Heshouwu decoction, a Chinese herb for tonifying kidney, ameliorates hypothalamic-pituitary-testicular axis secretion in aging rats

An increasing amount of evidence demonstrates the anti-aging effect of Heshouwu in pill form. In this study, a subacute aging rat model was established by continuous intraperitoneal injection of D-galactose and treated with Heshouwu decoction （a Chinese herb for tonifying the kidney, comprising Heshouwu pill, Herba Epimedii, Radix Salviae Miltiorrhiae, and Poria）. Heshouwu pill treated rats were the positive control group. Radioimmunoassay, immunohistochemical staining, and western blot assay showed hypothalamic gonadotropin-releasing hormone, hypothalamic substance P, and serum gonadotropin levels to be significantly increased in the model rats; the concentrations of hypothalamic ~3-endorphin, and serum levels of insulin-like growth factor I and testosterone were significantly decreased. 1713- and 3[3-hydroxysteroid dehydrogenase expression in testicular tissue was also decreased. Intragastric administration of Heshouwu decoction at high （9.6 g/mL/100 g）, medium （4.8 g/mL/100 g）, and low （2.4 g/mlJ100 g） doses, Heshouwu decoction pretreatment at a medium dose （4.8 g/mL/100 g）, and Heshouwu pill （2.06 g/mL/100 g） significantly reversed these changes. Heshouwu decoction pretreatment and high-dose Heshouwu decoction had the greatest anti-aging effects. These experimental findings indicate that Heshouwu decoction can improve hypothalamic-pituitary-testicular axis secretion in a subacute aging rat model, and prevent and delay gonadal axis aging, with an effect superior to that of Heshouwu pill.

Efficacy of Heshouwu(Radix Polygoni Multiflori)on gut mircobiota in mice with autoimmune encephalomyelitis

OBJECTIVE:To learn the mechanisms between gut microbiome and the autoimmunity benefits on Traditional Chinese Medicine(TCM)in central nervous system(CNS),we investigated the neuro-protection effects and gut mircobiota changes of Heshouwu(Radix Polygoni Multiflori)on experimental autoimmune encephalomyelitis(EAE),an animal model of multiple sclerosis(MS).METHODS:Mice were randomly divided into four groups:EAE mice(control phosphate-buffered saline group),50 mg·kg^(-1)·d^(-1)Heshouwu(Radix Polygoni Multiflori)-treated EAE mice,100 mg·kg^(-1)·d^(-1)Heshouwu(Radix Polygoni Multiflori)-treated EAE mice,and 200 mg·kg^(-1)·d^(-1)Heshouwu(Radix Polygoni Multiflori)-treated EAE mice.The spinal cords were stained with hematoxylin and eosin(HE)and luxol fast blue for evaluating inflammatory infiltration and demyelination.The percentages of granulocyte macrophage-colony stimulating factor(GM-CSF)+CD4+,interleukin 17(IL-17)+CD4+,Foxp3 CD4+,and interferon-γ(IFN-γ)+CD4+T cells in the inguinal lymph nodes(LNs)and brain were determined by flow cytometry analysis.16S rRNA gene sequencing was employed to analyze the changes in gut microbiota.RESULTS:We found that Heshouwu(Radix Polygoni Multiflori)alleviated the disease severity and neuropathology of EAE as evaluated by clinical and histopathologyical scores.Heshouwu(Radix Polygoni Multiflori)increased the diversity and abundance of the gut microbiota,and decreased Firmicutes/Bacteroidetes ratio(F/B ratio).Heshouwu(Radix Polygoni Multiflori)also decreased the concentrations of IL-10,and IL-21 and increase the levels of GM-CSF,IL-17A,IL-17F and IL-22 in serum of EAE mice.Moreover,Heshouwu(Radix Polygoni Multiflori)modulated the T cell responses by inhibiting Th17 cells and restoring Treg cells in the small intestine lymphoid tissues and inguinal lymph nodes.Microbiota-depleted mice receiving Heshouwu(Radix Polygoni Multiflori)-treated fecal microbiota transplantation had lower disease severity,neuropathology scores and alleviation of Th17/Treg imbalance compared to ad libitum group.CONCLUSIONS:Our findings suggested that the vital neuro-protection role of Heshouwu(Radix Polygoni Multiflori)(TCM)in immunomodulation effects partly by regulations of gut microbiome.

