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连续4次(每次间隔36h)部分肝切除对大鼠肝ACP、AKP、HSC70/HSP68和PCNA的影响 被引量:7
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作者 封青川 卢爱灵 +1 位作者 李庚午 徐存拴 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第S1期190-198,共9页
在分析了连续 3次 (每次间隔 4h)部分肝切除对肝细胞生化和增殖的影响后 ,本文又以连续 4次 (每次间隔 3 6h)部分肝切除 (shortintervalsuccessivepartialhepatectomy ,SISPH)大鼠为模型 ,分析了SISPH对肝脏酸性磷酸酶 (ACP)、碱性磷酸... 在分析了连续 3次 (每次间隔 4h)部分肝切除对肝细胞生化和增殖的影响后 ,本文又以连续 4次 (每次间隔 3 6h)部分肝切除 (shortintervalsuccessivepartialhepatectomy ,SISPH)大鼠为模型 ,分析了SISPH对肝脏酸性磷酸酶 (ACP)、碱性磷酸酶 (AKP)、构成性热休克蛋白 70 /诱导性热休克蛋白 68(HSC70 /HSP68)和增殖细胞核抗原 (PCNA)活性和含量的影响。结果表明 ,第 1次切除肝的左外叶后恢复 3 6h ,ACP和AKP活性及HSC70 /HSP68和PCNA表达量均增加 ;第 2、 3、 4次分别切除左中叶和中叶、右叶、尾状叶 (每次间隔 3 6h)后 ,AP活性和PCNA含量与AKP活性和HSC70 /HSP68含量呈负相关性 ;间隔 3 6h的连续部分肝切除延缓了细胞分化时间。根据上述实验中ACP和AKP在细胞内位置和活性变化推测 :AKP和ACP可能共同参与了细胞的增殖启动 ;PCNA和AKP可能参与了DNA合成和细胞增殖 ;ACP和HSC70 /HSP68可能在蛋白质转运、选择性降解和细胞结构、功能重建中起重要作用。 展开更多
关键词 大鼠 短间隔连续部分肝切除(SISPH) 肝再生 酸性磷酸酶和碱性磷酸酶(ACP和AKP) 构成性热休克蛋白70/诱导性热休克蛋白68(hsc70/HSP68) 增殖细胞核抗原(PCNA)
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白菜型冬油菜响应干旱胁迫差异蛋白质组学和HSC70-1基因克隆及表达分析 被引量:4
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作者 米超 赵艳宁 +3 位作者 刘自刚 孙万仓 邹娅 徐明霞 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期166-175,共10页
为探索白菜型冬油菜抗旱机理,采用双向电泳结合液相色谱-质谱技术分析抗旱冬油菜品系DR-5差异蛋白质组变化,克隆其差异蛋白热激同源蛋白70(heat shock cognate protein 70)基因HSC70-1,研究干旱胁迫对白菜型冬油菜HSC70-1表达的影响。... 为探索白菜型冬油菜抗旱机理,采用双向电泳结合液相色谱-质谱技术分析抗旱冬油菜品系DR-5差异蛋白质组变化,克隆其差异蛋白热激同源蛋白70(heat shock cognate protein 70)基因HSC70-1,研究干旱胁迫对白菜型冬油菜HSC70-1表达的影响。质谱鉴定出23个差异蛋白质,分别参与刺激响应(5)、糖/能量代谢(6)、脂代谢(2)、信号转导(1)、氨基酸/蛋白质代谢(2)、核酸代谢(1)、细胞骨架(1)、光合作用(2)、伴侣蛋白(3)。同源克隆得到1 911bp的HSC70-1基因完整开放阅读框,编码637个氨基酸残基。所编码的蛋白HSC70是稳定的疏水性蛋白质,含有HSP蛋白家族特有的核酸结合功能区及底物结合功能区,有5个活性口袋,氨基酸序列与白菜型油菜(Brassica rapa)HSC70氨基酸序列相似度达98%。实时荧光定量和半定量分析HSC70-1基因干旱胁迫下表达,发现HSC70-1在叶片中上调表达。本研究结果为冬油菜抗旱育种提供了理论基础。 展开更多
关键词 白菜型冬油菜 干旱胁迫 蛋白质组学 热激同源蛋白70 hsc70-1
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短间隔连续部分肝切除(SISPH)对大鼠肝ACP、AKP、HSC70/HSP68和PCNA的影响 被引量:6
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作者 徐存拴 卢爱灵 +1 位作者 封青川 李庚午 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2001年第3期197-206,共10页
本文以间隔时间(4h和36h)相互交叉的短间隔连续部分肝切除(36-4-4 SISPH和4-36-36-36SISPH)为模型,分析了ACP、AKP、HSC70/HSP68和PCNA的活性和含量变化。结果表明:140 kD的ACP和AKP活性在两种模型中都随着肝切除次数的增加而增加,而160... 本文以间隔时间(4h和36h)相互交叉的短间隔连续部分肝切除(36-4-4 SISPH和4-36-36-36SISPH)为模型,分析了ACP、AKP、HSC70/HSP68和PCNA的活性和含量变化。结果表明:140 kD的ACP和AKP活性在两种模型中都随着肝切除次数的增加而增加,而160 kD的AKP和ACP则与此相反;PCNA在4-36-36-36 SISPH中比在36-4-4SISPH中表达更多,而HSC70/HSP68的表达则与此相反。可见,连续部分肝切除的次数和方式能影响ACP、AKP、HSC70/HSP70和PCNA的活性和含量,并讨论了其可能的机理和生理意义。 展开更多
