巴西橡胶树HbMyb1基因的原位PCR物理定位

为探讨巴西橡胶树（Heveabrasiliensis）皮病抗性相关HbMyb]基因的定位，采用所建立的橡胶树染色体原位PCR技术体系进行研究。结果表明，HbMybl基因初步定位于巴西橡胶树‘热研7．33—97’的第5号染色体长臂上，信号位点到着丝粒的百分距离为15．21，并观察到在巴西橡胶树‘热研7．33．97’叶片细胞核的不同分裂时期均扩增到1～2个信号。同时对染色体标本的制备、保存、预处理等方面进行了探讨。

采用酵母双杂交法筛选HbMyb1相互作用蛋白

HbMyb1是橡胶树死皮病相关基因,为了进一步研究HbMyb1的功能,采用酵母双杂交方法,从胶乳cDNA文库中筛选出10个与HbMyb1发生相互作用的蛋白,包括已知的橡胶延伸因子和橡胶小粒子蛋白等,其中4个分别与3-羟酰基-ACP-脱氢酶、NAD-依赖的山梨糖醇脱氢酶、氧化还原酶、假定的富含亮氨酸重复蛋白具有同源性的蛋白,其余4个为未知蛋白。

巴西橡胶树死皮病相关基因Hb Myb1的结构分析及表达

对与死皮病有密切关系的HbMyb1基因进行了克隆和结构分析。该基因含有一个 34 4bp的内含子和2个外显子。利用GenomeWalker的方法获得了 1.2kb的 5′前导序列核心启动子 ,分析表明该启动子可能是富含GC和依赖于起始子 (Inr)的非典型启动子。Southern杂交分析表明 ,HbMyb1在橡胶树基因组中为2个拷贝。HbMyb1在树皮中表达最强 ,在叶片中最弱。