何首乌化学成分、药理作用及肝毒性的研究进展

从化学成分、药理作用及肝毒性3个方面综述何首乌的研究进展。何首乌含有二苯乙烯苷类、蒽醌类、磷脂类、黄酮类等多种化学成分,具有延缓衰老、抗癌、抗疲劳、抗炎镇痛、保护心血管等药理作用。目前,何首乌引起肝毒性的化学成分探讨主要集中于3类,即蒽醌类、二苯乙烯苷类及鞣质类。加大何首乌肝毒性成分、肝毒性机制研究的力度,加强中药安全用药知识宣教,规范其炮制及使用,可以在一定程度上降低何首乌肝毒性。

何首乌-牛膝药对抗维甲酸诱导骨质疏松作用及活性成分筛选研究

目的研究何首乌-牛膝药对的抗骨质疏松作用及筛选活性成分。方法采取液相色谱-质谱(HPLC-MS)联用法分析何首乌-牛膝药对指纹共有峰并进行成分确认;采用维甲酸复制大鼠骨质疏松模型及酶联免疫吸附(ELISA)方法,探讨何首乌-牛膝药对的抗骨质疏松作用;应用SPSS分析色谱结果与肝、肾湿重、骨干湿比数据和ELISA测定结果的相关性筛选何首乌-牛膝药对抗骨质疏松活性成分。结果HPLC-MS联用法分析结果共确定10个共有指纹峰成分,分别为:没食子酸、杯苋甾酮、β-蜕皮甾酮、25-R-牛膝甾酮、二苯乙烯苷、25-S-牛膝甾酮、大黄素、大黄素甲醚、齐墩果酸-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、牛膝皂苷D。生物学指标测定结果表明何首乌-牛膝药对能使维甲酸所致骨质疏松大鼠血清骨碱性磷酸酶(BALP)和骨钙素(BGP-OCN)指标升高,抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)和血清I型胶原C端肽(CTX-1)降低;何首乌-牛膝药对组肝、肾指数明显下降,骨干湿比上升,体质量变化明显。结论何首乌-牛膝药对具有抗骨质疏松作用,筛选出作用最显著活性成分为没食子酸、β-蜕皮甾酮、大黄素和齐墩果酸-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷。

何首乌延缓衰老机制探析

何首乌始载于宋代《开宝本草》,是临床常用的大宗药材之一。何首乌素有延缓衰老之灵药的美称,具有补肝肾、益精血、补虚损、黑须发等功效,被广泛用于预防和治疗衰老等相关疾病。何首乌的主要活性成分是二苯乙烯苷、多糖、蒽醌类等,具有增强免疫、抗氧化、延缓衰老、抗炎、降血脂及神经保护等药理作用。该文综述了何首乌对皮肤系统、阿尔茨海默病、动脉粥样硬化及帕金森病等衰老相关疾病的影响以及延缓衰老的作用机制,以期为何首乌在延缓老化方向的应用奠定理论基础。

何首乌饮对衰老大鼠抗氧化能力及血脂的影响

目的探讨何首乌饮的抗衰老机制。方法采用D-半乳糖连续腹腔注射致亚急性衰老大鼠模型,测定何首乌饮灌胃后大鼠血清中血脂和丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧物酶(GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果亚急性衰老模型组大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、MDA含量明显升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、SOD、GSH-Px、T-AOC明显下降,与正常对照组大鼠比较差异显著(P<0.05,P<0.01),经何首乌饮灌胃治疗后TG、TC、MDA含量下降,HDL-C、SOD、GSH-Px、T-AOC含量升高均接近正常水平,与模型组大鼠有显著差异(P<0.01)。结论何首乌饮明显提高衰老大鼠体内的HDL-C、SOD、GSH-Px、T-AOC水平,降低TG、TC、MDA含量,何首乌饮具有抗衰老作用,其抗衰老作用可能与此有关。

综合评分法优化黑豆汁炖何首乌炮制工艺

目的优化黑豆汁炖何首乌炮制工艺。方法以何首乌中二苯乙烯苷、多糖、大黄素的含量为指标,采用正交设计综合评分法优化黑豆汁炖何首乌的工艺。结果优化所得工艺为炖36 h,干燥9 h,干燥温度80℃。结论合理优选出最佳的炮制工艺稳定。

