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Chicken egg yolk antibodies (IgY) as non-antibiotic production enhancers for use in swine production: a review 被引量:8
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作者 Xiaoyu Li Lili Wang +2 位作者 Yuhong Zhent Shuying Li Yongping Xu 《Journal of Animal Science and Biotechnology》 CAS CSCD 2016年第1期57-66,共10页
In recent years, the use of in-feed antibiotics for growth and disease prevention in livestock production has been under severe scrutiny. The use and misuse of in-feed antibiotics has led to problems with drug residue... In recent years, the use of in-feed antibiotics for growth and disease prevention in livestock production has been under severe scrutiny. The use and misuse of in-feed antibiotics has led to problems with drug residues in animal products and increased bacterial resistance. Chicken egg yolk antibodies (IgY) have attracted considerable attention as an alternative to antibiotics to maintain swine health and performance. Oral administration of IgY possesses many advantages over mammalian IgG such as cost-effectiveness, convenience and high yield. This review presents an overview of the potential to use IgY immunotherapy for the prevention and treatment of swine diarrhea diseases and speculates on the future of IgY technology. Included are a review of the potential applications of IgY in the control of enteric infections of either bacterial or viral origin such as enterotoxigenic Escherichia coil, Salmonella spp., rotavirus, porcine transmissible gastroenteritis virus, and porcine epidemic diarrhea virus. Some potential obstacles to the adoption of IgY technology are also discussed. 展开更多
关键词 DIARRHEA Disease control Egg yolk antibodies IGY SWINE
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Antibodies to Newcastle Disease Virus in Egg Yolks of Great Cormorant (<i>Phalacrocorax carbo</i>) at Qinghai Lake
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作者 Alexander Y. Alekseeev Kirill A. Sharshov +6 位作者 Vasiliy Y. Marchenko Zhuo Li Jian Cao Fang Yang Alexander M. Shestopalov Vyacheslav A. Shkurupy Laixing Li 《Advances in Infectious Diseases》 2014年第4期194-197,共4页
Newcastle disease virus (NDV) is not considered as cause of serious disease in humans. But, recent data make it clear that, under particular circumstances, it is indeed possible for NDV to cause severe human respirato... Newcastle disease virus (NDV) is not considered as cause of serious disease in humans. But, recent data make it clear that, under particular circumstances, it is indeed possible for NDV to cause severe human respiratory disease. Newcastle Disease infection has been reported in