豆腐果苷对Aβ_(1-42)诱导阿尔茨海默病模型大鼠认知功能的影响

目的:探究豆腐果苷(HEL)对β淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))诱导阿尔茨海默病(AD)大鼠认知功能的影响。方法:24只SPF级健康雄性SD大鼠随机分成生理盐水(NS)组、Aβ_(1-42)+NS组、Aβ_(1-42)+HEL组、HEL组,每组6只。通过脑立体定位双侧海马区注射Aβ_(1-42)(5μg/μL)建立AD模型,注射3 d后Aβ_(1-42)+NS组和Aβ_(1-42)+HEL组分别给予生理盐水和豆腐果苷(50 mg/kg)灌胃治疗4周;作为对照,NS组和HEL组分别给予生理盐水和豆腐果苷(50 mg/kg)灌胃4周。治疗结束后通过Morris水迷宫实验对各组大鼠行为、认知能力进行评估;通过HE染色检测各组大鼠海马CA1区细胞的形态变化;采用免疫组化检测大鼠海马CA1区核因子-κB(NF-κB)表达情况;免疫印迹检测大鼠海马中淀粉前体样蛋白(APP)、NF-κB、肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达水平。结果:(1)与NS组相比,Aβ_(1-42)+NS组大鼠逃逸潜伏期明显延长,穿越原平台次数和停留在原平台象限的时间均显著降低;海马CA1区细胞形态发生明显核固缩;APP、NF-κB、TNF-α表达显著升高(P<0.05)。(2)与Aβ_(1-42)+NS组相比,Aβ_(1-42)+HEL组大鼠逃逸潜伏期明显缩短,穿越原平台次数和原平台所在象限停留时间均明显增多。(3)海马CA1区细胞核固缩得到良好改善;APP、NF-κB、TNF-α表达明显降低(P<0.05)。(4)NS组和HEL组大鼠Morris水迷宫结果无显著差异,APP、NF-κB和TNF-α蛋白在海马CA1区均无明显变化。结论:豆腐果苷能够改善Aβ_(1-42)诱导AD大鼠认知功能,可能与抑制APP、NF-κB及TNF-α的蛋白表达有关。

豆腐果苷对关节失稳模型骨关节炎的作用及机制

目的研究豆腐果苷对关节失稳模型骨关节炎(osteoarthritis,OA)的治疗作用,探讨豆腐果苷治疗OA的作用机制。方法通过切除大鼠膝关节内侧半月板的方法(medial meniscectomy,MMx)建立OA大鼠模型。术后给予豆腐果苷治疗后,通过HE和番红O-固绿染色法观察膝关节软骨组织的组织病理学变化;免疫组化法检测膝关节软骨和滑膜组织中瞬时受体电位香草酸亚型1(Trpv1)表达;Western blot法检测大鼠膝关节滑膜组织中Trpv1蛋白的表达情况。结果HE和番红O-固绿染色法显示,豆腐果苷治疗明显减缓膝关节软骨的退变情况。免疫组化结果显示,豆腐果苷明显降低膝关节软骨和滑膜中Trpv1蛋白的表达水平;Western blot结果证实豆腐果苷下调膝关节滑膜组织中Trpv1蛋白的表达量。结论豆腐果苷能明显抑制MMx诱导的关节软骨的破坏和软骨基质的丢失,从而发挥治疗OA作用。