何首乌主要成分大黄素、大黄酸和二苯乙烯苷对肝细胞、肝癌细胞的影响

目的通过观察何首乌主要成分大黄素、大黄酸和二苯乙烯苷对肝细胞、肝癌细胞的影响来探讨引发何首乌不良反应的物质基础，为规范中药合理应用提供理论依据。方法用MTT法观察何首鸟主要有效成分大黄素、大黄酸和二苯乙烯苷在不同浓度下作用不同时间对肝细胞和肝癌细胞的影响。结果蒽醌类化合物大黄素、大黄酸在终浓度6．25～50μmol／L，随着浓度的增加、作用时间的延长对L-02细胞和BEL细胞的损伤加大、抑制率增加；二苯乙烯苷在终浓度5～400μmol／L，随着浓度的增加、作用时间的延长对L-02细胞和BEL细胞的影响不明显，无显著性差异。结论大黄素、大黄酸是何首鸟引发不良反应一肝毒性的主要成分，在高浓度、长时间作用下有细胞毒作用，二苯乙烯苷在5～400μmol／L作用不同时间对肝细胞和肝癌细胞的影响不明显，无细胞毒作用。

综合评分法优化何首乌产地加工工艺

目的优化何首乌产地加工工艺。方法以何首乌中二苯乙烯苷、多糖、大黄素的含量为指标，采用正交设计综合评分法优化何首乌产地加工工艺。结果何首乌产地加工工艺8—12h，60—80℃干燥没有显著差异。结论产地采收何首乌后在8—12h，60—80℃干燥均可。

何首乌历代炮制方法考证

目的考证何首乌的历代炮制方法。方法通过查阅古今本草、文献及相关法典,对何首乌的历代炮制方法进行探讨。结果自《仙授理伤续断秘方》出现黑豆制何首乌,之后相继出现净制、切制、酒制,醋制,九蒸九曝,水煮,泔制,泔、麸炒,火炮,药汁制,泔、黑豆蒸,乳制等一系列不同的炮制方法和要求。其中黑豆制何首乌沿用至今并广泛使用。结论何首乌净制是否去皮,切制用具是否对何首乌有影响,传统"九蒸九晒"何首乌等炮制工艺与质量标准有待进一步规范化和标准化。

何首乌饮含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞端粒酶活性的影响

目的观察不同剂量的中药何首乌饮对大鼠卵巢颗粒细胞端粒酶活性的影响,探讨其在调节卵泡微环境过程中所起的作用。方法制备大鼠排卵前卵巢模型,收集颗粒细胞(GC)分别与雌性SD幼鼠空白血清及含不同剂量何首乌饮的药物血清在体外共同培养。用TRAP-ELISA方法分析GC的端粒酶活性;运用流式细胞术分析GC凋亡、坏死情况。结果各剂量组何首乌饮含药血清可明显上调GC端粒酶活性,与对照组比较,中、高剂量何首乌饮含药血清能够显著提高GC端粒酶活性(P均<0.05)。随着中药血清药物剂量的增加,颗粒细胞凋亡率逐渐下降,与对照组比较,中、高剂量组何首乌饮含药血清均能够显著降低离体GC的凋亡率(P均<0.01),各含药血清组细胞坏死率虽较对照组高,但与各组比较差别无统计学意义。结论何首乌饮通过上调离体培养的大鼠卵巢GC端粒酶活性、抑制凋亡从而对卵泡局部微环境的调节,可能是其调节下丘脑-垂体-卵巢轴的重要靶点之一。

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS代谢组学技术研究炮制前后何首乌化学成分变化

目的利用代谢组学分析方法对比分析市售生首乌和制首乌化学成分的差异。方法采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)方法,通过主成分分析和偏最小二乘判别分析等方法对比分析市售生首乌和制首乌化学成分的差异。结果市售生首乌和制首乌化学成分差异较大,共鉴别45个差异化学成分,主要为蒽醌、二苯乙烯和鞣质等。结论基于UPLC-Q-TOF-MS/MS代谢组学技术从整体角度分析了市售生首乌和制首乌的化学成分差异,为其炮制机理的阐释和临床应用奠定基础。

