Effects of erigeron breviscapus (Vant.) Hand-Mazz pretreatment on pathology and oxyradical level following spinal cord ischemia-reperfusion injury in rabbits

Objective To investigate the effects of erigeron breviscapus (Vant.) Hand-Mazz (erigeron breviscapus) pretreatment on pathology and oxyradical level in the spinal cord after ischemia-reperfusion (I/R) injury in rabbits. Methods A total of 40 New Zealand white rabbits were randomly divided into three groups: sham-operation group with 10 rabbits treated with only abdominal aorta exposure without occlusion,control group with 15 rabbits that underwent ischemia for 50 minutes and treated with matched saline,and experimental group with 15 rabbits that underwent ischemia for 50 minutes and treated with erigeron breviscapus (9mg/kg) injection before ischemia. Malondialdehyde (MDA) level and superoxide dismutase (SOD) activity in the spinal cord were examined at 6 and 24 hours after I/R,respectively. The morphological changes and the number of the spinal cord anterior horn motor neurons were observed and counted under the light microscope and electron microscope,respectively. Results The level of MDA was markedly decreased and SOD activity was increased in the experimental group compared with those in the control group (P<0.01). Compared with that in the control group,the number of motor neurons in the experimental group significantly increased at 24h after I/R (P<0.01) and the morphous of the motor neurons improved. Conclusion Erigeron breviscapus can reduce oxyradical production and the apoptosis of nerve cells,and protect nerve tissue structure and function after spinal cord I/R.

山银柴胡质量标准研究

目的:研究山银柴胡质量评价标准,建立指纹图谱分析方法。方法:参照2020年版中国药典的方法测定山银柴胡水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物含量;采用HPLC法测定山银柴胡中成分含量;建立30批山银柴胡的指纹图谱,结合相似度评价、聚类分析、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)进行质量评价。结果:30批山银柴胡的水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物、丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯、丝石竹皂苷元、皂皮酸含量的平均值分别为8.89%、12.67%、0.79%、34.53%、13.58 mg/g、1.62 mg/g、1.03 mg/g;指纹图谱确定了17个共有峰,样品与对照图谱的相似度为0.916~0.997,聚类分析可将样品分为3类,OPLS-DA分析筛选出7个质量差异性成分。结论:该研究建立的方法可为山银柴胡质量标准的完善提供参考。

蒲公英TmRAV1基因克隆及其响应脱落酸信号表达分析

根据脱落酸处理的蒲公英(Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.)的转录组数据,在蒲公英中克隆获得1个编码RAV转录因子的基因序列,命名为TmRAV1。TmRAV1的开放阅读框(ORF)长度为1026 bp,编码342个氨基酸。TmRAV1的理论相对分子质量为38229,理论等电点为pI 9.20。TmRAV1为不稳定蛋白,具有亲水性,没有跨膜结构域和信号肽,含有44个磷酸化位点。氨基酸序列比对结果显示:TmRAV1与莴苣(Lactuca sativa Linn.)LsRAV1氨基酸序列的同源性最高(一致性为85.88%),具有高度保守的AP2和B3结构域。系统发育分析结果表明TmRAV1与其他5种植物的RAV转录因子聚在一起。TmRAV1在蒲公英叶中的相对表达量显著(P<0.05)高于根和花。TmRAV1受100μmol·L^(-1)脱落酸和250 mmol·L^(-1)NaCl的显著诱导。TmRAV1能够显著上调脱落酸敏感型转录因子基因TmAREB1的表达。TmRAV1是核定位转录因子,与脱落酸信号核心蛋白家族成员TmSnRK2.6互作。综上所述,蒲公英TmRAV1响应脱落酸等多种信号,其编码蛋白与TmSnRK2.6互作,并调控TmAREB1的表达。

