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安徽省马鞍山市蜱携5种病原体的检测研究
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作者 杨国栋 杨锟 +10 位作者 江良梁 吴铭 洪颖 项可霞 何佳 龚磊 宋丹丹 包名家 李兴洲 秦天 王艳华 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期308-314,共7页
目的了解安徽省马鞍山市蜱携5种重要病原体的感染情况,并分析其与我国既往检出病原体的亲缘关系。方法在马鞍山市周边13个村庄采蜱642只,采用形态学和线粒体COI基因鉴定蜱种。对于土拉弗朗西斯菌检测16S rRNA,巴尔通体检测ssrA,立克次... 目的了解安徽省马鞍山市蜱携5种重要病原体的感染情况,并分析其与我国既往检出病原体的亲缘关系。方法在马鞍山市周边13个村庄采蜱642只,采用形态学和线粒体COI基因鉴定蜱种。对于土拉弗朗西斯菌检测16S rRNA,巴尔通体检测ssrA,立克次体检测16S rRNA、ompA和ompB,无形体检测16S rRNA和gltA,柯克斯体检测groEL和rpoB。在公共数据平台选取有代表性的序列,与本研究测序获得的基因序列比对,采用MEGA11.0构建系统进化树。结果在640只长角血蜱中共有36只蜱检出立克次体,其中20只蜱中检出黑龙江立克次体,16只蜱中检出敬信立克次体,2只蜱中检出牛无形体,186只蜱中检出柯克斯体样内共生体。本研究检出的黑龙江立克次体HY2和安徽省B8菌株聚在一个分支,敬信立克次体QL3和山西、江苏的聚在一个分支,而牛无形体JX4和山西省的聚在一个分支。经分析,还有17只蜱存在合并感染。5种病原体在2只龟形花蜱中均没有检测到。结论本研究首次在安徽省长角血蜱中检出敬信立克次体。对于斑点热立克次体和牛无形体,建议当地卫生部门做好相应的防控措施。 展开更多
关键词 立克次体 无形体 柯克斯体 长角血蜱 安徽省 系统进化分析
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长角血蜱嗅觉相关分子NPC2基因的克隆与初步鉴定
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作者 宋亚萍 旷策嫣 +4 位作者 曹杰 周勇志 张厚双 武军元 周金林 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第4期153-160,共8页
NPC2蛋白是一种小分子的溶酶体蛋白,具有水溶性。在脊椎动物中,NPC2蛋白与胆固醇和脂质的结合和运输有关;在节肢动物中参与多种信息化学物质的结合和识别。为了进一步探究蜱体内NPC2蛋白的分子特性,本研究以长角血蜱为研究对象,对HL-NPC... NPC2蛋白是一种小分子的溶酶体蛋白,具有水溶性。在脊椎动物中,NPC2蛋白与胆固醇和脂质的结合和运输有关;在节肢动物中参与多种信息化学物质的结合和识别。为了进一步探究蜱体内NPC2蛋白的分子特性,本研究以长角血蜱为研究对象,对HL-NPC2基因进行了克隆和序列分析,构建了原核表达载体,表达后制备出鼠源多克隆抗体,同时利用实时荧光定量qPCR技术对NPC2在蜱的不同生长阶段及不同组织进行分析,后续做了嗅觉相关性试验。结果显示:HL-NPC2蛋白的ORF为468 bp,编码155个氨基酸;NPC2蛋白在长角血蜱体内以多聚体形式存在,在长角血蜱各个生长阶段和不同吸血阶段的各个组织中都有表达;嗅觉相关性试验表明NPC2蛋白可能与长角血蜱嗅觉相关。本次研究可为该蛋白的后续研究及新的基于嗅觉的蜱控制策略的设计提供理论基础。 展开更多
关键词 长角血蜱 NPC2 克隆 鉴定
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Viromes of Haemaphysalis longicornis reveal different viral abundance and diversity in free and engorged ticks 被引量:1
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作者 Jian Xiao Xuan Yao +13 位作者 Xuhua Guan Jinfeng Xiong Yaohui Fang Jingyuan Zhang You Zhang Abulimiti Moming Zhengyuan Su Jiayin Jin Yingying Ge Jun Wang Zhaojun Fan Shuang Tang Shu Shen Fei Deng 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2024年第2期194-204,共11页
Haemaphysalis longicornis ticks,commonly found in East Asia,can transmit various pathogenic viruses,includingthe severe fever with thrombocytopenia syndrome virus(SFTSV)that has caused febrile diseases among humansin ... Haemaphysalis longicornis ticks,commonly found in East Asia,can transmit various pathogenic viruses,includingthe severe fever with thrombocytopenia syndrome virus(SFTSV)that has caused febrile diseases among humansin Hubei Province.However,understanding of the viromes of H.longicornis was limited,and the prevalence ofviruses among H.longicornis ticks in Hubei was not well clarified.This study investigates the viromes of bothengorged(fed)and free(unfed)H.longicornis ticks across three mountainous regions in Hubei Province from 2019to 