扇贝裙边糖胺聚糖对HSV-Ⅰ感染小鼠保护作用的研究

目的研究扇贝裙边糖胺聚糖(Glycosaminoglycan from Scallop Skirt,SS-GAG)对感染单纯疱疹病毒Ⅰ型(Herpes simplex virus typeⅠ,HSV-Ⅰ)小鼠的保护作用。方法通过在无菌条件下给予小鼠注射SS-GAG,连续11d,并在给药第三天给小鼠腹腔注射HSV-Ⅰ病毒悬液建立小鼠感染模型,观察SS-GAG对HSV-Ⅰ感染小鼠存活时间及死亡率及体重的影响,并计算其生命延长率。观察SS-GAG对对HSV-Ⅰ感染小鼠脾脏指数、胸腺指数等免疫指标的影响。结果与病毒对照组相比,SS-GAG(10mg·kg-1、20mg·kg-1、40mg·kg-1)能明显延长HSV-Ⅰ感染小鼠的平均存活时间,降低小鼠的死亡率(P<0.01),提高小鼠体重(P<0.01),并且能显著提高HSV-Ⅰ感染小鼠的脾脏指数和胸腺指数(P<0.01)。结论扇贝裙边糖胺聚糖对HSV-Ⅰ感染小鼠有一定的保护作用。其作用值得进一步研究。

苦瓜籽总甙体外抗HSV-Ⅰ和RSV活性研究

从苦瓜种子中提取苦瓜籽总甙,并测定了此总甙体外抗HSV-Ⅰ和RSV的活性.实验结果表明,0.375×10-3g/mL苦瓜籽总甙药液可抑制HSV-Ⅰ对Vero细胞和RSV对Hep-2细胞的损害.且此浓度对正常Vero细胞和Hep-2细胞均无毒性作用.

重组抗原在HSV-Ⅰ感染ELISA检测中的应用

目的 用单纯疱疹病毒(HSV)重组蛋白作为包被抗原建立一种特异性和灵敏性较高的ELISA方法。方法 将重组糖蛋白D(gD)和HSV Ⅰ分别作为包被抗原,检测5 7份临床标本,同时用国产和德国试剂盒进行检测;将德国试剂盒作为金标准,另外三者检测结果在特异性、灵敏性和符合率等方面与其进行比较。结果 与德国试剂盒相比,在特异度、敏感度、符合率方面,重组抗原分别为5 7 1%、82 0 %、78 9%。病毒抗原分别为5 7 1%、78 0 %、75 4 % ;国产试剂盒分别为10 0 0 %、4 8 0 %、5 4 4 %。重组蛋白重复性实验结果经统计学处理差异无统计学意义(P >0 0 5 )。结论 用酵母菌表达的HSV Ⅰ重组gD蛋白作为包被抗原进行ELISA检测是一种敏感、特异的方法,具有较大的应用价值。

牡荆属植物Vitexpolygama富含黄酮的提取物体外对耐阿昔洛韦的HSV-Ⅰ的抗病毒活性

作者研究了牡荆属植物 V.polygamaCham 富含黄酮的叶和果实的乙酸乙酯提取物及提取部位体外对耐阿昔洛韦的 HSV-I的抑制作用及机理。该植物干叶的乙酸乙酯提取物用硅胶柱层析,乙酸乙酯-丙酮-水(25∶8∶2)洗脱得14个部位(VPAF-1～14)。对木犀草素。

表达降钙素基因相关肽的单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子载体免疫效果观察

目的探讨重组pUPO-Δγ134.5-CGRP扩增子对免疫系统的作用。方法用重组扩增子感染BALB/C小鼠,分离血清及淋巴细胞,流式细胞仪法、免疫组化法、LDH法、分别检测外周血CD4、CD8分类、TCR、NK细胞、CTL细胞以及LAK细胞活性杀伤活性。结果重组扩增子明显增强了机体的免疫力。结论该重组扩增子具有增强机体免疫力的作用。

