血红蛋白Constant Spring复合血红蛋白H病的研究

目的 :分析血红蛋白ConstantSpring复合血红蛋白H病与缺失型HbH病患儿临床表现的差异并简要探讨其原因。方法 :运用基因芯片技术对缺失型HbH病患儿及HbCS复合HbH病患儿进行诊断。结果 :HbCS复合HbH病患儿有明显的地贫外貌 ,肝、脾肿大 ,体格发育障碍以及严重的贫血 ,其平均红细胞容积 (MCV)增大 ,低色红细胞比例增高 ,网织红细胞比例增高。结论 :HbCS复合HbH病患儿的临床表现比缺失型HbH病患儿严重 ,αCS链的聚集可加剧骨髓中红细胞的无效生成及外周血中红细胞的溶血。

全自动毛细管电泳技术筛查血红蛋白Constant Spring结果分析

目的:应用全自动毛细管血红蛋白电泳技术筛查血红蛋白Constant Spring(Hb CS),了解黔南地区人群Hb CS的携带率。方法:黔南地区地中海贫血防控项目县定点医疗机构对红细胞参数进行初筛分析。法国Sebia Capillarys2fl ex piercing型全自动毛细管电泳仪及配套试剂进行血红蛋白组分分析,检测Hb CS。结果:在14296例样本中,共检出Hb CS阳性147例(1.03%);146例为Hb CS携带者,1例为Hb CS-H病。结论:通过大人群筛查报道的黔南地区人群Hb CS的携带率,可见全自动毛细管血红蛋白电泳技术在Hb CS的筛查中具有重要价值。

广东惠州地区609例血红蛋白Constant Spring的血液学与基因型分析

目的分析血红蛋白Constant Spring(Hb CS)基因型和血液学表型的关系。方法使用血细胞分析仪和全自动毛细管电泳仪检测Hb CS携带者的血液学指标。采用悬浮阵列技术检测α和β地中海贫血基因。结果广东惠州地区人群Hb CS发生率为0.798%。Hb CS杂合子在临床上可无症状和血液学表型,但合并其它地贫基因突变时可加重血液学表型。当Hb CS合并--^(SEA)时表型最重,表现为Hb H病特征;Hb CS合并β地贫表现为β地贫特征,不能电泳出Hb CS波峰;Hb CS-H病合并β地贫表现为平均红细胞体积(MCV)和平均红细胞血红蛋白含量(MCH)明显降低,不能电泳出Hb H波峰,有时能电泳出Hb CS波峰。结论惠州地区人群Hb CS发生率高,本研究有助于该地区的地贫防控工作。

分析Constant Spring基因携带者血液学表型与不同基因型的关系

目的分析血红蛋白Constant Spring(HbCS)携带者的血液学表型,比较不同HbCS基因型携带者的表型特征。方法回顾性分析近10年在深圳市龙岗区妇幼保健院中心实验室通过地贫基因检测确诊携带HbCS的患者,并收集到其血常规和血红蛋白电泳相关指标的结果,共507例。计算不同基因型携带者Hb、MCV、MCH等指标的中位数或均值,并与缺失型α-地贫患者相应指标进行比较,统计各组患者的血液学表型是否具有统计学差异。结果通过毛细管血红蛋白电泳技术,在69.0%(350/507)的HbCS基因携带者中检测到HbCS带。HbCS基因携带者与缺失型α-地贫基因携带者的血液学表型有统计学差异。结论不同HbCS基因型携带者血液学表型的部分指标有显著差异,通过毛细管电泳检测HbCS组分,可帮助判断表型差异,为临床咨询提供参考依据。

血红蛋白Constant Spring的表型与基因型分析

目的 分析血红蛋白Constant Spring（hemoglobin Constant Spring,HbCS）携带者基因型和表现型的关系,探讨HbCS对血液学指标的影响规律.方法 检测HbCS携带者的血常规和血红蛋白电泳.采用跨越断裂点-PCR、反向点杂交方法确认α-、β-地中海贫血（以下简称地贫）突变.结果 HbCS合并--SEA/αα或HbQS表现为HbH病的特征,与αCSα/-α或HbCS杂合子比较,差异有显著的统计学意义.αCSα/-α与HbCS杂合子对表型的影响较小.HbCS合并β地中海贫血,其血液学表型表现为β地贫的特征.上述各型变异阳性病例中,仅有57.6%的样品血红蛋白电泳检测为阳性结果.结论 HbCS杂合子与其它类型地贫突变合并存在时,不同基因型组合可出现较大差异的表型变化.另外,对此类复合地贫仅用血红蛋白电泳较易漏诊和误诊,对其确诊需要依赖基因型分析.

HbHCS患者的氧化应激状态及其对Hepcidin的调节

目的:探讨血红蛋白H-Constant Spring病(hemoglobin constant spring discase,HbHCS)患者的氧化应激状态及其对铁调素(hepcidin)的影响。方法:共35例HbHCS患者纳入研究,其中切脾者15例,未切脾者20例。另有20例健康人群为对照。检测患者和健康人群血浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)水平,检测患者血浆造血调控因子红细胞生成素(EPO)、血清游离转铁蛋白受体(sFTR)、生长分化因子15(GDF15)水平和铁代谢调节因子hepcidin水平,并行单因素相关分析和多因素回归分析。结果:与健康人群相比,HbHCS患者的SOD和GSH水平下降而MDA和GSSG水平上升。切脾和未切脾患者的SOD、MDA、GSG、GSSG水平无显著性差异。相关分析表明,HbH CS患者的SOD水平与EPO、sFTR、GDF15水平呈负相关,MDA水平则与上述指标呈正相关。EPO和sFTR水平与Hepcidin呈负相关。结论:HbH CS患者存在过度的氧化应激,并通过上调EPO和sFTR而抑制hepcidin,参与患者的铁超载。