关键词 短间隔连续部分肝切除 大鼠肝 ACP AKP 热休克蛋白 PCNA 肝再生
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人源热休克蛋白HSC70与HPV16型E7融合蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化和活性检测
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作者 侯红军 李淑媛 赵民朝 《河北医药》 CAS 2008年第9期1279-1281,共3页
目的克隆人热休克蛋白HSC70的N端具有ATPase活性的结构域(简称为A基因)与HPV16型E7的融合基因,在大肠杆菌中表达,并纯化获得有生物活性的AE7融合蛋白。方法利用PCR方法扩增获得A基因片段,插入原核表达载体pET29b中,再通过PCR方法扩增HP... 目的克隆人热休克蛋白HSC70的N端具有ATPase活性的结构域(简称为A基因)与HPV16型E7的融合基因,在大肠杆菌中表达,并纯化获得有生物活性的AE7融合蛋白。方法利用PCR方法扩增获得A基因片段,插入原核表达载体pET29b中,再通过PCR方法扩增HPV16型E7基因片段,插入A基因的3′端,构建原核表达质粒pET29b-AE7,并转化大肠杆菌BL21(DE3),表达产物经离子交换层析和金属螯合层析纯化后,在一定的剂量下皮下免疫小鼠,检测对HPV-16的E7基因感染的预防及治疗作用。结果重组质粒pET29b-AE7经DNA序列测定确认。SDS-PAGE检测,表达产物分子量为66kD,大部分为包涵体。纯化后产物经SDS-PAGE电泳分析纯度>90%。纯化产物AE7在一定的剂量下皮下免疫小鼠,对HPV-16的E7基因的感染有预防及治疗作用。结论AE7融合蛋白的获得为进一步临床研究奠定基础。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒(HPV) 热休克蛋白 hsc70 E7 融合蛋白
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永久型70kD热休克蛋白在白菜花发育过程中的免疫组织化学定位 被引量:1
5
作者 赵东旭 徐存栓 +2 位作者 杨新芳 郝强修 庞广昌 《西北植物学报》 CAS CSCD 1998年第3期348-351,共4页
利用免疫组织化学技术研究了永久型热休克蛋白HSC70在白菜花各组织中的分布。结果表明:在正常温度条件下,HSC70在小孢子母细胞、四分体细胞、花药壁绒毡层细胞中分布最多,在花原基、花托的维管组织、花粉母细胞以及发育早... 利用免疫组织化学技术研究了永久型热休克蛋白HSC70在白菜花各组织中的分布。结果表明:在正常温度条件下,HSC70在小孢子母细胞、四分体细胞、花药壁绒毡层细胞中分布最多,在花原基、花托的维管组织、花粉母细胞以及发育早期的胚珠中的表达也较多。该结果与其他人用核酸杂交、同位素示踪等技术所得结果基本一致,本文对HSC70在白菜花不同组织中的分布与其功能的关系进行了初步讨论。 展开更多
关键词 白菜 hsc70 花发育 免疫组织化学
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蛋白酶体抑制剂MG-132对心肌梗死大鼠早期心功能及热休克蛋白70、热休克蛋白70羧基端相互作用蛋白的影响 被引量:3
6
作者 张新民 戴翠莲 +1 位作者 唐疾飞 杨鹏麟 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2010年第7期747-752,共6页
目的:研究蛋白酶体抑制剂MG-132对心肌梗死大鼠心脏结构、功能的影响及其分子机制。方法:建立大鼠心肌梗死模型,干预组静脉注射MG-132(0.75mg/kg),对照组及假手术组注射生理盐水,观察各组大鼠心脏心肌结构、功能及心肌热休克蛋白70(Hsp... 目的:研究蛋白酶体抑制剂MG-132对心肌梗死大鼠心脏结构、功能的影响及其分子机制。方法:建立大鼠心肌梗死模型,干预组静脉注射MG-132(0.75mg/kg),对照组及假手术组注射生理盐水,观察各组大鼠心脏心肌结构、功能及心肌热休克蛋白70(Hsp70)、热休克蛋白70羧基端相互作用蛋白(CHIP)的变化。结果:与心梗对照组比较,MG-132干预组心肌坏死减少,左室舒张末压和血清脑钠肽水平减低(P<0.01),同时心肌组织Hsp70、CHIPmRNA和蛋白质表达水平显著升高(P<0.05)。结论:蛋白酶体抑制剂MG-132能够减轻心肌梗死、改善心功能,其机制与上调Hsp70、CHIP水平有关。 展开更多
关键词 蛋白酶体抑制剂 热休克蛋白 热休克蛋白70羧基端相互作用蛋白 心肌梗死
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What we know about ST13, a co-factor of heat shock protein, or a tumor suppressor? 被引量:5
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作者 SHI Zheng-zheng, ZHANG Jia-wei, ZHENG Shu (The Second Affiliated Hospital, Cancer Institute, School of Medicine, Zhejiang University, Hangzhou 310009, China) 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2007年第3期170-176,共7页