治咳川贝枇杷滴丸体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型的作用

目的:研究治咳川贝枇杷滴丸体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)的作用。方法:采用CPE法和MTT法在细胞水平上检测治咳川贝枇杷滴丸抗HSV-Ⅰ的作用;观察不同时间段的含药血清抑制HSV-Ⅰ的情况,在血清水平上进一步验证治咳川贝枇杷滴丸抗HSV-Ⅰ的作用。结果:细胞水平上,治咳川贝枇杷滴丸对HSV-Ⅰ有直接灭活作用、侵入阻断作用、生物合成抑制作用,最高抑制率分别为75.41%、60.76%和56.71%(P<0.05)。在TC0范围以下,随着药物浓度的增加,病毒抑制率明显升高,呈量效关系。血清水平上,含药血清具有明显的抗HSV-Ⅰ作用,抑制作用呈一定的浓度、时间依赖性。结论:治咳川贝枇杷滴丸具有一定的体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型作用。

广谱抗病毒抗生素17997对HSV-1形态学的影响

目的探讨新一类抗病毒抗生素17997的抗病毒的作用机制。方法比较不同浓度的17997和ACV对HSV_Ⅰ形态学的影响。结果在Vero细胞核内和胞浆中发现许多HSV_Ⅰ空心衣壳。当17997的浓度达到几乎完全抑制HSV_Ⅰ复制时 ,仍没有看到明显的细胞损害。结论17997主要抑制病毒DNA合成 ,而且没有明显的细胞毒性。

表达降钙素基因相关肽的单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子载体的构建、包装和扩增

目的对单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子质料装载降钙素基因相关肽,并进行包装和扩增。方法分别钓取pac基因和γ134.5基因,克隆入pMD18-T载体中。pSV载体经HindⅢ和BamHⅠ双酶切,获得lacZ片段,自身环化形成pUPO-γ134.5-lacZ。合成CGRP基因序列,将此基因替换pUPO-γ134.5-lacZ质粒中的lacZ基因,插入γ134.5基因位点中,即pUPO-Δγ134.5-CGRP。再用单纯疱疹病毒温敏株辅助在BHK细胞中包装、扩增,通过检测lacZ的表达反映扩增子病毒滴度。结果酶切鉴定证实重组子构建成功。重组扩增子质粒的包装、扩增由BHK细胞的形态变化和X-gal原位检测载体lacZ的表达证实。扩增子假型病毒滴度达3.5×105TU/ml。结论本研究构建、包装、扩增的携带降钙素基因相关肽的假型病毒有较高感染性,这种扩增子病毒可作为实验研究的有力工具。

板蓝根体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型作用

目的探讨板蓝根5个化学部位体外抗单纯疱疹病毒型(HSV-Ⅰ)的活性及作用机制。方法利用Hep-2细胞体外培养系统,通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,测定板蓝根不同化学部位抑制HSV-Ⅰ对Hep-2细胞感染的作用;以治疗指数(TI)为评价指标,比较各部位抗病毒活性强弱。结果板蓝根各部位均有抑制HSV-Ⅰ生物合成作用,其中部位活性最强,TI为8.2;部位对HSV-Ⅰ有直接灭活作用;各部位均不能阻止HSV-Ⅰ侵入细胞。结论板蓝根在体外主要通过抑制生物合成而发挥抗HSV-Ⅰ作用。