极小种群野生植物狭叶坡垒种群结构与动态特征

【目的】研究极小种群野生植物狭叶坡垒[Hopea chinensis(Merr.) Hand.-Mazz.]的种群结构特征和数量动态特征,探讨种群发展潜力和濒危原因,为狭叶坡垒种质资源的保护和恢复提供参考依据。【方法】采用样地调查法对广西十万大山区域8个狭叶坡垒自然集中分布区进行调查,以空间代替时间分析狭叶坡垒种群结构特征,绘制种群静态生命表和存活曲线,分析种群动态指数及种群生存函数,对种群未来发展趋势进行预测。【结果】狭叶坡垒野生种群龄级结构呈倒J型,幼龄个体数占比较高,表现为增长型结构,种群个体幼龄期淘汰率较高;种群动态指数、随机干扰敏感指标和随机干扰风险概率分别为52.61%、4.38%和8.33%,对外界干扰敏感,环境对个体有较强的选择作用。狭叶坡垒野生种群存活曲线为DeeveyⅡ型的B1亚型,狭叶坡垒种群生存率在Ⅰ~Ⅵ龄级期间随龄级增加而减小,累积死亡率随龄级增加而增加,危险率在Ⅵ龄级达最高值,狭叶坡垒种群在Ⅵ龄级之后进入生理衰退期。时间序列分析表明,除Ⅻ龄级的个体数经过4个龄级时间后保持不变,经过4、6、8、10个龄级时间后,狭叶坡垒各龄级的个体数均呈增加趋势,其中Ⅳ~Ⅷ龄级逐渐成为种群的主体,狭叶坡垒种群总体呈增长状态。【结论】狭叶坡垒野生种群为增长型,种群处于波动变化状态中,对外界干扰敏感。幼苗数量充足,在生境不被破坏的前提下,具有较好的恢复潜力。但幼苗向幼树、幼树向小树转换过程中存在增补限制,制约狭叶坡垒种群发展。

丽江橐吾全草甲醇提取物的倍半萜类化学成分

综合利用多种色谱、波谱和质谱技术从菊科(Asteraceae)橐吾属(Ligularia Cass.)植物丽江橐吾(L.lidjiangensis Hand.-Mazz.)全草甲醇提取物的石油醚部分分离和鉴定出13个艾里莫芬烷型倍半萜,分别为ligularilactone A(1)、6β-hydroxy-8β-methoxyeremophil-7(11)-en-12,8α-olide(2)、8β-hydroxyeremophil-7(11)-ene-12,8α(4β,6α)-diolide(3)、8-oxo-eremophil-6-en-11-one(4)、eremophil-7(11),8(9)-dien-12,8(14β,6α)-diolide(5)、8β-methoxyeremophil-7(11)-ene-12,8α(4β,6α)-diolide(6)、6β-hydroxyl-7(11)-eremophilen-12,8α-olide(7)、eremophil-8(9)-,7(11)-dien-6α,15;8,12-diolide(8)、6β,8β-dihydroxyeremophi-7(11)-en-12,8α-olide(9)、eremophil-7(11)-ene-12,8α;14β,6α-diolide(10)、2-naphthaleneacetic acid,3,4,4α,5,6,7,8,8α-octahydro-α,8,8α-trimethyl-3-oxo-,methyl ester(11)、(1αR,3αR,7 S,7αR,7βS)-1α-acetyl-7,7α-dimethyloctahydronaphtho[1,2-β]oxiren-2(1αH)-one(12)和6β-hydroxy-8β-methoxyeremophil-7(11)-12,8α-olide(13)。其中,化合物1为新的艾里莫芬烷型倍半萜,化合物2至化合物13则均首次从丽江橐吾中分离得到。

外源硒对蒲公英生长、生理特性及其硒含量的影响

为研究叶面喷施外源硒对蒲公英(Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.)生长和品质的影响,采用盆栽试验,分析叶面喷施不同浓度亚硒酸钠溶液(0、100、200、300、400μmol/L)对蒲公英生长、生理特性及其硒含量的影响。结果表明,随着喷施硒浓度的增大,蒲公英根长和鲜重等生长指标呈先升高后降低的趋势;与对照相比,施加200μmol/L亚硒酸钠可显著提高蒲公英光合作用速率和光化学反应效率,提高光合色素含量;施加200μmol/L亚硒酸钠时蒲公英叶片SOD和CAT活性最高,施加300μmol/L亚硒酸钠时POD活性最高(P<0.05)。施硒可有效提高蒲公英绿原酸、总黄酮和总多酚的含量,施加200μmol/L亚硒酸钠时总黄酮和总多酚的含量较对照分别提高49.73%、31.34%。施硒后蒲公英各部位硒含量显著提高,叶片和根系的硒含量随硒浓度的变化符合一元二次方程。蒲公英叶片对外源硒浓度的变化较敏感,是富硒的主要部位。研究认为,叶面喷施200μmol/L亚硒酸钠是培养富硒蒲公英的最佳浓度。

