基于HVT耦合场的不同地下水位路基土体湿度场特征研究

为研究广西岳圩口岸联线公路路基非饱和细粒土湿度场变化特征,文章引入水-汽-热(HVT)三场耦合下水分迁移理论,采用ABAQUS仿真平台建立起路基模型,探讨了路基湿度场特征参数影响变化情况。研究表明:地下水位即使差异化,但毛细水上升过程具有相似性,均为逐步减缓态势,而地下水位愈高,毛细水上升高度愈低,尤以水位在17.5 m后降幅减弱最明显;在地下水位7.5~17.5 m与20~22.5 m两个区间内,路基高度方向上含水率变化趋势各有差异,地下水位限制了高度方向上土层水分迁移过程;从路基底至顶部,基质吸力逐步增大,且地下水位愈高,基质吸力在高度方向上变化愈敏感;路基水平方向上水分迁移较弱,不会改变高度方向上含水率变化,同一高度方向上土层含水率维持较稳定。研究结果可对路基非饱和土体湿度场演化及参数分析提供参考。

免疫鸡MDV感染后羽毛根HVT的分离及HVT免疫对MDV抗原检测的影响

５只ＨＶＴ免疫鸡，实验感染ＭＤＶ后的第１～１０周期间，分别采用初次细胞分离培养物上清中的自由病毒粒子鉴定，ｄｏｔ－ｂｌｏｔＤＮＡ杂交和常规ＡＧＰ试验等方法，对并发感染鸡羽毛根进行了病毒及病毒抗原的动态检测与比较。结果显示，在上述羽毛根中可同时存在ＨＶＴ粒子和ＭＤＶＤＮＡ。ＨＶＴ可分离时间为ＭＤＶ攻毒后１～７周；ＭＤＶＤＮＡ最早检出时间为ＭＤＶ攻毒后的第１８～２２天，并达到其持续性（２２～７０ｄ）的检出率最高峰（１００％）；而ＡＧＰ法对此期间鸡只羽毛根ＭＤＶ抗原的最早检出时间在第２２天，且检出率很低。因此，羽毛病毒抗原ＡＧＰ检测法，对免疫鸡只或鸡群ＭＤＶ感染的诊断仍然是特异的，但较单纯感染的检测，其检出率更低，因而更难以反映出免疫鸡群中ＭＤＶ感染的真实状况。

中药免疫增强剂对HVT免疫雏鸡免疫器官中免疫活性细胞的影响

研究对鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒疫苗(HVT)免疫雏鸡饲喂中药免疫增强剂后,免疫器官中免疫活性细胞的变化进行了观察。结果显示,HVT免疫后添加中药免疫增强剂组雏鸡胸腺、法氏囊和脾脏等免疫器官组织不同区域的T淋巴细胞和浆细胞数均明显高于空白对照组,尤其是胸腺中的T淋巴细胞、法氏囊和脾脏红髓中的浆细胞数及脾脏动脉周围鞘中的T淋巴细胞表现得更加突出。

HVT国内株的分离鉴定

用来自国内某火鸡饲养场的健康火鸡血白细胞 ,接种于鸡胚成纤维细胞 ,分离到一株火鸡疱疹病毒的野毒—SY8_2。电镜下可观察到分离株SY8_2的鸡胚成纤维细胞培养物中存在典型的火鸡疱疹病毒粒子 ;分离株SY8_2的细胞培养物经卵黄囊途径接种 4日龄鸡胚 ,14天后在绒毛尿囊膜上形成痘斑 ;用分离物SY8_2细胞培养物接种 1日龄SPF雏鸡 ,感染雏鸡可产生病毒血症 ,并能从感染雏鸡的血液白细胞中重新分离到病毒 ;经 2个月的临床观察人工感染鸡无不良反应 ,剖检无任何病理解剖学变化 ;用HVT特异性单克隆抗体L78(3型 )做间接免疫荧光染色试验证实分离株SY8_2为MD血清 3型病毒—HVT。