This article is to summarize the molecular and functional analysis of the gene “suppression of tumorigenicity 13” (ST13). ST13 is in fact the gene encoding Hsp70 interacting protein (Hip), a co-factor (co-chaperone)... This article is to summarize the molecular and functional analysis of the gene “suppression of tumorigenicity 13” (ST13). ST13 is in fact the gene encoding Hsp70 interacting protein (Hip), a co-factor (co-chaperone) of the 70-kDa heat shock proteins (Hsc/Hsp70). By collaborating with other positive co-factors such as Hsp40 and the Hsp70-Hsp90 organizing protein (Hop), or competing with negative co-factors such as Bcl2-associated athanogen 1 (Bag1), Hip facilitates may facilitate the chaperone function of Hsc/Hsp70 in protein folding and repair, and in controlling the activity of regulatory proteins such as steroid receptors and regulators of proliferation or apoptosis. Although the nomenclature of ST13 implies a role in the suppression of tumorigenicity (ST), to date available experimental data are not sufficient to support its role in cancer development, except for the possible down-regulation of ST13 in gastric and colorectal cancers. Further investigation of this gene at the physiological level would benefit our understanding of diseases such as endocrinological disorders, cancer, and neurodegeneration commonly associated with protein misfolding. 展开更多
关键词 ST13 Hip p48 hsc/Hsp70 Heat shock PROTEIN PROTEIN folding STEROID receptor Tumorigenicity
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热休克同源蛋白73与CXCR4在肾癌A498细胞核内相互作用 被引量:3
8
作者 王志向 王林辉 +3 位作者 王梁 杨庆 杨波 孙颖浩 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期702-705,共4页
目的研究热休克同源蛋白73(heat shock cognate protein73000,Hsc73)在基质细胞衍生因子1(SDF-1)/趋化因子CXC受体4(CXCR4)轴促进肾癌转移中的作用,确定Hsc73是否参与了CXCR4的核定位。方法通过蛋白电泳观察CXCR4高表达后Hsc73在A498细... 目的研究热休克同源蛋白73(heat shock cognate protein73000,Hsc73)在基质细胞衍生因子1(SDF-1)/趋化因子CXC受体4(CXCR4)轴促进肾癌转移中的作用,确定Hsc73是否参与了CXCR4的核定位。方法通过蛋白电泳观察CXCR4高表达后Hsc73在A498细胞中的表达情况。通过免疫染色、核蛋白免疫共沉淀等方法观察A498细胞在经过SDF-1刺激后Hsc73在细胞内表达情况,以及Hsc73与CXCR4结合情况。结果 CXCR4高表达后,A498细胞中Hsc73表达明显增高。Hsc73主要表达在A498细胞胞质中,在SDF-1刺激后出现部分转移至细胞核。提取SDF-1刺激后的A498细胞核蛋白进行CXCR4免疫共沉淀,其中发现了Hsc73。结论 Hsc73作为细胞内常见的分子伴侣蛋白,参与了CXCR4在细胞中的转运。对于SDF-1/CXCR4信号通路激活的部分环节起到了关键作用,并可能参与了CXCR4核转位的过程。 展开更多
关键词 肾细胞癌 hsc70热休克蛋白质类 CXCR4受体 趋化因子CXCL12 细胞核
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大鼠肝大部切除后热休克处理对热休克蛋白和磷酸酶的影响 被引量:2
9
作者 夏民 卢爱灵 +3 位作者 李效阳 赵绪永 李永辉 徐存拴 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期238-245,I009,共9页