many bird species. Cormorants that inhabit at the Qinghai-Tibet Plateau are mainly represented by Great Cormorant (Phalacrocorax carbo sinensis), which is distributed mainly on the Qinghai Lake area. Cormorants are considered as one of the main NDV-reservoir. We conducted the study for the presence of antibodies to Newcastle disease virus by hemagglutination inhibition test in yolks. We got 50% of seropositive yolks to Newcastle disease virus. These results show that NDV circulates in the Qinghai Lake population of cormorants. We first used the technique of detection of antibodies to Newcastle disease virus in the egg yolk for study the circulation of the virus in cormorants and demonstrated its effectiveness. We should carefully monitor cases of pneumonia in the population of people living around the lake and assess the causes of the disease. 展开更多
关键词 Newcastle Diseases Virus ANTIBODIES Egg yolk Great CORMORANT HEMAGGLUTINATION Inhibition Test
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A rapid and convenient dot-immunobinding assay for chicken egg-yolk antibodies
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作者 GUANG PING RUAN LI MA +4 位作者 XIN SHENG YAO QIAN WEN HONG YUN ZOU WEI LUO XIAO NING WANG 《Journal of Microbiology and Immunology》 2006年第2期153-159,共7页
The dot-immunobinding assay was applied to investigate the characteristics of chicken egg yolk antibodies. This method of assay was proved to be a rapid and simple method to demonstrate and characterize the egg-yolk a... The dot-immunobinding assay was applied to investigate the characteristics of chicken egg yolk antibodies. This method of assay was proved to be a rapid and simple method to demonstrate and characterize the egg-yolk antibody IgY in comparison with the traditional ELISA assay. By using the BandScan software, the gray scale value of dots and the background could be determined. According to the intensity of dots (gray scale value) compared to the standard sample of 10μg, how much IgY remained can be determined in a shorter time. 展开更多
关键词 Egg yolk antibody IgY Dot-immunobinding assay
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抗单纯疱疹病毒1型的IgY制备及其生物学活性检测
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作者 苏海涛 翟玥 +1 位作者 宋秀玲 徐坤 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期303-309,共7页