牛膝多糖硫酸酯抗Ⅰ型单纯疱疹病毒的实验研究

以细胞培养技术对牛膝多糖（Ａｃｈｙｒａｎｔｈｅｓｂｉｄｅｎｔａｔａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，Ａｂｐｓ）硫酸酯抗Ⅰ型单纯疱疹病毒药效的实验进行研究。受试药物Ａｂｐｓ硫酸酯（Ａ－５、Ａ－６、Ｂ－３、Ｂ－４、Ｂ－５、Ｃ－６、Ｃ－７、Ｃ－８）和对照药物环胞苷（ＣＣ）、亚膦酰乙酸（ＰＡＡ）按照综合药效指数评价时，排列顺序为Ａ－６（２．１７）＞ＣＣ（２．１１）＞ＰＡＡ（２．０４）＞Ｂ－３（２．０２）＞Ｂ－５（１．９０）＞Ａ－５（１．６０）＞Ｃ－８（１．３８）＞Ｃ－７（１．３２）＞Ｂ－４（０．８４）＞Ｃ－６（０．８０）。由此可见，８种受试的化学合成药牛膝多糖硫酸酯中Ａ－６为抗Ⅰ型单纯疱疹病毒效果较佳新药，本品优于环胞苷和亚膦酰乙酸。

HSVⅠ感染L-02细胞对核不均一性核糖核蛋白H2(hnRNP H2)表达影响

单纯疱疹病毒(HSVⅠ)对宿主细胞转录及mRNA修饰翻译通路的调控是一个系统的、复杂的体系,探索其具体机制将有助于了解病毒复制过程及与宿主细胞之间的相互作用。基于2-DE分析,人正常肝细胞L-02细胞核不均一性核糖核蛋白H2(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein H2,hnRNP H2)在感染HSVⅠ前后存在表达差异,通过Western blot,Northern blot等技术方法验证其在病毒复制过程中不同时段对其表达影响。

Ⅰ型单纯疱疹病毒潜伏感染及其应激复发

Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)是常见的病原体,人是其唯一自然宿主。原发感染后,HSV-1在上皮细胞大量复制,然后沿轴突逆行至感觉神经节并潜伏下来。当机体在一定的应激负荷下,潜伏感染的病毒重新激活,从而造成复发性疾病。因此,阐明病毒潜伏感染及应激复发的相关机制,将对Ⅰ型单纯疱疹病毒预防、治疗和控制带来新的启示。该文就HSV-1潜伏感染与应激复发的相关机制进行综述。

HSVⅠ感染人成纤维细胞诱导的SR-15蛋白生物学功能分析

人单纯疱疹病毒Ⅰ型(HerpessimplexvirusⅠ,HSVⅠ)结合人成纤维细胞相应受体以启动感染的过程,能够引起细胞产生特异性蛋白分子的表达,其中之一的SR-15蛋白经酵母双杂交系统分析证明可与细胞内多个具有KRAB结构的锌指蛋白产生特异性相互作用,其作用部位为锌指结构域,该作用能够影响该类蛋白之一ZNF268在细胞内的转录抑制作用。

人中性粒细胞多肽HNP_(1,3)体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型的作用

体外观察人中性粒细胞多肽1,3(Humanneutrophilpeptide,HNP1,3)及阿昔洛韦(Acyclovir,ACV)对单纯疱疹病毒-Ⅰ型(Herpessimplexvirus1,HSV-1)的抑制作用。以Vero细胞为靶细胞,用各种浓度HNP1,3与游离病毒颗粒(直接失活组)及感染病毒后的靶细胞(复制抑制组)进行相互作用,镜下观察各药物对HSV-1致细胞病变效应的抑制作用,并采用ELISA法测定感染48h后药物对HSV-1囊膜糖蛋白分泌的抑制作用。MTT法检测各药物对细胞的毒性作用。结果显示直接失活组中,HNP1,3可使HSV-1的致细胞病变效应减轻,对HSV-1直接失活的50%有效浓度(EC50)为8.1μg/mL、10.03μg/mL;复制抑制组中,ACV使HSV-1的致细胞病变效应减轻,EC50为0.68μg/mL。MTT检测结果表明HNP1,3在治疗浓度范围内无明显细胞毒性。以上结果表明HNP1,3除具有较强的抗菌作用和抗人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(Humanimmunodeficiencyvirus1,HIV-1)活性外,还能失活HSV-1病毒颗粒,从而逆转病毒及其蛋白的病毒效应(致细胞病变)和抑制病毒蛋白质的合成。

