Aβ_(25～35)诱导阿尔茨海默病模型大鼠海马神经元HSP70的表达

目的利用β淀粉样蛋白(Aβ25～35)毒性作用诱导大鼠阿尔茨海默病(AD)模型,研究热休克蛋白70(HSP70)在海马神经元损伤中的表达。方法将大鼠随机分为2组:AD模型组、溶媒体组,在双侧海马分别注射2μl(10μg)Aβ25～35、2μl生理盐水;于海马注射第1,7,14,21天采用免疫组织化学、积分光密度分析等手段对各组大鼠脑HSP70的表达进行观察。结果AD模型组手术第7天大鼠记忆明显减退(P<0.05),且HSP70在海马神经元内表达第1天时最高,第1～21天呈递减趋势,其中第14天锐减。结论Aβ25～35通过氧化应激和损伤海马神经元等过程使HSP70的表达明显降低,HSP70表达是AD大鼠脑内神经元存活的重要标志。

карра-阿片受体激动剂心肌预处理对正常和糖尿病大鼠心脏热休克蛋白25表达的影响

目的:研究 κappa-阿片受体激动剂心肌预处理对正常和糖尿病大鼠缺血再灌注心脏热休克蛋白25(HSP25)表达的影响。方法:腹腔一次注射链脲佐菌素(STZ 65mg·kg-1)诱导大鼠糖尿病模型。正常和糖尿病大鼠分别经选择性 κappa-阿片受体激动剂U50488H(10mg·kg-1)一次股静脉注射预处理,24h后行左冠状动脉结扎缺血30min再灌注4h,取出心脏经TTC染色法,观察心肌梗死面积及蛋白印迹法观察HSP25表达改变。结果:正常大鼠经U50488H预处理比未经过预处理的心肌梗死面积减小,HSP25表达增加。糖尿病大鼠经U50488H预处理后与未经过预处理的比较,心肌梗死面积和HSP25表达均无变化。结论:在糖尿病大鼠U50488H预处理失去诱导HSP25表达的作用可能与其心脏保护作用的消失有关。

热休克蛋白25在大鼠牙囊细胞中的表达及生物学意义

目的检测不同出生时间段以及体外培养大鼠牙囊细胞中热休克蛋白25（heatshock protein25，HSP-25）的表达，探讨其对牙囊细胞增殖和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）活性的影响，进一步了解HSP-25在牙齿发育中的作用。方法免疫组化法检测HSP-25在出生后第1、3、5、7、9、11天的SD大鼠下颌第一磨牙牙囊中的表达情况；间接免疫荧光法检测HSP-25在体外培养的大鼠牙囊细胞中的表达；甲基噻唑基四唑（MTT）法和流式细胞术分别检测不同质量浓度的重组鼠HSP-25刺激牙囊细胞增殖及细胞周期的变化，并检测ALP活性的变化。结果HSP-25在出生早期大鼠牙囊细胞内不表达或弱表达，第5天时表达增强并维持到第11天。HSP-25在牙囊细胞的胞质中呈阳性表达。MTF法结果显示不同质量浓度的HSP-25刺激牙囊细胞1、2、3d后细胞增殖无明显差异，流式细胞仪结果显示0和100μg/L HSP-25刺激牙囊细胞3d后细胞周期无明显差异。50和100μg／L HSP-25刺激牙囊细胞9d后ALP活性达到最高[A值分别为（1．6±0．3）、（1．8±0．2）]。结论HSP-25在出生早期的大鼠牙囊细胞中无表达，之后随时间变化表达逐渐增强；HSP-25在体外培养的大鼠牙囊细胞胞质中表达；不同质量浓度HSP-25对大鼠牙囊细胞增殖无影响，高质量浓度HSP-25可刺激牙囊细胞ALP活性增高。