红芪HpC4H基因的克隆及其铁盐干预下的表达分析

肉桂酸-4-羟化酶(Cinnamate-4-hydroxylase,C4H)在调节植物生长发育方面具有重要的作用。为探究红芪(Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz.)黄酮类成分合成的分子调节机制,本研究以红芪幼苗为材料,通过RACE技术,克隆HpC4H基因,并进行生物信息学分析和表达模式分析。结果显示:HpC4H基因全长为1634 bp,编码477个氨基酸,蛋白分子量为54.94 kD,不含有信号肽和跨膜结构区。亚细胞定位预测显示,该蛋白定位于内质网中,具有C4H保守功能区并属于细胞色素P450超基因家族。序列分析发现,HpC4H氨基酸序列与柠条锦鸡儿(Caragana korshinskii Kom.)的相似性高达92.84%。qRT-PCR结果表明,HpC4H基因在红芪不同组织中的表达模式为:根>茎>叶,同时,该基因的表达量在不同浓度铁盐干预下有上调趋势,推测铁盐可能在调控红芪HpC4H基因表达中发挥一定作用,且低浓度铁盐溶液作用显著。

大黄橐吾化学成分及其抗炎活性研究

目的研究大黄橐吾化学成分及其抗炎活性。方法大黄橐吾乙醇提取物采用高效液相色谱、凝胶柱色谱、硅胶柱色谱进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。利用CCK-8法、Griess法测定化合物的体外抗炎活性。结果从中分离得到18个化合物,分别鉴定为14-acetoxy-7β-senecioyloxy-1-(2-methylbutyryloxy)-notonipetranone(1)、rel-(1 R,3αS,5R,6S,7R,7αS)-1-[(1S)-1-(acetyloxy)ethyl]octahydro-6-[(2-methylbutanoyl)oxy]-4-methylidene-2-oxo-7-(propan-2-yl)-1H-inden-5-yl(2 E)-3-methylpent-2-enoate(2)、款冬酮(3)、petasipaline B(4)、8α-hydroxy-4(15),11-eudesmadiene(5)、羽扇烯酮(6)、羽扇豆醇(7)、(3β)-lup-20(29)-en-3-yl stearate(8)、松脂醇单葡萄糖苷(9)、isoeucommin A(10)、isoline(11)、尿苷(12)、三十四烷醇(13)、棕榈酸(14)、tridec-1-ene(15)、cis-octadec-9-enoic acid(16)、甲基-α-D-呋喃果糖苷(17)、β-谷甾醇(18)。化合物1~6、9~11、14对脂多糖诱导的RAW264.7细胞生成NO有抑制活性。结论化合物3~6、8~10、12~17为首次从该植物中分离得到。化合物1~6、9~11、14具有抗炎活性。

黄蜡果植物鉴定、化学成分与药理作用研究进展

黄蜡果(Stauntonia brachyanthera Hand.-Mazz.)是木通科野木瓜属植物,在侗医药中具有多种药用价值,其全草均可入药。藤茎具有清热利尿、通经活络、镇痛排脓、通乳等作用,与木通功效相似,民间有将黄蜡果藤茎代替木通入药的用法。该植物主要从黄蜡果的果、花、叶和藤茎进行鉴定。经过查阅文献对黄蜡果的化学成分进行分类,主要含有三萜、黄酮、苯乙醇苷、苯丙素类等成分。目前对黄蜡果的药理活性主要集中在镇痛、抗炎、抗痛风、抗氧化、保肝、利尿等方面进行了研究。