何首乌功效衍变及其应用分析

何首乌是我国常用的补益药,因其神奇的功效被广为追捧,但近年来何首乌不良反应报道频出,引起世人关注。纵观本草,何首乌功效不断衍变,生首乌最初在唐代有补益功效,到清代才形成"生者流利,制者固补"的观念。该研究查阅文献,整理了普通民众对何首乌的评价,并和历代医家对何首乌功效的认识相比较,勾勒出何首乌功效衍变的过程,发现何首乌的补益功效尚有争议。比较历代医家与现代中成药、保健品对含何首乌方剂的使用,发现现代对何首乌的使用过于追求其补益养生作用,忽视了其传统治瘰疬风毒的功效,与古人对何首乌使用规律有区别,两相比较,为何首乌安全使用提供借鉴。

何首乌复合剂对衰老的影响

目的:为探讨何首乌复合剂(何首乌+黄精+黑豆)对衰老的影响。方法:将老龄(20个月龄)雄性大鼠分为低、中、高3个剂量组和2个对照组老龄及少龄,每组10只,连续给受试物70d。测定血清及肝、脑组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)的活力和MDA含量;另选OregonK野生型黑腹果蝇,分为4个剂量组和1个对照组,每组400只,雌雄各半,进行果蝇生存试验。结果:剂量组为0.4、0.8、2.4g/kg.BW时,均显示有升高血清中SOD活力的作用及降低血清、脑组织中MDA含量的作用,剂量为0.8g/kg.BW时,显示有升高肝组织、脑组织中SOD活力的作用,剂量为2.4g/kg.BW时,显示有升高肝组织中SOD活力的作用及降低肝组织中MDA含量的作用;0.48%、1.44%浓度组雌雄果蝇与对照组相比均显示有延长平均寿命的作用,1.44%浓度组雌果蝇,0.16%、0.48%、1.44%浓度组雄果蝇也显示有延长平均最高寿命的作用,0.48%、1.44%浓度组雌雄果蝇的半数死亡时间也比空白对照组≥4d。结论:何首乌复合剂具有抗氧化、清除体内自由基及延缓衰老作用。

基于AHP-熵权TOPSIS混合加权法和均匀设计法优化何首乌九蒸九制炮制工艺

目的 基于AHP-熵权TOPSIS混合加权法和均匀设计法优化何首乌九蒸九制炮制工艺。方法 以闷润时间、蒸制时间、蒸制次数为考察因素,以5-羟甲基糠醛、二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚、何首乌多糖含量为评价指标,采用AHP-熵权TOPSIS混合加权法确定各指标权重系数,结合均匀设计法优选何首乌九蒸九制炮制工艺。结果 优化的何首乌九蒸九制工艺为闷润时间1 h、蒸制时间6 h、蒸制次数9次。验证试验的平均综合评分为94.85分(RSD=2.80%,n=3),与预测值(99.74分)的相对误差为-4.90%。结论 优化的炮制工艺稳定、可行,为九蒸九制何首乌的规范化生产及应用提供参考和依据。

何首乌对于肾虚模型大鼠肝毒性机制的实验研究

目的:探讨何首乌致大鼠肝脏损害的毒性机制。方法:SD大鼠分成两组分别造肾阳虚、肾阴虚模型,两模型组大鼠随机分为制首乌高剂量组(24 g/kg)、中剂量组(12 g/kg)、低剂量组(6 g/kg)、生首乌组(12 g/kg)和正常组,连续灌胃给药或蒸馏水3个月后,腹主动脉取血,离心,取血清检测AST(谷草转氨酶)、ALT(谷丙转氨酶)、ALP(碱性磷酸酶)、TBIL(总胆红素)、IBIL(间接胆红素)。取肝脏观察肝细胞形态学改变。采用ELISA法测定肝组织中炎症介质肿瘤坏死因子TNF-α水平。检测肝线粒体Na^+K^+-ATP酶、Ca^(2+)Mg^(2+)-ATP酶活性。结果:肾阳虚模型大鼠血清5个生化指标有不同程度的变化,而肾阴虚组除生首乌灌胃的大鼠之外未见显著改变。炎症介质TNF-α含量明显升高。Na^+K^+-ATPase、Ca^(2+)Mg^(2+)-ATPase水平下降。结论:生首乌对大鼠有肝毒性,制首乌对肾阳虚模型有一定的肝损伤,何首乌致大鼠肝毒性的机制可能与炎症因子的增加导致线粒体功能障碍有关。