雏鸡HVT疫苗免疫后活性氧自由基代谢变化规律的研究

本实验以火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）疫苗免疫１日龄ＡＡ肉用雏鸡，于免疫后７，１４，２８，４２和５６日龄分别检测雏鸡中枢、外周淋巴器官及主要内脏器官超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、含硒谷胱甘肽过氧化物酶（Ｓｅ－ＧＳＨＰｘ）活性和脂质过氧化物（ＬＰＯ、Ｏ）含量，并首次采用化学发光（ＣＬ）法检测雏鸡中枢、外周淋巴器官淋巴细胞化学发光的动态变化。结果：（１）ＨＶＴ疫苗免疫雏鸡各器官总ＳＯＤ（Ｔ－ＳＯＤ）和Ｍｎ－ＳＯＤ活性在大部分检测时期均显著增强（Ｐ＜０．０５），Ｃｕ、Ｚｎ－ＳＯＤ活性轻度升高，但无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；（２）ＨＶＴ疫苗免疫雏鸡各器官Ｓｅ－ＧＳＨＰｘ活性２８、４２和５６日龄显著增强（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）；（３）ＨＶＴ疫苗免疫雏鸡多数器官ＬＯＰ含量于７、２８和５６日龄降低和显著降低（Ｐ＞０．０５，Ｐ＜０．０５）；（４）ＨＶＴ疫苗免疫雏鸡胸腺、脾脏和法氏囊各免疫器官淋巴细胞ＣＬ值检测各时期增高和显著增高（Ｐ＞０．０５，Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。本实验结果表明，ＨＶＴ疫苗免疫雏鸡活性氧自由基清除系统活性增强、淋巴细胞活性氧自由基生成增多，但脂质过氧化作用减弱，从而发挥ＨＶＴ疫苗的免疫增强效应和免疫保?

HVT免疫鸡羽毛根中病毒抗原的检测

１日龄非免疫鸡，ＨＶＴ常规剂量免疫后，于第３周起，每周采集一次羽毛根，分别作常规ＭＤＶ琼扩抗原的检测，结果显示：在免疫后第３～８周检测，均未观察到特异性ＡＧＰ沉淀线；若取较多数量的富含羽髓的羽毛根，经２ｍｌ磷酸缓冲液（ＰＢＳ）浸提、浓缩胶浓缩约４０倍后，再作上述检测，则分别于免疫接种后的第３～５周都有特异性的ＡＧＰ沉淀线出现，且与感染细胞上清中浓缩的ＨＶＴ及ＭＤＶ琼扩抗原所形成的沉淀线基本吻合，而第６周检测时，仅与ＨＶＴ阳性血清呈微弱阳性，用同样方法对免疫后第６周后的检测结果均表明为阴性。由此推断，免疫鸡羽毛根中含有较低水平的、并与致病性ＭＤＶ抗原具有交叉反应性的ＨＶＴ琼扩抗原，但采用常规ＡＧＰ法不能直接检测到。

鸡马立克氏病HVT活疫苗稀释液的比较研究

对自制的鸡马立克氏病HVT冻干活疫苗四种稀释液与国内外6家公司的稀释液(市售)进行比较研究,以寻求一种适宜HVT耐热冻干活疫苗的优质稀释液.用不同稀释液稀释HVT活疫苗在(20±2)℃放置1～4 h,测定病毒存活率.结果表明:自制的BSW稀释液稀释耐热疫苗放置1 h后,病毒存活率为97.3%,三种国产稀释液平均为70%,三种进口稀释液平均为77%.BSW稀释液室温贮存2年后,再稀释疫苗置(20±2)℃1 h,测定病毒存活率,结果BSW稀释液(存活率84.5%)高于国产稀释液和进口稀释液18%以上.临床应用50万余羽份,反映效果良好.