目的:制备抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的卵黄抗体(IgY),探讨该抗体的生物学活性,阐明其抗HSV-1的能力。方法:制备HSV-1灭活疫苗,采用鸡胸多点注射法免疫高产蛋鸡,采用聚乙二醇-6000(PEG-6000)法提纯IgY,采用间接ELISA法、十二烷基硫酸钠-... 目的:制备抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的卵黄抗体(IgY),探讨该抗体的生物学活性,阐明其抗HSV-1的能力。方法:制备HSV-1灭活疫苗,采用鸡胸多点注射法免疫高产蛋鸡,采用聚乙二醇-6000(PEG-6000)法提纯IgY,采用间接ELISA法、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术和蛋白浓度定量试剂盒测定IgY效价、纯度及蛋白水平,采用间接ELISA法检测IgY中和病毒的能力,测定病毒阻断率,以Vero细胞为病毒感染靶细胞,测定不同抗体浓度(0.01560、0.03125、0.06250、0.12500、0.50000、和1.00000 g·L^(-1))作用后细胞病变效应(CPE),根据CPE程度测定IgY体外抗HSV-1能力。结果:制备的IgY效价随免疫时间逐渐升高,达到1/1024000后保持稳定;IgY轻链重链条带清晰;IgY平均蛋白水平为11.544 g·L^(-1);IgY对HSV-1的阻断率可高达77.90%;HSV-1致CPE程度随抗体浓度升高而逐渐降低,当IgY浓度达到0.50000g·L^(-1)及以上时,25%以下细胞(甚至无细胞)发生病变。结论:成功制备出抗HSV-1的IgY,该抗体对HSV-1具有明显的中和阻断能力和体外抑制活性,可用于药物及诊断方法的开发。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒1型 卵黄抗体 中和病毒 体外抗病毒能力
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口服抗大肠杆菌O157:H7卵黄抗体对昆明小鼠保护效果的研究
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作者 曹章 陈欣婷 +2 位作者 赵静 刘德凯 张彦龙 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期832-836,共5页
为制备抗大肠杆菌O157:H7卵黄中的免疫球蛋白Y(IgY),并研究其对人工感染大肠杆菌的昆明乳鼠是否具有预防和治疗效果,本研究将O157:H7大肠杆菌菌液经甲醛灭活后加弗氏佐剂和弗氏不完全佐剂制备灭活疫苗,以其免疫蛋鸡后每间隔1个月用灭活... 为制备抗大肠杆菌O157:H7卵黄中的免疫球蛋白Y(IgY),并研究其对人工感染大肠杆菌的昆明乳鼠是否具有预防和治疗效果,本研究将O157:H7大肠杆菌菌液经甲醛灭活后加弗氏佐剂和弗氏不完全佐剂制备灭活疫苗,以其免疫蛋鸡后每间隔1个月用灭活菌液加强免疫并收集鸡蛋,从蛋黄中分离纯化浓缩IgY,采用微量凝集试验检测卵黄抗体效价。采用Eudragit~?L100-55包被精制IgY制成骨架型肠溶片,以未包被的IgY抗体作为对照。在体外模拟胃/肠环境对未包被IgY及包被后的IgY通过微量凝集试验进行活性检测,同时对小鼠口服肠溶片并检测包被的IgY在动物消化道内的活性变化。结果显示,在模拟胃/肠液耐受性和体内释放试验中,未包被的IgY在胃模拟液内活性迅速丧失,在肠模拟液内活性逐渐丧失,并在10 h后活性完全丧失;而包被肠溶片IgY的生物活性可以保持较高水平。小鼠实验结果显示,IgY肠溶片的活性基本未受小鼠胃环境的影响,肠溶片IgY可到达动物肠道释放IgY且其活性可以保持较长时间。利用大肠杆菌O157:H7的6倍半数致死量(6LD_(50)),即1.5×10^(10)cfu/mL感染小鼠建立小鼠感染模型,通过小鼠实验验证口服IgY肠溶片的预防和治疗效果,以口服未包被IgY的小鼠作为对照组。治疗试验结果显示,对感染大肠杆菌后小鼠每日饲喂含0.4 mL IgY的肠溶片时,可以达到100%的存活率;预防试验结果显示;每日饲喂含0.05 mLIgY的肠溶片,并用6LD_(50)剂量的细菌感染,饲喂7 d后对小鼠的保护率达100%,保护试验与预防试验中IgY肠溶片组小鼠的存活率均远高于未包被IgY组。本研究结果表明口服IgY肠溶片可以有效预防和治疗大肠杆菌血清型O157:H7对昆明乳鼠的感染,为治疗和预防特定肠道的传染性疾病抗体制剂的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 口服 包被 卵黄抗体 大肠杆菌
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口服卵黄抗体对杂交鳢弹状病毒(HSHRV)感染的免疫保护效果
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作者 刘田 李硕 +4 位作者 汪铭书 赵立宁 黄锦炉 吴艺琳 贾爱卿 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期10-16,共7页
为了研究抗杂交鳢弹状病毒(hybrid snakehead rhabdovirus,HSHRV)卵黄抗体的制备方法并评价其免疫保护效果,将杂交鳢弹状病毒经白油乳化制备疫苗,免疫蛋鸡收集高免蛋,采用喷雾干燥方法制备成卵黄抗体粉,以细胞中和试验评估卵黄抗体中和... 为了研究抗杂交鳢弹状病毒(hybrid snakehead rhabdovirus,HSHRV)卵黄抗体的制备方法并评价其免疫保护效果,将杂交鳢弹状病毒经白油乳化制备疫苗,免疫蛋鸡收集高免蛋,采用喷雾干燥方法制备成卵黄抗体粉,以细胞中和试验评估卵黄抗体中和病毒的效果。按照每kg鱼投喂卵黄抗体0.25 g、0.40 g、0.60 g的比例制备低、中、高3种添加剂量的饲料,持续投喂杂交鳢10 d,在口服免疫第4天时以104 TCID50/0.1mL的杂交鳢弹状病毒江门I株(HSHRV-JMI)病毒经腹腔注射对杂交鳢进行攻毒,并记录6 d内各组死亡情况。结果显示,四次免疫后卵黄抗体中和效价达到高峰,为1∶46.8,抗体维持时间为60d。高中低剂量组的存活率分别为64.4%、70.6%、78.5%;相对保护率分别为61.1%、67.9%、76.5%,三者均显著高于非特异性卵黄抗体对照组(P<0.001)。表明杂交鳢弹状病毒能有效刺激卵黄抗体产生,高效价卵黄抗体经口服免疫后可以有效抑制杂交鳢弹状病毒的侵染,显著提高杂交鳢存活率和相对保护率。 展开更多
关键词 杂交鳢弹状病毒(HSHRV) 卵黄抗体 口服免疫 中和效价 免疫保护效果
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抗大口黑鲈蛙虹彩病毒卵黄抗体的制备及其间接ELISA检测方法的建立 被引量:1
