetermined significance,ASCUS)患者共3190例,将其随机分为2组,各1595例,分别进行HPV DNA检测(对照组)及HPV E6/E7 mRNA检测(观察组),再对每组的阳性患者进行阴道镜下活检及病理组织学检测,比较2种方法对宫颈病变的检出率。从对照组和观察组阳性的患者中随机各抽取184例,共368例,分别进行HPV E6/E7 mRNA和HPV DNA检测,比较2种方法的诊断效能。结果:对照组高级别宫颈上皮内病变患者的检出率为4.8%(77/1595),观察组为4.1%(66/1595),差异无统计学意义(χ^(2)=0.886,P=0.347)。但与HPV DNA检测相比,HPV E6/E7 mRNA检测具有较高的敏感度(87.50%)、特异度(71.79%)、阳性预测值(49.36%)、阴性预测值(94.81%)、约登指数(0.593)和较低的阴道镜转诊率(42.4%,P<0.05)。结论:对于高级别宫颈上皮内病变,HPV E6/E7 mRNA检测比HPV DNA检测具有更高的诊断效能,可以作为ASCUS患者分流的新方法。

宫颈癌患者治疗前检测血清HPV16E6 mRNA和CK19 mRNA的临床意义

目的检测宫颈癌患者治疗前外周血HPV16E6m RNA和CK19m RNA的表达,探讨其对宫颈癌的诊断意义及其与临床病理的相关性.方法对100例宫颈癌患者行治疗前外周血HPV16E6m RNA及CK19m RNA检测,以40例健康妇女为对照,分析其作为诊断参考的特异性和敏感性,并对两者与宫颈癌临床病理特征的相关性进行分析.结果 HPV16E6m RNA、CK19m RNA检测诊断宫颈癌的特异性均为97.5%.HPV16E6m RNA、CK19m RNA升高用于治疗前诊断的敏感性分别为15%和39%,两者差异有统计学意义(P<0.05).HPV16E6m RNA升高与临床分期(P=0.012)、盆腔淋巴结转移(P=0.026)相关.CK19m RNA升高与深肌层浸润(P=0.031)、盆腔淋巴结转移(P=0.027)相关.结论外周血HPV16E6m RNA和CK19m RNA均是宫颈癌微转移有价值的肿瘤标志物;CK19m RNA在作为宫颈癌指标时,临床诊断价值优于HPV16E6m RNA.

人乳头瘤病毒16型E6、E7反义RNA对人宫颈癌SiHa细胞的恶性逆转作用

通过真核表达载体介导HPV16型E6、E7基因反义RNA在SiHa细胞中的表达，探讨反义RNA能否降低E6、E7基因的表达和诱导细胞凋亡。利用pEGFP构建HPV16型E6、E7基因反义RNA的真核表达载体并转染SiHa细胞。利用RT-PCR和Western blot技术检测转染后E6、E7基因的mRNA和蛋白的变化，利用MTT法检测SiHa细胞转染后细胞增殖活性，利用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测转染后细胞的凋亡情况。

