HPV E6/E7 mRNA结合HPV L1衣壳蛋白检测诊断子宫颈癌前病变的临床意义

目的:探究人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA+HPV L1衣壳蛋白诊断子宫颈癌前病变临床价值。方法:选泰安市妇幼保健院2019年1月-2020年12月宫颈液基薄层细胞学检查(TCT)HPV DNA阳性94例患者为研究对象,根据组织细胞学检查结果将其设为观察组(宫颈上皮内瘤变,n=84)、对照组(正常宫颈,n=10);两组均接受HPV E6/E7 mRNA、HPV L1衣壳蛋白检测,以组织细胞学检查结果为金标准,比较两种诊断方式单独、联合诊断价值。结果:观察组HPV E6/E7 mRNA总阳性检出率为67.86%,较对照组的20.00%高,差异有统计学意义(P<0.05);CIN1、CIN2、CIN3阳性检出率呈现逐渐上升趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组HPV L1衣壳蛋白阳性检出率为35.71%,较对照组的10.00%高,差异有统计学意义(P<0.05);CIN1、CIN2、CIN3阳性检出率呈现逐渐下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。HPV E6/E7 mRNA+HPV L1衣壳蛋白联合诊断的准确度、灵敏度分别为82.98%、82.14%,较HPV E6/E7 mRNA(69.15%、67.86%)、HPV L1衣壳蛋白(41.49%、35.71%)单独检验高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在对子宫颈癌前病变诊断中,HPV E6/E7 mRNA、HPV L1衣壳蛋白阳性表达均较高,两者联合诊断后可提升诊断灵敏度。

HPV-16 L1甲基化和HPV E6/E7 mRNA检测宫颈病变的临床价值

目的:探讨HPV-16 L1甲基化程度、HPV E6/E7 mRNA表达水平在检测宫颈病变中的临床价值。方法:选择50例HPV-16感染患者的宫颈脱落细胞学标本,其中CIN1 11例、CIN2 11例、CIN3 21例、宫颈鳞癌(SCC)7例,另取11例病理检测HPV-16阴性或慢性炎症者为对照。采用甲基化敏感性高分辨溶解曲线法检测HPV-16 L1甲基化水平,采用b DNA技术检测HPV E6/E7 mRNA的表达情况。结果:对照组、CIN1组、CIN2组、CIN3组和SCC组HPV-16 L1甲基化阳性率分别为9.1%、72.7%、81.8%、90.5%、100.0%,HPV E6/E7 mRNA阳性率分别为45.5%、72.7%、90.9%、100.0%、100.0%;CIN2以上病变中HPV-16 L1甲基化阳性率均高于对照组,而CIN3以上病变中HPV E6/E7 mRNA阳性率均高于对照组(P均<0.005)。HPV-16 L1甲基化程度和HPV E6/E7 mRNA水平均随宫颈病变严重程度的增加而升高(rS=0.638和0.525,P均<0.001);HPV-16 L1甲基化程度与HPV E6/E7mRNA表达水平呈正相关(rS=0.420,P=0.001)。结论:HPV-16 L1甲基化与HPV E6/E7 mRNA检测在分流HPV感染或细胞学阳性患者方面具有良好的临床应用前景。

HPV E6/E7 mRNA联合HPV L1衣壳蛋白在子宫颈癌前病变诊断中的价值

目的探讨HPV E6/E7 mRNA联合HPV L1衣壳蛋白检测在子宫颈癌前病变诊断中的价值。方法采用分支链DNA信号放大技术检测156例子宫颈活检不同病变组织中HPV E6/E7 mRNA的表达,并应用免疫组化En Vision法检测HPV L1衣壳蛋白的表达。结果与正常组织相比,子宫颈低级别上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)、子宫颈高级别上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)和子宫颈鳞癌组织中HPV E6/E7mRNA的阳性率增高(P <0. 05),且HSIL和子宫颈癌中HPV E6/E7 mRNA的阳性率高于LSIL(P <0. 05),但HSIL和子宫颈癌组织中HPV E6/E7 mRNA的阳性率差异无显著性(P> 0. 05); HPV L1衣壳蛋白在LSIL中的阳性率明显高于HSIL(P <0. 05)。结论通过对子宫颈不同病变标本进行HPV E6/E7 mRNA和HPV L1衣壳蛋白联合检测,了解不同病变子宫颈组织中HPV E6/E7 mRNA和HPV L1衣壳蛋白的表达趋势,可预测子宫颈上皮内病变的发展趋势,指导临床医师进行合理治疗。

