苦瓜茎叶总皂甙的提取及抗HSV-Ⅱ型疱疹病毒作用研究

从苦瓜茎叶提取总皂甙并经体外细胞试验表明:总皂甙在浓度为0.005×10-6～500×10-6g/mL时无细胞毒性;在浓度达62.5×10-6g/mL水平时就表现有一定的抗HSV Ⅱ病毒活性.

宫颈癌患者外周血中HPV6.11、HPV16.18、HSVⅡ及HCMV DNA的检测

目的:测定宫颈癌患者外周血中人乳头状瘤病毒(HPV)、单纯疱疹病毒(HSVⅡ)和人巨细胞病毒(HCMV)DNA,探讨其对HPV感染的高危妇女发生宫颈癌的追踪及监测作用。方法:采用HPV6.11、HPV16.18、HSVⅡ及HCMVPCR试剂盒,用PEGeneAmpPCRSystem2400扩增,测定104例宫颈癌患者外周血中的HPV6.11、HPV16.18和80例HSVⅡ及HCMV的DNA,并以32例子宫肌瘤患者为对照组。用χ2行差异性检测。结果:1)宫颈癌患者外周血中HPV6.11、HPV16.18、HSVⅡ和HCMV病毒DNA测定的阳性率分别为35.58%、20.19%、10.00%和3.75%。对照组分别为12.50%、9.37%、3.13%和0%。2)宫颈癌患者外周血中HPV6.11混合HSVⅡ或混合HCMVDNA阳性率分别为2.04%和1.92%;HPV16.18混合HSVⅡ或混合HCMVDNA阳性率分别为5.36%和3.30%。对照组无1例出现病毒DNA的混合阳性。结论:1)宫颈癌患者外周血中HPV、HSVⅡ和HCMV等病毒DNA阳性率高于对照组。2)宫颈癌患者外周血中的病毒DNA阳性率以HPV为主(P<0.05)。3)宫颈癌患者外周血中各种病毒DNA混合阳性率较低,其协同的致癌作用有待进一步研究。4)在HPV感染的高危人群中定期进行宫颈涂片和检测外周血中HPVDNA,可起到对病情的追踪及监测作用。

汕头市孕妇HSV-Ⅱ感染血清学流行病学调查

目的 调查汕头市孕妇单纯疱疹病毒-Ⅱ（HSV-Ⅱ）感染情况，了解年龄、妊娠时期、妊娠史和文化程度等因素与HSV-Ⅱ感染的关系。方法 任选来本市各大医院妇产科就诊的孕妇1740例，采用ELISA法检测血清中HSV-Ⅱ抗体。结果 ①在1740例孕妇中，HSV-Ⅱ感染率为23.6％；②不同妊娠时期HSV-Ⅱ感染率差异无显著性（P〉0.05）；③26～35岁年龄组孕妇、有异常妊娠史、文化程度低的孕妇HSV-Ⅱ感染率高（P〈0.05）。结论 对孕妇进行HSV-Ⅱ感染的血清学监测，有利于识别有生殖器疱疹（GH）危险因素的孕妇和亚临床型孕妇，对预防新生儿HSV感染、降低流产、早产和死产的发生具有十分重要的意义。

性服务者HSVⅡ与HIV、梅毒、HBV及HCV交叉感染的流行病学调查

目的探讨青岛地区女性性服务者单纯生殖器疱疹病毒(HSV)与HBV、HCV、HIV、梅毒交叉感染的流行病学特征。方法对456例青岛地区女性性服务者的血清采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒抗体和型单纯疱疹病毒(HSV)抗体(IgG)。结果性服务者HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒抗体和HSV抗体(IgG)的阳性率分别为8.55%、0.65%、0.44%、10.53%和32.46%,交叉感染率达7.92%。结论青岛地区女性性服务者HBsAg、HCV、HIV、梅毒及HSV的感染率较高,应引起社会和医疗卫生单位的关注。

HSVⅡ-DNA在生殖器疱疹检测中的应用价值分析

生殖器疱疹（GH）由单纯疱疹病毒（HSV）引起的性传播疾病,可通过胎盘及产道感染新生儿,导致流产及新生儿死亡,与宫颈癌的发生也相关。单纯疱疹病毒（HSV）分Ⅰ型（HSVⅠ）和Ⅱ型（HSVⅡ）。HSVⅡ是生殖器疱疹的主要病原体,90%的生殖器疱疹病例都是有HSVⅡ引起的。

