丁胺卡那霉素诱发豚鼠耳蜗外毛细胞凋亡的实验研究

目的 探讨氨基糖苷类抗生素作用于耳蜗时外毛细胞凋亡现象及其凋亡发生特点。方法 用一定剂量的丁胺卡那霉素对 15只豚鼠行耳蜗造模后利用光镜、TUNEL标记技术 (teminal-deoxynucleotidytransferasemediatedd -UTPnick -endlabeling)原位检测凋亡发生。结果 肌注丁胺卡那霉素 1d后即可诱发豚鼠耳蜗底转外毛细胞发生凋亡 ,随着用药时间延长 ,其余各转外毛细胞亦发生凋亡 ,甚至出现部分外毛细胞丢失现象。结论 氨基糖苷类抗生素作用于耳蜗系统时可引起外毛细胞凋亡 ,细胞凋亡是豚鼠耳蜗听毛细胞损伤的一条途径 ;

红花和当归等中药煎剂对体外培养的鼠毛囊毛发生长与毛球部细胞增殖的影响

目的:探讨红花、当归等中药混合煎剂和单味煎剂,对体外培养的小鼠毛囊毛发生长与毛囊球部细胞生长活力的影响。方法:将离体培养的小鼠触须毛囊和乳鼠背部皮肤的毛囊球部细胞,分别设为对照组(W illiam s培养液)和中药组(W illiam s培养液+不同的中药煎剂)即混合组1(1.5×1-0 5g/m l),混合组2(1.5×1-0 6g/m l),混合组3(1.5×1-0 7g/m l),当归组与红花组分别为1.5×1-0 4g/m l、1.5×1-0 5g/m l,生侧柏叶组为5.0×1-0 4g/m l、5.0×1-0 5g/m l。显微镜下观察各组毛囊毛发生长情况,MTT比色试验测定各组吸光度A值。结果:毛囊培养第7天,中药混合组的毛囊毛发生长长度大于对照组和单味煎剂组(P<0.05),1.5×1-0 5g/m l混合组的毛囊毛发生长长度大于1.5×1-0 7g/m l组(P<0.05);单味中药组与对照组之间的毛囊毛发生长长度相近。毛囊球部细胞培养72 h、96 h中药混合组的吸光度A值高于对照组(P<0.05),72 h混合组1.5×1-0 5g/m l与1.5×1-0 7g/m l的吸光度A值高于部分单药组(P<0.05);单味中药组与对照组之间以及3个浓度中药混合组之间的吸光度A值相似。结论:红花、当归等中药混合煎剂对体外培养的小鼠毛囊毛发生长起促进作用,可促进毛囊球部细胞增殖;单味中药煎剂对体外培养的小鼠毛囊毛发生长及毛囊球部细胞增殖无明显作用。

Calpain在卡铂引起的耳蜗Ⅰ型传入神经系统损害中的作用

目的研究观察Ｃａｌｐａｉｎ在灰鼠耳蜗内的定位及其注射卡铂后不同时间的表现。方法应用免疫细胞化学方法在透射电镜下观察卡铂引起的耳蜗毛细胞及其传入神经系统中 Ｃａｌｐａｉｎ的活动变化。结果发现卡铂首先损坏耳蜗Ⅰ型传入神经的树突并伴有 Ｃａｌｐａｉｎ的破坏活动。结论卡铂引起的耳蜗 Ｉ型传入神经系统的早期破坏可能是由于细胞内形成的高钙浓度激活了Ｃａｌｐａｉｎ的活性，由此导致了Ｉ型传入神经原的蛋白质水解变性。

庆大霉素损伤后豚鼠前庭感觉上皮细胞凋亡和再生

目的 研究豚鼠前庭毛细胞庆大霉素损伤后前庭感觉上皮细胞凋亡和细胞增殖之间的关系。方法 成年豚鼠肌肉注射庆大霉素 10 0mg/kg/d连续 14d ,停用庆大霉素后1d和 10d ,腹腔注射Brdu 30 0mg/kg 6h后处死实验动物。免疫组化显色壶腹嵴中可见Brdu标记细胞 ,同时应用TUNEL技术原位显示凋亡细胞 ,观察应用庆大霉素后 1d和 10d壶腹嵴毛细胞损伤区域细胞凋亡和细胞增殖状况。结果 损伤后 1d ,可见TUNEL标记的凋亡细胞位于壶腹嵴的腔面细胞层 ,支持细胞层未发现TUNEL阳性细胞 ,及Brdu阳性细胞 ;损伤后修复 10d ,可见TUNEL阳性细胞位于壶腹嵴腔面细胞层 ,同时壶腹嵴支持细胞层出现Brdu阳性细胞 ,壶腹腔面细胞层未发现增殖细胞。结论 研究显示细胞凋亡是庆大霉素损伤后哺乳动物前庭毛细胞的一种死亡方式 ,并且细胞凋亡和细胞增殖发生的时间和部位一致。