HPV E6/E7 mRNA及HPV L1蛋白表达与宫颈病变的关系及其诊断价值

目的探讨宫颈不同级别病变与人乳头瘤状病毒(HPV)E6/E7mRNA及HPV L1蛋白的表达关系及其在宫颈病变中的诊断价值。方法收集2016年2月至2017年6月在临海市第二人民医院行宫颈液基薄层细胞学检查(TCT)的标本,其中经第二代杂交捕获法检测HPV DNA阳性127例。103例经组织细胞学诊断为宫颈上皮内瘤变(CIN)及鳞状细胞癌(SCC),设为研究组;24例经组织细胞学诊断为慢性炎症和正常,设为对照组。各组分别进行HPV E6/E7mRNA检测和HPV L1蛋白表达检测,计算并比较阳性表达率。统计HPV E6/E7mRNA和HPV L1两种检测方法的符合率。以组织细胞学诊断结果为金标准,比较两种检测方法在宫颈病变中的诊断价值(准确度、敏感度、阳性预测值、阴性预测值)。结果研究组HPV E6/E7mRNA表达阳性率明显高于对照组,差异有统计学意义(χ~2=23.269,P<0.05),研究组间不同级别病变HPV E6/E7mRNA表达阳性率均明显高于对照组,差异有统计学意义(χ~2值分别为3.296、13.125,均P<0.05)。研究组CIN1 HPV L1蛋白表达阳性率与对照组比较无显著性差异(χ~2=1.142,P>0.05)。相关性分析结果显示,组织细胞学诊断级别与HPV E6/E7mRNA表达阳性率呈显著正相关关系(r=0.954,P<0.05);与HPV L1蛋白表达阳性率呈显著负相关关系(r=-0.976,P<0.05)。各种检测方法敏感度、特异度比较有显著性差异(χ~2值分别为5.801、5.001,均P<0.05),其中联合检测敏感度最低,特异度最高。各种检测方法准确度、阳性预测值和阴性预测值比较无显著性差异(χ~2值分别为4.288、2.331、1.427,均P>0.05)。结论随着宫颈病变严重程度的增加,HPV E6/E7mRNA表达有增高趋势,HPV L1蛋白的表达有下降趋势。联合HPV E6/E7mRNA及HPV L1蛋白两种方法检测对临床HPV阳性的诊断有一定的诊断价值。

高危型HPV阳性患者中HPVL1蛋白的表达及临床意义

探讨HPV-L1蛋白在宫颈细胞学高危型HPV阳性患者中的表达及临床意义。方法 选取187例高危型HPV阳性宫颈液基细胞学标本,其中未见上皮内瘤样病变及恶性细胞(NILM)40例,非典型鳞状上皮细胞(ASC-US)68例、低度鳞状上皮内瘤变(LSIL)39 例、非典型鳞状上皮细胞-不除外高度(ASC-H)13例、高度鳞状上皮内病变(HSIL)24例、鳞状细胞癌(SCC)3例,用赛泰(CytoReact?)免疫组织化学染色检测 HPV L1 蛋白的表达,187例样本中同时具有宫颈细胞学和病理学诊断结果的111例。同时将细胞学诊断与病理诊断相对照。 结果 不同细胞学诊断患者HPV L1蛋白阳性表达率分别为NILM 5%、ASC-US 48.5%、LSIL 61.5%、ASC-H 8%、HSIL 0%、SCC 0%,比较差异显著,有统计学意义(χ2=36.100,P<0.01);不同病理学诊断患者HPV L1蛋白阳性率分别为:炎症66.6%、CIN 1 50%、CIN 2 10%、CIN 3 9%、SCC 0%,比较差异显著,有统计学意义(χ2=22.285,P<0.01)。随着病变级别的增加,HPV L1的表达逐渐下降。结论 HPV L1蛋白表达缺失和高危型人乳头瘤病毒感染的持续存在是ASC-US和LSIL患者进展为CIN2及以上病变的可靠预测因子。