2020.RNA-sequencing analysis identified viral sequences that were related to 39 reference viruses belonging tounclassified viruses and seven RNA viral families,namely Chuviridae,Nairoviridae,Orthomyxoviridae,Parvoviridae,Phenuiviridae,Rhabdoviridae,and Totiviridae.Viral abundance and diversity in these ticks were analysed,andphylogenetic characteristics of the Henan tick virus(HNTV),Dabieshan tick virus(DBSTV),Okutama tick virus(OKTV),and Jingmen tick virus(JMTV)were elucidated based on their full genomic sequences.Prevalenceanalysis demonstrated that DBSTV was the most common virus found in individual H.longicornis ticks(12.59%),followed by HNTV(0.35%),whereas JMTV and OKTV were not detected.These results improve our understanding of H.longicornis tick viromes in central China and highlight the role of tick feeding status and geographyin shaping the viral community.The findings of new viral strains and their potential impact on public health raisethe need to strengthen surveillance efforts for comprehensively assessing their spillover potentials. 展开更多
关键词 TICKS Virome haemaphysalis longicornis Phylogenetic analysis Viral abundance and diversity
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青海血蜱Haemalin基因的克隆、生物信息学及转录水平分析
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作者 何永彩 李增魁 +11 位作者 陈炳华 张连生 李中余 何顺福 陈继勇 耿鹏程 胡晓宇 蒋硕 陈强 徐璐瑶 康明 李英 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期700-708,共9页
为构建青海血蜱Haemalin基因的cDNA全长序列,并分析该基因的生物信息学特征及其在青海血蜱不同发育阶段和雌蜱不同组织中的转录水平,本研究基于青海血蜱唾液腺转录组文库中检索到的一个功能注释为Haemalin的基因片段,采用cDNA末端快速... 为构建青海血蜱Haemalin基因的cDNA全长序列,并分析该基因的生物信息学特征及其在青海血蜱不同发育阶段和雌蜱不同组织中的转录水平,本研究基于青海血蜱唾液腺转录组文库中检索到的一个功能注释为Haemalin的基因片段,采用cDNA末端快速扩增技术(RACE)引物设计软件设计Haemalin基因3'RACE和5'RACE特异性引物,分别经RACE扩增青海血蜱Haemalin基因的3'端和5'端序列,测序后与其中间序列拼接获得该基因的cDNA全长序列。利用生物信息学软件分析该基因编码蛋白的信号肽、理化性质、跨膜结构域、结构域、蛋白质三级结构、B细胞抗原表位以及氨基酸序列比对,采用NCBI中的BLAST及MEGA 7.0软件分别分析Haemalin基因编码氨基酸序列的相似性及构建其系统进化树,采用qPCR检测Haemalin基因在不同发育阶段青海血蜱和雌蜱不同组织中的转录水平。结果显示,青海血蜱Haemalin基因cDNA全长583 bp,开放阅读框(ORF)423 bp,该基因编码蛋白的信号肽为N端的15个氨基酸,理论等电点4.71,属于亲水性蛋白,无跨膜结构域。该基因编码蛋白的三级结构分析结果显示,其存在两个典型的Kunitz/牛胰蛋白酶抑制剂(Kunitz/BPTI)结构域,两个结构域之间由单链连接,共包括3个α螺旋,2对反向平行的β折叠;在aa35~aa45、aa54~aa60、aa75~aa80、aa91~aa93、aa125~aa131等处可能存在潜在的B细胞抗原表位。相似性与进化树结果显示,青海血蜱Haemalin氨基酸序列与褐黄血蜱凝血酶抑制剂Haemalin氨基酸序列的相似最高达92%,并在进化树中二者处于同一进化分支。表明,青海血蜱Haemalin可能也为一种凝血酶抑制剂。qPCR结果显示,Haemalin基因在不同发育阶段青海血蜱中的转录水平为:卵>半饱血蜱>若蜱>饱血蜱>幼蜱>吸血96 h的雌成蜱>游离雌成蜱,且其在青海血蜱雌蜱中肠中的转录水平极显著高于其他组织(P<0.0001)。表明,Haemalin基因在青海血蜱成蜱吸血阶段及其在该蜱的血液消化中均发挥重要作用。本研究为进一步研究Haemalin基因的生物学功能及其在青海血蜱防控中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 青海血蜱 Haemalin基因 克隆 生物信息学 转录水平
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陕西部分地区长角血蜱的鉴定及其基因多态性 被引量:1
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作者 张琳 贺真 +5 位作者 陆振华 韩婧 周琦 李瑞山 孙世伟 邵中军 《动物医学进展》 北大核心 2024年第5期1-7,共7页