目的 研究热休克蛋白 (Hsc70 /Hsp6 8)、酸性磷酸酶 (ACP)、碱性磷酸酶 (AKP)在肝再生过程中的生物学作用 ,检测这些大分子在大鼠肝大部切除后热休克处理下的动态变化。 方法 用组织化学、免疫组织化学、Western印迹、酶的原位复性... 目的 研究热休克蛋白 (Hsc70 /Hsp6 8)、酸性磷酸酶 (ACP)、碱性磷酸酶 (AKP)在肝再生过程中的生物学作用 ,检测这些大分子在大鼠肝大部切除后热休克处理下的动态变化。 方法 用组织化学、免疫组织化学、Western印迹、酶的原位复性电泳、体视学分析、比色分析等方法。 结果 肝切除和热休克联合处理 (PH - HS)后的0~ 144 h恢复期间 ,ACP有 3个高活性期 (12、36和 96 h) ,AKP有 2个高活性期 (12和 36 h) ,Hsc70 /Hsp6 8有 2个高表达期 (16和 48h) ;PH- HS后 ACP和 AKP活性增强与 140~ 180 k D的酶活性增加有关。与只进行热休克 (HS) (44℃ ,30 min)处理或与只进行 2 /3肝切除 (PH)后恢复期间 Hsc70 /Hsp6 8含量和磷酸酶活性动态变化的比较表明 ,PH- HS对 Hsc70 /Hsp6 8含量和磷酸酶活性的影响可持续 12 0 h;PH- HS中的 PH能略微降低 ACP和 AKP活性 ,减少 HS诱导肝细胞合成 Hsc70 /Hsp6 8的量 ;PH- HS中的 HS处理能抑制 PH诱导的 Hsc70 /Hsp6 8表达和推迟 ACP活性高峰出现的时间。 结论  ACP、AKP和 Hsc70 /Hsp6 8均在肝细胞的 HS反应和肝再生中起作用 ,其中 ,ACP可能在启动肝再生中起重要作用 ,AKP和 Hsc70 /Hsp6 8可能在 展开更多
关键词 肝再生 热休克 热休克蛋白 磷酸酶 大鼠
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腰椎间盘髓核组织HSPA8表达及对退变程度影响 被引量:4
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作者 王华聪 陈伯华 +2 位作者 金沧海 相宏飞 刘勇 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2019年第2期133-136,140,共5页
目的探讨70kDa热休克蛋白8(HSPA8)在人腰椎间盘髓核组织中的表达及其与人椎间盘退变程度的关系。方法收集人腰椎间盘髓核组织50例,其中15例为正常对照组,35例为退变腰椎间盘髓核组织(实验组,根据术前MRI分为突出组12例,脱出组13例,游离... 目的探讨70kDa热休克蛋白8(HSPA8)在人腰椎间盘髓核组织中的表达及其与人椎间盘退变程度的关系。方法收集人腰椎间盘髓核组织50例,其中15例为正常对照组,35例为退变腰椎间盘髓核组织(实验组,根据术前MRI分为突出组12例,脱出组13例,游离组10例)。分别应用Western-blot、苏木精-伊红(HE)染色、免疫组织化学方法检测各组髓核组织中HSPA8的表达。结果 3种方法检测结果均显示,对照组、突出组、脱出组、游离组腰椎间盘髓核组织中HSPA8表达依次降低,差异有显著性(F=153.52~1 662.43,P<0.001)。结论 HSPA8在人椎间盘髓核组织中稳定表达,并且与椎间盘退变的程度相关。 展开更多
关键词 hsc70热休克蛋白质类 椎间盘退行性变 印迹法 蛋白质 苏木精 免疫组织化学
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热休克蛋白、蛋白水解酶和磷酸酶在大鼠肝再生中的含量和活性变化 被引量:19
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作者 徐存拴 public.xxptt.ha.cn +5 位作者 夏民 卢爱灵 李效阳 李永辉 赵绪永 胡轶红 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期548-556,共9页
本文以2/3肝切除(partialhepatectomy,PH)大鼠为模型,探讨了PH后酸性和碱性磷酸酶(acidandalkalinephosphatases,ACP和AKP)、构成性热休克蛋白70/诱导性热休克蛋白68(HSC70/HSP68)、酸性和中性蛋白水解酶在肝再生期间(0~1... 本文以2/3肝切除(partialhepatectomy,PH)大鼠为模型,探讨了PH后酸性和碱性磷酸酶(acidandalkalinephosphatases,ACP和AKP)、构成性热休克蛋白70/诱导性热休克蛋白68(HSC70/HSP68)、酸性和中性蛋白水解酶在肝再生期间(0~144h)的动态变化。结果显示,在肝切除后的肝再生期间:(1)ACP和AKP均出现两个活性高峰(4和48h、16和96h),在每个活性高峰之后,ACP和AKP活性均有显著下降;(2)HSC70/HSP68在16和96h时出现两个含量高峰,第二个高峰后的最低点(接近于对照)比第一个高峰后的最低点低许多;(3)在2/3肝切除后2-6h时,诱导出一个90kD的中性蛋白水解酶;36h时,诱导出一个27kD的酸性蛋白水解酶。结果提示,ACP和90kD中性蛋白水解酶可能参与激活G0期肝细胞进入G1期;AKP和HSC70/HSP68可能主要在DNA合成、细胞代谢和增殖方面起作用;27kD酸性蛋白水解酶可能在肝细胞再分化和肝组织重建中有一定作用。 展开更多
关键词 肝再生 热休蛋白 蛋白水解酶 复性电泳
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大鼠肝大部分切除前热休克对热休克蛋白和磷酸酶的影响 被引量:8
