Influence of Toxoplasma gondii on in vitro proliferation and apoptosis of hepatoma carcinoma H7402 cell

Objective:To discuss the influence of tachyzoite of Toxoplasma gondii（T.gondii） RH strain on proliferation and apoptosis of hepatoma carcinoma（HCC） H7402 cell.Methods:The HCC H7402 cell in logarithmic phase and tachyzoite of T.gondii RH strain in different concentrations（1×107/mL,2×107/mL.4×107/mL,8×107mL and 16×107/mL） were co-cultured.CCK-8was utilized to determine the inhibition rate of T.gondii tachyzoite on H7402 cell growth.Flow cytometry was used to detect the change of cell cycle.RT-PCR method was used to detect the expression of cyclinB1 and cdc2-two genes related to cell cycle.Western blot method was used to detect the expression of apoptosis-related proteins Caspase-3 and Bcl-2.Results:The tachyzoite of T.gondii RH strain can inhibit the proliferation of HCC H7402 cells.The inhibition rate of tumor cell growth increased with the increase of concentration of T.gondii tachyzoite.With the increase of concentration of T.gondii tachyzoite,the proportion of G0/G1 phase of H7402 cell increased,the proportion of S phase decreased,and PI value decreased accordingly.The expression of cyclinB1 and cdc2 genes decreased with the increase of the concentration of T.gondii tachyzoite.With the increase of the concentration of tachyzoite of T.gondii RH strain,the expression quantity of Caspase-3 in H7402 cell increased,but the expression quantity of Bcl-2protein decreased.Conclusions:T.gondii can inhibit the in vitro proliferation of HCC H7402 cell,and induce its apoptosis.This effect shows a trend of concentration-dependent increase.Moreover,it is related to the down-regulation of cyclinB1 and cdc2（cell cycle-related genes）,the increase of apoptosis-related protein Caspase-3.and the decreasc of Bcl-2 expression.

半夏蛋白对人肝癌细胞Bel-7402的诱导凋亡作用

目的观察并比较半夏蛋白对体外培养的人肝癌细胞Bel-7402的生长抑制作用。方法应用流式细胞技术,检测半夏蛋白对人肝癌细胞Bel-7402的诱导凋亡作用,并观察了其诱导凋亡作用的量-效关系。结果60%硫酸铵沉淀蛋白没有明显诱导Bel-7402细胞凋亡的作用,而30%硫酸铵沉淀蛋白有诱导Bel-7402细胞凋亡的作用。30%沉淀进一步分离结果显示,只有0.1 mol/L NaCl洗脱峰有一定诱导Bel-7402细胞凋亡的作用。结论半夏蛋白有一定的诱导Bel-7402细胞凋亡作用,其主要成分可能存在于总有机酸部位。

呫吨酮衍生物XP-15对BEL-7402细胞线粒体膜电位的影响

目的 :探讨呫吨酮并吡啶衍生物9-(2-吗啡啉乙酰胺基)-7H-吡啶并[4,3-c]呫吨-7-酮(XP-15)对BEL-7402细胞线粒体膜电位的影响。方法:通过MTT法、细胞形态学和克隆实验观察XP-15对BEL-7402细胞增殖的影响;用荧光分光光度计检测线粒体膜电位的影响。结果:高剂量的XP-15能明显抑制BEL-7402细胞增殖(P<0.05);对BEL-7402细胞克隆的抑制作用,呈剂量和时间依赖性。XP-15作用后,BEL-7402细胞的线粒体膜电位降低(P<0.05)。结论:XP-15诱导BEL-7402细胞凋亡的作用,可能与其降低线粒体膜电位有关。