母鼠妊娠期服用豆腐果苷对仔代的神经行为效应

目的 应用神经行为畸胎学方法评价豆腐果苷对大鼠仔代的神经行为毒性。方法 妊娠 6～ 15 d大鼠采用豆腐果苷 0 ,2 7,2 70 ,135 0 mg/kg· d剂量连续 ig染毒 ,17只孕鼠自然分娩。观察母鼠妊娠期和分娩后的生理、生育指标 ;16 0只仔鼠出生后的体重增长、早期生理发育和神经行为发育指标 ;随机选择 32只仔鼠于 10周龄时进行自动化操作行为测试。此外 ,对 10周龄仔鼠 2 4只进行脑组织的光镜观察和单胺类神经递质 (去甲肾上腺素、多巴胺、5 -羟色胺 )的测定。整个实验采用双盲法。结果 未观察到豆腐果苷对大鼠的母体毒性 ;3个剂量组仔鼠的体重增长、早期生理发育及神经行为发育与对照组相比无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;操作行为测试中 ,仔鼠学习记忆能力无性别差异 ,3个剂量组仔鼠的学习成绩与对照组相比均无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;与对照组相比 ,各剂量组仔鼠脑组织均未观察到明显的形态学改变 ,脑神经递质含量也未见异常 (P>0 .0 5 )。结论 未观察到胚胎期服用豆腐果苷对大鼠仔代神经系统的早期发育。

豆腐果苷对大鼠仔代的早期神经行为毒性

目的 :探讨胚胎期豆腐果苷接触对大鼠仔代早期神经行为发育的毒性。方法 :3月龄Wistar大鼠♀ 32只 ,♂ 8只以3∶1交配 ,于孕鼠妊娠第 6～ 15日采用豆腐果苷 0 ,2 7,2 70 ,135 0mg/kg/d剂量经口灌胃染毒。观察母体毒性、16 0只仔鼠出生后生理发育指标 :体重增长、张耳、门牙萌出、开眼、睾丸下降、阴道开启等 ;仔鼠早期神经发育指标 :断崖回避、平面翻正、前肢悬挂、空中翻正、听觉惊愕、视觉定位等。结果 :4个实验组均未观察到母体毒性 ;3个剂量组仔鼠的体重增长、生理发育及早期神经行为发育等指标与对照组相比无差异 (P >0 .0 5 )。结论 :豆腐果苷对大鼠仔代的早期生理发育及中枢神经系统的发育没有影响。

[α-(2-氧代烷基)-α-(取代苯胺基)甲基苯基]-β-D-吡喃阿洛糖苷的合成及镇静活性研究

以豆腐果苷为原料,通过Mannich反应与取代苯胺和脂肪酮共合成了七个豆腐果苷衍生物,均未见文献报道.其结构经1HNMR,IR,MS和HRMS确认,并进行了药理活性筛选.结果表明,部分化合物均具有良好的镇静活性.其中,化合物2a(200mg/kg),2b(200or100mg/kg)和2e(200mg/kg)与豆腐果苷相比较,具有更强的疗效.

豆腐果苷对人孕烷X受体介导的CYP3A4和MDR1的转录调节作用

目的:建立和验证人孕烷X受体(human pregnant X receptor,hPXR)介导的CYP3A4、MDR1药物诱导剂的体外筛选体系,考察豆腐果苷对hPXR介导的CYP3A4、MDR1的转录调节作用。方法:利用构建的双荧光素酶报告基因系统,将表达载体和报告载体共转染HepG2细胞,以10μmol/L利福平为阳性对照,用不同浓度(0.004、0.04、0.4μmol/L)豆腐果苷处理48h后裂解细胞进行双荧光素酶活性检测。结果:不同浓度的豆腐果苷均不能通过激活hPXR来介导CYP3A4和MDR1表达上调,各浓度处理组的双荧光素酶比活性值与DMSO溶媒组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:成功构建了hPXR介导的CYP3A4和MDR1药物诱导剂的体外筛选体系,并发现豆腐果苷不能通过激活hPXR介导CYP3A4和MDR1的表达上调。

2-(4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯基)-4-芳基-2,3-二氢-1,5-苯并硫氮杂的合成及镇静活性的研究

以豆腐果苷为原料,与4-取代苯乙酮发生Claisen-Schimidt反应,得到一系列E-4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯乙烯基-4-取代苯酮衍生物1a～1e,再将1a～1e与邻氨基苯硫酚发生1,4-Michael反应,得到2-(4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯基)-4-芳基-2,3-二氢-1,5-苯并硫氮杂衍生物2a～2e,以上化合物均未见文献报道,其结构经1H NMR,IR,MS加以确证,并对2a～2e进行了药理活性筛选.结果表明,部分化合物具有良好的镇静活性.其中,化合物2a(200mg·kg-1),2b(200mg·kg-1),2c(200mg·kg-1),2d(200mg·kg-1),2e(200mg·kg-1)与豆腐果苷相比较具有更强的活性.