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作者 徐存拴 卢爱灵 +3 位作者 夏民 李效阳 李永辉 赵绪永 《实验生物学报》 CSCD 2000年第1期1-11,共11页
定性和定量分析了在大鼠2/3肝切除前8b热休克(46℃,30min)处理(HS-PH)的肝再生期间(0—144h)保持性热休克蛋白70/诱导性热休克蛋白68(HSC70/HSP68)分布和含量变化、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)分布、种类和活性变化。并把上述结... 定性和定量分析了在大鼠2/3肝切除前8b热休克(46℃,30min)处理(HS-PH)的肝再生期间(0—144h)保持性热休克蛋白70/诱导性热休克蛋白68(HSC70/HSP68)分布和含量变化、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)分布、种类和活性变化。并把上述结果同只进行热休克(46℃,30min)(HS)和只进行2/3肝切除(PH)时这些分子的变化进行了比较。发现:三种处理均可提高ACP、AKP活性和HSC70/HSP68表达量,但它们的变化规律不同。进一步分析发现,HS-PH后ACP活性增强是与140kD酶活性增加有关,而AKP活性增强则与140和160—180kD的酶活性增加有关。根据实验结果推测,ACP、AKP和HSC70/HSP68均在肝细胞的热休克反应和肝再生中起作用;它们可能均参与这些过程中的信号传导,但ACP可能在启动肝细胞增殖中起主导作用,AKP和HSC70/HSP68可能在胞质分裂中起主导作用。 展开更多
关键词 肝再生 热休克蛋白 磷酸酶 热休克反应 调控
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轮状病毒与细胞表面受体相互作用的分子机制研究 被引量:2
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作者 张旭辉 周旭 余黎 《微生物学免疫学进展》 2012年第6期58-63,共6页
目的轮状病毒是导致婴幼儿重症腹泻的重要病因。轮状病毒感染宿主细胞是一个多因素参与的复杂过程,包括病毒表面两种外壳蛋白与细胞表面唾液酸、整合素、热应激同源蛋白70等多种受体分子的相互作用。就轮状病毒与细胞受体相互作用的分... 目的轮状病毒是导致婴幼儿重症腹泻的重要病因。轮状病毒感染宿主细胞是一个多因素参与的复杂过程,包括病毒表面两种外壳蛋白与细胞表面唾液酸、整合素、热应激同源蛋白70等多种受体分子的相互作用。就轮状病毒与细胞受体相互作用的分子机制作了简要论述。 展开更多
关键词 轮状病毒 唾液酸 整合素 热应激同源蛋白70 神经氨酸酶 相互作用
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Identification of a heat shock cognate protein 70 gene in Chinese soft-shell turtle (Pelodiscus sinensis) and its expression profiles under thermal stress 被引量:3
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作者 Xiao-liang LI Yue KANG +2 位作者 Xiao-yan ZHANG Bing-lin ZHU Wei-huan FANG 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2012年第6期465-477,共13页
The heat shock cognate protein 70 (Hsc70) is a member of a 70-kDa heat shock protein (HSP70) family that functions as molecular chaperones.In this study,a novel Hsc70 gene from Chinese soft-shelled turtle (Pelodiscus ... The heat shock cognate protein 70 (Hsc70) is a member of a 70-kDa heat shock protein (HSP70) family that functions as molecular chaperones.In this study,a novel Hsc70 gene from Chinese soft-shelled turtle (Pelodiscus sinensis) (tHsc70) was identified.The tHsc70 full-length complementary DNA (cDNA) is 2 272 bp long with a 1 941-bp open reading frame (ORF) encoding 646 amino acids.Three characteristic signature regions of the HSP70 family,two major domains of an adenosine triphosphate (ATP)/guanosine triphosphate (GTP) binding domain (ABD),and a substrate-binding domain (SBD) were present in the predicted tHsc70 amino acid sequence.The tHsc70 gene was expressed in Escherichia coli BL21 and the expression product reacted with