牡荆水提物对蓖麻油腹泻小鼠的治疗作用研究

[目的]研究牡荆水提物对蓖麻油致小鼠腹泻的治疗作用,评价牡荆提取物的抗腹泻功效,为开发新型天然药物或植物提取物饲料添加剂提供理论依据。[方法]选取48只18~22 g SPF级昆明小鼠,随机分为6组:对照组、模型组、洛哌丁胺组及牡荆水提物高、中、低剂量组,每组8只,雌雄各半。牡荆水提物高、中、低剂量组小鼠灌胃16、8、4 g/kg BW牡荆水提物,对照组和模型组小鼠灌胃等剂量的生理盐水,洛哌丁胺组小鼠灌胃5 mg/kg BW洛哌丁胺,连续灌胃5 d。第5天给药后0.5 h,模型组、洛哌丁胺组及牡荆水提物高、中、低剂量组小鼠灌胃0.5 mL蓖麻油灌胃造模,对照组灌胃等量生理盐水。造模后的小鼠单笼单只饲喂。连续4 h观察小鼠腹泻情况,4 h后小鼠采血并断颈处死,每组随机取4只小鼠的肝脏、小肠各两份,一份制作组织切片;另一份用以提取RNA,检测空肠通道蛋白和肝脏急性期蛋白mRNA表达情况。[结果]模型组小鼠腹泻评分和腹泻指数均极显著高于对照组(P<0.01),说明蓖麻油腹泻模型造模成功。与模型组相比,洛哌丁胺组和牡荆水提物高剂量组小鼠腹泻评分和腹泻指数均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05);牡荆水提物高剂量组小鼠血清中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-10含量均显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01)。肝脏组织病理结果显示,牡荆水提物高、中、低剂量组小鼠肝索结构清晰,肝细胞排列紧密,仅少量肝细胞轻度肿胀,并伴少量炎性细胞浸润。肠道组织病理结果显示,牡荆水提物高、中、低剂量组小鼠空肠黏膜层、肌层、浆膜层均清晰可见,黏膜层绒毛上皮内见大量空泡,但均未见明显坏死或炎症反应。与模型组相比,牡荆水提物高剂量组小鼠空肠中NHE8、NHE3、AQP3、AQP4表达量均无显著差异(P>0.05),NHE2表达量显著降低(P<0.05),急性期蛋白TRF和CRP表达量均显著降低(P<0.05)。[结论]牡荆水提物对蓖麻油导致的小鼠腹泻模型具有较好的治疗作用,对肝脏和小肠黏膜具有一定的保护作用,作用机制可能与其降低血清中IL-6、IL-10含量,以及在一定程度上降低NHE2表达、抑制TRF和CRP的表达有关。

云南重楼果皮中1个新的C_(21)甾体皂苷

目的:研究云南重楼果皮中的甾体皂苷类成分。方法:采用HPD-100大孔吸附树脂柱、正相硅胶柱、ODS柱、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱和半制备型高效液相色谱等方法对云南重楼果皮70%乙醇渗漉提取物中的甾体皂苷类成分进行系统研究,通过现代波谱学技术结合参考文献对化合物结构进行鉴定。结果:从云南重楼果皮中分离得到8个甾体皂苷类化合物,分别鉴定为:17α-hydroperoxide pregn-5-en-20-one-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)]-β-D-glucopyranoside(1)、重楼皂苷Ⅳ(2)、ypsilandroside L(3)、重楼皂苷Ⅲ(4)、pregna-5,16-dien-3β-ol-20-one-3β-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)]-β-D-glucopyranoside(5)、pregna-5,16-dien-3β-ol-20-one-3β-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[α-L-arabinopyranosyl-(1→4)]-β-D-glucopyranoside(6)、pregna-5,16-dien-3β-ol-20-one-3β-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)]-β-D-glucopyranoside(7)、aethioside A(8)。结论:其中,化合物1为一个新的C_(21)甾体皂苷类化合物,化合物3、5、6、8为首次从重楼属植物中分离得到。

