急性髓系白血病HGFA、Matriptase、HAI-1、HAI-2表达水平及临床意义

目的:探讨HGFA、Matriptase、HAI-1、HAI-2在急性髓系白血病患者中的表达水平及其临床意义。方法:收集91例急性髓系白血病初治患者、41例急性髓系白血病缓解患者和32例正常人的骨髓标本,利用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)法检测髓系白血病细胞HGFA、Matriptase、HAI-1、HAI-2 mRNA表达水平;比较上述基因在人急性髓系白血病患者初治组和缓解组以及健康对照组中的表达情况;分析其表达情况与其临床特征的相关性。结果:在AML初治组HGFA水平高于健康对照组(P=0.010);而HAI-2 mRNA水平则低于健康对照组(P=0.0158),但均与AML缓解组无统计学差异。HAI-1、Matriptase mRNA水平在各组中均无明显差异。在高白细胞组中HAI-2 mRNA表达较低(P=0.03902)。结论:HGF/c-Met信号系统在AML中的异常激活,有可能是其上游的调控因子HGFA表达增高和HAI-2表达降低的结果。

乳腺癌中KAI1、HAI-1的表达及临床病理意义

目的:探讨抗癌1号(KAI1)、肝细胞生长因子激活剂抑制因子-1(HAI-1)在乳腺癌中的表达及临床意义。方法:应用组织芯片技术及免疫组织化学S-P法,对108例乳腺浸润性导管癌进行KAI1、HAI-1的检测。结果:乳腺癌KAI1的阳性表达率为44.44%(48/108),KAI1的表达与腋窝淋巴结转移及肿瘤组织的病理分级、临床分期有关(P<0.05)。乳腺癌中HAI-1的阳性表达率为91.67%(99/108)。HAI1的表达与腋窝淋巴结转移及病人绝经有关(P<0.05)。结论:KAI1低表达、HAI-1高表达提示肿瘤的高转移潜能。

HAI-1过表达对SW620细胞体外生长和运动能力的影响

肝细胞生长因子激活因子抑制因子1(hepatocyte growth factor activator inhibitor type 1, HAI-1)能有效抑制肝细胞生长因子激活因子(hepatocyte growth factor activator,HGFA)和丝氨酸蛋白酶Matriptase的活性,并可通过对HGFA和Matriptase活性的调控参与HGF/c-Met信号传导途径。为了解HAL-1在肿瘤细胞的生长和运动中的作用,本研究将人HAI-1基因全长cDNA克隆至pcDNA3.1(+)表达载体,并转染人肠癌SW620细胞,用Western blot验证了转染细胞中HAI-1的表达情况,并分别利用生长曲线、软琼脂集落形成、穿膜运动和扩散运动测定等方法检测了HAI-1 过表达对SW620细胞生长和运动能力的影响。生长曲线和软琼脂集落形成测定都显示出HAI-1 转染细胞与对照组相比差异不十分明显。穿膜运动和扩散运动测定则均显示了HAI-1过表达对细胞运动能力有明显的抑制。因此,HAI-1的过表达虽然在体外对肿瘤细胞生长影响较小,但可以抑制肿瘤细胞的运动迁移能力。

妊娠早期绒毛组织HAI-1的表达

目的研究肝细胞生长因子激活物抑制因子-1（hepatocyte growth factor activator inhibitor-1，HAI-1）在胚胎着床后绒毛组织中的动态表达，探讨其对胚胎早期发育的调控作用。方法取妊娠第6～10周正常人工流产绒毛组织50例，各孕周各10例。采用RT-PCR和免疫组织化学法检测绒毛组织HAI-1的表达。结果RT-PCR测得HAI-1 mRNA在各组绒毛组织中均有表达，且其表达量随妊娠周数增加而逐渐上调，在妊娠第6周HAI-1基因表达量极低（0．3142），随后表达量逐渐升高（第7周0．3476、第8周0．3910），至第9周达高峰（0．4876），且高峰持续至第10周（0．4909）。第9、10孕周组间HAI-1 mRNA表达值差异无统计学意义（P≥0．05），其余各孕周组HAI-1 mRNA表达值两两相比差异有统计学意义（P〈0．01），第10周与第9周分别同其余各孕周组间差异有统计学意义（P〈0．01）。免疫组织化学法显示HAI-1蛋白表达随妊娠周数增加呈递增趋势，与RT-PCR结果吻合。结论HAI-1基因可能参与了人胚胎早期发育。