7
作者 李硕 陈静妮 +4 位作者 赵立宁 黄春萍 黄锦炉 王贵平 仲颖 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期129-139,共11页
大口黑鲈(Micropterus salmoides)蛙虹彩病毒(Largemouth bass ranavirus,LMBV)是我国大口黑鲈养殖中的常发病原,主要引起大口黑鲈病毒性溃疡病,制约其养殖业的健康发展。为探究卵黄抗体在防控LMBV中的潜在作用,利用LMBV灭活疫苗免疫蛋... 大口黑鲈(Micropterus salmoides)蛙虹彩病毒(Largemouth bass ranavirus,LMBV)是我国大口黑鲈养殖中的常发病原,主要引起大口黑鲈病毒性溃疡病,制约其养殖业的健康发展。为探究卵黄抗体在防控LMBV中的潜在作用,利用LMBV灭活疫苗免疫蛋鸡,制备了抗LMBV卵黄抗体;通过筛选捕获物浓度、包被条件和封闭条件,建立了抗LMBV卵黄抗体的间接酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法;使用构建的方法,评估了LMBV灭活疫苗免疫蛋鸡后卵黄抗体的效价消减规律。结果表明,1‰(φ)β-丙内酯4℃作用72 h可完全灭活LMBV。间接ELISA反应中,每孔包被105 TCID50灭活病毒,37℃孵育2 h后,使用5%(φ)牛血清白蛋白37℃封闭2 h,可有效降低阴性对照组卵黄抗体的背景值;此外,所建立的检测方法与杂交醴弹状病毒卵黄抗体、未免疫的蛋黄提取物和空白细胞不存在交叉反应,特异性较高。LMBV灭活疫苗免疫蛋鸡约48 d可产生特异性卵黄抗体,免疫后58 d效价升高至峰值(1∶12800),峰值水平可持续至免疫后128 d。所构建的LMBV卵黄抗体检测方法,可实时监测LMBV灭活疫苗免疫蛋鸡后的特异性卵黄抗体效价水平的变化规律,确定LMBV卵黄抗体的高效免疫程序及高免蛋收集持续期,为LMBV卵黄抗体产品的开发、应用及LMBV的防治提供了新思路。 展开更多
关键词 大口黑鲈 蛙虹彩病毒 卵黄抗体 间接ELISA
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抗副溶血弧菌卵黄抗体制备及其与不同血清型菌株交叉反应研究
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作者 陈静妮 仲颖 +4 位作者 黄春萍 李硕 黄锦炉 王贵平 赵立宁 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期176-185,共10页
为探索卵黄抗体对防控凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖中副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)病的潜在作用,将2种血清型(O1:KUT和OUT:KUT)的3株副溶血弧菌制备成灭活疫苗,分别免疫产蛋鸡制备卵黄抗体。通过ELISA实验和试管凝集实... 为探索卵黄抗体对防控凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖中副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)病的潜在作用,将2种血清型(O1:KUT和OUT:KUT)的3株副溶血弧菌制备成灭活疫苗,分别免疫产蛋鸡制备卵黄抗体。通过ELISA实验和试管凝集实验,评估了卵黄抗体的效价消长规律、抑菌效果和交叉反应情况。结果显示:3株副溶血弧菌均能诱导高特异性水平的卵黄抗体,抗体凝集效价和ELISA效价的消长趋势相近,均在4免后10~60 d达到卵黄抗体的效价平台期,凝集效价在1∶8以上,ELISA效价在1∶6400以上;卵黄抗体与血清型相同的其他副溶血弧菌发生强烈的交叉ELISA和交叉凝集反应,但与血清型不同的副溶血弧菌有较低的交叉ELISA反应,无交叉凝集反应。研究表明副溶血弧菌能刺激蛋鸡产生高特异性水平的卵黄抗体,对不同血清型菌株不具有交叉保护效果,可为抗副溶血弧菌卵黄抗体产品的开发与应用提供参考。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 凡纳滨对虾 高特异性卵黄抗体 ELISA 凝集
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1例疣鼻天鹅Ⅰ群禽腺病毒血清4型的诊断与治疗
9
作者 王小雨 喇斐燕 +1 位作者 马旭晨 张浩 《现代畜牧科技》 2024年第8期117-120,共4页
为给临床兽医及科研工作者提供疣鼻天鹅禽腺病毒4型诊断与治疗的借鉴。方法:该文通过临床诊断、血清学检测、粪便检测、荧光PCR检测等手段对伊犁州林草局野生动物保护办公室发现的4只4月龄患病疣鼻天鹅进行诊断。结果:血清学检测结果显... 为给临床兽医及科研工作者提供疣鼻天鹅禽腺病毒4型诊断与治疗的借鉴。方法:该文通过临床诊断、血清学检测、粪便检测、荧光PCR检测等手段对伊犁州林草局野生动物保护办公室发现的4只4月龄患病疣鼻天鹅进行诊断。结果:血清学检测结果显示天鹅血清样本中禽流感和新城疫抗体水平为0,荧光PCR检测结果显示4只疣鼻天鹅禽呼肠孤、鸭坦布苏均为阴性,禽腺病毒4型为阳性。结论:可判定该群疣鼻天鹅感染Ⅰ群禽腺病毒血清4型,通过使用腺病毒卵黄抗体并配合抗生素和对症治疗,4只天鹅5 d后均治愈,治愈率100%。 展开更多
关键词 疣鼻天鹅 血清学诊断 荧光PCR 禽腺病毒4型 卵黄抗体
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抗弧菌三联特异性卵黄抗体的制备与体外抑菌作用
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作者 张林鹏 洪宇聪 +4 位作者 孙凯辉 赵书燕 刘沥涵 林蠡 秦真东 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期888-897,共10页
