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大鼠HSPB7蛋白的表达、活性研究及抗体制备
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作者 王竞 赵晓军 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期596-599,共4页
目的克隆SD大鼠热休克蛋白HSPB7基因,通过原核表达、纯化获得HSPB7蛋白,对其活性进行初步研究,并制备其多克隆抗体,为进一步研究HSPB7蛋白奠定基础。方法从SD大鼠心脏组织中提取总RNA,经逆转录PCR得到HSPB7基因,亚克隆入pET-43.1a(+)载... 目的克隆SD大鼠热休克蛋白HSPB7基因,通过原核表达、纯化获得HSPB7蛋白,对其活性进行初步研究,并制备其多克隆抗体,为进一步研究HSPB7蛋白奠定基础。方法从SD大鼠心脏组织中提取总RNA,经逆转录PCR得到HSPB7基因,亚克隆入pET-43.1a(+)载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,获得可溶性表达产物。经纯化、质谱鉴定后进行生物学活性研究,并用纯化蛋白免疫新西兰兔,分离血清,Westernblot法测定抗体效价和特异性。结果原核表达载体pET-43.1a-HSPB7成功构建,可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,得到相对分子质量(Mr)约18600的HSPB7蛋白,纯化蛋白经质谱鉴定正确。HSPB7具有分子伴侣活性,这种活性具有温度依赖性。用纯化的蛋白免疫新西兰大耳白兔,制备的多克隆抗体效价达1∶16000,且具有较强免疫特异性。结论得到具有生物学活性的大鼠HSPB7蛋白,成功制备了兔抗大鼠HSPB7蛋白的多克隆抗体,为后续研究提供了重要的实验材料。 展开更多
关键词 热休克蛋白hspb7 原核表达 抗体制备
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普伐他汀对大鼠急性心肌梗死后热休克蛋白B7表达的影响
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作者 蒋友旭 张丽华 +1 位作者 王小曼 李盼盼 《天津医药》 CAS 北大核心 2014年第3期228-230,I0007,共4页
目的观察急性心肌梗死(AMI)大鼠梗死区心肌组织中热休克蛋白B7(HSPB7)mRNA和蛋白的表达水平,研究普伐他汀对HSPB7表达的干预作用。方法 80只AMI大鼠随机分为AMI组和普伐他汀(P)组,每组40只,同时设假手术(SH)组大鼠40只,再将3组大鼠分为1... 目的观察急性心肌梗死(AMI)大鼠梗死区心肌组织中热休克蛋白B7(HSPB7)mRNA和蛋白的表达水平,研究普伐他汀对HSPB7表达的干预作用。方法 80只AMI大鼠随机分为AMI组和普伐他汀(P)组,每组40只,同时设假手术(SH)组大鼠40只,再将3组大鼠分为1、3、6和12 h组,每个时间组10只。SH组开胸后不结扎冠脉;AMI组开胸后结扎冠状动脉左前降支;P组开胸后结扎冠状左前降支,同时给予普伐他汀0.5 mg/(kg·d)灌胃;其余组给予等量蒸馏水灌胃。分别于各时间点处死大鼠,取左心室梗死区心肌组织,SH组取对应部位的心肌组织,分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化法检测HSPB7 mRNA和蛋白的表达。结果 AMI组和P组大鼠各时点梗死区心肌组织HSPB7 mRNA和蛋白表达均高于SH组(P<0.01);梗死后1 h,梗死区心肌HSPB7 mRNA和蛋白的表达增加,在3 h时达到高峰,6 h组、12 h组HSPB7 mRNA和蛋白的表达仍高于SH组。且P组中各时间点HSPB7的表达高于AMI组。结论 HSPB7能够在AMI早期表达,普伐他汀可促进AMI后梗死区心肌组织HSPB7表达,可能是其在心梗早期起到保护心肌作用的机制之一。 展开更多
关键词 热休克蛋白质类 普伐他丁 心肌梗死 急性病 疾病模型 动物 热休克蛋白B7
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复方丹参滴丸对大鼠急性心肌梗死后热休克蛋白B7表达的影响 被引量:1
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作者 徐好杰 《河南中医》 2016年第7期1144-1147,共4页
目的:观察复方丹参滴丸对大鼠急性心肌梗死(acute myocardial infarct,AMI)后热休克蛋白B7表达的影响。方法:选取80只大鼠制备急性心肌梗死模型,将造模成功的80只急性心肌梗死大鼠随机分为心肌梗死(AMI)组和复方丹参滴丸(D)组,每组40只... 目的:观察复方丹参滴丸对大鼠急性心肌梗死(acute myocardial infarct,AMI)后热休克蛋白B7表达的影响。方法:选取80只大鼠制备急性心肌梗死模型,将造模成功的80只急性心肌梗死大鼠随机分为心肌梗死(AMI)组和复方丹参滴丸(D)组,每组40只;剩余40只制备假手术组(SH),再将3组大鼠分为1 h组、3 h组、6 h组和12 h组,每个时间组各10只。SH组开胸后不结扎冠脉,AMI组开胸后结扎冠状左前降支,D组开胸后结扎冠状左前降支,同时给予复方丹参滴丸70 mg·(kg·d)^(-1)灌胃,其余组给予等量蒸馏水灌胃。于上述各时间点处死大鼠取出心肌梗死组织,使用免疫组织化学法检测HSPB7蛋白表达,RT-PCR法测定HSPB7 mRNA表达。结果:与SH组比较,AMI组和D组在各时间点上心肌组织中HSPB7蛋白和mRNA的表达,差异均有统计学意义(P<0.001);心肌梗死1 h后HSPB7的表达开始升高(P<0.05),3 h达到高峰,6 h组、12 h组与假手术组比较,HSPB7的表达仍高,差异具有统计学意义(P<0.05),且在每个时间点上,AMI组HSPB7表达低于D组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在AMI早期HSPB7即可表达,且复方丹参滴丸对心肌梗死组织中的HSPB7表达起到促进作用,可能是其在AMI早期对心肌细胞起到保护的机制之一。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 热休克蛋白B7 复方丹参滴丸 大鼠