HAI-1与子宫内膜癌侵袭转移的相关性研究

目的探讨HAI-1表达水平与子宫内膜癌细胞株侵袭迁移能力的相关性。方法体外培养人子宫内膜癌细胞株,采用Real-time q PCR技术检测HEC-1A、HEC-1B和RL952三株子宫子宫内膜癌细胞中HAI-1 m RNA表达水平,应用细胞划痕实验及穿膜小室实验,观察三株子宫内膜癌细胞体外的侵袭及迁移能力。结果 (1)HAI-1 m RNA在三株细胞中的相对表达量分别为(0.3042±0.0101)、(0.0032±0.0001)和(0.2580±0.0096),HAI-1蛋白在HEC-1A、HEC-1B和RL952中均呈阳性表达,但在HEC-1B中表达低于HEC-1A及RL952。(2)细胞划痕实验结果显示,HEC-1A、HEC-1B和RL952三组迁移距离分别为(173.30±7.33)μm、(437.00±8.72)μm和(135.30±6.89)μm。(3)侵袭实验结果显示,HEC-1A、HEC-1B和RL952三组穿膜细胞数分别为(52.67±2.73)、(117.30±3.48)和(62.00±3.06)。结论 HAI-1 m RNA表达水平与子宫内膜癌细胞侵袭迁移能力呈负相关。对HAI-1抑癌机制的进一步研究,将有望使HAI-1成为今后子宫内膜癌诊断及治疗中的新靶点。

1HAI-1,ST14在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的检测HAI-1mRNA和ST14mRNA在非小细胞肺癌组织与正常肺组织中的表达并分析其与临床病理的关系。方法应用原位杂交技术,积分光密度半定量,检测ST14mRNA和HAI-1mRNA在非小细胞肺癌及相应的正常肺组织中的表达。结果HAI-1mRNA和ST14mRNA在非小细胞肺癌组织中表达低于正常肺组织(P<0.05),在高分化癌组织表达高于低分化组织(P<0.05),在无淋巴结转移组表达高于有淋巴结转移组(P<0.05),与年龄,性别,癌组织类型无关(P>0.05)。结论在肿瘤进程中,HAI-1mRNA和ST14mRNA转录受抑制,两基因在肺癌中可能表现为抑癌基因。HAI-1mRNA和ST14mRNA与肺癌的分化程度有关,可能参与促进细胞分化成熟,并且其表达降低可能促进肿瘤的转移。

HAI-1和Matriptase在宫颈鳞癌中的表达及其意义

目的探讨肝细胞生长因子激活物抑制因子(HAI-1)及Matriptase在宫颈鳞癌(SCC)、宫颈上皮内瘤变(CIN)及正常宫颈上皮(NCE)中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测90例SCC、60例CIN、30例NCE中HAI-1及Matriptase蛋白的表达水平。结果 HAI-1在SCC中的表达阳性率均明显低于其他两组(P<0.05),Matriptase在SCC中的表达阳性率均明显高于其他两组(P<0.01);两者表达与宫颈癌临床期别、浸润深度、淋巴结转移、组织分化、肿瘤大小相关,与年龄无关;HAI-1和Matriptase两者表达均呈负相关,在NCE、CIN、SCC中相关系数分别为-0.775、-0.565、-0.455,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 HAl-l和Matriptase的异常表达在SCC的发生发展过程中可能具有重要作用,HAI-1联合Matriptase可作为判定SCC恶性程度及预后的新型生物学标记。

GST-HAI-1融合蛋白的表达及抗人HAI-1单克隆抗体的制备

制备抗人肝细胞生长因子激活物抑制因子 (HAI 1 )单克隆抗体 ,为对HAI 1进行进一步的研究打下基础。将人HAI 1cDNA分段克隆 ,构建GST HAI 1融合蛋白原核表达载体 ,转化大肠杆菌后加IPTG诱导融合蛋白表达 ,经制备型SDS PAGE法分离表达的GST HAI 1融合蛋白 ,通过割胶、电洗脱回收融合蛋白 ,并以此为抗原免疫BALB c小鼠 ,应用细胞融合技术制备产生抗人HAI 1单克隆抗体的杂交瘤 ,以ELISA、Westernblot和免疫组织化学染色进行鉴定。最终获得抗人HAI 1单克隆抗体杂交瘤细胞株ZMC6 ,产生的单克隆抗体可特异性地与表达的GST HAI 1融合蛋白反应 ,并可识别大肠组织中的膜型及脱落型HAI 1蛋白。该单克隆抗体的制备成功 ,为深入研究HAI