【目的】制备抗弧菌三联特异性卵黄抗体,并研究其对创伤弧菌(Vibrio vulnificus)、河流弧菌(Vibrio fluvialis)和霍乱弧菌(Vibrio cholerae)的体外抑菌作用,为抗生素替代品的研发以及弧菌混合感染的防治提供参考。【方法】制备创伤弧菌... 【目的】制备抗弧菌三联特异性卵黄抗体,并研究其对创伤弧菌(Vibrio vulnificus)、河流弧菌(Vibrio fluvialis)和霍乱弧菌(Vibrio cholerae)的体外抑菌作用,为抗生素替代品的研发以及弧菌混合感染的防治提供参考。【方法】制备创伤弧菌、河流弧菌和霍乱弧菌三联灭活疫苗,免疫蛋鸡,制备特异性卵黄抗体(IgY),并检测IgY的效价、纯度和特异性。通过免疫荧光、扫描电镜和体外抑菌试验初步探究制备的三联特异性卵黄抗体对3种弧菌的体外抑菌效果。【结果】使用间接ELISA检测特异性IgY效价,分别以创伤弧菌、霍乱弧菌和河流弧菌作为抗原,特异性IgY效价峰值高达1∶51200,可持续4~5周。对水稀释-盐析分离纯化的IgY进行SDS-PAGE分析,可见IgY的重链和轻链,且蛋白杂带逐渐减少,纯度逐渐变高。免疫印迹分析发现,特异性IgY可以和抗原发生特异性结合,出现IgY的蛋白条带。免疫荧光试验结果表明,特异性IgY可以与3种弧菌发生特异性结合,出现明显的菌体凝集。扫描电镜观察发现,特异性IgY处理过的3种弧菌,菌体黏附,菌体细胞结构遭到破坏。体外抑菌试验发现,特异性IgY对3种弧菌的体外生长繁殖具有明显的抑制作用,抑菌效果随抗体用量增加而增强。【结论】本研究制备的抗弧菌三联特异性卵黄抗体对创伤弧菌、河流弧菌和霍乱弧菌有较强的抑制作用,在弧菌混合感染的防治和开发新型抗生素替代品方面具有很大的潜力。 展开更多
关键词 卵黄抗体 创伤弧菌 河流弧菌 霍乱弧菌 抑制作用
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斑翅果蝇YolkProtein1基因原核表达及抗体制备 被引量:2
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作者 祝晴 王瑞娟 +5 位作者 覃冬云 陈浩 代晓彦 刘艳 周紫章 翟一凡 《山东农业科学》 北大核心 2022年第3期106-111,共6页
斑翅果蝇(Drosophilasuzukii)是一种农业害虫,在世界范围内分布广泛,可对多种水果产生不可逆损害,造成巨大经济损失。本试验对斑翅果蝇YolkProtein1(Ds-YP1)基因进行原核表达,并对Ds-YP1蛋白的功能结构域和信号肽进行预测,克隆多肽并构... 斑翅果蝇(Drosophilasuzukii)是一种农业害虫,在世界范围内分布广泛,可对多种水果产生不可逆损害,造成巨大经济损失。本试验对斑翅果蝇YolkProtein1(Ds-YP1)基因进行原核表达,并对Ds-YP1蛋白的功能结构域和信号肽进行预测,克隆多肽并构建pET-32a-c(+)-Ds-YP1原核表达载体,IPTG诱导表达并免疫小鼠制备抗体;用成功制备的抗体进行斑翅果蝇蛋白WesternBlot验证。结果表明构建的pET-32a-c(+)-Ds-YP1表达载体在大肠杆菌中表达了His-Ds-YP1融合蛋白,通过免疫小鼠成功制备并纯化了Ds-YP1多克隆抗体。制备的Ds-YP1多克隆抗体不但能识别His-Ds-YP1融合蛋白,而且能识别斑翅果蝇Ds-YP1蛋白,具有较好的特异性。本研究成功制备了斑翅果蝇Ds-YP1的多克隆抗体,对进一步研究YolkProtein蛋白作用机制具有重要意义。 展开更多
关键词 斑翅果蝇 卵黄蛋白 原核表达 抗体
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Application of high-titred IgY antibodies in orthopox virus diagnostics 被引量:2
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作者 张小莺 AndreasKurth +3 位作者 DianaPauly GeorgPauli RdigerSchade HeinzEllerbrok 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS 2008年第3期183-191,共9页
Layer chickens were immunized with three species of inactivated orthopox virus (vaccinia virus, calpox virus and cowpox virus). Antibodies (IgY) were purified from egg yolks by improved polyethylene glycol precipi... Layer chickens were immunized with three species of inactivated orthopox virus (vaccinia virus, calpox virus and cowpox virus). Antibodies (IgY) were purified from egg yolks by improved polyethylene glycol precipitation. The development of IgY directed against orthopox virus antigens was followed by immunofluorescence assay, plaque reduction neutraliztion test and immunoelectron microscopy. Cross-reactivity of two IgY antibodies with cells infected by the different strains of the pox viruses was also investigated by different methods (immunofluorescence assay, plaque reduction neutraliztion test and Western blot). Even in very high dilutions in immunofluorescence assay (titres up to 1:10^6 and 1:10^5, respectively) and persisted on a plateau over 10 months after four booster injections, it was showed that anti-vaccinia virus IgY and anti-calpox virus IgY were positive. Neutralizing activity and ultra-structural detection of antigen with gold-labelled antibodies were respectively observed in plaque reduction neutralization test and immunoelectron microscopy. Western blot analysis revealed specific binding of IgY to virus proteins. Thus, there was cross-reactivity between different orthopox viruses. Finally, orthopox virns-specific IgY antibodies bounded magnetic beads (Dynabead) were used to concentration of orthopox viruses. This study suggests that anti-pox virus IgY could serve as a useful tool for orthopox viruses diagnosis. 展开更多
关键词 Orthopox virus (OPV) Egg yolk antibody (IgY) Diagnostic system
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Isolation of egg yolk IgY from hens immunized with S.mutans B29-33 and S.sobrinus 6715 被引量:6
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作者 FAN Ming-wen, JIANG Qian-zhou, BIAN Zhuan, ZHANG Ping, LIU Ning-hui, LIU Jian.College of Stomatology, Wuhan University, Wuhan 430079 《口腔医学纵横》 CSCD 2000年第3期193-194,共2页
目的 :从鸡蛋中提取特异性抗体 ,鉴定抗体性质并分析其蛋白质含量 ,以探索一种制备被动免疫防龋抗体的制备方法。方法 :变形链球菌GTF高表达株S .mutansB2 9- 33及茸毛链球菌S .sobrinus 6 715免疫母鸡 ,采用硫酸铵沉淀法提取鸡蛋黄抗体... 目的 :从鸡蛋中提取特异性抗体 ,鉴定抗体性质并分析其蛋白质含量 ,以探索一种制备被动免疫防龋抗体的制备方法。方法 :变形链球菌GTF高表达株S .mutansB2 9- 33及茸毛链球菌S .sobrinus 6 715免疫母鸡 ,采用硫酸铵沉淀法提取鸡蛋黄抗体 ,SDS -PAGE凝胶扫描鉴定抗体性质 ,分析其纯度并用分光光度法测蛋白质含量。结果 :用硫酸铵沉淀法可提取出鸡蛋黄抗体 ,其性质为IgG ,蛋白质含量约为 7.0 0mg/ml。结论 :鸡蛋黄抗体含量高 ,作为被动免疫抗体的载体有较好的应用前景。 展开更多
关键词 鸡蛋黄 抗体 变形链球菌 制备
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水禽细小病毒病流行病学及防控研究进展 被引量:3
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作者 马瑶 罗青平 +4 位作者 张蓉蓉 曾哲 温国元 商雨 汪宏才 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2023年第16期24-28,共5页
我国是水禽养殖大国,也是禽肉、禽蛋消费大国。细小病毒是危害水禽重要病原之一,常引起鹅和番鸭的发病甚至死亡,造成严重的经济损失。为了有效防控水禽细小病毒(Waterfowl parvovirus,WPVs)的流行,减少经济损失,国内外学者研制各种疫苗... 我国是水禽养殖大国,也是禽肉、禽蛋消费大国。细小病毒是危害水禽重要病原之一,常引起鹅和番鸭的发病甚至死亡,造成严重的经济损失。为了有效防控水禽细小病毒(Waterfowl parvovirus,WPVs)的流行,减少经济损失,国内外学者研制各种疫苗用于WPVs的预防。文章从WPVs流行病学及防控措施(疫苗、卵黄抗体及生物安全管理)方面进行综述,旨在为水禽细小病毒病的综合防控提供参考。 展开更多
关键词 水禽细小病毒 流行病学 疫苗 卵黄抗体 生物安全
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犬冠状病毒S1蛋白特异性小分子抗体Fab的制备 被引量:1
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作者 薛姣雄 赵婷芳 +9 位作者 张倩 唐青海 高翠翠 赵铖 张妍 全飞杨 刘婷 杨灿 杨海 王文秀 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第11期2568-2583,共16页