the anti-Hsc70 mouse monoclonal antibody by Western blotting.Homology analysis revealed that tHsc70 shared identity from 53.9% to 87.7% at the nucleotide level,and 49.1% to 99.5% at the amino acid level with the known Hsc70s.Phylogenetic analysis showed that tHsc70 was clustered together with the Hsc70 gene of another reptile species (Alligator mississippiensis).The tHsc70 was expressed in the liver,lung,heart,and skeletal muscle.The expression patterns of tHsc70 messenger RNA (mRNA) differed among different tissues under different durations of heat stress at 40 °C.Adaptation at 25 °C for 1 h after heat stress was also different among tissues and length of heat stress.Irrespective of different profiles of expression under heat stress,tHsc70 may play roles in protecting turtles from thermal stress. 展开更多
关键词 Pelodiscus sinensis Heat shock cognate protein 70 hsc70 Phylogenetic analysis Heat stress
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肝大部切除前后热休克处理对热休克蛋白、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性影响的分析
15
作者 徐存拴 夏民 +3 位作者 卢爱灵 李效阳 李永辉 赵绪永 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 1999年第2期154-158,共5页
综合了磷酸酶的原位复性电泳、体视学分析、比色分析等方法分析①切除大白鼠大部分肝后的肝再生期间,②热休克处理大白鼠(46℃、30min)恢复8h,再切除大部分肝后的肝再生期间,③切除大部分肝恢复4h,再热休克处理(46... 综合了磷酸酶的原位复性电泳、体视学分析、比色分析等方法分析①切除大白鼠大部分肝后的肝再生期间,②热休克处理大白鼠(46℃、30min)恢复8h,再切除大部分肝后的肝再生期间,③切除大部分肝恢复4h,再热休克处理(46℃、30min)后的肝再生期间热休克蛋白(HSC70/HSP68)、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)动态变化的资料,从6个方面比较分析了HSC70/HSP68。 展开更多
关键词 肝大部切除 热休克蛋白 碱性 磷酸酶 热休克处理
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食淀粉乳杆菌对轮状病毒受体HSC70的影响
16
作者 张佳琪 马新娜 +4 位作者 张萍 王宁 邹云飞 纪元元 魏萍 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期77-82,96,共7页
旨在探究食淀粉乳杆菌(Lactobacillus amylovorus)对轮状病毒(rotavirus,RV)的细胞受体热休克同源蛋白HSC70的调节作用。以饲喂食淀粉乳杆菌的中国昆明鼠乳鼠为试验动物,通过ELISA、qPCR、冰冻切片间接免疫荧光等技术,1~11 d逐日进行空... 旨在探究食淀粉乳杆菌(Lactobacillus amylovorus)对轮状病毒(rotavirus,RV)的细胞受体热休克同源蛋白HSC70的调节作用。以饲喂食淀粉乳杆菌的中国昆明鼠乳鼠为试验动物,通过ELISA、qPCR、冰冻切片间接免疫荧光等技术,1~11 d逐日进行空肠组织取样,检测食淀粉乳杆菌对小鼠空肠组织中HSC70调节作用的动态变化。试验分为4组:正常组、病毒组、预防组(先益生菌作用后攻RV)、治疗组(先攻RV后作用益生菌)。试验结果显示,乳鼠体质量的增长率及变化情况与RV的感染相关,并且食淀粉乳杆菌可以显著地治疗及预防RV感染(P<0.05)。对空肠组织中HSC70的检测发现,攻RV后正常组及预防组的热休克同源蛋白HSC70含量在第5天显著高于治疗组和病毒组(P<0.05);在第7,11天时,各组组内热休克同源蛋白HSC70的含量无明显差异(P>0.05);第9天病毒组的热休克同源蛋白HSC70含量显著高于其他组(P<0.05)。HSC70 mRNA含量随天数的增加而减少,正常组下降趋势显著(P<0.05),预防组在第3,4天趋于平缓。攻RV后小鼠肠内HSC70 mRNA的相对表达量在第5,7,11天,呈现为病毒组>预防组>治疗组>正常组(P<0.05),且小鼠肠内HSC70 mRNA的相对表达量在第7天显著升高(P<0.05)。对第9天空肠组织进行冰冻切片-间接免疫荧光检测发现,HSC70主要存在于空肠绒毛组织,且预防组中HSC70明显少于病毒组及正常组(P<0.05)。结果表明,食淀粉乳杆菌可显著抑制RV受体HSC70在细胞中的合成,从而发挥抗病毒作用,为探究食淀粉乳杆菌抗RV机理提供理论依据。 展开更多