沙棘籽渣黄酮类化合物诱导人肝癌细胞凋亡研究

目的:探讨沙棘籽渣黄酮类化合物(FSH)对人肝癌细胞BEL-7402的抑制和诱导凋亡作用。方法:采用SRB观察FSH对人肝癌细胞BEL-7402的生长抑制作用,采用wright染色、透射电镜和流式细胞术检测FSH对BEL-7402细胞的促凋亡作用。结果:200～1200μg/ml FSH能够剂量依赖性地抑制 BEL-7402细胞的增殖,wright染色观察到凋亡小体,透射电镜下发生染色质边集,流式细胞术检测出现亚二倍体峰。结论:FSH能够抑制BEL-7402的生长并能诱导细胞凋亡。

外加极低频交变磁场照射下致吸附纳米FeOx颗粒不同类型肝癌细胞凋亡研究

目的:观察纳米FeOx粒子在100Hz外加极低频交变磁场(extremely low frequency altering electric-magnetic field,EMF)作用下导致的Bel-7402及HepG2两种肝癌细胞凋亡现象,并探讨其分子机制。方法:采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测纳米粒子在EMF作用下对不同类型体外培养肝癌细胞Bel-7402及HepG2增殖的影响,流式细胞仪检测不同实验条件下细胞发生的早期凋亡及死亡,运用Western-blot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl家族及热休克蛋白-27(Hsp-27)的表达以确定其对细胞影响的分子机制。结果:EMF照射纳米FeOx颗粒吸附HepG2和Bel-7402细胞增殖抑制率分别为(35.54±3.2)%、(76.31±2.3)%(P<0.05),凋亡率分别为(18.64±6.68)%、(23.34±2.16)%(P>0.05),两种细胞凋亡率差异不显著。Western-blot实验结果表明两种细胞的Bcl蛋白家族大量表达,细胞发生明显早期凋亡,其中Bel-7402细胞的Bcl/Bax值明显低于HepG2细胞的比值,而Hsp-27蛋白表达明显高于HepG2细胞中的表达,Bel-7402细胞的自我保护功能表现得更为显著,两种细胞的凋亡率度未出现明显差异。结论:EMF照射磁性纳米FeOx颗粒吸附得两种肝肿瘤细胞均能抑制细胞增殖并导致细胞发生大量的早期凋亡,可作为一种潜在的治疗肝脏肿瘤细胞的手段。

氧化吲哚类化合物Z24的体内抑瘤活性及其血管生成抑制作用(英文)

目的 从抗血管生成活性的角度 ,寻找新的抗肿瘤药物 ,研究Z2 4的体内抑瘤活性及其对血管内皮细胞的选择性抑制作用。方法 MTT法检测不同浓度的Z2 4作用 72h时对人肝癌细胞系BEL 74 0 2及正常人胚肺二倍体细胞 2BS的生长抑制作用 ,并从浓度 抑制率曲线求出IC50 ;台盼蓝拒染计数法检测不同浓度的Z2 4作用 72h时对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)的生长抑制作用 ,从浓度 抑制率曲线求出IC50 ;小鼠S180 ,H2 2和裸小鼠皮下移植性人肝癌BEL 74 0 2模型研究Z2 4的体内抑瘤作用。鸡胚尿囊膜 (CAM )血管生成模型检测Z2 4的血管生成抑制活性。结果 MTT法测得Z2 4对BEL 74 0 2生长抑制作用的IC50 为 10 6 μmol·L- 1,对 2BS生长抑制作用的IC50 为 116 μmol·L- 1。台盼蓝拒染计数法测得Z2 4对HUVEC生长抑制作用的IC50 为 6 .4 4μmol·L- 1。Z2 4可明显抑制鸡CAM新生血管的形成Z2 4 10 0mg·kg- 1可使S180 ,H2 2和裸小鼠人肝癌BEL 74 0 2模型的肿瘤重量较对照组分别下降 5 2 .5 %(n =10 ,P <0 .0 1) ,4 1.5 % (n =10 ,P <0 .0 1)和5 3.4 % (n =6 ,P <0 .0 1)。Z2 4可显著抑制CAM的血管生成。结论 Z2 4对多种肿瘤动物模型均具有显著的体内抑瘤活性 ,对血管内皮细胞有选择性抑制作用 ,并明显抑制CAM新生血管的生成?

