Expression,purification and immunocharacteristics of recombination UreB protein of H.pylori

INTRODUCTIONHelicobacter pylori (H . pylori) is associated with the development of chronic gastritis ,peptic ulcer and gastric cancer and gastric MALT lymphoma[1-9],H .pylori has many antigens ,including urease ,heat shock protein and vacuolating cytotoxin and so on ,and urease is an important factor in the colinization of the gastric mucosa and suspected to cause damage to the gastric mucosa[10-14].At the same time ,urdase is also one of the important protective antigens .

幽门螺杆菌尿素酶C基因的克隆及测序

目的用PCR方法扩增幽门螺杆菌(Hp)尿素酶C基因,以构建Hp UreC基因的重组克隆,为进一步表达Hp UreC基因的重组蛋白质并研究其功能奠定基础。方法以Hp临床菌株总DNA为模板,根据已发表的HpUreC基因序列设计引物(位于588bp～605bp和1737bp～1754bp),采用PCR方法扩增出一个1173bp的Hp尿素酶C基因片段,用BamHⅠ及EcoRⅠ双酶切后将其克隆入测序质粒pGEM-3Zf(-)中,以全自动测序仪双向测定目的片段序列,借助于DNA TOOL 5.1拼接成完整序列,与已知的Hp UreC基因序列做比较。结果所得核酸序列与报道的Hp国际标准菌株M60398的UreC基因同源性为95％,根据测序结果推断其编码的氨基酸序列,并行BLAST分析,发现它与标准菌株M60398的氨基酸序列同源性为97％。结论成功构建了Hp UreC基因的重组克隆,为进一步研究表达Hp UreC基因的重组蛋白质并研究其功能奠定了基础。

幽门螺杆菌感染与进展期胃腺癌相关性研究

目的研究幽门螺杆菌（Hp）感染与胃癌的相关性。方法68例进展期胃腺癌与60例年龄、性别相匹配的食管癌（对照组）均经内镜检查确诊．应用ELISA法检测血清Hp抗体及尿素酶试验来确定Hp感染；并检测血液和胃液过氧化氢酶（CAT）和丙二醛（MDA）水平．结果胃癌组Hp检出率为57．1％高于对照组检出率35％（P＜0．01）；肠型和弥漫型胃癌Hp检出率分别为62％与56％（P＞0．05）；Hp检出率尤以胃窦部为最高达70％．两组血液CAT水平（Ku／L）为219．41±10．6与199．26±11．2及MDA水平（nmol／mL）为3．96±0．26与4．12±0．25（P＞0．05；P＞0．05）；Hp相关的胃癌两亚组胃液CAT（Ku／L）水平为110．40±8．0与276．6±13．1及MDA水平（nmol／mL）为0．69±0．42与0．43±0．14（P＜0．05；P＜0．05）结论Hp感染与进展期胃腺癌具有相关性；与胃癌两亚型均相关；Hp感染诱导自由基对胃粘膜的损害可能在胃粘膜癌变过程中起重要作用。

上消化道疾病幽门螺杆菌感染临床分析

目的调查分析上消化道疾病幽门螺杆菌（Hp）感染情况．方法经内镜胃窦活检粘膜用快速尿素酶测定法及细菌学涂片法对3318例受检者检测Hp，而后对各种上消化道疾病Hp阳性率进行临床分析．Hp感染评判标准：上述二项检测法中凡有一项阳性即为Hp阳性；二项均阴性则为Hp阴性．结果3318例受检者中慢性活动性胃炎847例，慢性非活动性胃炎1213例，活动性十二指肠溃疡597例，愈合期十二指肠溃疡198例，活动性胃溃疡187例，愈合期胃溃疡44例，复合性溃疡77例，胃癌34例，残胃53例，正常胃粘膜68例．其Hp阳性率分别为81．7％，22．3％，76．7％，61.6％,68．5％，50％，74％，41．2％，32％，29％．统计结果显示，慢性活动性胃炎、消化性溃疡及胃癌的Hp阳性率明显高于慢性非活动性胃炎．X2检验P＜0．05．差异有高度显著性．结论本文证实慢性活动性胃炎、消化性溃疡及胃癌与Hp感染密切相关．