HAI-1蛋白在人正常及肿瘤组织中的表达研究

目的:肝细胞生长因子激活物抑制因子(Hepatocyte growth factor activator inhibitor 1,HAI-1)是一类细胞膜相关的Kunitz型丝氨酸蛋白酶的抑制因子,它可强效抑制多种丝氨酸蛋白酶的活性,包括:肝细胞生长因子的激活因子(HGFA)、matriptase,、hespsin、组织激肽释放酶和胰蛋白酶。其中,HGFA、matriptase和hepsin能激活作为酪氨酸激酶MET受体配体的肝细胞生长因子(HGF),研究显示HAI-1可能在肿瘤中发挥多方面的作用,因此检测HAI-1蛋白在人正常及肿瘤组织中的表达,分析与大肠癌临床病理的相关性,为进一步研究HAI-1在肿瘤的发生和发展中可能的作用及机制提供资料。方法:应用免疫组化方法,用抗HAI-1单克隆抗体检测HAI-1蛋白在人正常及肿瘤组织中的表达水平,并结合大肠癌患者的临床病理资料,统计分析HAI-1在大肠癌组织中的表达与其相关性。结果:HAI-1在各种上皮组织和/或相应的肿瘤组织中有不同程度表达,在38对大肠癌及其癌旁(正常)组织中大肠粘膜上皮和肿瘤组织表达较高,大肠腺体表达较低(P<0.001),HAI-1蛋白的表达水平与总共52例大肠癌的组织分化程度正相关(P<0.05),与大肠癌的分期及淋巴结转移无显著相关性。结论:HAI-1可能在正常上皮细胞分化以及大肠癌的分化中发挥重要的作用,并可能为上皮细胞分化成熟的一个标志。

HAI-1基因不同功能域的原核表达载体构建及融合蛋白表达

目的:分段克隆1型肝细胞生长因子激活剂抑制因子(HAI-1)基因的功能域并在大肠杆菌中表达,为进一步研究HAI-1的生物学功能打下基础。方法:针对HAI-1的不同功能域设计相应的5对引物,分别扩增KD1、KD1+LDLR、KD2、LDLR+KD2和KD1+LDLR+KD2片段。将PCR产物克隆至pGEM-TEasy载体中并经测序鉴定。将5个cDNA片段亚克隆至具有6个组氨酸标签(His-Tag)的原核表达载体pIVEX2.3-MCS中。以上述表达不同功能域的载体转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导融合蛋白的表达,表达产物以Westernblot进行鉴定,并进一步通过镍亲和层析柱纯化His-Tag标记的KD1+LDLR+KD2融合蛋白。结果:成功地构建了HAI-1各功能域基因片段的原核表达载体。Westernblot分析证实,在大肠杆菌BL21(DE3)中分段表达了5种HAI-1不同功能域的His-Tag融合蛋白,并通过亲和层析法纯化到了相对分子质量为22200的KD1+LDLR+KD2融合蛋白。结论:重组质粒pIVEX2.3-MCS/HAI-1能在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,纯化的融合蛋白可用于研究HAI-1不同功能域的生物学作用。

龙菁1号紫花苜蓿新品种的选育

试验为解决寒区优质紫花苜蓿种质资源匮乏的难题,以抗寒、高产为育种目标,2002年起对9个国内外紫花苜蓿品种经过混合单株选择法及四代田间表型混合选择,选育龙菁1号紫花苜蓿品种。结果显示:在品种比较试验中,龙菁1号紫花苜蓿的干草产量、越冬率和粗蛋白含量最高,分别为10920.2 kg/hm^(2)、95.2%、19.22%;在区域试验中,龙菁1号紫花苜蓿在吉林白城地区的干草产量(11866.18 kg/hm^(2))最高;在生产试验中,与龙牧803、WL323HQ相比,龙菁1号紫花苜蓿在杜蒙地区的干草产量(10088 kg/hm^(2))最高。研究表明,龙菁1号紫花苜蓿品种的耐寒性、干草产量、粗蛋白含量均优于龙牧803和WL323HQ,是适合东北寒区人工草地建植、退化草原改良、粮改饲和草田轮作的优质牧草。