为比较陕西省渭南市和商洛市长角血蜱的核糖体基因差异,探讨长角血蜱的分子鉴定方法,先通过体式显微镜观察蜱的形态结构进行形态学鉴定确认。再对长角血蜱的18S、ITS1、5.8S、ITS2和28S核糖体序列进行测定,比对与边缘革蜱等常见蜱种的... 为比较陕西省渭南市和商洛市长角血蜱的核糖体基因差异,探讨长角血蜱的分子鉴定方法,先通过体式显微镜观察蜱的形态结构进行形态学鉴定确认。再对长角血蜱的18S、ITS1、5.8S、ITS2和28S核糖体序列进行测定,比对与边缘革蜱等常见蜱种的基因的同源性并构建系统发育树,分析基因多态性,筛选有效标记。结果显示,核糖体5.8S序列不能区分不同种属的蜱虫,18S、28S、ITS1和ITS2序列可区分不同种属的蜱虫。虽然ITS1和ITS2多态性高于18S,但是18S不仅可以将国内和国外长角血蜱区分开,还可以区分国内不同地域的长角血蜱。18S序列区分不同长角血蜱地域株能力最强,可作为长角血蜱分子鉴定的有效标记。 展开更多
关键词 长角血蜱 核糖体基因 系统发育 基因多态性
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刻点血蜱成蜱中肠菌群结构的分析
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作者 刘龙江 刘潇雨 +2 位作者 程天印 段德勇 吴平顺 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第4期54-60,共7页
旨在探明雌、雄刻点血蜱中肠菌群结构特征及其差异。从新疆沙湾市绵羊体表采集刻点血蜱雌、雄蜱,无菌条件下收集雌、雄蜱中肠内容物,提取各样本细菌总DNA,PCR扩增细菌16S rDNA V3-V4区,运用Illiumina NovaSeq高通量双末端测序,对数据进... 旨在探明雌、雄刻点血蜱中肠菌群结构特征及其差异。从新疆沙湾市绵羊体表采集刻点血蜱雌、雄蜱,无菌条件下收集雌、雄蜱中肠内容物,提取各样本细菌总DNA,PCR扩增细菌16S rDNA V3-V4区,运用Illiumina NovaSeq高通量双末端测序,对数据进行拼接和过滤,扩增子序列变异(ASVs)降噪与物种注释后,对比分析雌、雄蜱中肠菌群结构的组成及差异。结果:雌蜱中肠菌群多样性高于雄蜱;在门水平上,变形菌门、厚壁菌门、异常球菌门、拟杆菌门、放线菌门在雌、雄蜱中肠内相对丰度较高,其中变形菌门相对丰度最高,为2个样本的优势菌门,且变形菌门在雄蜱中肠内的含量大于雌蜱;在属水平上,Schlegelella、不动杆菌属、拟杆菌属、乳杆菌属、短波单胞菌属、罗姆布茨菌属等在雌、雄蜱中肠内的相对丰度较高,其中Schlegelella的丰度最高,且在雌蜱(41.7%)中的含量高于雄蜱(0.8%);注释到种水平且2个样本共有的菌种包括:西尔瓦诺斯亚栖热菌、鲍曼不动杆菌、柯克斯氏体共生菌、肠乳杆菌、长双歧杆菌、巴氏杆菌拟杆菌等。本研究表明,刻点血蜱雌、雄蜱中肠菌群结构较为相似,但各细菌在不同分类级别上的相对丰度差异较大,这可能与雌、雄蜱吸血及生理特性不同有关。 展开更多
关键词 刻点血蜱 雌蜱 雄蜱 中肠 菌群结构
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3种褐黄血蜱基因组DNA提取方法的比较
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作者 焦雪丽 张鑫 +1 位作者 杨惠 苏婧 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2024年第4期354-358,共5页
目的在保持褐黄血蜱Haemaphysalis flava寄生蜱虫体形态完整的前提下,综合比较95℃水浴法、改良碱裂解法、离心柱法3种提取方法对蜱组织DNA提取质量的差异,筛选适用于蜱鉴定分型的高效稳定基因组DNA提取方法。方法取蜱标本的一只足作为... 目的在保持褐黄血蜱Haemaphysalis flava寄生蜱虫体形态完整的前提下,综合比较95℃水浴法、改良碱裂解法、离心柱法3种提取方法对蜱组织DNA提取质量的差异,筛选适用于蜱鉴定分型的高效稳定基因组DNA提取方法。方法取蜱标本的一只足作为实验样本,通过95℃水浴法、改良碱裂解法和离心柱法分别提取样品中基因组DNA,检测提取物浓度以及A260/A280和A260/A230比值,并通过PCR技术检测蜱分型相关基因16S rDNA(16S ribosoma DNA,16S核糖DNA)、ITS2(internal transcribed spacer 2,内转录间隔区2)的片段扩增效率,综合分析3种提取方法的优劣。多组之间使用单因素方差分析(ANOVA检验),两组之间比较采用t检验分析。P<0.05为差异有统计学意义。结果3种提取方法均可获得足量的蜱基因组DNA,改良碱裂解法提取效率显著高于其他2种方法(P<0.05),A260/A280和A260/A230比值结果表明离心柱提取法获得的DNA纯度更高,进一步的PCR实验表明,在模板量一致的情况下,以离心柱法提取的DNA为模板扩增产生的16S rDNA、ITS2片段扩增效率更高,而以95℃水浴法提取的DNA为模板扩增产生的16S rDNA、ITS2片段效率较低。结论离心柱法是提取蜱基因组DNA高效且实用的方法,能够在保持虫体形态完整的情况下满足对寄生蜱进行后续基因分型实验的要求。 展开更多
关键词 褐黄血蜱 寄生蜱 基因组DNA 核酸提取 PCR
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越南血蜱(Haemaphysalisvietnamensis)的扫描电镜观察 被引量:1
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作者 丁熙成 殷佩云 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1996年第5期486-490,共5页
用扫描电镜对越南血蜱(Haemaphysalisvietnamensis)的成虫、若虫和幼虫进行了形态学观察。成虫、若虫、幼虫的哈氏器囊孔形似“逗点状”,与本属其他种的不同。若虫背部有1对环形感器(sensilums... 用扫描电镜对越南血蜱(Haemaphysalisvietnamensis)的成虫、若虫和幼虫进行了形态学观察。成虫、若虫、幼虫的哈氏器囊孔形似“逗点状”,与本属其他种的不同。若虫背部有1对环形感器(sensilumsagittiforme),侧部有2对环形感器;足Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ基节内外侧各有1个环形感器,足Ⅲ基节外侧有2个、内侧有1个环形感器。幼虫须肢第Ⅳ节基部偏向腹侧有1根粗而弯曲的感毛;虫体背面和侧面各有1对环形感器,腹面足各基节内外侧各有1个环形感器。 展开更多
关键词 越南血蜱 形态学 扫描电镜