为表达犬冠状病毒(canine coronavirus,CCV)S1蛋白,制备其特异性小分子抗体Fab,为CCV的防治提供新材料。采用PCR扩增CCV S 1基因全长及其截短片段,分别克隆到原核表达载体pET28a或pGEX4T-1中,转到BL21(DE3)或Rosetta(DE3)感受态细胞构... 为表达犬冠状病毒(canine coronavirus,CCV)S1蛋白,制备其特异性小分子抗体Fab,为CCV的防治提供新材料。采用PCR扩增CCV S 1基因全长及其截短片段,分别克隆到原核表达载体pET28a或pGEX4T-1中,转到BL21(DE3)或Rosetta(DE3)感受态细胞构建重组表达菌株;用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白表达,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot鉴定分析重组蛋白;纯化蛋白分别与ISA71AVG或ISA201VG佐剂配伍乳化后制备免疫原,免疫蛋鸡,用聚乙二醇(PEG)沉淀法提取得到CCV S1蛋白的卵黄抗体,通过Western blot检测抗体滴度,用胃蛋白酶水解卵黄抗体制备小分子抗体Fab。结果显示,S1蛋白全长无表达,CCV S1-a和CCV S1-b分子量分别为79 ku和68 ku。在免疫后第35天2种佐剂组的卵黄抗体滴度可达1∶128000。制备小分子抗体Fab最佳酶切条件为卵黄抗体与胃蛋白酶混合质量比20∶1、pH值4.1、37℃酶切8 h。完整的IgY可以与CCV呈特异性反应,胃蛋白酶处理后制备的小分子抗体Fab可以有效阻断CCV的感染性。综上,本研究成功表达了CCV S1的2个截短片段蛋白,制备了卵黄抗体及其小分子抗体Fab,为进一步开展犬冠状病毒病的诊断和防治技术研究奠定了基础。 展开更多
关键词 犬冠状病毒 原核表达 佐剂 卵黄抗体 小分子抗体Fab
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抗杂交鳢(Channa argus×C.maculate)弹状病毒卵黄抗体制备及ELISA检测方法的建立
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作者 刘田 李硕 +4 位作者 汪铭书 赵立宁 黄锦炉 吴艺琳 贾爱卿 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1756-1765,共10页
为确定杂交鳢(Channa argus×C.maculate)弹状病毒卵黄抗体效价水平消减规律并验证抗体对病毒的中和能力,采用杂交鳢弹状病毒灭活疫苗免疫蛋鸡,使用醋酸-醋酸钠-辛酸法制备卵黄抗体,建立间接ELISA检测方法以监测卵黄抗体产生过程抗... 为确定杂交鳢(Channa argus×C.maculate)弹状病毒卵黄抗体效价水平消减规律并验证抗体对病毒的中和能力,采用杂交鳢弹状病毒灭活疫苗免疫蛋鸡,使用醋酸-醋酸钠-辛酸法制备卵黄抗体,建立间接ELISA检测方法以监测卵黄抗体产生过程抗体水平消减情况,以中和试验评估卵黄抗体中和杂交鳢弹状病毒效果。结果显示,ELISA检测方法最佳条件为抗原包被浓度0.5×105.8TCID_(50)/0.1 mL,37℃包被2 h,37℃封闭2 h。与大口黑鲈蛙虹彩病毒卵黄抗体、SPF蛋黄提取物、免疫前蛋黄提取物以及MBC空细胞均无交叉反应。以S/N(sample/negative)>2.1且敏感性最高为标准确定阳性、阴性样品。卵黄抗体于首免后28 d产生效价,四免后达到最高水平,效价为1︰25600,平台期可持续40~60 d,通过中和抗体检测结果证明平台期内抗体中和效价在免疫周期内最高,约为46.3。通过ELISA检测方法对卵黄抗体产生规律进行监测,通过中和检测方法评估卵黄抗体中和病毒效果。高滴度卵黄抗体具有被开发为新型抗杂交鳢弹状病毒生物制品的潜力,杂交鳢弹状病毒卵黄抗体的制备及快速检测方法的构建为该病的防治提供了理论基础和技术手段。 展开更多
关键词 杂交鳢弹状病毒 卵黄抗体 间接ELISA 中和抗体
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Ⅰ群4型禽腺病毒蛋黄抗体中和效价与攻毒保护相关性研究
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作者 李斌 路晓 +4 位作者 刘美丽 赵鲁宁 张帆 于可响 韩易航 《家禽科学》 2023年第1期3-7,共5页
为了研究Ⅰ群4型禽腺病毒蛋黄抗体中和效价与攻毒保护的相关性,取3批实验室试制抗体,分别通过预防试验和紧急预防试验模型进行抗体中和效价与靶动物攻毒保护力相关性试验。预防试验:21日龄SPF鸡经颈背部皮下注射中和效价分别为1:64、1:... 为了研究Ⅰ群4型禽腺病毒蛋黄抗体中和效价与攻毒保护的相关性,取3批实验室试制抗体,分别通过预防试验和紧急预防试验模型进行抗体中和效价与靶动物攻毒保护力相关性试验。预防试验:21日龄SPF鸡经颈背部皮下注射中和效价分别为1:64、1:128、1:256的蛋黄抗体,每只0.5 mL,168 h后接种Ⅰ群4型禽腺病毒检验用强毒,观察10日。紧急预防试验:先给21日龄SPF鸡接种Ⅰ群4型禽腺病毒检验用强毒,36 h后经颈背部皮下注射不同中和效价的抗体,每只0.5 mL,观察10日。结果表明:当中和效价为1:128时,攻毒保护率均达到80%以上;当中和效价为1:256时,攻毒保护率均达到90%以上。故本研究结果表明,抗体效价不低于1:128时可有效抵御Ⅰ群4型禽腺病毒的攻击。 展开更多
关键词 Ⅰ群4型禽腺病毒 蛋黄抗体 中和效价 攻毒保护 相关性
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IgY应用于生物感染领域的药理学研究进展
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作者 卢韦 肖雁冰 《局解手术学杂志》 2023年第8期739-742,共4页