关键词 食淀粉乳杆菌 轮状病毒 热休克同原蛋白hsc70 冰冻切片-间接免疫荧光
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Cloning,Sequencing of the HSC70 Gene in Ctenopharyngodon idella
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作者 FU Yong LI Chunge +3 位作者 LIU Feng DONG Zhongdian JI Xiangshan CHEN Hongju 《Wuhan University Journal of Natural Sciences》 CAS 2014年第3期235-244,共10页
A cDNA encoding heat shock cognate protein 70(HSC70)was cloned from liver of grass carp(Ctenopharyngodon idella)(GenBank JF436930).This cDNA was found out to contain2 346 bp in length,including 1 950 bp of compl... A cDNA encoding heat shock cognate protein 70(HSC70)was cloned from liver of grass carp(Ctenopharyngodon idella)(GenBank JF436930).This cDNA was found out to contain2 346 bp in length,including 1 950 bp of complete coding sequence encoding 649 amino acids(aa),plus 89 bp of 5′-UTR and 307 bp of3′-UTR.Analysis of its genomic structure revealed that its corresponding gene contained seven exons and six introns.Homology analysis indicated that it shared 99%of identity with HSC70 of breams and 86%of identity with HSP70 of Drosophila.Fluorescent RT-PCR analysis revealed that at 28℃,this gene was expressed in abdominal fat,muscle,intestines,brain,middle kidney,head kidney,gonads,swim bladder,liver,heart,spleen,gills,and fins with expression level in liver being the highest(p〈0.05),followed by that in the gonads;at 36℃,its mRNA expression level was increased at first but then decreased thereafter under heat shock stress,indicating that its expression can be regulated by heat shock.In conclusion,cloning and expression analysis identified a cDNA encoding a constitutive HSP70 gene that is expressed in many tissues of Ctenopharyngodon idella and its expression was down-regulated by heat shock. 展开更多
关键词 Ctenopharyngodon idella hsc70 heat shock mRNA expression
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妊娠期高血压疾病孕妇血清、脐血及胎盘组织中热休克蛋白70的表达及其意义 被引量:17
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作者 朱锦明 李敏 李蕾 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期676-680,共5页
目的探讨热休克蛋白70(HSP70)在妊娠期高血压疾病孕妇血清、脐血及胎盘组织中的表达及其在发病中的作用。方法收集2011年8月至2012年12月在徐州市妇幼保健院产科住院分娩的妊娠期高血压疾病孕妇90例,其中妊娠期高血压组30例,轻度子... 目的探讨热休克蛋白70(HSP70)在妊娠期高血压疾病孕妇血清、脐血及胎盘组织中的表达及其在发病中的作用。方法收集2011年8月至2012年12月在徐州市妇幼保健院产科住院分娩的妊娠期高血压疾病孕妇90例,其中妊娠期高血压组30例,轻度子痫前期组30例,重度子痫前期组30例。选择同期分娩的健康孕妇30例为对照组。采用ELISA法检测各组孕妇血清、脐血中HSP70水平;用免疫组化sP法检测胎盘组织中HSP70蛋白表达水平;用逆转录(RT).PCR技术检测胎盘组织中HSP70mRNA表达水平。