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原核表达的褐黄血蜱唾液腺蛋白和铁蛋白1的免疫保护效果评价
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作者 陈玲 陈浩 +4 位作者 岳婵娟 马锐 范雪阳 刘颂蕊 杨光友 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期688-697,共10页
旨在获得褐黄血蜱重组蛋白(rHfFer1和rHfAV422)并评价其作为抗蜱疫苗的免疫保护效果。通过原核表达获得rHfFer1和rHfAV422,然后将22只新西兰兔随机分为3组(皂素对照组和两个免疫组),其中皂素对照组6只,两个免疫组各8只,所有兔均免疫两次... 旨在获得褐黄血蜱重组蛋白(rHfFer1和rHfAV422)并评价其作为抗蜱疫苗的免疫保护效果。通过原核表达获得rHfFer1和rHfAV422,然后将22只新西兰兔随机分为3组(皂素对照组和两个免疫组),其中皂素对照组6只,两个免疫组各8只,所有兔均免疫两次,首免14 d后同等剂量进行二免,二免后一周感染幼蜱,根据蜱的饱血率和蜕皮率为指标评估抗蜱效果。结果显示,rHfFer1和rHfAV422免疫组的饱血率和蜕皮率与对照组均存在显著差异(P<0.05),计算得出rHfFer1和rHfAV422的抗蜱效果分别为68.06%和50.00%。研究结果表明,rHfFer1和rHfAV422可以作为抗蜱疫苗研发的候选抗原。 展开更多
关键词 褐黄血蜱 铁蛋白1 Fer1 唾液腺蛋白 AV422 重组蛋白 抗蜱效果
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安徽省部分地区硬蜱蜱种鉴定及蜱携带无形体检测
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作者 赵雪 Lerato Khakhane +8 位作者 陆皖晴 吴鑫云 宋芳菲 新宇 张莹莹 邢晨 徐可瀚 何茂章 柳燕 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期302-307,共6页
目的了解安徽省部分地区硬蜱蜱种种类、蜱种分布及蜱虫携带无形体情况,为蜱传无形体防控提供参考依据。方法于2023年4月至8月,在安徽省金寨县、含山县、旌德县、巢湖市等地通过布旗法和从动物身上采集硬蜱共计630只。用体式显微镜进行... 目的了解安徽省部分地区硬蜱蜱种种类、蜱种分布及蜱虫携带无形体情况,为蜱传无形体防控提供参考依据。方法于2023年4月至8月,在安徽省金寨县、含山县、旌德县、巢湖市等地通过布旗法和从动物身上采集硬蜱共计630只。用体式显微镜进行形态学鉴定,设计蜱特异性引物进行蜱种分子生物学鉴定。设计无形体16S rRNA特异性引物用巢式PCR检测单只蜱虫无形体携带情况。利用MEGA11.0构建系统发育树并分析。结果安徽省金寨县微小扇头蜱占18.8%(18/96)、长角血蜱占81.2%(78/96),含山县、巢湖市均为长角血蜱,旌德县均为微小扇头蜱。长角血蜱携带无形体阳性率为30.9%(102/330),包括牛无形体1.8%(6/330)、嗜吞噬细胞无形体21.8%(72/330)和一种uncultured无形体7.3%(24/330),微小扇头蜱携带嗜吞噬细胞无形体13.6%(18/132)。牛无形体和未培养无形体在游离蜱检测出,在24.4%的寄生蜱和15.8%的游离蜱检测出嗜吞噬细胞无形体。结论安徽省调查县的蜱种包括长角血蜱和微小扇头蜱,长角血蜱和微小扇头蜱及其游离蜱和寄生蜱均携带无形体。 展开更多
关键词 蜱种鉴定 长角血蜱 微小扇头蜱 无形体 安徽省
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褐黄血蜱脂肪酸结合蛋白对褐黄血蜱卵及其原生质蛋白影响的研究
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作者 王兰兰 刘金宝 程天印 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期342-349,共8页
为了解蜱类脂肪酸结合蛋白(FABP)及其基因的结构和功能,本研究基于褐黄血蜱转录组文库中的Contig 879序列设计引物,采用cDNA末端快速扩增技术(RACE)扩增其两翼缺失部分,拼接后得到编码褐黄血蜱FABP (HfFABP)的全长cDNA序列;采用qPCR法... 为了解蜱类脂肪酸结合蛋白(FABP)及其基因的结构和功能,本研究基于褐黄血蜱转录组文库中的Contig 879序列设计引物,采用cDNA末端快速扩增技术(RACE)扩增其两翼缺失部分,拼接后得到编码褐黄血蜱FABP (HfFABP)的全长cDNA序列;采用qPCR法检测该基因在褐黄血蜱的不同发育阶段、不同组织器官中的转录水平;采用平行反应监测(PRM)法分析HfFABP dsRNA干扰对褐黄血蜱产卵和孵化,以及卵原生质蛋白的影响。结果显示,HfFABP的cDNA全长1 443 bp,ORF长396 bp,编码132个氨基酸的多肽。HfFABP基因在雌蜱中的转录水平高于幼蜱、若蜱和雄蜱;在蜱的卵巢、中肠和体壳中的转录水平高于其在唾液腺中的转录水平;吸血使HfFABP基因的转录水平升高。HfFABP dsRNA干扰使蜱产卵减少,其中约30%的卵大小不均、蜡质增多、塌瘪易裂;表观正常的卵孵化率降低,原生质中的FABP、卵黄蛋白原(Vitellogenin)、弹性蛋白酶抑制剂(Neutrophil elastase inhibitor)、天冬氨酸蛋白酶(Aspartic protease)和热休克蛋白83 (Heat shock protein 83)等12种蛋白的丰度大幅下降(P<0.01、P<0.05)。上述结果首次表明HfFABP在蜱卵发育过程中发挥重要作用,本研究为HfFABP在抑制雌蜱生殖中的应用提供科学依据。 展开更多
关键词 褐黄血蜱 脂肪酸结合蛋白(FABP) cDNA末端快速扩增技术(RACE) 平行反应监测(PRM)
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Acaricidal activity of synthesized titanium dioxide nanoparticles using Calotropis gigantea against Rhipicephalus microplus and Haemaphysalis bispinosa 被引量:2