乙型肝炎肝硬化合并2型糖尿病患者血清热休克蛋白70、可溶性程序性死亡蛋白1和25-羟基维生素D_(3)水平与预后的相关性研究

目的探讨乙型肝炎肝硬化(HBLC)合并2型糖尿病(T2DM)患者血清热休克蛋白70(HSP70)、可溶性程序性死亡蛋白1(sPD-1)、25-羟基维生素D_(3)[25(OH)VD_(3)]的表达及对预后的评估价值。方法回顾性分析2018年6月至2019年11月浙江普陀医院97例HBLC合并T2DM患者(HBLC合并T2DM组)、105例单纯HBLC患者(HBLC组)和118例单纯T2DM患者(T2DM组)的临床资料。比较三组血清HSP70、sPD-1和25(OH)VD_(3)水平,分析其与肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)]、血糖[空腹血糖(FBG)和糖化血红蛋白(HbAlc)]的相关性。并根据HBLC合并T2DM患者治疗6个月后的预后分为预后不良(28例)和预后良好(69例),比较两者HSP70、sPD-1、25(OH)VD_(3)和肝功能Child-Pugh分级;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析HSP70、sPD-1和25(OH)VD_(3)对HBLC合并T2DM患者预后的评估效能。结果HBLC合并T2DM组HSP70和sPD-1明显高于HBLC组和T2DM组[(4.28±1.19)μg/L比(2.27±0.76)和(2.40±0.84)μg/L、(7.86±2.45)ng/L比(4.23±1.62)和(3.85±1.27)ng/L],25(OH)VD_(3)明显低于HBLC组和T2DM组[(13.62±3.96)μg/L比(18.63±6.11)和(17.45±4.36)μg/L],差异有统计学意义(P<0.05);HBLC组与T2DM组比较差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关分析结果显示,在HBLC合并T2DM患者中,HSP70和sPD-1与ALT、AST、FBG、HbAlc呈正相关(P<0.01),25(OH)VD_(3)与ALT、AST、FBG、HbAlc呈负相关(P<0.01)。在HBLC合并T2DM患者中,预后不良患者HSP70、sPD-1和Child-Pugh分级B级率明显高于预后良好者[(6.03±1.63)μg/L比(3.57±1.02)μg/L、(9.86±1.59)ng/L比(7.05±2.62)ng/L和71.43%(20/28)比30.43%(21/69)],25(OH)VD_(3)明显低于预后良好患者[(9.26±3.02)μg/L比(15.39±5.84)μg/L],差异有统计学意义(P<0.01或<0.05)。ROC曲线分析结果显示,HSP70、sPD-1和25(OH)VD_(3)联合预测HBLC合并T2DM预后的曲线下面积最大,为0.890,灵敏度和特异度分别为89.29%和79.71%。结论HBLC合并T2DM患者血清HSP70、sPD-1明显升高,25(OH)VD_(3)明显降低,并与肝功能、血糖存在良好线性关系,早期联合检测HSP70、sPD-1和25(OH)VD_(3)可为临床对症治疗、预后评估提供新思路。

电针与艾灸对内脏高敏感大鼠穴区辣椒素受体和热休克蛋白70表达的影响及镇痛效应

目的:探讨电针与艾灸对内脏高敏感大鼠穴区辣椒素受体1(VR 1)和热休克蛋白70(HSP 70)表达的影响及其镇痛效应是否存在差异。方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸43℃组、艾灸46℃组、电针1mA组、电针3mA组,每组各10只。采取直结肠扩张(CRD)的方法制备内脏高敏感模型。艾灸和电针分别刺激"天枢"穴,每日1次,连续10d。腹部撤回反射(AWR)评分评价大鼠对直肠内不同程度扩张刺激的敏感性,免疫组化法观察穴区VR 1、HSP 70的表达。结果:在20、40、60、80mmHg CRD刺激下,模型组AWR评分均显著升高(P<0.01),艾灸43℃组、艾灸46℃组、电针1mA组、电针3mA组与模型组相比AWR评分均显著降低(P<0.01,P<0.05);艾灸46℃组在40、80mmHg时评分低于电针1mA组(均P<0.05),在40mmHg时评分低于电针3mA组(P<0.05)。模型组穴区VR 1、HSP 70的表达与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05);艾灸43℃组、艾灸46℃组穴区VR 1的表达较模型组、电针1mA组、电针3mA组均显著升高(P<0.01),且艾灸46℃组显著高于艾灸43℃组(P<0.01);艾灸43℃组、艾灸46℃组和电针1mA组、电针3mA组穴区HSP 70的表达均较模型组显著升高(P<0.01),其中艾灸46℃组明显高于其他各组(P<0.01)。结论:43℃、46℃不同温度艾灸和1mA、3mA不同强度电针刺激均可不同程度地改善/升高内脏高敏感模型大鼠的痛阈,其中以46℃艾灸的效应最为显著;这种镇痛效应与其能在一定程度上激活穴区VR 1和HSP 70表达有关。