结果(1)轻度子痫前期组孕妇血清及脐血中HSP70水平分别为(2.61±0.98)及(0.78±0.27)μg/L,重度子痫前期组分别为(3.10±1.18)及(0.96±0.28)μg/L,两组孕妇血清及脐血中HSP70水平均分别高于对照组分别为(1.88±0.79)及(0.61±0.15)μg/L]及妊娠期高血压组[分别为(2.13±0.71)及(0.64±0.18)μg/L],分别比较,差异均有统计学意义(P〈0.05);重度子痫前期组均分别高于轻度子痫前期组,差异也有统计学意义(P〈0.05);妊娠期高血压组虽高于对照组,但差异无统计学意义(P〉0.05)。(2)妊娠期高血压组、轻度子痫前期组及重度子痫前期组胎盘组织中的HSP70蛋白表达总阳性率分别为83%(25/30)、90%(27/30)及100%(30/30)1均高于对照组(43%,13/30),分别比较,差异均有统计学意义(P〈0.05);重度子痫前期组高于妊娠期高血压组及轻度子痫前期组,差异也均有统计学意义(P〈0.05)。(3)妊娠期高血压组、轻度子痫前期组及重度子痫前期组胎盘组织中HSP70mRNA表达水平(分别为0.82±0.27、0.92±0.26及1.36±0.29)明显高于对照组(0.45±0.18),分别比较,差异均有统计学意义(P〈0.05);重度子痫前期组高于妊娠期高血压组及轻度子痫前期组,分别比较,差异也均有统计学意义(P〈0.05)。结论妊娠期高血压疾病孕妇血清、脐血及胎盘组织中HSP70表达水平明显升高,且随疾病程度加重其表达水平明显升高。提示HSP70在妊娠期高血压疾病发病中可能起一定作用。 展开更多
关键词 高血压 妊娠性 HSP70热休克蛋白质类 胎血 胎盘
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老龄大鼠术后认知功能障碍时海马HSP70表达的变化 被引量:4
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作者 蒋素芳 刘雅 康荣田 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期309-311,共3页
目的评价老龄大鼠术后认知功能障碍时海马热休克蛋白70(HSP70)表达的变化。方法清洁级健康雄性老龄SD大鼠12只,18月龄,体重500~650 g,采用随机数字表法分为2组(n=6):老龄对照组(O组)和老龄手术组(OS)。另取清洁级健康雄性成年SD大鼠12... 目的评价老龄大鼠术后认知功能障碍时海马热休克蛋白70(HSP70)表达的变化。方法清洁级健康雄性老龄SD大鼠12只,18月龄,体重500~650 g,采用随机数字表法分为2组(n=6):老龄对照组(O组)和老龄手术组(OS)。另取清洁级健康雄性成年SD大鼠12只为对比,采用随机数字表法分为2组(n=6):成年对照组(A组)和成年手术组(AS组)。AS组和OS组行剖腹探查术。于术后第3天行Morris水迷宫实验,随后处死大鼠,分离海马组织,采用Western blot法检测HSP70的表达,ELISA法检测IL-1β和TNF-α含量。结果与A组比较,AS组海马HSP70表达上调(P<0.05),其余指标差异无统计学意义(P>0.05);与O组比较,OS组逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,海马IL-1β和TNF-α含量升高,HSP70表达上调(P<0.05);与AS组比较,OS组逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,海马IL-1β和TNF-α含量升高(P<0.05),HSP70表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论老龄大鼠术后认知功能障碍时海马HSP70表达上调,有助于抑制炎症反应,发挥内源性神经保护效应。 展开更多
关键词 hsc70热休克蛋白质类 认知功能障碍 老年人
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人热休克蛋白70和热休克固有蛋白70的基因克隆和表达 被引量:2
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作者 周锦勇 潘金顺 周乙华 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第1期56-58,89,共4页
目的:克隆人热休克蛋白70(HSP70)和热休克固有蛋白70(HSC70)基因,并在大肠杆菌中表达,获得重组蛋白。方法:用RT-PCR法从HepG2细胞中扩增HSP70及HSC70cDNA序列。测序后,将相应的cDNA插入pRSET-A表达载体,在大肠杆菌中表达,重组蛋白纯化后... 目的:克隆人热休克蛋白70(HSP70)和热休克固有蛋白70(HSC70)基因,并在大肠杆菌中表达,获得重组蛋白。方法:用RT-PCR法从HepG2细胞中扩增HSP70及HSC70cDNA序列。测序后,将相应的cDNA插入pRSET-A表达载体,在大肠杆菌中表达,重组蛋白纯化后用SDS-PAGE及Western Blotting分析。结果:DNA序列结果显示,本研究所获得的HSP70及HSC70cDNA序列与参考序列一致。将全长cDNA分别插入表达质粒后,转化BL21(DE3)细菌,在IPTG的诱导下,表达产物SDS-PAGE显示相应的分子量(70kDa)位置有明显的蛋白条带。Western Blotting结果证实了其为目的蛋白,经镍树脂柱纯化,获得了相应的重组多肽。结论:成功构建了原核表达重组质粒HSP70-pRSET-A和HSC70-pRSET-A,并获得了纯化的重组人HSP70和HSC70蛋白,为进一步研究这两种蛋白的结构、功能及临床应用奠定了基础。 展开更多
关键词 热休克蛋白70 热休克固有蛋白70 基因克隆 原核表达
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