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作者 Sampath Marimuthu Abdul Abdul Rahuman +10 位作者 Chidambaram Jayaseelan Arivarasan Vishnu Kirthi Thirunavukkarasu Santhoshkumar Kanayairam Velayutham Asokan Bagavan Chinnaperumal Kamaraj Gandhi Elango Moorthy Iyappan Chinnadurai Siva Loganathan Karthik Kokati Venkata Bhaskara Rao 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2013年第9期682-688,共7页
Objective:To assess the acaricidal activity of titanium dioxide nanoparticles(TiO_2 NPs)synthesized from flower aqueous extract of Calotropis gigantea(C.gigantea)against the larvae of Rhipicephalus(Boophilus)microplus... Objective:To assess the acaricidal activity of titanium dioxide nanoparticles(TiO_2 NPs)synthesized from flower aqueous extract of Calotropis gigantea(C.gigantea)against the larvae of Rhipicephalus(Boophilus)microplus[R.(B.)microplus]and the adult of Haemaphrysalis bispinosa(H.bispinosa).Methods:The lyophilized C.gigantea flower aqueous extract of 50 mg was added with 100 mL of TiO(OH_2)(10 mM)and magnetically stirred for 6 h.Synthesized TiO_2 NPs were characterized by X-ray diffraction(XRD).Fourier transform infrared spectroscopy(FTIR),Scanning electron microscopy(SEM),and Energy dispersive X-ray spectroscopy(EDX).The synthesised TiO_2 NPs were tested against the larvae of R(B.)microplus and adult of H.bispinosa were exposed to filter paper impregnated method.Results:XRD confirmed the crystalline nature of the nanoparticles with the mean size of 10.52 nm.The functional groups for synthesized TiO_2NPs were 1405.19,and 1053.45 cm^(-1)for-NH_2 bending,primary amines and amides and 1053.84and 1078.45 cm^(-1)for C-O.SEM micrographs of the synthesized TiO_2 NPs showed the aggregated and spherical in shape.The maximum efficacy was observed in the aqueous flower extract of C.gigantea and synthesized TiO_2 NPs against R.(B.)microplus(LC_(50)=24.63 and 5.43 mg/L and r^2=0.960 and 0.988)and against H.bispinosa(LC_(50)=35.22 and 9.15 mg/L and r^2=0.969 and 0.969).respectively.Conclusions:The synthesized TiO_2 NPs were highly stable and had significant acaricidal activity against the larvae of R.(B.)microplus and adult of H.bispinosa.This study provides the first report of synthesized TiO_2 NPs and possessed excellent anti-parasitic activity. 展开更多
关键词 Rhipicephalus(Boophilus) microplus haemaphysalis bispinosa Calotropis gigantean TITANIUM dioxide nanoparticles X-ray DIFFRACTION techniques Electron MICROSCOPIC study
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Construction of Larval cDNA Expression Library and Immunological Identification of Positive Clones in Tick Haemaphysalis qinghaiensis
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作者 ZHAO Hai-ping YIN Hong +8 位作者 LI Chun-yi GAO Jin-liang LI You-quan GUAN Gui-quan LIU Zhi-jie LIU Jun-long YANG Fu-he XING Xiu-mei LUO Jian-xun 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2010年第6期896-902,共7页