卵黄免疫球蛋白(IgY)是一种多克隆抗体,无毒副作用,其能通过特异性地与相应抗原结合,并保持可逆及非共价性地形成抗原-抗体复合体,达到使抗原失活的目的,在机体防御中发挥作用。利用IgY具有结合外来抗原特异性和针对性的优势,将其制备... 卵黄免疫球蛋白(IgY)是一种多克隆抗体,无毒副作用,其能通过特异性地与相应抗原结合,并保持可逆及非共价性地形成抗原-抗体复合体,达到使抗原失活的目的,在机体防御中发挥作用。利用IgY具有结合外来抗原特异性和针对性的优势,将其制备成了卵黄球蛋白,并研制出许多成品药物用于人、牲畜等抗感染治疗,诸如瑞琳他抗类药物,该类药物主要应用于女性人乳头状瘤病毒(HPV)感染治疗。故本文就IgY应用于女性HPV感染领域及其他生物感染领域的药理学研究进展进行综述。 展开更多
关键词 瑞琳他抗 卵黄免疫球蛋白 HPV感染 检测 防治
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一株仔猪产肠毒素大肠杆菌分离鉴定、耐药性分析及其卵黄抗体的制备
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作者 尹家银 喻娇 +6 位作者 唐青海 滕威 阳坤 曹馨 徐晴 刘博 李泽 《湖北农业科学》 2023年第4期127-134,共8页
为诊断某规模化养猪场仔猪腹泻病原,并制备其特异性卵黄抗体,采用细菌分离培养、生化试验、16SrRNA PCR鉴定及系统进化树分析、药敏试验等方法对病料进行研究,并利用全菌体灭活和超声波破碎法制备抗原,将其分别与不同佐剂(ISA 71VG、ISA... 为诊断某规模化养猪场仔猪腹泻病原,并制备其特异性卵黄抗体,采用细菌分离培养、生化试验、16SrRNA PCR鉴定及系统进化树分析、药敏试验等方法对病料进行研究,并利用全菌体灭活和超声波破碎法制备抗原,将其分别与不同佐剂(ISA 71VG、ISA201VG和15AVG)配伍乳化制备疫苗免疫蛋鸡、聚乙二醇法提取高免卵黄抗体、SDS-PAGE电泳和Bradford法鉴定抗体质量及浓度、双向琼脂扩散试验测定抗体效价。结果表明,分离菌株的形状、大小及生化特性均与大肠杆菌相符。分离株的主要毒力基因E.coli-estb和elt基因分别为113、272 bp;分离株elt和estb基因与美国流行毒株如UMNK88处于同一分支,亲缘关系较近;与丹麦株CFSAN018748、瑞士株14OD0056处于不同分支,亲缘关系较远。分离菌株对头孢噻肟、诺氟沙星和复方新诺明敏感,对头孢曲松和多黏菌素B中介,对多西环素、呋喃唑酮以及多种氨基糖苷类和喹诺酮类抗菌药物耐药。各组卵黄抗体的重链(约70 ku)和轻链(约25 ku)均明显,纯度高。首免后56 d 0.2%甲醛处理的菌液与ISA 15AVG配伍所致疫苗的卵黄抗体蛋白含量最高(1.462 mg/g卵黄),超声波破碎处理的菌液与ISA 71VG配合所制疫苗的卵黄抗体蛋白含量次之(1.459 mg/g卵黄)。血清抗体与菌体抗原反应性良好,超声波破碎抗原与ISA 71VG配伍所制疫苗的血清抗体、卵黄抗体效价分别高达1∶16、1∶4。 展开更多
关键词 猪致病性大肠杆菌(Escherichia coli) 分离培养 进化分析 耐药性分析 卵黄抗体
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Ⅰ型鸭肝炎病毒的分离鉴定及其高免卵黄抗体的制备
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作者 李娟 王岩 +4 位作者 刘秋晨 于洪敏 徐福利 单春乔 刘艳 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2023年第18期72-77,136,共7页
为了确定山东某养殖场疑似患有鸭病毒性肝炎(duck viral hepatitis,DVH)病死鸭的病原,并针对该病原制备高效且安全的卵黄抗体(antibody of yolk,IgY),试验无菌采集病死鸭肝脏组织样品,通过细菌检测、病毒的分离与增殖、特异性基因的RT-... 为了确定山东某养殖场疑似患有鸭病毒性肝炎(duck viral hepatitis,DVH)病死鸭的病原,并针对该病原制备高效且安全的卵黄抗体(antibody of yolk,IgY),试验无菌采集病死鸭肝脏组织样品,通过细菌检测、病毒的分离与增殖、特异性基因的RT-PCR鉴定与序列分析及动物回归试验确定病原,采用Reed-Muench法计算半数致死量(LD_(50)),并针对病原制备油乳剂灭活苗,按照免疫程序将其免疫产蛋鸡,收集免疫鸡的鸡蛋,采用生理盐水法提取IgY,测定IgY的中和效价,最后进行动物被动免疫试验,探究IgY对攻毒雏鸭的免疫保护作用。结果表明:将病死鸭肝脏组织划线接种于营养琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基,培养后均无细菌生长,病死鸭肝脏组织和增殖尿囊液均扩增出Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)特异性基因片段,目的基因与GenBank中的9株DHV-Ⅰ参考株的相应基因序列的相似性为99.1%~99.2%,确定分离出1株DHV-Ⅰ,命名为SD,分离株SD对9日龄鸭胚的LD_(50)为1×10^(-8.25)/0.2 mL。将分离株重新接种健康雏鸭,出现DVH典型的症状,死亡率为100%,提取死亡雏鸭肝脏组织中的病毒RNA,经RT-PCR后能扩增出目的条带,测序结果与分离株SD一致。制备的油乳剂灭活苗稳定性良好,30 min内不分层,雏鸭注射后14 d内生长无异常。制备的IgY抗体中和效价为1∶256,注射IgY后第1~5天攻毒,10 d后的保护率为87.5%~100%,注射IgY后第7天攻毒,10 d后的保护率为75%。说明从发病鸭群肝脏组织中分离出1株高致病性的DHV-Ⅰ,制备的油乳剂灭活苗免疫蛋鸡后获得高效价IgY,对攻毒雏鸭具有很好的免疫保护作用。 展开更多
关键词 Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ) 分离 鉴定 半数致死量(LD50) 灭活疫苗 卵黄抗体(IgY) 被动免疫
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