两种中药复方对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织Hes-1、Hes-5表达的动态影响

目的:探讨益气活血方和补肾生髓方对脑缺血再灌注大鼠缺血侧额顶叶皮质Hes-1、Hes-5蛋白表达的动态影响。方法:采用线栓法复制局灶性脑缺血再灌注大鼠模型。随机分为假手术组、模型组、益气活血方组和补肾生髓方组。脑缺血2 h,分别再灌注1,2,3周,采用免疫组织化学SABC法检测Hes-1、Hes-5蛋白表达的阳性面积和平均吸收光密度值。结果:在缺血区额顶叶皮质,再灌注1,2周时,模型组Hes-1、Hes-5表达阳性面积单位、平均吸收光密度值较假手术组明显增加(P<0.05,或P<0.01)。再灌注1周时,益气活血方和补肾生髓方组Hes-1、Hes-5蛋白表达阳性面积及平均光密度值显著高于模型组(P<0.05,或P<0.01),益气活血方组Hes-1和Hes-5蛋白表达平均光密度值显著高于补肾生髓方组(P<0.01)。再灌注2周时,除补肾生髓方组Hes-5外,益气活血方组和补肾生髓方组Hes-1和Hes-5蛋白表达阳性面积及平均光密度值显著高于模型组(P<0.05,或P<0.01),益气活血方组Hes-5表达阳性面积显著高于补肾生髓方组(P<0.01)。再灌注3周时,补肾生髓方组Hes-1表达阳性面积,补肾生髓方组和益气活血方组Hes-5表达阳性面积及益气活血方组Hes-5表达平均光密度值显著高于模型组(P<0.05)。结论:两种中药复方均能通过增强缺血侧脑组织额顶叶皮质Hes-1和Hes-5的表达,促进局灶性脑缺血后内源性神经干细胞的增殖分化。

补阳还五汤对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马CA4区Hes-1和Hes-5表达的影响

目的:探讨补阳还五汤对脑缺血再灌注大鼠海马CA4区Hes-1和Hes-5表达的影响。方法:63只SD大鼠随机分为补阳还五汤(BYHWT)组、脑缺血再灌注损伤模型(I/R)组和假手术(Sham)组3组。大脑中动脉阻塞线栓(MCAO)法建立局灶性脑缺血再灌注大鼠模型。脑缺血2h后再灌注10、19和28d,显微镜观察阳性细胞形态特点,免疫组化法检测CA4区Hes-1和Hes-5阳性细胞数目。结果:10d和19d BYHWT亚组Hes-1及Hes-5阳性细胞数目分别高于I/R和Sham组(P<0.01);28d BYHWT亚组显著低于I/R与Sham组(P<0.01)。I/R和BYHWT的19d亚组分别高于其对应的10d亚组(P<0.01)。结论:补阳还五汤在脑缺血再灌注损伤早中期通过上调海马CA4区Hes-1和Hes-5表达,晚期通过下调其表达,从而对局灶性脑缺血再灌注损伤产生神经修复作用。

Notch信号传导系统在补阳还五汤对局灶性脑缺血再灌注大鼠神经修复中的调节作用

目的:探讨补阳还五汤对脑缺血再灌注大鼠不同时期海马CA4区Hes1和Hes5表达的影响,阐明Notch信号传导系统在补阳还五汤对局灶性脑缺血再灌注大鼠神经修复作用中的调节作用。方法:清洁级SD大鼠63只随机分为补阳还五汤组(Group BYHWT)、脑缺血再灌注损伤模型组(Group CIRI)、假手术组(Group Sham)。采用大脑中动脉阻塞线拴法(MCAO法)建立BYHWT组和CIRI组的局灶性脑缺血再灌注大鼠模型。脑缺血2 h,分别再灌注10 d、19 d和28 d,采用免疫组化SP法检测海马CA4区Hes1和Hes5表达的阳性细胞数目,并进行单因素方差分析(one way ANOVA),两组间均数差异性比较采用t检验。结果:术后10 d和19 d,CIRI组大鼠海马CA4区的Hes1和Hes5阳性细胞密度较Sham组大(P<0.01)。BYHWT组大鼠海马CA4区Hes1和Hes5阳性细胞密度较CIRI组及Sham组都大(P<0.01);而在术后28 d,则显著低于CIRI组与Sham组(P<0.01)。CIRI组和BYHWT组术后19 d大鼠海马CA4区阳性细胞密度分别较术后10天增加(P<0.01);而术后28天阳性细胞密度较术后19天降低(P<0.01)。结论:补阳还五汤在脑缺血再灌注损伤早中期通过上调大鼠海马CA4区Hes1和Hes5的表达,而在晚期通过下调其表达,而对局灶性脑缺血再灌注损伤产生神经修复作用,该作用的发挥可能是通过控制Hes1和Hes5的表达水平来调控Notch信号传导系统,进而调节NSCs的增殖与分化。

异泽兰黄素调节Notch 1/Hes信号通路对宫颈癌细胞迁移和侵袭的影响

目的探讨异泽兰黄素对人宫颈癌(cervical cancer,CC)细胞迁移和侵袭的影响及对Notch信号通路的调节作用。方法培养人CC肠转移细胞系Caski细胞,将其分为空白对照(BC)组、阴性对照(NC)组、异泽兰黄素(Eupatilin)组、Notch 1过表达(Notch 1)组及异泽兰黄素+Notch 1过表达(Eupatilin+Notch 1)组。MTT法检测细胞活力;划痕愈合实验与Transwell实验检测细胞迁移和侵袭情况;蛋白质印迹法检测细胞中上皮间质转化(epithelial–mesenchymal transition,EMT)和Notch信号通路相关蛋白水平。结果与NC组相比,Eupatilin组细胞活力、迁移、侵袭能力以及细胞中N-cadherin、Snail、Notch 1、Hes-1及Hes-5蛋白水平均降低,细胞中E-cadherin蛋白水平增高(P<0.05);Notch 1组以上各指标变化与Eupatilin组呈相反的效果(P<0.05)。Notch 1过表达逆转异泽兰黄素对Caski细胞活力、迁移、侵袭以及Notch信号通路的影响(P<0.05)。结论异泽兰黄素通过Notch 1/Hes信号通路抑制人CC细胞迁移和侵袭,该研究为人类CC的临床治疗提供一些新的线索。