人血树突状细胞联合LPAK细胞体外诱导肝癌细胞株凋亡的形态学观察<英文>

研究人外周血树突状细胞(dendritic cell,DC)联合LPAK(lymphokine and PHA activatedkiller)细胞体外诱导人肝癌细胞株BEL-7402凋亡的作用,并进行形态学分析。实验分LD(BEL-7402+LPAK+DC),L(BEL-7402+LPAK),D(BEL-7402+DC)和 B(BEL-7402)四组,采用中性红摄入比色法检测细胞毒活性,原位末端标记(TUNEL)技术、电镜技术观察细胞的光镜形态和超微结构。结果显示,D组与B组比较吸光度值无显著性差异(P>0.05),即无杀伤活性;LD组与L组比较,细胞毒活性为LD组>L组(P<0.01)。光镜下凋亡的肿瘤细胞呈TUNEL阳性,细胞核染成棕黄色或深棕色,大小不等,形态也不一;电镜下肿瘤细胞核染色质凝聚、固缩和胞质浓缩,凋亡小体多见;少部分LPAK细胞内形成自噬体,发生自噬性凋亡。结论提示,人血DC联合LPAK细胞能有效地诱导肝癌细胞凋亡,在此过程中LPAK细胞同时发生自噬性凋亡。

树突状细胞联合LPAK细胞体外诱导肝癌细胞株凋亡的形态学研究(英文)

目的 研究人外周血树突状细胞 (DendriticCell,DC)联合LPAK细胞体外诱导人肝癌细胞株BEL 74 0 2凋亡的作用 ,并进行形态学分析。方法 实验分LD、L、D和B四组 ,采用中性红摄入比色法检测细胞毒活性 ,原位末端标记 (TUNEL)技术、电镜技术观察细胞的光镜形态和超微结构。结果 D组与B组比较吸光度值无显著性差异 ,即无杀伤活性 (P >0 .0 5) ;LD组与L组比较 ,细胞毒活性为LD组 >L组 (P <0 .0 1)。光镜下凋亡的肿瘤细胞呈TUNEL阳性 ,细胞核染成棕黄色或深棕色 ,大小不等 ,形态也不一 ;电镜下肿瘤细胞核染色质凝聚、固缩和胞质浓缩 ,凋亡小体多见 ;少部分LPAK细胞内形成自噬体 ,发生自噬性凋亡。结论 人血DC联合LPAK细胞能有效地诱导肝癌细胞凋亡 ,在此过程中LPAK细胞同时发生自噬性凋亡。

羟基喜树碱双嵌段共聚物纳米粒的抗肿瘤作用

目的研究羟基喜树碱双嵌段共聚物纳米粒(MePEG-PLGA-HCPT-NPs)的抗肿瘤作用。方法选择人肝癌细胞株Bel-7402为体外模型,采用MTT法观察体外肝癌细胞的生长和增殖抑制情况,评价MePEG-PLGA-HCPT-NPs对肝癌细胞的毒性作用;采用激光共聚焦荧光显微镜技术观察其对肝癌细胞摄取药物的影响;采用小鼠H22肝癌细胞实体瘤模型进行体内抑瘤实验观察荷瘤动物的生长情况,测定肿瘤生长抑制率。结果 MePEG-PLGA-HCPT-NPs能抑制肝癌细胞的生长增殖,且随羟基喜树碱浓度的升高而增强;激光共聚焦荧光照片显示载药纳米粒能有效地被Bel-7402细胞摄取;MePEG-PLGA-HCPTNPs对小鼠的H_(22)实体瘤生长具有明显的抑制作用,低、中、高剂量组的生长抑瘤率分别为37.62%、50.31%和70.25%,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MePEG-PLGA-HCPT-NPs具有较强的体外、体内抗肿瘤作用。与羟基喜树碱注射剂相比,MePEG-PLGA-HCPT-NPs的抑瘤率更高,且与剂量有关,并对肿瘤生长的抑制更为持久。