孕期Ⅱ型HSV感染对胎婴儿生长发育的影响

目的 探讨孕妇Ⅱ型单纯疱疹病毒 (HSV)感染及其对胎婴儿生长发育的影响。方法 应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)和多聚酶链反应 (PCR)研究 4 5 5例孕妇及其胎婴儿Ⅱ型HSV感染状况及垂直传播途径。结果 异常组孕妇Ⅱ型HSV感染率 (6 1.0 1% )明显高于对照组 (2 7.0 4 % ) ;孕妇生殖道Ⅱ型HSV无症状排毒率为 3.0 7% ;羊水、胎盘及胎儿组织中均可检出Ⅱ型HSVDNA ;母婴间Ⅱ型HSV垂直传播率为 4 .2 4 %。结论 孕妇Ⅱ型HSV感染与异常妊娠关系密切。Ⅱ型HSV可经羊水、胎盘或产道感染胎婴儿。

ELISA法与荧光定量PCR法检测HSVⅡ感染的应用研究

目的 :分析ELISA法和荧光定量PCR法联合检测生殖器疱疹感染HSVⅡ的敏感性。方法 :对 191例生殖器疱疹患者同时运用改良的ELISA法和荧光定量PCR法进行检测。结果 :ELISA法检测抗体阳性率为 6 1 8% ,荧光定量PCR法检测HSVⅡ阳性率 85 9% ,总阳性率 92 1%。结论 :荧光定量PCR法灵敏度优于ELISA法 。

10株分泌HSV-Ⅱ型单克隆抗体的杂交瘤细胞系的建立

用HSV-ⅡUW268株免疫BALB/c鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选、克隆化后获得10株分泌抗HSV-ⅡUW268株单克隆抗体的细胞系。其中1株仅与HSV-ⅡUW268株发生特异免疫反应,9株与HSV-Ⅱ和HSV-IF_(17)均发生免疫反应。用免疫沉淀试验检测单克隆抗体的Ig类型为IgG_1。保存的杂交瘤细胞仍能稳定地分泌抗HSV-ⅡUW268株的单克隆抗体。

子宫内膜癌与HSV Ⅱ感染关系研究

目的为了解子宫内膜癌与单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSVⅡ)感染的关系。方法采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术检测30例子宫内膜癌,子宫内膜增生症、正常子宫内膜各15例HSVⅡ感染情况。结果子宫内膜癌HSVⅡ感染阳性率50%(15/30),子宫内膜增生症HSVⅡ阳性率6.67%(1/15);15例正常子宫内膜无HSVⅡ感染。子宫内膜癌与子宫内膜增生症及正常子宫内膜比较,P<0.001,OR=29,RR=2.749,差异极为显著。结论子宫内膜HSVⅡ感染与子宫内膜癌的发生发展相关,可能与患者临床分期、病理分化程度有一定的相关性,可能为子宫内膜癌的高危因素之一。

肺癌与HSVⅡ感染关系的研究

目的了解单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSVⅡ)感染与肺癌的关系。方法采用基因芯片技术检测26例肺癌,10例正常肺组织 HSVⅡ感染情况。结果肺癌 HSVⅡ感染阳性率61.5%(16/26),10例正常肺组织1例 HSVⅡ感染。肺癌与正常肺组织比较,P<0.01,差异显著。结论肺组织 HSVⅡ感染与肺癌的发生发展、与患者临床分期、病理分化程度相关,可能为肺癌的高危因素之一。

ELISA法检测HSVⅡ-Ag与HSVⅡ-Ab(IgG,IgM)在HSVⅡ感染上的应用研究

目的 分析ELISA法检测生殖器疱疹病毒抗原、抗体的敏感性和特异性。方法 同时对 84例皮肤性病门诊病人用ELISA法进行生殖器疱疹病毒抗原、抗体检测。结果 HSVⅡ -Ag阳性率 5 3 .6%,HSVⅡ -Ab(IgG)阳性率 42 .9%,HSVⅡ -Ab(IgM) 2 2 .6%。结论 ELISA法检测HSVⅡ -Ag可应用于基层医院在生殖器疱疹上的辅助诊断 ,检测HSVⅡ -Ab(IgG ,IgM)可应用于医疗事业单位健康体检 ;