海岛棉品系海1无腺体性状的遗传Ⅰ.等位性测验

本文研究了海岛棉无腺体突变体品系海1的遗传机制.等位性测验结果表明:(1)海1无腺体性状由位于Gl_2位点上的部分显性突变基因控制,暂定名为Gl^e_2;(2)海l携有有腺体基因Gl_3,Gl^e_2对Gl_3有上位性作用;(3)海1的基因型可表达为Gl^e_2Gl^e_2Gl_3Gl_3;(4)海1无腺体的遗传为核遗传,不受细胞质影响.本文还讨论了海1显性无腺体遗传在棉花育种上的应用意义.

弱凝胶调驱技术在海1块普通稠油油藏的应用

海1块为注水开发普通稠油油藏,目前已进入高含水、高采出程度阶段,长期水驱开发使储层非均质性加剧,油藏依靠常规注水技术难以大幅度提高采收率。针对上述开发矛盾,分析了弱凝胶调驱提高采收率技术的原理并开展了海1块普通稠油油藏弱凝胶调驱可行性研究,按照"封、调、驱、洗"一体化思路对调驱体系及注入参数进行优化设计:第一段前置段塞选择有机铬凝胶与体膨颗粒复配组成高强度复合凝胶体系对高渗透层及大孔道进行封堵,注入量0.01 PV;第二段主段塞选择中等强度有机铬弱凝胶体系用于调整纵向吸水剖面,同时改善平面油水流度比,扩大波及体积,注入量0.14 PV;第三段驱油段塞选择一定浓度的驱油剂用于降低油水界面张力,进一步提高驱油效率,注入量0.05 PV。室内物理模拟及先导试验结果表明,三段塞调驱体系能有效封堵大孔道,改善平面油水流度比,提高水驱波及体积,大幅度改善海1块水驱后期开发效果,对同类油藏具有一定借鉴意义。

海1块表面活性剂/碱复配体系提高采收率研究

海1块为一注水开发20年的普通稠油油藏,长期水驱开发使储层非均质性加剧,层内、层间、平面矛盾非常突出.2010年以来,通过引进弱凝胶调驱技术,油藏三大矛盾得到缓解,水驱波及系数大幅提高,开发效果大幅改善,含水下降5%,阶段累增油8.6×10^4 t,但受弱凝胶调驱机理的限制,油藏仍有大量残余油赋存在微小孔隙中,后续注入水很难将其洗出.为此,针对区块油藏条件开展了弱凝胶调驱后表面活性剂/碱复配体系提高采收率技术研究.通过室内实验对比,在相同表面活性剂浓度下,NaOH体系的界面张力比Na2CO3体系的低,因此选择碱剂NaOH与表面活性剂复配,两者浓度通过实验对比确定,其中碱剂NaOH浓度取1.1%,表面活性剂浓度取0.3%为最佳,再用该复配体系进行岩心驱替实验,经计算最终采收率可以提高8.0%～8.4%.研究结果对下步矿场先导试验具有指导意义.

特早熟显性无腺体种质系汾显无1号的选育及应用研究

利用杂交、回交、自交、测交相结合的手段，经１０年转育、纯化、筛选、鉴定，将存在于海岛棉１号的无腺体基因２（Ｇｌｅ２）转育到了特早熟普通常腺体棉品种上，选育出携带有单节显性无腺体基因的特早熟陆型无腺体棉花新种质系汾显无１号。并对该品系在低酚棉育种和杂交种选育中的应用进行了初步研究。

“S比N_(1)还N_(2)”构式句法特征形成的动因分析——基于“S比N还A”构式的压制研究

近年来有关"S比N_(1)还N_(2)"构式的研究较多,但关于"S比N还A"构式对其压制的研究却极少。有鉴于此,本文从构式语法的视角分析了"S比N还A"对"S比N_(1)还N_(2)"构式的句法压制及后者对前者句法信息的传承。"S比N还A"构式分为表比较类和表比况类构式两种。研究发现,"S比N_(1)还N_(2)"构式除其N_(2)传承了"S比N还A"构式中A的句法特征外,还传承了"S比N还A"构式无否定形式;传承了表比况类构式中A不能转换为其反义词、S与N不能互换、不能省略"还"的特征;阻断了"S比N还A"构式中A后面可用数量词,以及表比较类构式中A可转换为其反义词、S与N可互换、可省略"还"的信息。在传承"S比N还A"构式的5个句法特征中,有3个传承自表比况类构式。这表明,"S比N_(1)还N_(2)"构式主要受到表比况类构式的压制,即其句法特征的形成主要与后者相关。