口腔唾液幽门螺杆菌与功能性消化不良

目的探讨口腔唾液中Hp与功能性消化不良（FD）的关系，为Hp感染防治提供依据．方法87例FD患者内镜检查前用一次性容器收集唾液标本，内镜检查时取幽门前区粘膜活检标本作革兰染色光镜检查和快速尿素酶试验．唾液Hp检测采用美国MJ公司PTC-100扩增仪和上海复星生物有限公司Hp-PCR试剂盒．结果87例FD患者胃粘膜革兰染色和快速尿素酶试验均阳性45例（51．7％），阴性42例（48．3％）．阳性患者唾液Hp-PCR阳性18例（40％），阴性患者无一例唾液Hp-PCR阳性．FD不同临床类型唾液Hp-PCR阳性检出率依次为胃食管反流型32．5％（13／40），溃疡型17．6％（3／17），动力紊乱型6.7％（2／30），经统计学处理唾液Hp检出率胃食管及流型与溃疡型无显著差异（P＞0．05），与动力紊乱型差异显著（P＜0．01）．结论①FD患者口腔唾液中检出Hp，证明Hp可通过胃食管反流入口腔，且随时可能将Hp重新吞入，引起胃粘膜再感染和损伤．因此，根除Hp除选择敏感药物外，必须同时治疗消化不良，尤其是控制胃食管及流症状，否则Hp感染者就难以得到根治．②唾液中检出Hp，进一步证实Hp可通过唾液或口-口接触传播．由此可见，控制胃食管反流症状，保持口腔清洁卫生，改变国人的共餐饮食传统习惯，对阻止Hp人-人传播具有重要现实意义．

聚合酶链反应检测胃粘膜及唾液幽门螺杆菌

目的采用ＰＣＲ技术探讨从唾液中检测Ｈｐ的可能性，并与其它常用检测方法比较，观察Ｈｐ检出率与胃炎程度的关系．方法住院患者１２２例，男８８例，女３４例，年龄１７岁～８２岁，平均５３６岁．其中经内镜检查十二指肠球部溃疡５３例，胃溃疡２１例，复合性溃疡１３例，慢性胃炎３５例．检查前２周均未服用铋剂、质子泵抑制剂和抗生素．内镜检查前取唾液２ｍｌ，内镜下于胃体及胃窦部取活检组织各３块分别行ＰＣＲ，快速尿素酶试验，Ｇｉｅｍｓａ染色找Ｈｐ．各方法间Ｈｐ检出率的比较采用二样本的Ｕ检验；胃炎级别与Ｈｐ感染程度间的比较用双向有序行×列表资料的χ２检验．结果ＰＣＲ法同步检测１０５例患者，唾液标本６例Ｈｐ阳性（５７１％）；胃粘膜标本６４例Ｈｐ阳性（６０９５％），显著高于Ｇｉｅｍｓａ法４９２％，但低于尿素酶７５０％．若以尿素酶、Ｇｉｅｍｓａ法同时阳性为准，唾液中Ｈｐ阳性率１１８％（６／５１），胃粘膜ＰＣＲ阳性率为８７５％；假阳性率：唾液为０％，胃粘膜２２２％．ＰＣＲ法胃粘膜Ｈｐ检出率依次为重度胃炎８３３％，中度胃炎６９８％，轻度胃炎４２２％．三者间比较Ｐ＜００５；Ｇｉｅｍｓａ染色法还显示组织学胃粘膜炎症程度与Ｈ?

慢性胃炎患者治疗前后胃内幽门螺杆菌的分布特点

目的研究根除治疗前后幽门螺杆菌在胃内的分布特点．方法有消化道症状，Ｈｐ＋慢性胃炎患者９０例，其中男５２例，女３８例，年龄１９岁～７４岁，平均４４岁．采用ＣＢＳ，ＦｕＺ，Ｍｅｔ三联治疗２ｗｋ，在根除治疗前及治疗结束４ｗｋ后从胃底、胃体、角切迹、幽门前大弯侧多部位取活检，以ＷａｒｔｈｉｎＳｔａｒｙ染色检测Ｈｐ，ＨＥ染色观察局部胃炎程度．结果三联治疗前Ｈｐ呈全胃分布，各部位Ｈｐ阳性率无明显差异（Ｐ＞００５），但Ｈｐ数量和胃炎程度各部位有差异，且有明显相关性（ｒ＝０９４８），以角切迹Ｈｐ数量最多，胃炎程度最重，局灶性萎缩、活动性胃炎的发生率亦最高．２２例根除治疗后Ｈｐ仍阳性患者，以胃底检出率最高（９０９％），角切迹最低（３１８％），两部位相比有显著差异（χ２＝１４４，Ｐ＜００１）．结论角切迹是治疗前Ｈｐ的最佳检测部位，胃底是治疗后Ｈｐ的最佳检测部位．