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Adenoviral-mediated Hath1-EGFP gene transfer into guinea pig cochlea through intact round window membrane 被引量:7
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作者 CHEN Wei HU Yin-yan +6 位作者 YANG Shi-ming GUO Wei SUN Jian-he HAN Dong-yi ZHAI Suo-qiang YANG Wei-yan David ZZHe 《Journal of Otology》 2008年第1期18-23,共6页
Objective To study expression of adenoviral-mediated Hath1-EGFP gene in the guinea pig cochlea after transfer through intact round window membrane(RWM), and to assess its effects on hearing. Methods Twenty adult guine... Objective To study expression of adenoviral-mediated Hath1-EGFP gene in the guinea pig cochlea after transfer through intact round window membrane(RWM), and to assess its effects on hearing. Methods Twenty adult guinea pigs were used, of which: 12 were surgically inoculated with Ad-Hath1-EGFP in the bony groove of round window niche, and 8 with artificial perilymph. Auditory brainstem response(ABR) thresholds were determined in all animals before and 5 days after surgery. On post-surgery day 5 and day 14, animals were sacrificed and whole mounts of cochlea and frozen sections were examined. Results ABR tests showed no significant change of hearing after the surgery. Strong fluorescence staining in the cochleae was seen in Ad-Hath1-EGFP groups. The highest levels of gene expression were seen in the post-surgery day 5 group with little decrease on post-surgery day 14.The contralateral cochlea and those in the control groups were free of fluorescence staining. Conclusion The transgenic Hath1-EGFP can be effectively delivered into the inner ear through intact RWM, in an atraumatic manner. 展开更多
关键词 gene transfer round window membrane ADENOVIRUS guinea pig hath1
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Hath1基因抑制结肠癌细胞的增殖 被引量:3
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作者 朱代华 龚建平 +2 位作者 任柯 孙建明 魏思东 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1005-1008,1011,共5页
目的研究Hath1基因对结肠癌细胞增殖的影响。方法将重组质粒pcDNA3.1(+)-Hath1转化至HT29结肠癌细胞中,随机挑选3个过表达Hath1的HT29细胞克隆,通过定量实时RT-PCR方法检测Hath1 mRNA、Muc2mRNA的表达;Western blotting检测Hath1、Muc2... 目的研究Hath1基因对结肠癌细胞增殖的影响。方法将重组质粒pcDNA3.1(+)-Hath1转化至HT29结肠癌细胞中,随机挑选3个过表达Hath1的HT29细胞克隆,通过定量实时RT-PCR方法检测Hath1 mRNA、Muc2mRNA的表达;Western blotting检测Hath1、Muc2、cyclinD1和p27表达;通过软琼脂克隆形成实验和裸鼠移植实验,观察Hath1基因对HT29细胞增殖能力的影响。结果 Hath1基因可上调p27和下调cyclinD1的表达,抑制HT29细胞的增殖。结论 Hath1基因可能在结肠癌的发病中扮演抗癌基因的作用。 展开更多
关键词 hath1基因 结肠肿瘤 HT29 MUC2 CYCLIND1 P27
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相较正常结肠黏膜,Hath1在非粘液性结肠腺癌中的表达下调 被引量:4
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作者 朱代华 龚建平 +2 位作者 任柯 孙建明 魏思东 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期666-669,共4页
目的:研究Hath1基因在非粘液性结肠癌中的表达。方法:从48例非粘液性结肠腺癌患者的标本中取材,石蜡包埋切片,H&E染色,观察正常结肠黏膜、癌旁黏膜和结肠癌组织中杯状细胞数量的变化。用定量实时RT-PCR和Western blot的方法,检测这... 目的:研究Hath1基因在非粘液性结肠癌中的表达。方法:从48例非粘液性结肠腺癌患者的标本中取材,石蜡包埋切片,H&E染色,观察正常结肠黏膜、癌旁黏膜和结肠癌组织中杯状细胞数量的变化。用定量实时RT-PCR和Western blot的方法,检测这3种组织中Hath1蛋白和Muc2蛋白的表达。结果:在结肠癌组织中未发现杯状细胞;结肠癌组织中Hath1 mRNA、Hath1蛋白、Muc2 mRNA和Muc2蛋白的表达均显著下调。结论:Hath1基因的表达下调,可能与非粘液性结肠腺癌的发生有关。 展开更多
关键词 结肠癌 hath1基因 病因学
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真核表达载体pIRES2-DsRed2-Hath1的构建及其在HEK293T细胞中的表达 被引量:2
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作者 陈杰 高下 +3 位作者 朱敏生 张文程 麻晓峰 顾香芳 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第18期2211-2214,共4页
目的构建真核表达载体pIRES2-DsRed2-Hath1,并验证其在HEK293T细胞中的表达。方法从人的全血标本中提取DNA模板,经PCR获得Hath1-cDNA,将Hath1-cDNA和pIRES2-DsRed2质粒用限制性内切酶XhoⅠ、EcoRⅠ双酶切,酶切产物琼脂糖凝胶电泳,割胶纯... 目的构建真核表达载体pIRES2-DsRed2-Hath1,并验证其在HEK293T细胞中的表达。方法从人的全血标本中提取DNA模板,经PCR获得Hath1-cDNA,将Hath1-cDNA和pIRES2-DsRed2质粒用限制性内切酶XhoⅠ、EcoRⅠ双酶切,酶切产物琼脂糖凝胶电泳,割胶纯化,前者回收1065bp片断,后者回收大片断,再将回收的2个片断用T4DNA连接酶连接,转化感受态DH5α细胞,挑选单克隆,提取质粒,将所提取的质粒双酶切鉴定并测序。再将构建成功的pIRES2-DsRed2-Hath1质粒通过脂质体LipofectamineTM2000转染HEK293T细胞,观测其转染情况和目的基因的表达情况。结果成功地构建了真核表达载体pIRES2-DsRed2-Hath1,该质粒能有效地转染HEK293T细胞,目的基因能有效表达。结论pIRES2-DsRed2-Hath1的构建为Hath1基因转染致聋小鼠的耳蜗的实验奠定了基础。 展开更多
关键词 hath1 基因克隆 真核表达载体 脂质体
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