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Increased expression of 70 kD heat shock protein in cultured primary human keratinocytes induced by human papillomavirus 16 E6/E7 gene 被引量:1
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作者 LIAO Wen-jun FAN Ping-shen FU Meng FAN Xue-li LIU Yu-feng 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2005年第24期2058-2062,共5页
Background Heat shock protein 70 (HSP70) is expressed highly in epithelial tumours associated closely with human papillomavirus 16 (HPV16) infections. However, evidence about the direct relationship between HSP70 ... Background Heat shock protein 70 (HSP70) is expressed highly in epithelial tumours associated closely with human papillomavirus 16 (HPV16) infections. However, evidence about the direct relationship between HSP70 expression and HPVs infections are still lacking. In the present study, we examined the expression of HSP70 in keratinocytes introduced with HPV16 E6/E7 oncogenes. Methods Stable transfected cells were established by transfection of the plasmids pLXSN16E6/E7 into cultured primary keratinocytes and subsequently selected by plasmid specific selection antibiotic (G418) at the required concentration. The expression of HSP70 in pLXSN16E6/E7 transfected keratinocytes was determined by Western blot. The correlation of HSP70 expression and E6/E7 transfeetion was further confirmed by doubly labelled immunofluorescent staining. Results Compared to non-transfected keratinocytes, there was a significant trend for higher levels of HSP70 in pLXSN16E6/E7 transfected keratinocytes. Doubly labelled immunofluorescent staining experiment showed that the co-localization of HPV16 E6/E7 and HSP70 in transfeeted keratinoeytes was observed and increased expression of HSP70 was strongly associated with the transfection of HPV16 E6/E7. Conclusions Our studies demonstrated increased levels of HSP70 proteins in keratinocytes stably transfected by HPV16 E6/E7 oncogenes. It suggests that the expression of HSP70 is modulated by HPV16 E6/E7 proteins, which may be involved in HPV16 E6/E7 induced immortalization. 展开更多
关键词 heat shock protein 70 KERATINOCYTES human papillomavirus 16 E6/E7
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MCM7及HPV在上颌窦鳞状细胞癌中的表达及临床意义 被引量:2
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作者 胡月 卢利 +3 位作者 姜菲菲 丁晓旭 王佳说 阎艾慧 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2017年第5期392-396,共5页