HPV E6/E7 mRNA检测、LCT及HPV L1壳蛋白联合检验在宫颈癌筛查中的意义

目的探讨高危人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7mRNA、超薄液基细胞学检测(LCT)、HPV L1壳蛋白联合监测在宫颈癌筛查中的价值。方法选择2017年3月至2019年6月于新乡市中心医院妇科门诊就诊的367例行宫颈LCT检查的女性为研究对象,采用分支链DNA信号放大技术检测HPV E6/E7mRNA,免疫组化检测HPV L1壳蛋白表达。72例受试者行阴道镜宫颈组织活检,根据病理诊断结果分析联合HPV E6/E7 mRNA、LCT、HPV L1壳蛋白检测在宫颈癌筛查中的价值。结果72例经阴道镜组织活检证实宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ级8例,CINⅡ级6例,CINⅢ级4例,宫颈原位癌3例。意义不明不典型鳞状细胞和腺细胞(ASCUS)、低度鳞状上皮内病变(LSIL)、高度鳞状上皮内病变(HSIL)组织HPV E6/E7mRNA阳性表达率高于正常/炎症组织(P<0.05),HSIL组织HPV E6/E7mRNA阳性表达率高于ASCUS组织(P<0.05)。LSIL组织HPV L1壳蛋白阳性表达率高于正常/炎症、ASCUS、HSIL组织(P<0.05),ASCUS组HPV L1壳蛋白阳性表达率高与正常/炎症组织(P<0.05)。联合HPV E6/E7 mRNA、LCT、HPV L1壳蛋白鉴别诊断宫颈癌CINⅠ级/Ⅱ级的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为94.44%、97.22%、97.14%、94.59%。结论HPV E6/E7 mRNA、LCT、HPV L1壳蛋白在宫颈癌筛查中均具有一定价值,联合三项检查可提高宫颈癌筛查效能。

阴道灌洗液中TNF-α、IL-12、IL-10表达与高危型HPV持续感染的相关性

目的:阴道灌洗液中TNF-α、IL-12、IL-10表达与高危型HPV持续感染的相关性。方法:选取2017年10月至2018年4月于郑州大学第三附属医院妇科门诊行HPV DNA检测、HPV E6/E7 mRNA检测及液基细胞学检查,且细胞学诊断结果为阴性的患者90例。根据HPV检查结果分为3组:HPV E6/E7 mRNA+/DNA(+/-)组(30例)、HPV E6/E7 mRNA-/DNA+组(30例)和HPV E6/E7 mRNA-/DNA-组(30例)。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测并比较各组阴道灌洗液中TNF-α、IL-12、IL-10表达情况,比较HPV E6/E7 mRNA+/DNA(+/-)组不同HPV分型患者的细胞因子表达情况。结果:HPV E6/E7mRNA+/DNA(+/-)组与其它各组比较,IL-10浓度明显升高,TNF-α、IL-12浓度明显降低(P<0.0167),TNF-α、IL-12和IL-10在HPV E6/E7 mRNA-/DNA+组和HPV E6/E7 mRNA-/DNA-组的浓度比较,差异均无统计学意义(P> 0.0167)。HPV E6/E7 mRNA+/DNA(+/-)组中,不同HPV分型患者的TNF-α、IL-12、IL-10浓度比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。结论:高危型HPV持续感染引起阴道局部免疫状态发生改变,通过改变阴道局部免疫状态为宫颈病变的预防及治疗提供新的思路。

共表达HPV16L1、L2、E6、E7蛋白的重组非复制型痘苗病毒构建及鉴定

目的构建共表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1、L2、E6、E7蛋白的非复制型重组痘苗病毒人用疫苗株。方法以痘苗病毒为载体、利用同源重组技术筛选共表达HPV16L1、L2、E6、E7蛋白的重组痘苗病毒并对其进行鉴定。结果该病毒在CEF细胞上连续传至第15代,经斑点杂交结果表明重组病毒基因组中有L1、L2、E6、E7基因插入;经WesternBlot检测,重组病毒能稳定表达HPV16L1、L2、E6、E7蛋白。结论非复制型重组痘苗病毒NTVJE6E7CKL1L2可作为预防和治疗HPV16相关肿瘤及其癌前病变候选疫苗。

宫颈癌前病变进展风险预测指标的研究进展

宫颈癌是全球女性第二大恶性肿瘤，严重威胁女性健康。全球每年约有51万新增病例，死亡人数超过28万，其中有80%发生在卫生资源欠缺的发展中国家[1]。世界卫生组织2010年发布数据显示：我国每年约有75，434例女性被诊断为宫颈癌，死亡病例高达33，914例，如果任其发展，2025年将突破9万例，死亡人数也将超过5万。