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Efficacy of electroacupunture at Zusanli(ST36)on jumping-injured muscle based on transcriptome sequencing and genes analysis
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作者 HAN Rui CHANG Junzhao +2 位作者 LIU Qianqian LIU Haitao LI Junwei 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CSCD 2023年第2期322-328,共7页
METHODS:In the present study,female SpragueDawley rats were randomly divided into four groups with 6 of each,including normal control group(NC),jumpinginduced muscle injury model group(JI),JI with electroacupuncture s... METHODS:In the present study,female SpragueDawley rats were randomly divided into four groups with 6 of each,including normal control group(NC),jumpinginduced muscle injury model group(JI),JI with electroacupuncture stimulation treatment group(EA),and JI with non-electroacupuncture stimulation group(NEA).Transmission electron microscopy,transcriptome sequencing and analysis,prediction of protein interaction networks,real-time polymerase chain reaction verification,and Western blotting were performed on the gastrocnemius muscle of ipsilateral lower limbs.RESULTS:The structural repair of injured gastrocnemius myofibers following jumping training in EA rats was better than that of NEA rats.A total of 136 genes were differentially expressed in EA rats relative to JI rats,with 55 genes upregulated and 81 genes downregulated.According to results of transcriptome analysis,and prediction of protein mutual interaction by the online STRING database,Heat shock protein beta-7(Hspb7)and myozenin2(Myoz2)genes were targeted.Expressions of Hspb7 and Myoz2 mRNAs were increased in EA rats relative to JI rats(P<0.05).The expression of Hspb7 protein was upregulated in EA rats relative to that in NC,JI,and NEA rats(P<0.01,<0.05,and<0.05,respectively).The expression of Myoz2 protein was upregulated in EA rats relative to that in NC and JI rats(both P<0.01,respectively).CONCLUSIONS:The present results suggest that electroacupuncture stimulation at Zusanli(ST36)could improve muscle healing following jumping-induced muscle injury,owing to the upregulation of Hspb7 and Myoz2 proteins. 展开更多
关键词 electroacupuncture stimulation skeletal muscle wounds and injuries gene expression profiling sequence analysis hspb7 Myoz2
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