广西地区323例血红蛋白Constant Spring基因型与表型分析

目的探讨血红蛋白Constant Spring（Hb CS）携带者基因型和表型的关系。方法检测HbCS携带者的血常规和血红蛋白电泳,通过跨越断裂点PCR（gap—PCR）和反向点杂交方法检测α和β地中海贫血基因。结果 Hb CS杂合子和Hb CS复合α-地贫对表型影响较小,Hb CS纯合子和Hb CS合并--SEA/αα表现为Hb H病特征,对表型影响明显,Hb CS杂合子复合轻型β-地贫表现为β-地贫表型。Hb CS杂合子Hb CS带含量较低,Hb CS纯合子或Hb CS复合--SEA时Hb CS含量高达为1.6-5.5%,当其合并β-地贫时也有较高的Hb CS含量。Hb CS-H病复合β-地贫时不能电泳出Hb H带。结论 Hb CS可通过血红蛋白电泳进行筛查,当Hb CS杂合子与其他类型地贫复合时,可呈现不同临床表型,此类复合地贫仅用血液学与表型筛查易漏检,需要通过基因检测进行确诊。

应用毛细管血红蛋白电泳技术筛查血红蛋白Constant Spring

目的建立一种在人群中筛查血红蛋白Constant Spring(Hb CS)的简单、经济的实验室方法。方法采用法国Sebia公司Capillarys 2全自动毛细管电泳仪及配套试剂进行血红蛋白电泳,检测Hb CS。阳性标本用分子检测技术验证。结果在23 842例临床标本中,共检出Hb CS携带者71(0.3%)例;Hb CS杂合子携带者血中Hb CS浓度为0.6%(0.1-1.0%)。结论本研究首次报道了本地区人群的Hb CS频率,表明毛细血管电泳仪可用于地中海贫血高发地区的人群筛查。

切脾与未切脾HbH CS病患者铁负荷情况分析

目的分析切脾与未切脾血红蛋白H CS(HbH CS)病患者的血清铁蛋白(SF)及肝铁浓度(LIC)情况,并探讨其关联性。方法选择该院于2014-07~2015-06收治的HbH CS病患者64例,按照是否接受脾切治疗分为切脾组(n=34)和未切脾组(n=30)。比较两组的血红蛋白(Hb)、有核红细胞(NRBC)、网织红细胞(Ret)、白细胞(WBC)和SF水平及肝MRI T2^*,并筛查与lnSF(SF的自然对数)及肝MRI T2^*具有相关性的指标。结果切脾组Hb、WBC和NRBC水平均高于未切脾组,差异有统计学意义(P<0.05)。切脾组lnSF和肝MRI T2^*水平均显著高于未切脾组(P<0.05),反映切脾组SF水平高于未切脾组,而LIC水平低于未切脾组。切脾组肝MRI T2^*与年龄和lnSF呈负相关(P<0.05);lnSF与Hb呈负相关(P<0.05),与年龄、NRBC、WBC及输血级别呈正相关(P<0.05)。未切脾组肝MRI T2^*与lnSF呈负相关(P<0.05);lnSF与年龄呈正相关(P<0.05)。结论肝MRI T2^*可反映肝铁负荷情况,HbH CS病患者切脾后SF水平与LIC存在不一致的情况,对于地中海贫血患者的铁负荷评估需综合考虑患者是否已接受了切脾治疗及脏器的铁负荷情况。

高效液相色谱法检测血红蛋白Constant Spring的影响因素

目的探讨高效液相色谱法(HPLC)检测血红蛋白Constant Spring(CS)影响因素。方法回顾性分析2016年全年进行地中海贫血(地贫)HPLC筛查与α地贫基因检测的结果,从而对CS筛查的效果进行评价。结果 2016年全年进行地中海贫血(地贫)HPLC筛查与α地贫基因检测共10007例,10007例中α地贫基因检测CS突变阳性505例,HPLC共检测出CS阳性451例,与α地贫基因检测相符,应用HPLC方法筛查CS的敏感性为89.3%,特异性为100.0%,准确性为99.5%,阳性预测值为100.0%,阴性预测值为99.3%。HPLC法漏检54例,其中有49例为CS杂合突变复合轻型β地贫,2例为外院陈旧血样本,2例为婴儿血标本,1例合并异常血红蛋白Hb G-siriraj(与CS峰出峰时间相近)。结论 HPLC方法是筛查α地贫CS突变的有效方法,合并β地贫、血标本的保存时间、筛查年龄及合并与CS峰出峰时间相近的其他异常血红蛋白可影响该方法准确性和敏感性。

应用限制性内切酶分析PCR产物快速诊断HbCS基因突变

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）选择性扩增包括ＨｂＣＳ突变（ＴＡＡ→ＣＡＡ）位点在内的α＿２珠蛋白基因片段，利用与该点突变密切相关的天然Ｔｒｕ９１位点和由ＰＣＲ引物介导出的人工ＨｉｎｆＩ位点的变化可识别ＨｂＣＳ突变等位基因和野生型等位基因。ＰＣＲ产物直接经Ｔｒｕ９１或ＨｉｎｆＩ消化及电泳分析后即可对样品ＤＮＡ中是否存在ＨｂＣＳ突变及其基因型作出诊断。此法简便、省时，可用于基因筛查和产前诊断。