藏药矮丛风毛菊中多糖提取工艺研究

为确定矮丛风毛菊中多糖提取和醇沉的最优工艺参数,以矮丛风毛菊中多糖得率为响应值,采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,单因素实验确定提取因素水平,正交设计方法优选最佳提取工艺[1]。最佳提取工艺为:提取所用液料比w(H_(2)O)∶w(矮丛风毛菊)为20∶1,提取次数为3次,提取时间为3 h;最佳醇沉工艺为:体积分数为80%的乙醇,试样浓缩液与乙醇体积比1∶6,醇沉静置时间15 min;最佳检测波长为490 nm。测得样品的平均多糖得率为8.87%。相对标准偏差(RSD)<2%,优选出的提取和醇沉工艺参数稳定可靠,该法准确、重复性好,为矮丛风毛菊开发利用提供了参考数据。

胡椒属三种民族药的生药学鉴别研究

目的:对胡椒属植物石南藤Piper wallichi(Miq.)Hand.-Mazz.、毛蒟P.puberulum(Benth.)Maxim.、山蒟P.hancei Maxim.进行生药学对比研究,建立鉴别三者主要特征的方法。方法:基于原植物基原鉴定、药材性状鉴定、不同器官显微组织鉴定,比较三者异同点,采用薄层色谱法鉴别三者。结果:三者显微特征较为相似。石南藤的叶片形状为椭圆形,毛蒟及山蒟叶片均为卵状披针形;石南藤枝被疏毛,毛蒟幼枝及叶片被短柔毛,而山蒟无毛。石南藤茎显微横切中髓部所占比例最小,仅为60%,而毛蒟和山蒟占比达到80%~90%。建立的薄层色谱鉴别方法能鉴别石南藤、毛蒟及山蒟。结论:可根据叶片形状、茎枝是否被毛、茎显微中髓部所占比例、薄层色谱鉴别区分石南藤、毛蒟及山蒟。该研究为三者的鉴别、质量控制及资源开发利用奠定了基础。

云南蓍地上部分化学成分分离与结构鉴定

针对药用植物云南蓍的化学成分进行分离与结构鉴定,采用正相硅胶、反相硅胶(Rp-C18)、葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)、MCI以及RP-HPLC色谱等几种分离手段,对该药用植物地上部分的90%乙醇提取浸膏进行分离纯化,依据现代波谱方法(核磁共振NMR、质谱MS)以及理化性质对分离得到的单体化合物的结构进行确定。最终从该植物中分离并鉴定了9个单体化合物,结构分别为matricarin(1)、3β-hydroxy-11α,13-dihydro-costunolide(2)、黑麦草内酯(3)、4-羟基-3-甲氧基苯乙酮(4)、2-苯基乙酰胺(5)、sylvamide(6)、5-羟甲基呋喃甲醛(7)、6-甲氧基-7-羟基香豆素(8)、邻苯二甲酸二丁酯(9)。这些化合物中,化合物1~8为首次从该植物中分离得到。

3种药用植物利用石蜡切片和冰冻切片制片的效果比较研究

目的:优选出不同状态(新鲜、干燥)及不同药用部位的不同药用植物(滇重楼、密脉鹅掌柴、铁皮石斛)最适宜的制片方法,提高横切面组织装片制备效率。方法:采用不同防冰晶形成保护剂(不处理、蔗糖和甘油)处理新鲜材料并进行冰冻切片,采用甘油软化干燥材料并进行石蜡切片,比较不同前处理条件和两种制片方法的制片效果。结果:新鲜材料中,密脉鹅掌柴的茎叶,滇重楼的根茎、茎、叶采用甘油溶液做保护剂效果较佳,而铁皮石斛适用蔗糖磷酸缓冲溶液做保护剂;滇重楼的须根用石蜡切片法可获得组织结构完整的装片。此外,经甘油溶液软化,滇重楼的干燥根茎和密脉鹅掌柴的干燥叶可获得质量较好的石蜡切片。结论:质地稍硬的新鲜药材用甘油溶液处理后采用冰冻切片可以获取较为理想的效果;质地柔软的新鲜药材可不经任何处理或经蔗糖磷酸缓冲液浸泡后采用冰冻切片;干燥药材或含淀粉类药材采用石蜡切片法可获得理想的切片效果。