HPV、HSVⅡ、ICAM-1在宫颈癌发生发展中的作用及相互关系分析

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)、疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)及细胞间黏附分子-1(ICMA-1)在宫颈癌发生发展中的作用,并就上述3种物质间的关联进行分析。方法选择197例研究对象,按照其病理学检测结果将其分为晚期宫颈癌组(Ⅲ~Ⅳ期,51例)、早期宫颈癌组(Ⅰ~Ⅱ期,40例)、良性病变组(46例)、健康对照组(60例),应用PCR技术检测4组研究对象HPV-DNA、HSV2-DNA、ICMA-1mRNA水平并进行组间对比,对宫颈癌患者实施治疗,并对比治疗前后两组宫颈癌患者上述4个指标变化。结果对比显示,4组中HPV-DNA、HSV2-DNA、ICMA-1mRNA水平晚期宫颈癌组最高,其次为早期宫颈癌组,而后是良性病变组,健康对照组最低,组间对比差异具有统计学意义(P<0.05);对比发现,治疗后晚期宫颈癌组及早期宫颈癌组HPV-DNA、HSV2-DNA、ICMA-1mRNA水平均出现下降,对比治疗前差异具有统计学意义(P<0.05);相关性分析发现,HPV、HSVⅡ、ICAM-1之间呈现正相关联系(P<0.05)。结论HPV及HSVⅡ感染会增加宫颈癌发生几率,ICAM-1过表达态可用于宫颈癌诊断,HPV、HSVⅡ、ICAM-1呈现正相关联系。

检测血清HSVⅡ-IgM水平4种试剂盒的比较

本实验室用 4种试剂盒检测 84只血清HSVⅡ -IgM水平 ,进行比较 ,确定选择荷兰阿克苏 ,所属Zeus集团的试剂盒 ,依据是 :1 方法特异性强。 2 试剂稳定性佳。 3

不同标本对HSVⅡ-DNA检出率的影响

目的通过对来源不同的标本(包括水疱液、宫颈分泌物、血清)进行HSVⅡ-DNA荧光定量检测,探讨其阳性率存在的差异。方法运用荧光定量PCR的方法,对不同标本进行HSVⅡ-DNA检测。结果在86例标本中,水疱液的阳性率最高,达78例,阳性率为90.7%;血清标本的阳性率最低,仅3例阳性,阳性率为3.5%;宫颈分泌物阳性率介于以上两者之间,阳性标本47例,阳性率为54.7%。结论来源不同的标本,其HSVⅡ-DNA阳性检出率存在明显差异。

IL-18与HSV-2gD模拟抗原表位DNA疫苗的免疫效果观察

目的:研究串联重组核酸疫苗pcDNA3.1-IL-18-HSVP6和pcDNA3.1-IL-18-HSVNP6对机体的免疫效果。NP6为与HSV-2gD模拟抗原P6最相似的天然抗原表位序列(Accession Number:E00394)。方法:将构建的真核表达质粒pcDNA3.1-IL-18、pcDNA3.1-IL-18-HSVP6和pcDNA3.1-IL-18-HSVNP6肌内注射免疫接种BALB/c小鼠3次,每次间隔1周。末次免疫后1周眼眶静脉采血,ELISA法检测小鼠血清特异性抗体滴度、IFN-γ及IL-18含量;末次免疫后一月,处死小鼠,无菌分离脾脏,MTT法测定脾淋巴细胞增殖率。结果:重组核酸疫苗pcDNA3.1-IL-18-HSVP6免疫小鼠后可刺激血清特异性抗体的产生,诱导分泌较高水平的IFN-γ和IL-18。可促进小鼠脾淋巴细胞的增殖。结论:重组核酸疫苗pcDNA3.1-IL-18-HSVP6能诱导较强的细胞免疫和体液免疫,从而为构建更加有效的HSV-2DNA疫苗奠定了良好的基础。

