Wnt、Notch信号参与造血微环境调控造血机制的研究

目的探讨造血发育过程中Wnt和Notch信号通路参与造血微环境调控造血的机制。方法磁珠分选法分离小鼠骨髓c—kit^＋造血干／祖细胞（HSPC）。贴壁培养法分离小鼠孕10．5d主动脉-中肾-肾上腺（AGM）区，孕12．5d、14．5d、16．5d胎肝以及骨髓来源的基质细胞。通过Transwell共培养以及流式细胞术计数．比较不同来源基质细胞支持HSPC增殖的能力。通过实时定量PCR和免疫荧光动态检测各发育阶段基质细胞中Wnt、Notch mRNA和蛋白的表达。结果体外培养7d，AGM区和胎肝基质细胞培养体系中c-kit^＋细胞数由0．4×10^5／孔分别扩增为（19．2±3．2）×10^5／孔和（26．8±5．4）×10^5／孔．明显高于骨髓基质细胞培养体系的（9．6±2．9）×10^5／孔（P〈0．05）；其中，AGM区和骨髓基质细胞培养体系中c—kit^＋细胞比例分别为（75．2±7．1）％和（74．1±6．2）％，明显高于胎肝基质细胞培养体系的（63．4±5．3）％（P〈0．05）=Wnt、Notch在各阶段基质细胞均有表达，Wnt在ACM区和胎肝基质细胞表达水平较高，Notch在AGM区及骨髓基质细胞表达水平较高（P〈0．05）、结论造血发育过程中，造血微环境通过Wnt与Notch信号通路协作、交替、整合，精密调控HSPC的发育．