1-烃基-2-(4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯基)-苯并咪唑类化合物的合成及其镇静活性的研究

以豆腐果苷为原料,在冰醋酸催化下和邻苯二胺缩合生成中间体2-(4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯基)-苯并咪唑(2),2与卤代烃在K2CO3作用下以乙醇为溶剂合成了一系列1-烃基-2-(4-β-D-吡喃阿洛糖苷-苯基)-苯并咪唑类化合物3a～3h.新化合物2和3a～3h的结构经1H NMR,IR和MS(HRMS)确认,并对2和3a～3h进行了药理活性筛选.结果表明,部分化合物具有良好的镇静活性;其中化合物2(100mg·kg-1),3f(100mg·kg-1)与豆腐果苷相比较具有更强的药理活性.

豆腐果苷对慢性应激小鼠行为学的影响

目的:研究豆腐果苷对慢性应激抑郁小鼠行为学的影响。方法:连续28d给予小鼠慢性不可预见性的刺激与孤养,建立小鼠抑郁模型,同时给予豆腐果苷(40、20、10mg/kg,i.g.)或盐酸氟西汀(2.6mg/kg,i.g.),采用敞箱试验、蔗糖饮水实验及情绪性行为评分等观察豆腐果苷的抗抑郁行为效应。结果:豆腐果苷可逆转慢性应激小鼠自发活动减少,糖水偏爱度降低,情绪性行为评分及体重的降低。结论:豆腐果苷对慢性应激小鼠具有抗抑郁作用。

豆腐果苷在大鼠体内代谢的初步研究

豆腐果苷（helicid,对苯甲醛-O-β-D-阿洛吡喃糖苷）是从我国西南少数民族植物药物豆腐渣果中提取的有效成分。基于药效学实验的基础,我们对豆腐果苷进行了动物体内的药动学研究,发现如下问题：（1）物料不平衡：豆腐果苷原药在大鼠尿、粪和胆汁中24 h的总排泄量约为给药量的5%,提示约有95％豆腐果苷在体内代谢消除。

豆腐果苷在大鼠体内的药动学研究

目的：建立RP-HPLC测定大鼠血浆中豆腐果苷（helicid，HD）浓度的方法，研究HD在大鼠体内的药动学。方法：Wistar雄性大鼠15只，随机分为3组，尾静脉注射HD（0．223，0．496，0．67mg·kg-1），不同时间点尾静脉取血，血浆样品用6％高氯酸沉淀蛋白后，上清液进样，采用反相C18色谱柱，检测波长270nm。结果：HD在43．8—43800μg·L^-1呈良好线性关系（r=0．9998），日内和日间精密度RSD均小于6％，提取回收率大于87％。静注3个剂量的药-时曲线符合二室模型，分布半衰期分别为4．582，5．097和4．727min，消除半衰期分别为23．945，26．508和25．396min，分布容积分别为36．1，35．1，35．0mL。AUC与剂量之间线性相关。结论：在考察浓度范围内，HD在大鼠体内符合线性动力学过程。

三维打印技术制备豆腐果苷零级控释片研究

目的:应用三维打印技术制备豆腐果苷零级控释片。方法:通过对片剂局部组成及结构进行选择与设计,利用三维打印技术制备了豆腐果苷馅饼型多层控释片,并对所制备的片剂进行常规分析、结构分析及体外释药试验。结果:控释片的各项性能符合相关标准;ESEM显示药片不同部分的结构与组成有差异;体外溶出实验表明三维打印技术制备的控释片中95.29的豆腐果苷在7个小时内能以零级速率释放。结论:三维打印技术能应用于豆腐果苷片研究开发中。