鸡马立克火鸡疱疹病毒（Fc－126株）的标准化研究Ⅳ．HVT克隆株（330801）的安全性与半数保护量的测定

ＨＶＴ克隆株（大斑３３０８０１）大剂量（１０头剂）免疫１日龄有母源抗体的雏鸡，在１０周的观察期内未见任何不良反应和肉眼可见病变，半数保护量（ＰＤ５０）为６０ＰＦＵ。病毒的免疫剂量（ＰＦＵ数）与抗攻毒保护力及与雏鸡的增重呈正相关。

HVT非必需基因区鉴定及含MDVgB基因重组病毒的构建

以火鸡疱疹病毒(HVT)约8.0kb的BamHⅠDNA克隆片段中的B9mHⅠHindⅢ亚克隆片段为同源序列,将大肠杆菌β-半乳糖苷酶(LacZ)基因作为报告基因,通过同源重组,获得了表达LacZ基因产物的重组HVT(LacZ-rHVT)。经体内、体外传代表明重组病毒中的LacZ基因表达稳定;同时证明该亚克隆片段属于HVT复制的非必需基因。在此基础上,将Ⅰ型马立克氏病毒(MDV)糖蛋白B(gB)基因插入该亚克隆片段中,构建了含gB基因的HVT转移载体质粒(pHMDVgB)。将pHMDVgB与LacZ-rHVT DNA重组,通过病毒蚀斑的颜色筛选,获得了含MDVgB基因的重组HVT(MDVgB-rHVT)。采用PCR扩增及Dot blot杂交检测证实MDV的gB基因已插入到HVT基因组中。

影响鸡马立克氏病HVT活疫苗蚀斑测定因素

在鸡马立克氏病 HVT活疫苗蚀斑测定中 ,通过对不同的稀释液、吸附条件、维持液残留量、培养液存放时间及计数时机等进行蚀斑计数的比较试验 ,分析了影响蚀斑测定的因素 。

鸡马立克氏病疫苗免疫增强剂的研究 Ⅰ、免疫增强剂对火鸡疱疹病毒(HVT)疫苗蚀斑保护试验

将自行研制的免疫增强剂与鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(HVT,Fc—126株)活疫苗联合使用。结果表明该免疫增强剂能显著提高HVT疫苗的保护率和HVT苗的活力,同时能提高机体T、B淋巴细胞免疫功能。联合使用的结果,经实践证明能更有效地控制鸡马立克氏病的发生。

表达H9亚型禽流感病毒血凝素的重组HVT活疫苗免疫效力评价

为在SPF鸡和商品蛋鸡上评价一株表达H9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素基因的重组HVT(r HVT-H9)活疫苗的免疫保护效力,试验将1日龄SPF鸡分为r HVT-H9疫苗组、灭活疫苗组和空白对照组,共3组(n=60,每组20只);1日龄商品蛋鸡除上述三组外另增加r HVT-H9疫苗与禽流感灭活疫苗(H9亚型,F株)联合免疫组,共4组(n=80,每组20只)。免疫后,通过血凝抑制试验检测血清中针对H9亚型AIV的抗体效价;并于免疫后28 d,将全部试验组及空白对照组以H9亚型AIV F株进行静脉注射攻毒。攻毒后第3、5天分别采集喉头、泄殖腔棉拭子检测排毒情况;并于攻毒后第10天将全部试验鸡进行剖检。结果显示:SPF鸡r HVT-H9疫苗组能达到100%免疫保护,而灭活疫苗组仅能达到80%保护;商品蛋鸡r HVT-H9疫苗组保护率为40%,灭活疫苗组保护率为70%,但联合免疫组能达到100%的免疫保护。因此,该重组病毒r HVT-H9疫苗可作为H9亚型禽流感的有效疫苗候选株,与现有商品化禽流感H9亚型灭活疫苗联合使用,效果更佳,为其防控提供一定的技术支持。

HVT疫苗中加入药物造成的免疫失败

用鸡马立克氏病ＨＶＴ疫苗预防该病的发生，已取得了明显效果。但近几年常有免疫失败的发生。其中在稀释ＨＶＴ疫苗的同时，根据“外地经验”或“资料”加入某些抗生素或抗菌药物，是造成免疫失败的原因之一。调查的两个孵化厂，其中一个孵化厂按每１０００羽份进口ＨＶＴ疫苗的专用稀释液２００ｍｌ中，加入每支含４万单位的庆大霉素１０支，然后按羽份免疫了２５００只雏鸡，将此种免疫的雏鸡分养于两个专业户，结果从２月龄开始陆续发生马立克氏病并死亡，４月龄时死淘率达３０％，５月龄时死淘率达５０％，并仍陆续发病死亡，最终被迫全部淘汰。另一孵化厂则在每１０００羽份ＨＶＴ疫苗稀释液中加入２．５％。恩诺沙星溶液１０ｍｌ，共免疫注射２０００羽雏鸡，分养于２个专业户，饲养至４月龄时陆续出现马立克氏病及死亡，至５月龄时死淘率已达４２％及５１％，最后仍被迫将鸡全部淘汰，这两个孵化厂在与上述同批孵出或同期孵出的雏鸡，在所使用的ＨＶＴ疫苗中未加入上述两种药物者，则未出现马立克氏病。认为使用ＨＶＴ疫苗时，应按规定使用专配的稀释液，不应添加其它任何药物，以免造成免疫失败。