卷柏属药用植物提取物体外抗疱疹病毒Ⅰ型的研究

目的对卷柏属7种药用植物的13种提取物在体外抗疱疹病毒I型(HSV-I)的作用进行比较研究,并对其抗病毒作用机制进行初步探讨。方法采用13种提取物一定浓度的溶液作用于HSV-I感染的Vero细胞,观察比较细胞病变效应(CPE),72h后MTT法测定细胞存活率。结果在Vero细胞体系中,卷柏属7种药用植物的乙酸乙酯和95%乙醇提取物部位具有一定的抑制HSV-I对细胞的致病变作用,使细胞存活率提高。结论多种卷柏属药用植物可作为新的抗HSV-I的资源植物。

皱瘤海鞘抗单纯疱疹病毒Ⅰ型活性的初步研究

目的探讨皱瘤海鞘醇提物在体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)的作用。方法以阿昔洛韦为阳性对照,利用Vero细胞体外增殖模型,通过细胞病变效应法(CPE)和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞活性,测定皱瘤海鞘醇提物抑制HSV-Ⅰ对Vero细胞感染的作用。结果皱瘤海鞘醇提物TC50值(半数致病变浓度)为7.778 mg/mL,综合药效IC50(半数抑病毒浓度)为0.230 mg/mL,治疗指数TI为33.8,具有高效低毒性;对HSV-Ⅰ具有很好的直接杀伤作用,对HSV-Ⅰ生物合成的抑制作用较小。结论皱瘤海鞘醇提物在体外具有良好的抗HSV-Ⅰ活性。

血浆载脂蛋白A－Ⅰ生理功能的研究──A－Ⅰ及其裂解片段对单纯疱疹病毒感染细胞的作用

载脂蛋白Ａ－Ⅰ是血浆高密度脂蛋白的主要蛋白成份，在生理浓度下能抑制单纯疱疹Ⅰ型病毒引起的细胞融合。作者选用了三种来源的血浆载脂蛋白Ａ－Ⅰ及其中一种的裂解片段，通过三种不同的实验研究了其抗病毒作用，并认为此作用与Ａ－Ⅰ的氨基酸组成及其相应的空间结构有密切关系。

单纯疱疹病毒Ⅰ型基因治疗载体的快速构建

背景:单纯疱疹病毒Ⅰ型载体因具有独特的优点目前被广泛应用,但其构建尚缺乏一种快速有效的方法。目的:利用Cre/Loxp高效重组系统构建单纯疱疹病毒Ⅰ型载体。方法:分离单纯疱疹病毒HSV-1,将含Cre重组酶的c66-SV40-cre质粒转染Vero细胞,构建一株带有Loxp位点的重组HSV-1框架载体HSVLoxp。构建穿梭载体pShuttle-SV40-Cre-Loxp-IRES及重组单纯疱疹病毒Ⅰ型载体HSV-GDNF,用HAT培养基筛选出阳性毒株后用GDNF引物做PCR鉴定,扩增培养后测定滴度。结果与结论:成功构建pHV-TK-GFP质粒,并在Vero细胞内发生重组,分离出缺失了Us3基因的重组病毒HSVtk-Loxp-GFP01。成功构建HSV-1框架载体HSVLoxp及穿梭载体pShuttle-SV40-Cre-Loxp-IRES,成功获得GDNF基因,并将其转移到了HSV-1基因组上,成功构建了表达GDNF的单纯疱疹病毒HSV-1载体,测定其滴度约为2.25×106IU/mL。

单纯疱疹病毒Ⅰ型最新研究进展——病原学、防控及应用

单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus 1,HSV-1)感染可引起广泛的临床症状,包括口腔感染造成的组织损伤,以及严重的中枢神经系统感染造成的脑炎。HSV-1的研究每年都有突破性进展,其病原学、感染引致慢性炎症、抗病毒制剂,以及作为微生物工具用于治疗肿瘤的研究,引起了业界同行的广泛兴趣。本文对HSV-1近几年的研究进展进行综述,为进一步了解该病毒致病机理及应用价值提供参考。