‘和燕1号’农艺性状和产量对不同播量和行距的响应

为研究‘和燕1号’燕麦(Avena sativa)的栽培措施,挖掘其高产潜力,本研究在甘肃省和政县进行了不同播量和不同行距的试验,探讨了播量和行距对‘和燕1号’农艺性状、干草产量和种子产量的影响。结果表明,播量和行距对‘和燕1号’的农艺性状、干草产量及种子产量均有显著影响;干草产量在行距30 cm+播量300 kg·hm^–2时最高,达9059.73 kg·hm^–2;种子产量则在行距20 cm+播量300 kg·hm^–2时最高,达2728.40 kg·hm^–2。通过相关分析和通径分析,株高、分蘖数、干草产量、种子产量与行距极显著正相关(P<0.01),茎粗、叶长、有效分蘖数与行距显著正相关(P<0.05);种子产量与播量显著正相关(P<0.05),分蘖数、茎粗、叶宽与播量显著负相关(P<0.05),其中穗长与播量极显著负相关(P<0.01);种子产量与株高、干草产量极显著正相关(P<0.01);株高对干草产量的直接作用最大。实际生产中可以通过影响‘和燕1号’株高、有效分蘖数、叶长、茎粗等指标来挖掘该品种产量潜力,做到经济效益的最大化。

不同播量和行距对“夏燕1号”牧草产量、种子产量及农艺性状的影响

为研究“夏燕1号”燕麦高产栽培措施,挖掘其高产潜力,在甘肃省夏河县开展了不同播量(120、180、240、300 kg/hm^(2))和不同行距(10、15、20、30 cm)试验,探讨了播量和行距对“夏燕1号”农艺性状、鲜干草产量和种子产量的影响。结果表明,播种量对“夏燕1号”分蘖数和有效分蘖数影响极显著(P<0.01);行距对“夏燕1号”叶宽和茎粗影响显著(P<0.05),同时对叶长、穗长、分蘖数和有效分蘖数影响极显著(P<0.01);鲜、干草产量在行距20 cm+播量240 kg/hm^(2)时均为最高,分别达20926.01 kg/hm^(2)和8447.83 kg/hm^(2);种子产量则在行距30 cm+播量300 kg/hm^(2)时最高,达3171.17 kg/hm^(2)。通过相关分析,株高、分蘖数、有效分蘖数、穗长与种子产量极显著正相关(P<0.01),干草产量与种子产量显著正相关(P<0.05);穗长、分蘖数与干草产量显著正相关(P<0.05)。综上,在夏河县的自然条件下,选择行距20 cm,播量240 kg/hm^(2)种植“夏燕1号”燕麦较为适合。

南1-斜1井套管锻铣技术

介绍了国内２４４．５ｍｍ套管锻铣位置最深的南１－斜１井套管锻铣及侧钻情况。从６个方面分析了深部井段锻铣施工难点。提出了两种锻铣刀具的选择与使用技术措施。探讨了套管锻铣位置的确定及锻铣效果的判断等问题。

棉花海A胞质不育系中1-2A的特点及应用

为了培育出新的海A胞质不育系,从而实现中长绒陆地棉“三系”配套。作者以海A胞质不育系与中1-2(保持系)回交,连续3年6代,选育出优质胞质不育系中1-2A;并以中1-2A为母本,恢复系11R为父本,获得杂交种三师棉12。对其农艺、产量和品质性状进行分析,并在棉铃生长30天时对棉铃生理性状进行测试。结果表明:一是中1-2A具备100%的胞质不育性,利用11R恢复系可使中1-2A恢复成可育;二是中1-2A比对照中棉所49和中1-2的棉铃内含液态物生理指标有较大差异;三是杂交种三师棉12中的天冬氨酸含量最高,表现为铃大、衣分高、丰产和优质的特性。