目的:通过检测MCM7和HPV在上颌窦鳞癌(squamous cell carcinoma of the maxillary sinus,MSSCC)中的表达,探讨其在MSSCC发病机制中的作用及临床意义。方法:采用免疫组织化学方法检测MSSCC(实验组)、癌旁组织(癌旁组)和下鼻甲黏膜组织(... 目的:通过检测MCM7和HPV在上颌窦鳞癌(squamous cell carcinoma of the maxillary sinus,MSSCC)中的表达,探讨其在MSSCC发病机制中的作用及临床意义。方法:采用免疫组织化学方法检测MSSCC(实验组)、癌旁组织(癌旁组)和下鼻甲黏膜组织(对照组)中的MCM7及HPV的表达,应用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:(1)MCM7在癌旁组和对照组上皮中大部分位于基底层,而其在MSSCC中呈弥散分布。MCM7在对照组(P=0.000)、癌旁组(P=0.000)和实验组(P=0.000)中的表达水平逐渐增高。(2)MCM7的表达仅与肿瘤分化程度有关(P=0.030),并且随着分化程度的下降,MCM7的表达水平逐渐增高。(3)伴HPV感染的细胞无论在对照组、癌旁组或实验组中分布均无明显规律。HPV在对照组、癌旁组及实验组患者中的感染率分别为40.00%(4/10)、95.65%(22/23)和78.57%(33/42)。(4)HPV感染与颈淋巴结转移有关(P=0.015),而与患者性别(P=1.000)、年龄(P=0.332)、吸烟(P=0.536)、临床分期(P=0.806)及肿瘤分化程度(P=0.489)无关。(5)在实验组中,伴HPV感染者,MCM7表达水平显著高于未感染者(P=0.007),且呈正相关关系(rs=0.317,P=0.041)。结论:MCM7和HPV可能与MSSCC的发生、发展有关,可能对患者的临床治疗及预后判断具有重要指导意义;MCM7异常表达可作为筛查HPV感染病例的良好临床病理学指标。 展开更多
关键词 上颌窦 鳞状细胞癌 微小染色体维持蛋白7 人乳头瘤病毒
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Aurora-A、MCM7及HPV16 E7在子宫颈上皮内瘤变和子宫颈鳞癌中的表达及意义 被引量:2
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作者 闫洁 付敏 +1 位作者 梁慧 庞永红 《徐州医学院学报》 CAS 2015年第2期85-89,共5页
目的:探讨子宫颈病变中Aurora-A激酶(Aurora-A)、微小染色体维持蛋白7(MCM7)及人乳头瘤病毒16型E7蛋白(HPV16 E7)的表达及三者相关性。方法半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测20例低级别子宫颈上皮内瘤变( CINⅠ)... 目的:探讨子宫颈病变中Aurora-A激酶(Aurora-A)、微小染色体维持蛋白7(MCM7)及人乳头瘤病毒16型E7蛋白(HPV16 E7)的表达及三者相关性。方法半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测20例低级别子宫颈上皮内瘤变( CINⅠ)、30例高级别子宫颈上皮内瘤变( CINⅡ-Ⅲ)、40例子宫颈鳞状细胞浸润癌及20例慢性子宫颈炎组织中Aurora-A、MCM7及HPV16E7 mRNA的表达。结果①Aurora-A mRNA在CINⅡ-Ⅲ组、子宫颈癌组的表达分别高于慢性子宫颈炎组、CINⅠ组,差异有统计学意义(P<0.05),CINⅡ-Ⅲ组与子宫颈癌组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。②MCM7 mRNA表达从慢性炎症到浸润癌呈渐进性增高,慢性子宫颈炎组、CINⅠ组分别与CINⅡ-Ⅲ组、子宫颈癌组比较,差异有统计学意义(P<0.05),CINⅡ-Ⅲ组与子宫颈癌组比较,差异有统计学意义(P<0.05),慢性子宫颈炎组与CINⅠ组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。③HPV16E7 mRNA的表达在子宫颈癌组和CINⅡ-Ⅲ组显著高于慢性子宫颈炎组及CINⅠ组(P<0.05);而子宫颈癌组与CINⅡ-Ⅲ组比较,差异无统计学意义( P>0.05)。④在 CIN 中, Aurora -A、MCM7 mRNA 的表达在HPV16E7阳性组高于阴性组,差异均有统计学意义(P<0.05)。在浸润癌中,Aurora-A与HPV16E7的表达呈正相关(r=0.642,P<0.05),MCM7与HPV16 E7的表达呈正相关(r=0.608,P<0.05),Aurora-A与MCM7的表达呈正相关(r=0.734,P<0.01)。结论 Aurora-A、MCM7及HPV16E7 mRNA的表达随子宫颈病变进展逐渐增加,子宫颈癌中三者表达呈正相关;Aurora-A、MCM7及HPV16E7与子宫颈癌的发生、发展密切相关,检测子宫颈组织中三者表达,可用于子宫颈高级别CIN和子宫颈癌的筛查或预测。 展开更多
关键词 子宫颈上皮内瘤变 子宫颈肿瘤 鳞状细胞癌 Aurora—A激酶 微小染色体维持蛋白7 人乳头瘤病 毒16型E7蛋白
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人乳头瘤病毒16型晚期蛋白真核表达质粒的构建
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作者 刘大维 刘景晔 +3 位作者 王鹏富 姜春来 于湘晖 孔维 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期259-261,共3页
目的克隆宫颈癌病理组织中人乳头瘤病毒16型(HPV16)晚期蛋白(L1)的基因,并构建真核表达质粒,为制备预防性疫苗奠定基础。方法采用PCR法从宫颈癌病理标本中扩增出HPV16-L1基因,与pMD18T载体连接,测序并构建真核表达质粒(pVAX1L1),瞬时转... 目的克隆宫颈癌病理组织中人乳头瘤病毒16型(HPV16)晚期蛋白(L1)的基因,并构建真核表达质粒,为制备预防性疫苗奠定基础。方法采用PCR法从宫颈癌病理标本中扩增出HPV16-L1基因,与pMD18T载体连接,测序并构建真核表达质粒(pVAX1L1),瞬时转染Cos7细胞,利用免疫组化技术检测表达产物。通过小鼠淋巴细胞转化试验检测免疫原性。结果所得L1基因的序列与GenBank中序列比较存在若干变异,并由此引起相应的氨基酸发生变化。pVAX1-L1瞬时转染Cos7细胞,经免疫组化技术检测到棕黄色免疫复合物的形成,说明有表达产物L1蛋白产生。淋巴细胞转化试验结果显示,试验组与对照组差异有显著意义。结论宫颈癌病理组织中HPV16L1基因序列存在一定程度的变异,所得L1基因表达产物具有生物学活性。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 晚期蛋白 真核表达质粒 COS-7细胞
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