[目的]基于网络药理学预测红曲-山楂治疗非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的潜在分子机制,并采用蛋氨酸-胆碱缺乏NASH模型对核心信号通路之一的核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路进行实验验证。[方...[目的]基于网络药理学预测红曲-山楂治疗非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的潜在分子机制,并采用蛋氨酸-胆碱缺乏NASH模型对核心信号通路之一的核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路进行实验验证。[方法]通过中医药数据和分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)、PubChem、Swiss Target Prediction等数据库获取红曲、山楂的有效成分及靶点,运用基因组注释数据平台(Genome Annotation Database Platform,GeneCard)、在线人类孟德尔遗传(Online Mendelian Inheritance in Man,OMIM)等数据库获取NASH的疾病靶点,结合Cytoscape软件构建药物-成分-靶点拓扑图;取交集靶点并筛选核心共靶基因,应用STRING数据库构建蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络;应用Metascape进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析。建立大鼠NASH模型,通过一般情况、生化检验、苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、Masson染色、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、免疫印迹等方式验证网络药理学分析结果。[结果]通过网络药理学共筛选出18个活性成分,54个关键靶点,GO分析结果涉及炎症、代谢、自噬、肿瘤等,KEGG结果涉及NF-κB等经典信号通路。动物实验结果显示,红曲-山楂干预可显著改善NASH小鼠脂肪变性及炎症改变情况,降低组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等炎症因子水平,降低核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65、NF-κB p50、NF-κB抑制蛋白-α(inhibitor of NF-κB-α,IκB-α)基因水平,下调NF-κB p65、NF-κB p50、磷酸化NF-κB-p65(phospho-NF-κB-p65,p-NF-κB p65)蛋白的表达。[结论]红曲-山楂可能通过调控NF-κB信号通路,改善NASH模型小鼠的症状,本研究结果可为红曲-山楂的临床应用提供依据。展开更多
文摘[目的]基于网络药理学预测红曲-山楂治疗非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的潜在分子机制,并采用蛋氨酸-胆碱缺乏NASH模型对核心信号通路之一的核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路进行实验验证。[方法]通过中医药数据和分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)、PubChem、Swiss Target Prediction等数据库获取红曲、山楂的有效成分及靶点,运用基因组注释数据平台(Genome Annotation Database Platform,GeneCard)、在线人类孟德尔遗传(Online Mendelian Inheritance in Man,OMIM)等数据库获取NASH的疾病靶点,结合Cytoscape软件构建药物-成分-靶点拓扑图;取交集靶点并筛选核心共靶基因,应用STRING数据库构建蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络;应用Metascape进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析。建立大鼠NASH模型,通过一般情况、生化检验、苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、Masson染色、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、免疫印迹等方式验证网络药理学分析结果。[结果]通过网络药理学共筛选出18个活性成分,54个关键靶点,GO分析结果涉及炎症、代谢、自噬、肿瘤等,KEGG结果涉及NF-κB等经典信号通路。动物实验结果显示,红曲-山楂干预可显著改善NASH小鼠脂肪变性及炎症改变情况,降低组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等炎症因子水平,降低核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65、NF-κB p50、NF-κB抑制蛋白-α(inhibitor of NF-κB-α,IκB-α)基因水平,下调NF-κB p65、NF-κB p50、磷酸化NF-κB-p65(phospho-NF-κB-p65,p-NF-κB p65)蛋白的表达。[结论]红曲-山楂可能通过调控NF-κB信号通路,改善NASH模型小鼠的症状,本研究结果可为红曲-山楂的临床应用提供依据。