灰毡毛忍冬与忍冬HQT2基因的克隆及表达分析

目的分别克隆灰毡毛忍冬与忍冬HQT2基因全长序列,并进行生物信息学和表达量分析,以揭示HQT2在灰毡毛忍冬与忍冬绿原酸生物合成中的可能功能。方法多糖多酚试剂盒法分别提取灰毡毛忍冬与忍冬花总RNA,通过RT-PCR和RACE技术克隆HQT2基因的全长c DNA序列,运用相关软件对该基因序列进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)分别测定灰毡毛忍冬与忍冬茎、叶及不同花期花中相关基因的相对表达量;采用HPLC测定绿原酸含量并结合表达量做相关性分析。结果克隆得到LmHQT2(MH196564)和LjHQT2(MK294639),其开放阅读框长度均为1296 bp,编码431个氨基酸,生物信息学分析预测为亲水性蛋白,可能定位于细胞质中,属于氯霉素乙酰转移酶样结构域超家族;qRT-PCR结果显示,HQT2基因具有组织特异性,在灰毡毛忍冬与忍冬茎、叶及不同花期花器官中表达存在差异;绿原酸含量与基因相对表达量之间呈现一定的相关性。结论本研究成功克隆了灰毡毛忍冬与忍冬HQT2基因并探索其在不同器官中的表达模式,推测HQT2基因在灰毡毛忍冬与忍冬的绿原酸生物合成途径中发挥不同功能,为进一步研究该基因的功能及探究灰毡毛忍冬和忍冬绿原酸生物合成调节机制提供了研究基础。

广西腺枝葡萄‘桂黑珍珠3号’果实品质差异解析

以罗城和武鸣生产的腺枝葡萄‘桂黑珍珠3号’为试材,结合两地的气候条件,调查该品种在两地的物候期、果实品质与气候因子的差异。结果显示,葡萄生长季(4—9月)的有效积温、采收前3个月平均温度之和、光照时数3个指标以武鸣较高,浆果成熟月降水量和采收前2个月水热系数以罗城较高;武鸣‘桂黑珍珠3号’各物候期开始时间早于罗城6~17 d;罗城‘桂黑珍珠3号’成熟果实的果粒大、种子多,白藜芦醇和单宁含量指标优于武鸣;另外,罗城成熟期果实中检出的挥发性代谢物种类和含量总体高于武鸣,尤其以芳樟醇和α-松油醇两个具有典型花香类的萜类化合物含量更高。相关分析表明,‘桂黑珍珠3号’果实粒质量除与纵径、横径和芳樟醇含量呈极显著正相关外,还与果实L^(*)和α-松油醇含量呈显著正相关,与a^(*)呈显著负相关;果实籽粒数、籽质量和皮质量与白藜芦醇和单宁含量无显著相关性。综上认为,相对气温低、海拔高是罗城腺枝葡萄‘桂黑珍珠3号’物候期晚、生育期长、酚类及挥发性化合物丰富的主要原因。

粤东地区3种药用植物分布新记录

在第四次全国中药资源普查广东省揭阳市揭西县、惠来县、榕城区和揭东区普查时,记录了1000多种药用植物资源并采集了相应腊叶标本2000多份,经过细节鉴定和查阅资料核实,确定其中伞花猕猴桃Actinidia umbelloides C.F.Liang为广东分布新记录,歌绿开宝兰Goodyera seikoomontana Yamamoto和罗星草Canscora melastomacea Hand.-Mazz.为粤东地区新记录,凭证标本暂存于揭阳市揭阳职业技术学院。这些新记录种的发现丰富了粤东地区的药用植物种类,对该地区植物多样性及中药资源开发具有一定参考价值。