A primary cDNA expression library with a titer of 5.0 × 105 PFU mL-1 was constructed from mRNA extracted from larval Haemaphysalis qinghaiensis ticks in order to identify certain genes,which would then be used as... A primary cDNA expression library with a titer of 5.0 × 105 PFU mL-1 was constructed from mRNA extracted from larval Haemaphysalis qinghaiensis ticks in order to identify certain genes,which would then be used as candidate molecules for development of effective vaccines to control this parasite.Totally 11 positive clones,which designated as HqL01-11,were obtained by immunoscreening of the library using a polyclonal antibody generated in rabbit with larval tick protein extract.Results of sequence analysis from BLASTN searching revealed that 6 of them had no significant homology with the adult H.qinghaiensis ticks’ known genes,4 of them had no significant homology with all genes deposited in GenBank database.HqL07,HqL08,HqL09,and HqL11 were deposited to GenBank database,and accession numbers were EF605263,EF605264,EF605265,and EF605266,respectively.Subsequently,HqL07 and HqL09 were expressed in vitro and the molecular weights of the corresponding expressed products were 60 and 70 kDa,respectively.Western blot analyses showed that HqL07 and HqL09 had immunogenicity.This study laid the foundation for future production of genetically engineered vaccines for the immunological control of H.qinghaiensis. 展开更多
关键词 larval tick haemaphysalis qinghaiensis cDNA expression library IMMUNOSCREENING immunologicalidentification
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成都市山区蜱虫种类及分布调查 被引量:1
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作者 张伟 魏文娟 +3 位作者 邓良利 田汶佳 胡雅劼 刘朝发 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2023年第2期119-121,共3页
目的 了解成都市山区蜱虫种类及分布情况,为蜱虫及蜱媒传染病的防治提供依据。方法 采用布旗法调查游离蜱和人工拣拾法调查动物体表寄生蜱。结果 野外生境采集到游离蜱50只,平均密度为0.045只/100 m,其中长角血蜱平均密度为0.038只/100... 目的 了解成都市山区蜱虫种类及分布情况,为蜱虫及蜱媒传染病的防治提供依据。方法 采用布旗法调查游离蜱和人工拣拾法调查动物体表寄生蜱。结果 野外生境采集到游离蜱50只,平均密度为0.045只/100 m,其中长角血蜱平均密度为0.038只/100 m,血红扇头蜱平均密度为0.007只/100 m;调查1 158只动物,总带蜱率为2.94%,总带蜱指数为0.037。龙门山脉以大邑县捕获最多,共计捕获21只;龙泉山脉以龙泉驿区捕获最多,共计捕获52只。除3月外,5—9月均捕获到游离蜱和寄生蜱。结论 成都市龙门山脉和龙泉山脉均有蜱虫分布,长角血蜱是成都市的优势种,林地和羊群孳生较高。 展开更多
关键词 种类 分布 长角血蜱 血红扇头蜱
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褐黄血蜱HSP70-b2及其类14-Mer肽的作用研究 被引量:1
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作者 程天印 吴聪颖 +1 位作者 刘雨珂 段德勇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2570-2580,共11页
褐黄血蜱(Haemaphysalis flava,H.flava)热休克蛋白70-b2(heat shock protein 70-b2,HSP70-b2)属于HSP70家族。为评估褐黄血蜱HSP70-b2的抗凝血活性、免疫原性及其类14-Mer肽的作用,本研究通过RACE技术扩增褐黄血蜱HSP70-b 2基因全长;... 褐黄血蜱(Haemaphysalis flava,H.flava)热休克蛋白70-b2(heat shock protein 70-b2,HSP70-b2)属于HSP70家族。为评估褐黄血蜱HSP70-b2的抗凝血活性、免疫原性及其类14-Mer肽的作用,本研究通过RACE技术扩增褐黄血蜱HSP70-b 2基因全长;定点突变其编码类14-Mer肽段序列获得HSP70-b2^(M)基因全长;分别构建原核表达质粒,经原核表达、镍柱层析纯化获得可溶性重组蛋白,体外凝血四项试验评估rHSP70-b2与rHSP70-b2^(M)的抗凝血活性;将重组蛋白与弗氏(不)完全佐剂按推荐剂量乳化,皮下免疫Sprague Dawley(SD)大鼠,间接ELISA检测血清抗体效价,探究rHSP70-b2与rHSP70-b2^(M)的免疫原性。