青羊参多糖硫酸酯体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型活性研究

目的体外测定青羊参多糖硫酸酯抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的活性。方法采用MTT法检测化合物对疱疹病毒感染Vero细胞的保护作用。结果青羊参多糖硫酸酯体外抗HSV-Ⅱ的EC50为69.9μg/m l,治疗指数为103。结论在体外,青羊参多糖硫酸酯有较显著的抗HSV-Ⅱ的作用。

应用ELISA方法检测单纯疱疹病毒-Ⅱ型抗体的研究

目的了解广东省汕头市人群单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的感染状况。方法采用ELISA方法检测HSV-ⅡIgM和IgG抗体。结果性传播疾病(性病)患者的抗体阳性检出率:HSV-ⅡIgM为16.2%(88/544),HSV-ⅡIgG为62.9%(324/544);正常对照组的抗体阳性检出率:HSV-ⅡIgM为3.3%(2/60)、HSV-ⅡIgG为41.7%(25/60)。两组的阳性检出率,患者组明显高于对照组(P<0.01)。结论不同人群HSV的感染状况不同;正常人群中存在HSV-Ⅱ感染,HSV-Ⅱ是性病的重要病原体之一。

小鼠MIP-1α真核表达质粒的构建及在HSV-II核酸疫苗中的应用

目的构建小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)的真核表达质粒,观察其作为分子佐剂对单纯疱疹病毒II型(HSV-II)DNA疫苗免疫效果的影响。方法以LPS刺激RAW264.7细胞提取总RNA。采用RT-PCR扩增出MIP-1α基因的全部编码序列,利用克隆载体pUCm-T,将其亚克隆入pcDNA3中,构建出小鼠MIP-1α的真核表达质粒Pm;将其转染COS-7细胞,并用Boyden趋化小室法检测MIP-1α的生物学活性。然后用其与HSV-IIgD的DNA疫苗一起免疫BALB/c小鼠,检测免疫小鼠的特异性抗体、脾T细胞增殖反应及病毒攻击小鼠后对小鼠的保护率,观察MIP-1α对HSV-IIDNA疫苗免疫效果的影响。结果成功构建了小鼠MIP-1α的重组真核表达质粒;免疫BALB/c小鼠发现,其作为分子佐剂可加强HSV-IIgDDNA疫苗的免疫效果。结论小鼠MIP-1α可作为HSV-IIgDDNA疫苗的分子佐剂,为研制新型有效的HSV-IIDNA疫苗提供一定的依据。

子宫内膜癌与单纯疱疹病毒Ⅱ感染的关系研究

目的了解子宫内膜癌与单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSVⅡ)感染的关系。方法采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术检测30例子宫内膜癌,子宫内膜增殖症、正常子宫内膜各15例HSVⅡ感染情况,电子显微镜观察子宫内膜癌癌细胞5例。结果子宫内膜癌HSVⅡ感染阳性率50%(15/30),电子显微镜观察子宫内膜癌癌细胞胞质内可见少量单膜包裹的圆形小体病毒颗粒;子宫内膜增殖症HSVⅡ阳性率6.67%(1/15);15例正常子宫内膜无HSVⅡ感染。子宫内膜癌与子宫内膜增殖症及正常子宫内膜比较,P<0.001,OR=29,RR=2.749,差异极为显著。结论子宫内膜HSVⅡ感染与子宫内膜癌的发生、发展相关,与患者临床分期、病理分化程度有一定的相关性,可能为子宫内膜癌的高危因素之一。

大黄提取液体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型作用的实验研究

目的:研究大黄提取液在体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的作用。方法:用hela细胞做体外培养实验,以不同剂量的大黄提取液作用于病毒复制周期的各个阶段,以病毒半数感染量(TCID50)、细胞病变(CPE)、MTT染色细胞保护率(MTT法)作为评价指标,判断药效,对大黄提取液抗HSV-Ⅱ作用进行评价。结果:大黄提取液对hela细胞的增殖无明显作用,且对hela细胞毒性极低,对病毒有直接灭活作用;可干扰病毒向宿主细胞吸附,还可有效抑制病毒复制。结论:大黄提取液在体外对HSV-Ⅱ有显著的抑制和杀伤作用,并且有效抑制病毒复制。