何首乌饮对衰老模型大鼠下颌下腺组织结构的影响

目的探讨何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺组织结构的影响。方法光镜下观察并分别计算经何首乌饮预防或治疗性干预过的亚急性衰老大鼠下颌下腺腺实质、脂肪和纤维间质的相对体积比。结果何首乌饮预防各组腺实质成分所占比例均高于模型组(P<0.05)。治疗各组腺实质以阴性对照组最高(P<0.05),自然恢复组最低(P<0.05)。伴随衰老,脂肪和纤维间质含量逐渐增多,预防各组间以模型组最高(P<0.05);治疗各组间以自然恢复组最高(P<0.05),阴性对照组最低(P<0.05)。结论D-半乳糖模型大鼠下颌下腺功能性腺实质成分逐渐减少而被脂肪和纤维间质所替代。何首乌饮可延缓下颌下腺组织结构的衰老性改变。

基于网络药理学探讨何首乌-丹参治疗阿尔茨海默病的作用机制

目的应用网络药理学方法预测何首乌-丹参抗阿尔茨海默病(AD)的作用靶点及相关信号通路,挖掘其抗AD的作用机制。方法通过中药系统药理学技术平台(TCMSP)网站检索何首乌-丹参的活性成分及对应的作用靶点,再通过Drugbank数据库、Dis Ge NET数据库和TTD数据库获得AD的主要致病靶点,采用Cytoscape 3.7.1软件构建药物活性成分-靶点网络图,利用STRING数据库构建蛋白与蛋白相互作用网络,然后运用生物信息学的方法对关键靶点进行基因功能分析和通路富集分析,最后采用MTT法、ELISA法、比色法和实时荧光定量PCR法对网络药理学主要预测的生物过程与信号通路进行验证。结果研究共筛选出何首乌-丹参药对的有效成分24个,对应靶点274个,与AD相关靶点共107个,相关信号通路前10条,GO分析相关度前20个靶点分子功能。细胞实验证实了何首乌-丹参能有效提高PC12细胞的细胞存活率及抑制PC12细胞的炎症反应和氧化应激反应,并促进Nrf2/HO-1信号通路的激活。结论何首乌-丹参主要是通过抗炎和抗氧化应激对AD产生重要的治疗作用,为后续临床治疗AD提供新的思路。

何首乌提取物对内皮细胞T-AOC、LPO、NO、SOD代谢的影响

目的探讨何首乌提取物对正常内皮细胞的保护作用。方法体外培养内皮细胞,用不同浓度的何首乌提取物分别作用于内皮细胞,检测其总抗氧化能力(T-AOC)、脂质过氧化物(LPO)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)的变化。结果何首乌提取物对内皮细胞T-AOC和NO有上调作用,并有浓度依赖关系,对SOD25mg/L和12.5mg/L组有上调作用,50mg/L组则无上调作用,而对LPO25mg/L和12.5mg/L组有下调作用,50mg/L组无下调作用。结论何首乌提取物对体外培养的内皮细胞具有保护作用,为临床选择有效保护内皮细胞的药物提供了依据。

不同炮制时间制何首乌大鼠血清中大黄素含量测定

目的:研究不同炮制时间制何首乌经口服给药后大鼠血清中大黄素含量的变化。方法:将20只SD大鼠随机分成空白组、制何首乌不同炮制时间24、48、72 h组,每组5只,共4组。空白组给生理盐水。其余各组分别给予不同炮制时间的制何首乌水提液灌胃,24 h(12 g/kg)、48 h(12 g/kg)、72 h(12 g/kg),连续7 d后,腹主动脉取血,离心,采用高效液相仪分析大鼠血清中大黄素的含量。HPLC条件,色谱柱:Spursil ODS 5μm 250×4.6 mm色;流动相甲醇∶磷酸水(83∶17);紫外检测波长:254 nm。结果:制何首乌炮制24 h时大鼠血清中大黄素含量为0.01536μg/L,炮制48 h血清含量为0.01276μg/L,炮制72 h血清含量为0.0100μg/L。结论:制何首乌不同炮制时间给大鼠经口服给药后,血清中大黄素的含量会发生改变,且随炮制时间的延长,大鼠血清中的大黄素含量呈减少趋势。提示在使用何首乌时,可以通过延长其炮制时间,减少何首乌中大黄素的含量,可能会降低其对肝脏的损伤。