结果显示:HSP70-b 2基因全长2413 bp,开放阅读框长1905 bp,编码蛋白中具有HSP70蛋白家族标签。成功将HSP70-b 2中编码类14-Mer肽段的核酸序列突变为编码14-Mer肽段的核酸序列。与对照组相比,rHSP70-b2和rHSP70-b2^(M)对凝血酶原时间(prothrombin time,PT)和活化部分凝血酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)无显著作用(P>0.05),但均可延长凝血酶时间(thrombin time,TT)和纤维蛋白原(FIB)凝血时间(P<0.05),且rHSP70-b2^(M)与rHSP70-b2的抗血凝效果相近(P>0.05)。大鼠血清中抗体效价随免疫次数的增加而提升,且rHSP70-b2诱导产生的抗体水平极显著高于rHSP70-b2^(M)(P<0.01)。综上表明:rHSP70-b2和rHSP70-b2^(M)在体外可通过延长凝血酶时间和降低纤维蛋白原含量发挥抗凝血作用;rHSP70-b2和rHSP70-b2^(M)均具有良好的免疫原性,可诱发体液免疫。 展开更多
关键词 褐黄血蜱 HSP70-b2 定点突变 原核表达 抗凝活性 免疫原性
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Identification of tick-borne pathogens using metagenomic analyses in H.longicornis feeding on humans in downtown Beijing
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作者 Jizhou Lv Huiyu Wang +7 位作者 Xueqing Han Lin Mei Xiangfen Yuan Yufang Kong Junhua Deng Zhen F.Fu Shaoqiang Wu Xiangmei Lin 《Animal Diseases》 2021年第3期173-181,共9页
On August 14th,2018,a Beijing resident living in Xicheng District found a female H.longicornis tick attached to the skin at the front of his upper shin.On examination,the patient was afebrile and appeared well.The spe... On August 14th,2018,a Beijing resident living in Xicheng District found a female H.longicornis tick attached to the skin at the front of his upper shin.On examination,the patient was afebrile and appeared well.The species of the tick was identified through morphological characteristics and phylogenetic analysis based on cytochrome C oxidase subunit I.This H.longicornis tick was screened for tick-borne pathogens such as viruses,bacteria and parasites.RNA pathogens were screened by PCR and sequencing,while DNA pathogens were screened by metagenomic analyses.It was found that the tick was positive for the DNA sequences of zoonotic and animal pathogens such as A phagocytophilum,Ehrlichia minasensis and C.burnetii.Considering the good health condition of the patient,we hypothesized that the pathogens originated from the tick specimen itself rather than host blood meal.For the first time,our study reveals the possible risk of transmission of tick-borne pathogens to human beings through tick bit in downtown Beijing.Further research is needed to screen for tick-borne pathogens among unfed ticks collected from central Beijing. 展开更多
关键词 Tick-borne pathogens Metagenomic analyses H.longicornis Downtown Beijing
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合肥市蜱系统发育分析及安徽省一蜱种新纪录 被引量:2
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作者 汪敏 侯银续 +5 位作者 章乐生 汪峰峰 马晓荷 宋丹丹 操治国 汪天平 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2023年第4期320-323,共4页