高危型人乳头瘤病毒E6/E7基因在未明确意义的非典型鳞状上皮细胞分流中的应用效果

目的 对比Aptima HPV检测(是基于HPV E6、E7 mRNA检测的方法)及Aptima HPV 16型和HPV 18型和(或)45型(18/45型)分型(Aptima HPV-GT)检测作为意义不明的非典型磷状细胞(ASCUS)分流的临床效能。方法 研究对象来源于2019年6月至2021年6月在福建医科大学附属闽东医院妇科门诊就诊,细胞学结果为ASCUS的有性生活史女性397例,选取其中有完整阴道镜召回信息及AHPV检测结果阳性的女性作为研究对象,共239例。根据ASCCP指南对其进行阴道镜检查,病变处取活检行组织病理学诊断。将病理学诊断作为金标准,分析经Aptima HPV mRNA检测的ASCUS细胞学检查和hrHPV阳性结果的患者的数据,以及他们的随访活检结果。结果 239例细胞学为ASCUS和hrHPV阳性的研究对象的年龄为(47.51±12.39)岁,其中71.55%(171例)患者在6个月内立即进行了组织学随访。在Aptima hrHPV分型检测的辅助下,ASCUS/HPV阳性患者中,HPV16阳性率为13.56%(32/236),且CIN2+(宫颈上皮内瘤变2级及以上)检出率为39.29%(11/28)。HPV 18/45阳性率8.47%(20/236),CIN2+检出率为35.29%(6/17)。HPV16、18/45阳性率为1.27%(3/236),CIN2+检出率为100.00%(2/2),失访1例,ASCUS/AHPV-GT阳性CIN2+检出率明显高于ASCUS/AHPV-GT阴性(χ^(2)=4.185,P=0.0408),ASCUS/AHPV-GT阳性CIN3+检出率明显高于ASCUS/AHPV-GT阴性(χ^(2)=5.517,P=0.0188)。结论 ASCUS患者进行HPV16、18/45分型是有意义的,建议采用HPV E6/E7 mRNA检测对ASCUS人群分流同时进行AHPV-GT检测且HPV16、18/45均阳性,可考虑快速治疗。

HPVE6/E7mRNA检测对宫颈上皮细胞内瘤变的诊断价值

宫颈上皮细胞内瘤变（cervicalintraepithelialneoplasias,CIN）是癌前期病变的统称,与宫颈浸润癌密切相关[1]。CIN发生的主要原因是高危型人乳头瘤病毒（humanpapillomavirus,HPV）持续感染,同时也是CIN发展为宫颈癌的重要因素[2]。检查宫颈癌方法有很多,但如何减少宫颈癌的发生和漏查是目前临床最大的问题。

HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中的应用价值

目的评价人乳头状病毒(human papilloma virus,HPV)E6/E7 m RNA检测在宫颈癌筛查中的应用价值。方法采用支链DNA(b DNA)杂交核酸检测技术对1019例已行液基细胞学(thinp rep cytologic,TCT)检查的标本进行高危型HPV E6/E7 m RNA检测,对照TCT结果判断检测敏感性及特异性。结果细胞学异常组的拷贝数显著高于细胞学阴性组(P<0.05),细胞学病变级别越高,对应的HPV E6/E7 m RNA表达率越高,具有相关性;HPV E6/E7 m RNA检测敏感度73.37%,特异度80.57%。结论宫颈病变与HPV E6/E7 m RNA转录有关,检测HPV E6/E7 m RNA对宫颈癌筛查具有临床应用价值。

HPV检测和免疫治疗进展

人乳头瘤病毒(HPV)感染引起的疾病包括良性增生性疾病、宫颈癌、头颈与直肠恶性肿瘤。全球发病率居高不下,不仅影响健康也造成很大经济负担。快速、可靠和有效的HPV检测对疾病诊断和预防非常重要。目前检测方法包括聚合酶链反应(PCR),DNA原位杂交、杂交捕捉法HC-2、高危HPV感染相关生物学标记的免疫组织化学检测、以及高危型HPV E6/E7 mRNA检测等。HPV病毒蛋白免疫组化以及DNA/RNA微阵列或芯片技术在HPV检测中的应用价值非常大但尚未推广普及。对HPV免疫学机制和致癌机制的最新研究促进了HPV相关肿瘤免疫治疗的研究。预防性HPV疫苗不能诱导细胞免疫清除HPV感染、尤其无法治疗HPV相关肿瘤,故迫切需要寻求治疗HPV感染和相关肿瘤的有效手段。已经研发的几种类型治疗性疫苗,包括活载体、蛋白质或肽、核酸和基于细胞的疫苗已在进行临床前和临床试验研究。另外一些新的免疫治疗策略,如免疫检查点抑制剂、过继性T细胞疗法等仅在临床前评估阶段。