三维打印技术制备控释药片工艺研究

目的:研究三维打印工艺对控释片中豆腐果苷释放的影响。方法:利用三维打印技术,通过对成形工艺参数:粉末中的骨架材料、黏结剂种类、粉末铺层厚度、喷涂次数、分区设置、孔径等的变化制备了不同的馅饼型多层豆腐果苷控释片,通过体外溶出试验,分析各参数对豆腐果苷释放的影响。结果:体外溶出实验表明三维打印技术在合理的分区设置与孔径大小情况下,能够通过黏结剂的选择、喷涂层厚的变化、喷涂次数的调节等多种方式调节馅饼型零级控释片的释药周期。结论:三维打印工艺过程在制备控释片上具有高度的灵活性和有效性。

豆腐果苷口腔崩解片的制备

目的以微晶纤维素(MCC),交联聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)和泡腾剂(碳酸氢钠与枸橼酸比例为1∶1.2)为崩解剂制备豆腐果苷口腔崩解片。方法采用粉末直接压片法制备,运用星点设计-效应面法进行处方优化,并对药物体外溶出进行评估。结果以MCC,PVPP和泡腾剂含量为自变量,体外崩解时间为因变量进行二次多项式拟合,结果表明,拟合的效果较好,较优处方为MCC 5.4%、PVPP 5.8%、泡腾剂12%。与市售普通片比较,口腔崩解片具有明显速释效果。结论将豆腐果苷制成口腔崩解片能显著提高其体外溶出速度。

生物黏附性神衰果素缓释片体外释放度及组织黏附力研究

目的研究生物黏附性神衰果素缓释片的体外释放度及释药规律,并测定其体外黏附力。方法采用转篮法,以900mL水为释放介质,转速100 r.min-1测定其累积释放度,用多种数学模型对释放曲线进行拟合,根据各模型拟合的AIC值、计算值与真实值的绝对误差以及相对误差确定最优模型。以自制黏附力测定装置测定了生物黏附性缓释片的大鼠离体胃、小肠组织的黏附力。结果缓释片以Higuchi,Ritger-Peppas模型拟合皆佳,在大鼠离体胃、小肠组织的黏附力分别为6.1,13.2 kPa。结论生物黏附性神衰果素缓释片的释药参数n=0.619 9,药物的释放是通过扩散和凝胶骨架溶蚀两种机制协同作用的结果;在大鼠离体胃、小肠组织均具有黏附作用,且在小肠组织的黏附作用强于胃。

神衰果素亲水凝胶缓释骨架片的制备及释药机理的研究

目的 制备神衰果素亲水凝胶缓释骨架片。方法 以羟丙基甲基纤维素(HPMC)作为缓释材料.采用粉末_直接压片工艺制备神衰果素亲水凝胶缓释骨架片,考察HPMC的用量、规格、不同的释药条件对释药速率的影响,并对释药机制作了初探。结果 神衰果素亲水凝胶缓释骨架片的体外释药为非Fick扩散,HPMC的用量对药物的释放有较大影响,而HPMC的规格,释放介质的pH值对药物释放影响不大。结论 以HPMC作为缓释材料,采用粉末直接压片法制备神衰果素亲水凝胶缓释骨架片,工艺简单.体外缓释效果好。

平衡透析法考察豆腐果苷血浆蛋白结合率:种属差异研究（英文）

糖苷类化合物豆腐果苷在人与大鼠体内处置过程存在种属差异。药物血浆蛋白结合率是决定药物整体分布、排泄、活性及毒性的重要决定过程。本文旨在应用平衡透析法评价蛋白结合率差异在豆腐果苷种属差异中的作用。研究采用HPLC-ESI-MS方法进行检测,并对试验中的一些影响因素进行了优化。在试验中的四个浓度下,大鼠血浆蛋白结合率在10.33%-11.03%,人血浆蛋白结合率在10.60%-10.98%。结果表明人与大鼠药代动力学参数的差异不是由蛋白结合率的差异所导致。这是有关豆腐果苷蛋白结合率相关研究的首次报道。