目的了解安徽省合肥市蜱类系统发育情况,并对安徽省一新纪录种进行描述。方法选取合肥市长丰县、蜀山区、肥西县作为采样点,采集蜱样进行形态学鉴定后,选取部分样本,用PCR方法扩增线粒体核糖体核糖核酸大亚基(16S rRNA)和细胞色素C氧化... 目的了解安徽省合肥市蜱类系统发育情况,并对安徽省一新纪录种进行描述。方法选取合肥市长丰县、蜀山区、肥西县作为采样点,采集蜱样进行形态学鉴定后,选取部分样本,用PCR方法扩增线粒体核糖体核糖核酸大亚基(16S rRNA)和细胞色素C氧化酶I(COI)基因,测序后进行相似性及系统发育分析,并对发现的安徽省硬蜱科一新纪录种进行鉴定。结果长丰县、蜀山区、肥西县3个采样点共采集到18只蜱样,其中长丰县1只,蜀山区11只,肥西县6只。形态学鉴定为褐黄血蜱12只,长角血蜱5只,豪猪血蜱1只。16S rRNA和COI基因序列与Genbank上下载的序列比对显示,本次所获得长角血蜱、褐黄血蜱、豪猪血蜱分别聚于不同分支,长角血蜱与豪猪血蜱亲缘关系较近,与褐黄血蜱亲缘关系较远。采集到的豪猪血蜱为安徽新纪录种。结论初步了解了合肥市蜱类构成,安徽省蜱类新增纪录种为豪猪血蜱。 展开更多
关键词 系统发育 硬蜱科 新纪录种 豪猪血蜱
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2019—2021年扬州市蜱虫监测分析 被引量:2
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作者 田婧棽 许飞 +1 位作者 王晶 罗直智 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2023年第1期37-39,共3页
目的了解扬州市蜱虫种类及分布特点,为防治工作提供依据。方法采用人工布旗法和体表捡蜱法对不同生境和动物体表的蜱虫进行采集。结果2019—2021年扬州市共采集游离蜱450只,属3种,分别为硬蜱科血蜱属的长角血蜱、褐黄血蜱和稚鸡血蜱,优... 目的了解扬州市蜱虫种类及分布特点,为防治工作提供依据。方法采用人工布旗法和体表捡蜱法对不同生境和动物体表的蜱虫进行采集。结果2019—2021年扬州市共采集游离蜱450只,属3种,分别为硬蜱科血蜱属的长角血蜱、褐黄血蜱和稚鸡血蜱,优势种群为长角血蜱(431只,占95.78%)。农村外环境密度要高于景区。检查宿主动物389只,有28只带蜱,带蜱率为7.20%。结论扬州市农村外环境和景区生境以及宿主动物体表均有蜱虫孳生,长角血蜱是扬州市的优势种群。 展开更多
关键词 蜱虫 种类 分布 长角血蜱
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利用QIAxcel Connect全自动DNA/RNA分析系统鉴定豪猪血蜱和长角血蜱
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作者 郑卫青 胡海军 +2 位作者 田俊华 梁书剑 王煜煜 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2023年第1期18-24,共7页
豪猪血蜱和长角血蜱携带病原体种类不同,准确对其鉴定是防控相关蜱媒传染病的基础。传统的形态学鉴定需要研究者具有较高的专业水平,且鉴定结果受标本的发育阶段和完整性等因素影响。针对分子标记的PCR扩增和产物测序,能准确鉴定蜱种,... 豪猪血蜱和长角血蜱携带病原体种类不同,准确对其鉴定是防控相关蜱媒传染病的基础。传统的形态学鉴定需要研究者具有较高的专业水平,且鉴定结果受标本的发育阶段和完整性等因素影响。针对分子标记的PCR扩增和产物测序,能准确鉴定蜱种,但耗时费力。本研究将扩增后的豪猪血蜱和长角血蜱的16S rRNA基因片段,经毛细管凝胶电泳后,两者扩增产物在胶图上出现单一且明显的分离条带,其中长角血蜱基因片段大于豪猪血蜱。两个蜱种的目的基因测序结果显示,长角血蜱455 bp,豪猪血蜱453 bp。将豪猪血蜱和长角血蜱的16S rRNA基因片段扩增产物等量混合,并将两者混合物设为鉴定Size Marker,对长角血蜱16S rRNA基因片段赋值455 bp,对豪猪血蜱的赋值453 bp。经毛细管凝胶电泳分析,豪猪血蜱和长角血蜱分子量被准确测定,且基因条带明显分离。结果表明,采用16S rRNA的PCR扩增和产物毛细管电泳相结合的方法,在产物不测序的情况下,可快速、准确鉴定形态相近的豪猪血蜱和长角血蜱,此外,该法亦可推广到其他2个及以上形态难以鉴定物种的区分。 展开更多
关键词 毛细管凝胶电泳 物种鉴定 豪猪血蜱 长角血蜱
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不同地区褐黄血蜱的单倍型多态性、遗传分化和种系发育关系分析
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作者 李中波 侯强红 +1 位作者 舒鸣 程天印 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第9期60-66,共7页
为了探究不同地区褐黄血蜱的单倍型多态性、遗传分化和种系发育关系,本试验以采自于湖南、河南两省的褐黄血蜱(各10只,共20只)为研究对象,通过PCR扩增其细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(cox1)和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚基Ⅳ(nad4)基... 为了探究不同地区褐黄血蜱的单倍型多态性、遗传分化和种系发育关系,本试验以采自于湖南、河南两省的褐黄血蜱(各10只,共20只)为研究对象,通过PCR扩增其细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(cox1)和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚基Ⅳ(nad4)基因序列,对其单倍型多态性(Hd)、遗传分化和种系发育关系进行分析。结果显示,cox 1基因序列(849 bp)包含4个变异位点,5个单倍型(h=5,A1~A5,Hd=0.653),其基因分化系数(Gst)=0.061,遗传分化系数(Fst)=-0.047,基因流(Nm)=-5.625;nad 4基因序列(626 bp)包含3个变异位点,3个单倍型(h=3,B1~B3,Hd=0.363),其Gst=0.004,Fst=0.074,Nm=3.125;cox 1+nad 4基因序列包含7个变异位点,7个单倍型(h=7,C1~C7,Hd=0.768),其Gst=-0.010,Fst=-0.015,Nm=-16.560;在所构建的种系发育树中,20只褐黄血蜱均处于种系发育树的一个分支。结果表明,湖南、河南两省的褐黄血蜱个体之间虽表现出单倍型多态性,但它们之间具有较近的亲缘关系,尚未出现遗传分化。 展开更多
关键词 褐黄血蜱 cox 1 nad 4 基因变异 单倍型多态性 遗传分化 种系发育关系
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