云南蓍的黄酮类成分及其体外抗炎活性研究

目的:研究云南蓍Achillea wilsoniana Heimerl ex Hand.-Mazz.的黄酮类化学成分及其体外抗炎活性。方法:采用多种色谱技术对云南蓍70%乙醇提取物进行分离纯化,并根据化合物的理化性质与波谱数据进行结构鉴定。采用脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW 264.7体外炎症模型测定化合物对一氧化氮(NO)释放的抑制作用。结果:从云南蓍中分离得到22个黄酮类化合物,分别鉴定为:木犀草素(1)、hydnocarpin(2)、槲皮素(3)、异荭草素(4)、quercetin-3-O-α-arabinopyranosyl(1→6″)-β-glucopyranoside(5)、芦丁(6)、异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷(7)、异金雀花素(8)、异鼠李素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、异槲皮苷(10)、蒿黄素(11)、槲皮素-4′-O-β-D-葡萄糖苷(12)、异牡荆苷(13)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(14)、苜蓿素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(15)、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷(16)、芹菜素(17)、异鼠李素(18)、casticin(19)、槲皮苷(20)、泽兰黄素(21)、vitexin(22)。体外抗炎实验结果表明,化合物1、3、11、13~15、17、19和21对LPS诱导的RAW 264.7细胞NO生成具有一定的抑制活性。结论:其中,化合物1、3~7、10、11、13~15、17~19、21、22为首次从云南蓍中分离得到,化合物2、8、9、12、16、20为首次从蓍属植物中分离得到,化合物1、3、11、13~15、17、19、21具有一定的抗炎活性。

山银花茎叶与花化学成分和抗炎活性比较研究

目的比较山银花茎叶和花提取物的主要成分及抗炎活性差异。方法通过D101大孔树脂制备富含酚酸与三萜类成分的山银花茎叶及花提取部位,采用HPLC测定样品中6种酚酸和3种三萜含量。利用脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导RAW264.7细胞炎症模型,将细胞分为空白对照组、模型组、地塞米松组(32μg·mL^(-1))、山银花茎叶组(25、50、100、200μg·mL^(-1))、山银花组(29.5、59、118、236μg·mL^(-1)),共5组。空白对照组和模型组给予等量的无血清培养基,其余组以含各药物的无血清培养基预处理2 h后,加入浓度为1μg·mL^(-1)的LPS,继续培养24 h。采用Griess法检测一氧化氮(nitric oxide,NO)释放量。将小鼠随机分为空白对照组、模型组、地塞米松组(5 mg·kg^(-1))、山银花茎叶组(1.25、2.5、5 g·kg^(-1))和山银花组(1.25、2.5、5 g·kg^(-1)),连续灌胃给药7 d后,除空白对照组外,其余各组小鼠于右耳内外侧涂抹巴豆油(40μL)建立耳郭肿胀模型和左侧足趾皮下注射1%角叉菜胶(30μL)建立足趾肿胀模型。4 h后,测定各组小鼠耳郭和足趾肿胀度,计算肿胀抑制率,采用ELISA法测定小鼠足肿胀组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis facor-α,TNF-α)和前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的含量。结果山银花茎叶中总酚酸(P<0.01)和隐绿原酸(P<0.05)含量高于山银花,总三萜(P<0.01)、灰毡毛忍冬皂苷乙(P<0.01)、灰毡毛忍冬皂苷甲(P<0.05)含量低于山银花。与空白对照组比较,模型组RAW264.7细胞NO水平、小鼠耳郭肿胀度和足趾肿胀度以及足肿胀组织中炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2)水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,山银花茎叶组(50、100、200μg·mL^(-1))和山银花组(59、118、236μg·mL^(-1))RAW264.7细胞NO水平降低(P<0.01);山银花茎叶组(1.25、2.5、5 g·kg^(-1))和山银花组(1.25、2.5、5 g·kg^(-1))耳郭肿胀度明显降低(P<0.01),耳肿胀抑制率升高(P<0.01);山银花茎叶组(2.5、5 g·kg^(-1))和山银花组(2.5、5 g·kg^(-1))足趾肿胀度降低(P<0.01),足肿胀抑制率升高(P<0.01);山银花茎叶组(1.25、2.5、5 g·kg^(-1))和山银花组(1.25、2.5、5 g·kg^(-1))足肿胀组织中IL-1β、IL-6、TNF-α和PGE2的含量降低(P<0.01)。结论山银花茎叶和花具有相似的酚酸和三萜成分,但其含量存在显著差异。山银花茎叶和花提取物对急性炎症均有明显抑制作用,其机制可能与抑制外周TNF-α、IL-6、IL-1β、PGE2和NO炎症因子的表达有关。