鸡马立克火鸡疱疹病毒(Fc-126株)的标准化研究 VI.HVT克隆株的稳定性、保存期测定及田间试验效果

对ＨＶＴ克隆株进行了稳定性测定，结果表明克隆株稀释后室温存放１小时，病毒滴度损失不超过３０％，符合有关规定。在－７０℃和－２０℃下保存，克隆株保存期分别至少可达到３年和２．５年。用克隆株试制的３批产品在野外使用效果良好，无任何不良反应。

雏鸡HVT疫苗免疫后SOD活性的变化

雏鸡ＨＶＴ疫苗免疫后ＳＯＤ活性的变化＊迟玉杰李庆章（东北农业大学动物医学系，哈尔滨１５００３０）于洪祥（哈尔滨原种鸡场）在马立克氏病（ＭＤ）及其疫苗免疫的国内外研究中，马立克氏病病毒（ＭＤＶ）的分子生物学及病原诊断、疫苗研制及应用、ＭＤ病理等方面已取...

鸡马立克氏病CV1988/Rispens冷冻活疫苗和HVT冻干苗效力比较试验

给带有不同血清型 (Ⅰ型、Ⅲ型 )母源抗体的两组雏鸡分别免疫不同血清型的鸡马立克氏病疫苗 :火鸡疱疹病毒冻干疫苗 (HVT、Ⅲ型 )和鸡的细胞结合性疱疹病毒冷冻疫苗 (CV1988/Rispens株、Ⅰ型 )。用CV1988免疫的两组雏鸡保护指数均高于HVT免疫的两组雏鸡的保护指数。

HVT疫苗中REV污染的来源及危害

禽网状内皮组织增生病毒（REV）属于反转录病毒属。此病毒主要感染火鸡、鹅、鸡、鹤鹑和鸭等禽类并引起以淋巴一网状细胞增生为特征的肿瘤性病理综合征。禽网状内皮组织增生病与鸡马立克氏病（MD）和鸡淋巴细胞白血病（AL）均是禽病毒性肿瘤性疾病，且都可以引起严重的免疫抑制。目前，因为REV等免疫抑制性疾病所造成的直接或由于疫苗带毒所造成的间接损失已日益成为影响养禽生产和养殖效益的严重因素。

MD疫苗免疫增强剂对HVT雏鸡免疫活性细胞的影响

用鸡马立克氏病疫苗免疫增强剂与马立克氏病火鸡疱疹病毒苗 (HVT)同时免疫雏鸡 ,然后观察免疫器官中免疫活性细胞 (ANAE+T淋巴细胞 ,PMG+浆细胞 )的变化情况 ,结果显示 :1日龄雏鸡HVT免疫后 ,加MD免疫增强剂雏鸡免疫器官中的T淋巴细胞和浆细胞数同相应不加增强剂的雏鸡相比呈现明显的增多 ,尤其是在第 7天和 1

左旋咪唑对HVT免疫雏鸡免疫器官中T细胞数量影响的观察

观察了左旋咪唑对 HVT免疫雏鸡免疫器官中 T细胞数量的影响 ,结果表明 :雏鸡在 1日龄接种火鸡疱疹病毒 (HVT)冻干苗后 ,同时连续 4 d应用 15 mg/ kg左旋咪唑组和空白对照组相比 ,免疫后 7、14、2 1、2 8d,胸腺、法氏囊和脾脏等免疫器官的不同区域中 T淋巴细胞的数量均呈现不同程度的增多 ,并在大部分时间内差异显著 (P<0 .0 5 )