4-取代亚甲基苯基-β-D-吡喃阿洛糖苷的合成及其镇静活性

目的寻找更多具有镇静活性的潜在药物。方法以豆腐果苷为原料,通过其醛基与甲基酮Shimdt-Claisen缩合、与肼类、胺类缩合得到新的化合物,并进行了药理活性筛选。结果和结论共合成了14个豆腐果苷衍生物,均未见文献报道。其结构经1HNMR,IR和MS(HRMS)确认。药理证明所合成的化合物均具有镇静活性,其中部分化合物具有良好的镇静活性。

豆腐果苷对慢性神经病理性疼痛大鼠热痛觉过敏及脊髓背角p-CREB表达的影响

目的：观察豆腐果苷（helicid）对坐骨神经慢性压迫伤（CCI）后大鼠热痛觉过敏的影响及对脊髓背角磷酸化cAMP反应元件结合蛋白（phosphorylated cAMP response element binding protein,p-CREB）表达的影响。方法：32只180～220 g Wistar雄性大鼠随机分为4组（n=8）;分别为Sham组（假手术组）、CCI组（CCI模型组）、H1组（CCI 10天后豆腐果苷,25 mg·kg^-1·d^-1×10 d灌胃）和H2组（CCI 10天后豆腐果苷,50 mg·kg^-1·d^-1×10d灌胃）。4组分别于CCI手术前1天、CCI手术后1、3、5、7、9、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20天进行热板实验、测后肢回缩时间（PWL）。CCI后20天取L4、5脊髓,免疫组织化学染色,计数p-CREB免疫反应阳性（p-CREB-IR）神经元数量。结果：第一部分：CCI手术后第9天,Sham组、CCI组、H1组、H2组分别与术前PWL基础值比较,Sham组无差异（P〉0.05）,CCI组、H1组、H2组均有差异（P〈0.05）,且下降达30（以上;CCI手术后第9天,CCI组、H1组、H2组分别做PWL值组间两两比较均无差异（P〉0.05）,证实CCI模型制作成功。给药后第1～10天,H1组、H2组分别与CCI组做组间比较,PWL值增高,H2组第3天已有差异,H1组第5天开始有差异,两组PWL值增高至第7天达峰值,后一直保持稳定,H2组较H1组保持较高水平。第二部分：脊髓背角p-CREB免疫反应阳性神经元细胞计数比较：与Sham组比较,CCI组、H1组和H2组计数明显升高,有差异（P〈0.01）;H1组和H2组分别与CCI组比较,数量较之为少（P〈0.01）;H1组计数稍大于H2组,但无差异;即CCI〉H1〉H2〉Sham组。结论：口服豆腐果苷能剂量依赖性提高CCI大鼠热痛阈值,降低热痛觉过敏,并与影响脊髓背角p-CREB的表达有关。

3-(4-β-D-吡喃阿洛糖苷苯基)-4-胺羰基-5-甲氧羰基异噁唑衍生物的合成及其镇静活性的研究

4-(β-D-吡喃阿洛糖苷)-α-氯代苯甲醛肟与N-芳基马来酰亚胺在三乙胺作用下,以甲醇为溶剂,通过1,3-偶极环加成,合成了一系列未见文献报道的3-(4-β-D-吡喃阿洛糖苷苯基)-4-胺羰基-5-甲氧羰基异噁唑衍生物;其结构经1HNMR,IR,MS(HRMS)加以确证.并对4a～4h和5a进行了药理活性筛选,结果表明,部分化合物具有良好的镇静活性.其中,化合物4b(200mg?kg-1),4c(200mg?kg-1),4h(200mg?kg-1),与豆腐果苷相比较具有更强的活性.